información que describe la prueba inmunológica de las reacciones febriles.

2.  Las reacciones febriles son un conjunto de pruebas de
aglutinación que buscan apoyar o descartar el
diagnóstico de infecciones causadas por Salmonella
typhi, Salmonella paratyphi y Brucella abortus, agentes
etiológicos de infecciones comúnmente conocidas como
Fiebre Tifoidea o Fiebre Ondulante, Paratifoidea y, Fiebre
de Malta o Brucelosis respectivamente. Para esto se
utilizan antígenos, que constan de suspensiones
bacterianas de cepas patógenas específicas que han sido
muertas por procesos especiales que dejan íntegros los
antígenos contra los que reaccionan los anticuerpos
producidos por el sujeto infectado.

3.  Estos antígenos febriles son:
 Antígeno “O” (somático) de
Salmonella typhi
 Antígeno “H” (flagelar) de
Salmonella paratyphi
 Antígeno flagelar de S. Paratyphi
“A”
 Antígeno flagelar de S. Paratyphi
“B” (b, 1 y 2)
 Antígeno completo de Brucella
abortus (Br)
 Antígeno Proteus Ox-19

4.  La reacción de Widal (Antígeno Paratífico A, Antígeno
Paratífico B, Antígeno Tífico H, Antígeno Tífico O), es un
método serológico que se utiliza frecuentemente en el
diagnóstico de la fiebre tifoidea y de otras fiebres
intestinales asociadas al género Salmonella.
 La reacción de Huddleson (Antígeno Brucella abortus)es
un método serológico auxiliar en el diagnóstico de la
brucelosis.
 La reacción de Weil-Felix (Antígeno Proteus vulgaris Ox-
19) es un método serológico en el cual se emplea un
antígeno común compartido entre cepas de Proteus
vulgaris Ox-19 con las Rickettsias causantes de tifo
exantemático y tifo murino o fiebre manchada.

5. En las reacciones febriles se incluye:
 Fiebre tifoidea (Salmonella). La reacción de Widal en un método
serológico usado comúnmente en el diagnóstico de las fiebres
tifoideas, entérica y ondulante, la reacción mide el título del suero
contra una suspensión de microorganismo conocidos
 La reacción de Widal es un test basado en el principio de aglutinación
antígeno-anticuerpo, donde se determina la presencia de anticuerpos
contra el antígeno O y H de la Salmonella typhi para el
serodiagnóstico de fiebre tifoidea.

6.  La fiebre tifoidea es una
enfermedad infectocontagiosa de
alta prevalencia a nivel mundial, es
causada por la bacteria Salmonella
typhi.
 Cuadro clínico: La fiebre tifoidea
caracterizada por fiebre alta
constante (40º), sudoración profusa,
gastroenteritis y diarrea. Menos
comúnmente puede aparecer un
sarpullido de manchas aplanadas de
color rosáceo
(roséola).Tradicionalmente se divide
en cuatro fases, durando cada una de
ellas una semana aproximadamente.

7.  Primera semana: Durante esta fase sube lentamente la temperatura con una
bradicardia relativa, malestar general, dolor de cabeza y tos. Se ha observado
Epistaxis en una cuarta parte de los casos. Hay leucopenia con eosinopenia .
 Segunda semana: Durante esta fase se produce la postración. Llegando la fiebre a
los 40º C. El delirio es frecuente .En un tercio de los pacientes se han observado
puntos rojos en la parte inferior del pecho y abdomen. Hay respiración agitada. La
diarrea puede también ocurrir en esta fase, de apariencia verde y olor característico
con apariencia de puré de guisantes. No obstante el estreñimiento también es
frecuente. El Bazo e hígado están inflamados con un aumento del nivel de
transaminasas.
 Tercera semana: En esta semana si la fiebre tifoidea no se trata, las complicaciones
son frecuentes: Hemorragias Intestinales debidas a la congestión de las Placas de
Peyer.
 Finales de Tercera semana/Principios de la cuarta: La temperatura corporal se va
restableciendo, pero el debilitamiento aun persiste
 El diagnóstico definitivo de Fiebre tifoidea se establece mediante el aislamiento de
Salmonella en cultivo (hemocultivo, mielocultivo) de un paciente con cuadro clínico
clínico compatible

8. Brucelosis (Brucella abortus).
 La Brucelosis (conocida también como fiebre de Malta, fiebre ondulante,
enfermedad de Bang o fiebre del Mediterráneo) es una Zoonosis es decir una
enfermedad que es transmitida de los animales al humano causada por bacterias
del genero Brucella. La enfermedad se adquiere por ingerir alimentos
contaminados o mantener un estrecho contacto con el ganado. La brucelosis en el
hombre se transmite por la ingesta de leche, sus productos y derivados
contaminados, no pasteurizados, por contacto con productos, subproductos y
desechos como tejidos o excreciones de animales enfermos,.
 Cuadro clínico:
 Es una enfermedad que se autolimita o se vuelve crónica. Muchos pacientes
padecen infecciones asintomáticas.
 • La forma aguda de la brucelosis se caracteriza por fiebre que en la mayoría de los
casos es alta e intermitente (ondulante), acompañada de cefalea intensa frontal y
occipital, y diaforesis.
 • En la forma crónica, las manifestaciones más comunes son:
 Síndrome febril: habitualmente de poca intensidad en la mayoría de los casos
 Digestivas: esplenopahetomegalía, hepatitis.

 Diagnóstico:
 Existen varios metodos serologicos para el diagnóstico de Brucelosis como el Rosa
de Bengala, 2-mercapto-etanol, y la reacción de Huddleson, esta ultima es la
utilizada en la prueba de reacciones febriles.

9. Rickettsiosis (Proteus 0X-19):
 Las Rickettsias son bacterias cocobacilares, muchas de ellas son transmitidas
por vectores como pulgas, garrapatas y piojos. En general la Rickettsiosis se
considera una zoonosis, siendo el humano un huesped accidental excepto por
el tifo epidémico (transmitido por piojos)
 Son parásitos intracelulares estrictos. Son muy sensibles y raramente
sobreviven fuera del huésped (reservorio o vector
 La Rickettsiosis se puede dividir en 3 grandes grupos
 1. Grupo Tifus: tifo epidémico, por Rickettsia prowazekii, transmitido por
piojos (Poulex ivitans) y tifo clásico endémico, por Rickettsia typha por la
pulga.
 2. Grupo de Fiebre manchada: Rickettsia rickettsii, que implica más de 30
especies, transmitido principalmente por ácaros y pulgas (Fiebre manchada de
las montañas rocallosas).
 3. Tifus Scrub: Orientia tsutsugamushi, también llamado tifo de los matorrales,
transmitido por ácaros
 Cuadro clínico: El periodo de incubación es de aproximadamente 7 días y
varia de 2 a 14 días. Los síntomas en general, se caracterizan por fiebre,
cefalea (dolor de cabeza), rash (erupciones cutáneas), dolor abdominal,
hepatomegalia, esplenomegalia y síntomas respiratorios como tos, entre otros
síntomas, acompañados de anormalidades en las muestras de laboratorios
como: anemia, neutrofilia, elevación de las enzimas hepáticas, .

10. Técnica
 FUNDAMENTO
 La prueba se basa en una reacción
inmunológica entre los anticuerpos séricos y
el antígeno correspondiente produciendo
una reacción de aglutinación macroscópica.

11. VOLUMEN DEL SUERO TITULO
 0.08 mL 1 : 20
 0.04 mL 1 : 40
 0.02 mL 1 : 80
 0.01 mL 1 : 160
 0.005 mL 1 : 320

12. MÉTODO DE TITULACIÓN EN TUBO:
 Mezcle bien la suspensión de antígeno mediante agitación suave; prepare una dilución 1:20 del antígeno a utilizar en solución salina.
 1. Colocar 7 tubos de 13 x 100 mm en una gradilla para cada antígeno a probar, marcándolos del 1 al 6 y el tubo 7 como control.
 2. Añadir al tubo 1, 0.9 mL de solución salina y 0.5 mL a los 6 tubos restantes.
 3. Añadir 0.1 mL del suero a probar al tubo número 1, mezcle bien y transfiera 0.5 mL al tubo número 2.
 4. Continúe esta operación hasta el tubo número 6, eliminar 0.5 mL de esta dilución. El tubo 7 (Control negativo) tendrá únicamente solución salina.
 5. Añadir 0.5 mL del antígeno diluido 1:20 a cada uno de los 7 tubos.
 6. Agitar bien la gradilla para mezclar el antígeno y el suero e incubar en baño de agua. El tiempo y temperatura recomendado es el siguiente.
 Antígeno Temperatura Tiempo de incubación
 Tífico “O” 48-50ºC 18-24 Horas
 Tífico “H” 37ºC 2 Horas
 S. paratyphi “A” y “B” 48-50ºC 2 Horas
 Brucella abortus 37°C 48 Horas
 Proteus OX-19 37ºC 18-24 Horas
 7. Después de la incubación, saque la gradilla que contiene los tubos del baño y observe la aglutinación. La utilización de una fuente de luz directa contra un fondo
negro dará mejores condiciones para la lectura.
 8. Registrar los resultados como sigue :
 4+ Todos los organismos 100% aparecen sedimentados en el fondo del tubo y el sobrenadante es totalmente claro.
 3+ Aproximadamente el 75% de los organismos se encuentran sedimentados y el sobrenadante es ligeramente turbio.
 2+ Aproximadamente el 50% de los organismos se encuentran sedimentados y el sobrenadante es moderadamente turbio.
 1+ Aproximadamente el 25% de los organismos se encuentran sedimentados y el sobrenadante es turbio.
 Negativo No se observa aglutinación y la suspensión es turbia.

13. MÉTODO DE PRUEBA RÁPIDA EN PLACA
 Marcar en una placa de vidrio correctamente indicando el
antígeno que se este usando.
 NOTA:
 El reactivo así como los sueros, deben alcanzar la temperatura
ambiente para comenzar la prueba.
 1. Depositar en sitios diferentes de la placa las siguientes
cantidades del suero a analizar: 0.08 mL, 0.04 mL, 0.02 mL, 0.01
mL y 0.005 mL (EL SUERO DEBE ESTAR TOTALMENTE CLARO).
 2. Agitar el antígeno a utilizar para tener una suspensión
uniforme.
 3. Añadir 30 μL de la suspensión de antígeno a cada una de
las diferentes cantidades de suero. Se recomienda utilizar
pipetas automáticas (el gotero incluido proporciona una gota
de 30-40 μL).
 4. Mezclar el antígeno y el suero utilizando un aplicador
diferente para cada una de las cantidades de suero.
 5. Girar la placa manualmente o utilizando un agitador
mecánico (120 rpm) durante 2 minutos.
 6. Realizar la lectura utilizando una fuente de luz directa y
observar la aglutinación macroscópica.
 7. Se recomienda incluir controles Positivo y Negativo

15. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
 1. Algunos sueros normales pueden dar un
titulo de 1:20 a 1:40 y hasta 1:80 pero esto
puede ser debido a vacunaciones o alguna
infección anterior. No siempre se presenta
producción de aglutininas en infecciones
bacterianas