La PCR, siglas en inglés de 'Reacción en Cadena de la Polimerasa', es una prueba de diagnóstico que permite detectar un fragmento del material genético de un patógeno. En la pandemia de coronavirus, como en tantas otras crisis de salud pública relacionadas con enfermedades infecciosas, se está utilizando para determinar si una persona está infectada o no con coronavirus. A esta herramienta se están sumando en los últimos días los test de diagnóstico rápido, más sencillos y rápidos.

1. PCR
CARMEN SOFIA BENJUMEA1

2. REACCIÓN EN CADENA DE LA
POLIMERASA
Se usa para amplificar una secuencia de DNA
1983
(Rodríguez I y cols., 2004;Torres A y cols., 1995)
Con ésta se consigue copiar millones
de veces, en un par de horas, una
secuencia predeterminada, dentro de
una mezcla de ADN tan compleja
como el propio genoma humano,
donde la secuencia de interés
representa tan sólo una
diezmillonésima parte.2

3. (Lodish y cols., 2006)
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4.  Desoxinucleosidos trifosfato (dNTPs), el sustrato para
polimerizar nuevo ADN.
 Dos cebadores (o primers), oligonucleotidos que son, cada
uno, complementarios a una de las dos hebras del ADN.
 Una solución tampón (buffer) que mantiene el pH adecuado
para el funcionamiento de la ADN polimerasa.
 Iones divalentes. Se suele usar magnesio (Mg2+), agregado
comúnmente como cloruro de magnesio (MgCl2).
Iones monovalentes, como el potasio.
ADN polimerasa o mezcla de distintas polimerasas con
temperatura óptima alrededor de 70ºC (la más común es la
Taq polimerasa).
 ADN molde, que contiene la región de ADN que se va a
amplificar.
ELEMENTOS
NECESARIOS PARA LA
PCR
3

5. MENCIONES LOS DNTPS QUE
DEBE INCLUIR EN UNA PCR Y
CUÁL ES SU FUNCIÓN
 Desoxirribonucleótidos trifosfato
(dNTPs): Las ADN polimerasas son
enzimas (celulares o virales) que
intervienen en el proceso de replicación
del ADN. Llevan a cabo la síntesis de la
nueva cadena de ADN emparejando
los desoxirribonucleótidos
trifosfato (dNTP) con
los desoxirribonucleótidos complementari
os correspondientes del ADN molde.

6. 4

7. TERMOCICLADOR
30 ciclos repetitivos conformados
cada uno de tres pasos.
Consisten en un bloque que
puede ser programado para
calentarse y enfriarse
rápidamente en determinados
tiempos
¿EN DONDE SE LLEVA A CABO LAREACCIÓN?
5

8. ETAPAS
Desnaturalización
Alineamiento/Unión del cebador
Extensión/Elongación de la cadena
Elongación Final
7

10. Mediante un calentamiento a 94°C, el
ADN de doble cadena logra que sus
cadenas se separen odesnaturalicen
Actividad de la enzima decrece de
manera muy rápida a partir de los
95ºC (vida media a 92.5ºC = 2h, a
95ºC = 40 min. y a 97.5ºC = 5 min.),
por lo que a estas temperaturas o
superiores es aconsejable disminuir
el tiempo de incubación.
Se rompen puentes
de hidrogeno.
Las bases
nitrogenadas quedan
expuestas
Síntesis de novo.
DESNATURALIZACIÓN
(Rodríguez I y cols., 2004)
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11. GRACIAS