(2024-04-30). ACTUALIZACIÓN EN PREP FRENTE A VIH (PPT)
Esterilización Por Eto Validación
1. FUDESA
Fundación para el Desarrollo de la Esterilización en Argentina
Esterilización por Oxido de Etileno
Validación y control de rutina
Farmacéutico Galo Hugo García
Farmacéutica María Celina García
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2. Sumario
El siguiente artículo describe una aplicación práctica del procedimiento de
Validación y Control de rutina en la esterilización de Dispositivos Médicos por
Oxido de Etileno puro en un todo de acuerdo a lo establecido por la Norma
IRAM 37008/Dic. 96(ISO 11135-1994)
(El material que ilustra el presente trabajo ha sido gentilmente cedido por la firma Sterilab
SRL., Se obtuvo de su sistema de registro y monitoreo)
Summary
This paper describes an practical application of the validation’s procedure and
routine control in the Ethylene Dioxide Sterilization of Medical Devices, in
accordance with Norm.
IRAM 37008/Dic. 96 (ISO 11135:1994).
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3. Cuando tratamos el tema de validación y control de rutina de un
procedimiento de esterilización surge la primera pregunta
¿En qué condiciones llega el dispositivo médico a la etapa de esterilización?
El dispositivo médico debe llegar a la esterilización con una carga biológica
conocida, incluido en un envase primario adecuado ,el que es contenido en un
envase secundario apto para el proceso a que va a ser sometido, identificado
con número de lote, con el testigo químico que corresponda, el indicador
biológico(conforme a lo establecido por la USP-XXIV )que se ubica en la
posición más dificultosa para ser alcanzado por el agente esterilizante y con
una configuración de carga determinada, según la cámara que se va a utilizar.
El dispositivo médico así preparado se somete al proceso de esterilización por
Oxido de Etileno puro (ETO), proceso que comprende las siguientes etapas:
1. Preacondicionamiento
2. Ciclo de esterilización
3. Aireación
A continuación se realizan:
4. Controles de proceso
5. Determinación de posibles niveles de ETO residual
6. Liberación del producto
1-Preacondicionamiento:
En esta etapa la carga alcanza los límites especificados de temperatura (T º C)
y humedad relativa (HR) que mejor le correspondan al tratamiento.
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4. (Ver en Fig. 8 registro de temperatura y humedad relativa en el
preacondicionamiento correspondiente al Ciclo de esterilización Nº 17363)
2-Ciclo de esterilización:
Comprende varias etapas realizadas en la Cámara de esterilización y que
incluyen:
• remoción del aire: por vacío, para permitir el posterior ingreso del
ETO
• humidificación: para compensar la pérdida de HR que trae la carga
y que se produce después del vacío inicial.
• inyección del gas esterilizante: en la cantidad necesaria para llegar
a la concentración adecuada Las concentraciones más frecuentes son
entre 450 y 600 mg / l de ETO.
• tiempo de contacto: durante el cual se mantienen constantes los
parámetros de trabajo especificados. Según el material, los tiempos
de contacto más comunes varían entre 4 a 6 horas, de acuerdo a
nuestra experiencia en estos casos.
• desgasificación forzada en máquina: procedimiento por el cual el
gas es removido de la carga y de la cámara por cualquiera de los
siguientes métodos: a)por admisiones y evacuaciones múltiples y
alternadas de aire filtrado a la cámara ó b) pasaje continuo de aire
filtrado a través de la cámara y la carga. Se produce una
desgasificación gradual de la carga y la mezcla aire-gas se empobrece
en ETO.
3-Aireación en sala:
Se completa el proceso de desorción acondicionando la carga en la Sala de
aireación que tiene un ingreso de aire caliente permanente, por la parte
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5. superior de la Sala y extracción continua a nivel de piso, dejándola estibada los
tiempos que resulten necesarios para que el proceso se complete.
4-Controles de proceso:
En esta etapa se deben registrar y conservar los datos de todos los parámetros
para demostrar que las especificaciones del proceso de esterilización han sido
satisfechas. Estos controles incluyen por lo menos los siguientes:
• temperatura y humedad del preacondicionamiento
• hora de iniciación y del retiro de la carga del preacondicionamiento
• hora de inicio del ciclo de esterilización para cada lote a esterilizar
• temperatura y presión de la cámara durante el ciclo
• prueba que el gas ha sido introducido en la cámara. En nuestro caso el
sensor presente en el gasificador nos da la información de la
temperatura a la que ingresa el gas a la cámara y paralelamente el
sensor de presión informa la caída de la misma en relación a la cantidad
de gas que ingresó. En la Fig. 7 se observa el registro de este momento
del proceso.
• medida de la concentración del ETO en cámara, que se consigue , en
nuestro caso,. por la variación de la presión que genera la entrada del
mismo a la cámara y por volumetría con el dosificador calibrado.
• tiempo de exposición
• datos del suministro de aire durante la desgasificación
• controlar que todos los indicadores químicos hayan virado
correctamente.
• verificar que los indicadores biológicos se hayan cultivado las 48 horas a
37 º C +/-2 º C.
En el Reporte de Proceso que se observa en el Cuadro Nº 1, se informan todos
los datos mencionados.
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7. 5-Residuos del Oxido de Etileno:
Una vez finalizada la etapa de aireación, se retiran muestras para la
determinación de los niveles de oxido de etileno residual y sus productos de
reacción, para demostrar que los mismos, después de la aireación, están por
debajo de los límites especificados.
Estos dosajes son análisis especializados y en nuestro medio los realiza un
laboratorio oficial y un laboratorio tercerista habilitado.
6-Liberación del producto:
Adoptamos el criterio de liberación convencional del producto bajo parámetros
preestablecidos y con indicadores biológicos.
a) Se da conformidad al cumplimiento de todos los parámetros físico
químicos del ciclo y
b) Se confirma ausencia de desarrollo de microorganismos en los IB
utilizados, luego de la incubación durante 48 h. a 37 º C +/- 2 ºC.
Con esta breve descripción de lo que comprende un proceso de esterilización
por ETO puro, podemos ahora entrar de lleno en el tema que es motivo de este
artículo:
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8. Validación y control de rutina de la esterilización por ETO
“Validación es un procedimiento documentado para obtener, registrar
e interpretar los resultados requeridos para establecer que un proceso
sistemáticamente logra que un producto cumpla con especificaciones
predeterminadas”
(por definición de la Norma 37008 mencionada)
Es considerada como un proceso total que consiste en la calificación de la
instalación y el desempeño .La relación entre estos términos se ilustra en la
Fig. 1
Validación
Calificación de la instalación Calificación de desempeño
Calificación física Calific.microbiológica
Fig.1
8
9. Calificación de la instalación:
Comprende la descripción técnica de todas las instalaciones, la calibración de
todos los instrumentos, aparatos de medición y accesorios y de la materia
prima a utilizar (en nuestro caso del ETO).
Por lo tanto sería la calificación de:
- cámara de preacondicionamiento
- cámara de esterilización
- área de aireación
- materia prima a utilizar
Calificación de desempeño físico:
Comprende la determinación de perfiles de temperatura y humedad relativa en
las cámaras y áreas, vacías y con carga, a saber:
- Cámara de preacondicionamiento: Perfil de temperatura y humedad
relativa (Vacía y con carga)
- Cámara de esterilización: Test de hermeticidad, y perfil de temperatura
de la cámara vacía y con carga.
- Cámara de aireación: Perfil de temperatura
Calificación de desempeño microbiológico:
Debemos tener en cuenta dos temas fundamentales en esta etapa:
El indicador biológico (IB) a usar y el método a aplicar para la calificación.
Indicador biológico:
Para la esterilización por ETO se utilizan indicadores biológicos portadores de
esporas de B. subtillis, variedad Níger, en concentración de 106. En nuestra
experiencia utilizamos indicadores autocontenidos, que disponen en su interior
de una ampolla con medio de cultivo apropiado. Se deben distribuir en la carga
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10. teniendo en cuenta los lugares de la cámara donde las condiciones de
esterilización sean las más difíciles de lograr y en la cantidad que establece la
Norma .En nuestro caso usamos 20 IB por ciclo.
Los indicadores deben recibir el mismo tratamiento que la carga, por lo que
deben ser también preacondicionados en conjunto con la misma.
Una vez finalizado el ciclo de esterilización los IB se retiran de la cámara, se
les rompe la ampolla que contiene el medio de cultivo para que entre en
contacto con las esporas y se cultivan en estufa 48 h a 37 º C +/- 2º C , junto
a un IB sin procesar (control positivo) del mismo lote y fecha de fabricación
para controlar las condiciones de incubación y la viabilidad de los IB.
Se observan a las 12, 24 y 48 hs.
La presencia de desarrollo se detecta a simple vista por un cambio de color y
enturbiamiento del medio.
- Proceso correcto: NO HAY CAMBIO DEL COLOR ni turbidez en el medio
después de 48 h de incubación..No hay presencia de esporas viables
- Proceso incorrecto: HAY VIRAJE DEL COLOR y turbidez del medio. Hay
presencia de esporas viables.
- Control positivo: DEBE VIRAR EL COLOR, con elevada turbidez del
medio( hay desarrollo), lo que demuestra que los resultados del IB son
válidos.
Método a aplicar:
La Norma 37008 sugiere utilizar uno de los tres métodos siguientes:
- Método A – Construcción de la curva de supervivencia
- Método B – Método de fracción negativa
- Método C – Método del medio ciclo
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11. Por razones de practicidad nosotros utilizamos el método C-Método del medio
ciclo, por lo que nos referiremos brevemente al mismo.
El método del medio ciclo “incluye la determinación del tiempo mínimo de
exposición al ETO en el cual no hay sobrevivientes manteniendo todos los
parámetros del proceso constantes, excepto el tiempo. Deberán realizarse dos
ensayos para confirmar el tiempo mínimo. Ninguno de los indicadores
biológicos deberá mostrar crecimiento alguno.
El tiempo de exposición especificado deberá ser por lo menos el doble
de este tiempo mínimo.
También debe realizarse un ciclo de corta duración del cual pueden
recuperarse los sobrevivientes, para demostrar lo adecuado de la técnica de
recuperación y de la viabilidad de los IB.
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12. Certificación de la Validación:
El informe de la validación deberá hacer referencia a:
- detalle de producto esterilizados y modelo de carga en el esterilizador
- especificaciones del esterilizador
- información de inspección
- registros físicos y biológicos, de todos los ensayos de calificación de
desempeño
- documentación de que todos los marcadores, registradores, etc. fueron
calibrados cuando se evaluó el desempeño
- prever una futura revisión y revalidación
- protocolo de validación
- procedimientos documentados usados
- manuales de capacitación y registros de todo el personal involucrado
- procedimientos de operación documentados
- procedimientos de mantenimiento y calibración
Una vez completado el programa de validación, los resultados se deben
compilar en un archivo específico. La validación de un modelo de carga para un
esterilizador en particular queda debidamente completada con la
aprobación de las personas responsables del sistema de calidad.
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13. Influencia del envase primario en el proceso de esterilización:
Completando nuestra experiencia nos interesa presentar registros
correspondientes a:
- un ciclo tipo (Fig.2)
- ciclos donde se observan registros con curvas diferentes que muestran la
influencia de los distintos materiales que componen los envases
primarios, frente a la presión reducida en la cámara ,a saber:
envases tipo Pouch (Fig.3 ),
envases de polietileno (Fig.4)
Hay casos en los cuales se hace necesario efectuar vacío fraccionado para
desalojar el aire del sistema, (Fig. 5) ya que la naturaleza del envase (por ej.
Bolsas múltiples de polietileno) frente a la presión reducida, genera riesgo de
rotura del envase. El vacío fraccionado equilibra la presión reducida dentro y
fuera del envase, permitiendo llegar al valor adecuado para el proceso sin que
haya rotura del mismo.
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14. PRESION
Steri-Lab S.R.L.
TEMPERATURA
500
400
300
6
o
r
N
A
R
A
M
A 200
C
100
0
06 /06/01 20:24 :00 06/06 /01 21:36:00 06/06/01 22:48:00 06/07/01 00:00:00 06/07/01 01:12:00 06/07/01 02:24:00 06/07/01 03:36:00 06/07/01 04:48:00 06/07 /01 06:00:00 06/07/01 07:12:00 06/07/01 08:24:00
- 100
CICLO 15848 COMIENZO DE CICLO: 06/06/01 20:55:30
Fig. 2 – Ciclo tipo
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15. Steri-Lab S.R.L. PRESION
TEMPERATURA
500
450
400
350
CAMARA Nro 6
300
250
200
150
100
50
0
06/07/01 07:12:00 06/07/01 08:24:00 06/07/01 09:36:00 06/07/01 10:48:00 06/07/01 12:00:00 06/07/01 13:12:00
CICLO 15856 COMIENZO DE CICLO: 06/07/01 07:56:40
Fig. 3 – Influencia del envase primario tipo Pouch
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16. Steri-Lab S.R.L. PRESION
TEMPERATURA
500
450
400
350
CAMARA Nro 6
300
250
200
150
100
50
0
06/05/01 19:12:00 06/05/01 21:36:00 06/06/01 00:00:00 06/06/01 02:24:00 06/06/01 04:48:00 06/06/01 07:12:00 06/06/01 09:36:00
CICLO 15836 COMIENZO DE CICLO: 06/05/01 19:58:35
Fig. 4 - Influencia del envase primario de polietileno
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