7. 1. Técnicaparaamplificacióndeácido
nucleico
Primera línea por ser rápida con S y E alta cercana al cultivo
líquido
Conocida como MTB/RIF detecta al mismo tiempo TB y
resistencia a la rifampicina en <2h
Laboratorios no convencionalesporque no exige
seguridad biológicao entrenamiento. Energia estable
OMS recomienda prueba Dx inicial en VIH, niños y adultos
Xpert MTB/RIF con S 98% AFB y S 70% AFB
negativo:
LCR si sospecha de meningitis tuberculosa y
otras muestras (PAAF, lavado gastrico) en
sospecha de TB extrapulmonar
Actualidad Xpert MTB/RIF ultra con +S pero -E
AFB: Bacilos acidoresistentes
“traza” En VIH, niños y TB extrapulmonar
(positivo verdadero)
8. 2.Microbiológico
EldiagnósticodefinitivodeTB es elaislamientoe identificacióndelbacilotuberculoso.
Los productos para cultivo pueden dividirse en dos grupos:
a) Territorios estériles, como el LCR o una biopsia (ganglionar o hepática), que pueden
sembrarse directamente en los medios de cultivo. Tejido no colocar formaldehido.
b) Territorios con flora comensal, como el esputo o la orina, en los que previamente hay que
descontaminar la muestra de esta flora acompañante de crecimiento rápido (horas). Falsos +
El examen directo para la visualizaciónde micobacterias es el examen microscópicoAFB
M tuberculosis pared lipidica, tinciones específicas y crecimiento lento (semanas)
Tradicional: tinción de Ziehl Neelsen
+S: tinción auramina-rodaminay microscopía de fluorescencia
9. 2.Microbiológico
TB pulmonar se envía mínimo 3 muestras seriadas
de esputo, preferible temprano en la mañanaal
despertar, en días consecutivos para :
frotis de AFB (bacilos acidoresistentes)
cultivo de micobacterias
La detección de bacilos ácido-alcoholresistentes
en un examen microscópico sólo proporciona un
dato diagnóstico de presunción porque no es
específica de M. tuberculosis y su ausencia
tampoco descarta.
10. 2. Cultivomicobacteriano
Dos tipos de cultivo:
- Medio sólidos adecuados para el desarrollo de las micobacterias, como el clásico de Löwenstein-
Jensen, a basede huevo coagulado,o los semisintéticos con agar de Middlebrook y Cohn,
- Medios líquidos.
Las colonias de M. tuberculosis son bastante características, de color crema, rugosas («en coliflor» o
«en miga de pan») y de superficie seca
OMS recomienda como estándar el cultivo
liquido MGIT
La aparición de fluorescencia indica
crecimiento activo de micobacterias en un
periodo de 10 dias a 2 o 3 semanas
Los tubos se leen c/semana hasta la
8va semana de incubaciónantes de
declarar el cultivo como negativo.
11. 2. Cultivomicobacteriano
Se adicionan métodos moleculares (amplificaciónde ac nucleico) o cromatografía para determinar la
especie de los aislados micobacterianos
- La inmunocromatográficade flujo lateral basada en la detección del antigeno MTP64
Losresultadossedeben interpretarconcautela:
Alta sospecha clínica y baciloscopiapositiva el VPP alto, aunque un resultado negativo no excluye TB
Baja sospecha clínica y baciloscopia positiva tiene escaso valor Dx, y un resultado negativo excluye
12. 3.Pruebadesusceptibilidadfarmacológica
Se identifica riesgo de resistencia: no responde al
tto inicial o recae después de completar el tto
OMS recomienda a todos los aislados iniciales de
M tuberculosis
Manera directa: muestra clínica. En >8
semanas
Manera indirecta: cultivo medio solido o liquido.
En 3 semanas
Métodos genotípicos muy confiables en regiones
riesgo:
Resistencia a la rifampicina como rpoB
Isoniazida como katG e inhA
Usuales para resistencia a rifampicina están
MTB/RIF, Xpert MTB/RIF y Xpert MTB/RIF
ultra
13. 3.Pruebadesusceptibilidadfarmacológica
En pacientes con RR-TB o MDR-TB confirmada
se recomienda las pruebas de sonda lineal
Detectar resistencia de rifampicina e isoniazida
1ra y 2da linea tto
Sin embargo, la amplificaciónpor PCR detecta las
mutaciones más frecuentes relacionadas con
resistencia. Por ello, esto no elimina las pruebas en
cultivos fenotípico para identificar la resistencia a
otros fármacos y vigilancia
En recursos limitados los métodos MODS u
observados al microscopio están nitrato
reductasa y colorimétrico por redox
14. 4.Técnicasradiográficas
S alta pero E baja
Síntomas respiratorios + lesiones sugestivas de TB --à realizar pruebas bacteriológicas
Lóbulo superior con infiltrados y
cavidades.
No obstante, imagen normal, nódulo
pulmonar solitario, infiltrados alveolares
difusos en SDRA. En VIH/SIDA ninguna
imagen patognomónica
TC en imágenes dudosas por Rx y útil para TB extra pulmonar
Tomografíapor emisión de positrones + TC --à enfermedad subclínica que puede evolucionar a TB en VIH
MRI para TB intracraneal
15. Estenosis del bronquio principal izquierdo
areas parcheadas de infiltrados alveolares
centrolobulillar
bronquiectasia cilindrica en lob sup
bandas atelectasicas bibasales
Impresion Dx tapon mucoso en traquea previo a
traqueotomo, distal a cierdas vocales verdaderas
PCR positivo para TB
Tos seca por 2 meses
Disfonía
MV disminuido en campo
pulmonar izquierdo
APP DM2 con ADO
16. 5.Otrastécnicasdiagnósticas
- Pacientes con signos radiográficos anormales compatibles con otras
enfermedades—------broncoscopia de fibra óptica + cepillado bronquial y
endobronquial o de una biopsia transbronquial o LBA
- Muestras para buscar los AFB en los frotis, cultivar las micobacterias y realizar
pruebas moleculares con el estudio MTB/RIF.
- Técnicas diagnósticas invasivas—------TB extrapulmonar—-----muestras de
los sitios afectados, biopsia , cultivo hístico, hemocultivo
- Cultivos o resultados del estudio MTB/RIF (-)........ Diagnóstico x epidemiología,
respuesta al tto clínico y radiográfico.
17. - TB vinculada al VIH—--prueba MTB/RIF, S 60-70% entre casos negativos en AFB, pero con
cultivos positivos, 97-98% entre los casos positivos para AFB
- Prueba de lipoarabinomanano urinario por flujo lateral—----signos y síntomas de TB y
una cifra de linfocitos T CD4+ <100 células/μL o en pacientes con VIH graves, al margen de
la cifra de linfocitos T CD4+ o con una cifra desconocida.
18. - Varias pruebas serológicas, no se consideraron útiles x baja S y E
PRUEBAS SEROLÓGICAS YOTRAS PRUEBAS
DIAGNÓSTICAS PARA TUBERCULOSIS ACTIVA
DIAGNÓSTICODE INFECCIÓNLATENTEPORM.TUBERCULOSIS
- Pruebacutáneade tuberculina:prueba cutánea de derivado
proteico purificado de tuberculina (PPD)
- Mide la respuesta a una estimulación antigénica de los linfocitos T
residentes en la piel.
- Falta de especificidad para las especies micobacterianas, subjetividad
de la interpretación de la reacción cutánea
- Valor limitado para el diagnóstico de TB activa
- Incapacidad para discriminar entre LTBI y la enfermedad activa
- Reacciones NF y PF
- defectos técnicos de
administración
- TB agudas graves
- individuos infectados por el HIV
- otras infecciones víricas o
bacterianas
- vacunación reciente con virus vivos
- pacientes que reciben
glucocorticoides y otros fármacos
inmunodepresores
- sarcoidosis, neoplasias
linfoproliferativas
- edades extremas de la vida,
desnutrición y otras enfermedades
anergizantes.
19. - La tuberculina, que se obtiene del filtrado del cultivo de M. tuberculosis esterilizado y concentrado,
actualmente está constituida por un derivado proteico purificado (PPD).
- Técnica de Mantoux, inyección intradérmica en la cara ventral del antebrazo de una cantidad constante de
líquido diluyente (0,1 mL) con la dosis correspondiente de tuberculina}
- Induración- pápula a las 48-72 h.
20.
21. - Miden la liberación de IFN-y por los linfocitos T en respuesta a la estimulación con antígenos específicos para TB
- Antígenos early secretory antigen target 6 (ESAT-6) y culture filtrateprotein 10 (CFP-10)
- Antígenos secretados por el complejo M. tuberculosis y que están ausentes tanto en la vacuna BCG como en la
mayoría de las micobacterias ambientales.
- Discriminan los individuos sensibilizados por M. tuberculosis de los vacunados por BCG y de los expuestos a otras
micobacterias
- Pueden repetirse inmediatamente
- Son más S y E que la prueba de la tuberculina y correlacionan mejor el riesgo de infección con el grado de
contacto con un enfermo de TB.
- Requieren la extracción de sangre y su envío inmediato posterior al laboratorio.
- Equipo y entrenamiento especial
AnálisisdeliberacióndeIFN-y
Ventajas:
- conveniencia logística, la necesidad de
menos visitas del paciente para completar
la prueba
- la ausencia de mediciones subjetivas, como
la induración cutánea.
22. - Pueden identificar a las personas con infección latente
- tienen valor predictivo bajo para identificar a los individuos con el
riesgo más alto de progresión hacia la enfermedad
- no pueden diferenciar entre la TB activa y la LTBI
- no pueden distinguir las infecciones nuevas de las reinfecciones
- su sensibilidad es baja en pacientes inmunodeprimidos.
