2. Que es la sangre?
⚫ Elemento principal del medio interno, por ella se
realizan todos los intercambios bioquímicos.
⚫ Transporte: H2O, gases (respiración) disueltos o
unidos a π plasmáticas o celulares, nutrientes, π,
glu, aa, vitaminas, electrolitos, metabolitos,
remoción de toxinas.
⚫ Regulación: hormonas, temperatura corporal,
balance electrolítico, control pH (7,35-7,45)
(homeostasis).
⚫ Protección: inmunidad (inmunoglobulinas G, A,
M, D, E).
⚫ Hemostasia
3. La sangre humana está
compuesta por:
▪ líquido o plasma
sanguíneo
(45-60%) (plasmática)
▪ células sanguíneas
4. Diferencias
⚫ SANGRE: células + líquido.
⚫ PLASMA: líquido sobrenadante
obtenido a partir de sangre
anticoagulada, post centrifugación.
⚫ SUERO: líquido exudado a partir
de sangre coagulada
7. Hemograma o CSC (conteo
sanguíneo completo) o biometría
hemática.
Es un cuadro o fórmula sanguínea en el
que se expresan el número, proporción y
variaciones de los elementos sanguíneos
8. Hemograma:
conjunto de determinaciones
● Rto de glóbulos rojos
● Rto de glóbulos blancos
● Rto de plaquetas.
● Frotis
Hematocrito
Eritrosedimentación
Hemoglobina
● Que información brinda cada
determinación?
9. Eritrocitos
Transporte de oxígeno a los órganos y tejidos y
del dióxido de carbono para su eliminación.
Cel. anucleada
Contienen en su interior hemoglobina (proteína)
Forma: bicóncava facilita intercambio.
Vida media: 120 días
Mujeres: 4,2 - 5,6 millones/mm³ (En unidades
SI: 4,2 - 5,4 x10¹²/L)
Hombres: 4,8 - 6,2 millones/mm³ (En
unidades SI: 4,6 - 6,2 x10¹²/L)
10. Su número depende de:
⚫ edad
⚫ sexo
⚫ especie
⚫ disminución de PpO2 en tejidos:
⚫ altura sobre el nivel del mar
⚫ tabaquismo
⚫ Hb alteradas (>afinidad por O2)
11. Leucocitos
Glóbulos blancos ayudan a combatir infecciones
Existen cinco tipos de estos glóbulos:
⚫Basófilos
⚫Eosinófilos
⚫Linfocitos (células T y células B)
⚫Monocitos
⚫Neutrófilos
12. Leucocitos
⚫ Valores normales
Adulto: 5.000 – 10.000/μL
R/N: hasta 30.000/μL
1ª semana: hasta 10.000/μl
⚫ LEUCOCITOSIS (= ↑de los leucocitos)
infecciones bacterianas
apendicitis
leucemias
embarazo (forma fisiológica)
⚫ LEUCOPENIA (=↓ de los leucocitos)
infecciones víricas
hepatitis infecciosa
artritis reumática
lupus eritematoso
radiación y tratamientos quimioterápicos
13. ⚫ Observaciones
Niños: la cifra de leucocitos es mucho más elevada
que la de un adulto ante una misma infección.
El recuento de leucocitos aparece más elevado por
la tarde que por la mañana.
Se produce un aumento de leucocitos después de
un ejercicio físico extenuante, con la ansiedad y la
tensión emocional.
Embarazo.
14. Variación en el nro. de leucocitos
Aumento de
neutrófilos:
Neutrofilia
Infecciones bacterianas-Síndrome
mieloproliferativo
Inflamaciones de origen no infeccioso
Enfermedades del colágeno
Neoplasias-Apendicitis
Aumento de
eosinófilos:
Eosinofilia
Su misión está estrechamente ligada a la reacción
antígeno-anticuerpo.
Enfermedades alérgicas: asma, alergias
medicamentosas.
Parasitosis
Enfermedades de la piel: eczema, psoriasis
En algunas leucemias
Aumento de
basófilos
Basofilia
No se conoce con precisión la misión de estas
células, aparte de que intervienen en las
reacciones alérgicas (sus gránulos contienen
histamina y heparina).
Síndrome mieloproliferativos: Leucemia
mieloide, Policitemia Vera.
Ciertas infecciones víricas
15. Monocitos M →µφ ( vasos sanguineos) en casi todas
las enfermedades agudas,
particularmente en la fiebre
tifoidea, endocarditis infecciosas y fie
bres eruptivas, en algunos estados
crónicos (paludismo, fiebre
recurrente, etc.) y en
cierto número de formas
de leucemia.
Linfocitos • Tumores linfoides, leucemia
linfoblástica aguda y crónica,
• Infecciones víricas: síndromes
mononucleares (VEB, CMV),
hepatitis, rubéola, virus
herpes simple y varicela-zoster,
adenovirus.
•toxoplasma, Bordetella Pertussis,
Rickettsias.
shock séptico, fallo cardiaco agudo,
cirugía, fármacos.
16. Hemoglobina
⚫ Heteroproteína
Compuesta por 4 cadenas polipeptídicas
⚫ GRUPO HEMO
Cada cadena está unida a un grupo hemo
Cada grupo hemo une una molécula de O2.
⚫ transporta el oxígeno desde los órganos
respiratorios hasta los tejidos, el dióxido de
carbono desde los tejidos hasta los pulmones
que lo eliminan
19. Significado clínico
El valor de referencia
37 a 47% en mujeres
42 a 52% en hombres.
Su aumento indica policitemia
(aumento del número de eritrocitos);
su disminución se presenta durante
la anemia, hipovolemia y durante el
embarazo.
20. Procedimiento
1. Llenar un capilar hasta ¾ partes con
la sangre homogenizada. Sellar el
extremo vacío del tubo con plastilina.
2. Colocar el capilar sellado en la
microcentrífuga con la parte sellada
hacia el lado opuesto al centro de la
centrífuga.
3. Centrifugar 5 minutos (10.000 rpm) o
10 minutos (5.000).
4. Calcular hematocrito con ayuda del
lector (ABACO) o de acuerdo a
la siguiente fórmula:
5. Hto= Vol. de eritrocitos (mm) / Vol
Total de sangre (mm) x100
6. Se informa en %
21.
22. Índices eritrocitarios
VCM, HCM, CHCM
⚫Fundamento
Se trata de indicadores obtenidos
mediante cálculos aritméticos, que
involucran los valores de hemoglobina,
número de eritrocitos/mm3 y hematocrito,
y que permiten la clasificación morfológica
de las anemias.
23. Plaquetas
Las plaquetas son las primeras en acudir ante
una lesión en un vaso, se agregan (se junta
unas con otras), se adhieren a los tejidos
dañados y forman el tapón primario, mientras
se desencadena el proceso de la coagulación y
la liberación de factores que la hagan posible.
⚫ El recuento de plaquetas →microscopio de
contraste de fases, previa lisis de los
hematíes, o microscopio convencional
⚫ Aumento de plaquetas →Trastornos
mieloproliferativos.Las plaquetas pueden ser
funcionalmente inoperantes
24. Disminución de plaquetas.
(Trombopenia)
⚫Descartar un error de lectura (como
consecuencia de una agregación
parcial de las plaquetas en la muestra)
⚫Las verdaderas trombopenias pueden
obedecer a una causa central
(generalmente asociada a leucopenia y
anemia).
25. Trombosis
⚫los vasos sanguíneos llegan a
obstruirse por los coágulos
ocasionando severas reacciones
un accidente cerebro vascular, infarto
agudo de miocardio, embolismo
pulmonar, o bloqueo en cualquier
otra parte del cuerpo como en las
extremidades superiores e inferiores.
26. ERITROSEDIMENTACION
Velocidad de sedimento globular
⚫ Se deja en reposo durante cierto tiempo una sangre total
anticoagulada, los hematíes se van separando del plasma
(pesan más) y se van sedimentando en el fondo del
recipiente.
⚫ La velocidad con la cual se produce este descenso de los
hematíes = VSG
⚫ Factores mecánicos y técnicos: esto se evita con los
actuales aparatos que miden solos y automáticamente la
VSG.
28. Método de Westergreen
⚫ 1- Extraer sangre venosa (aprox. 1-2 mL) y
homogenizar con el anticoagulante (Citrato Sódico
3.8 % en proporción 1/4). Se recomienda realizar la
determinación dentro de las 2 horas posteriores a la
extracción de la muestra.
⚫ 2- Cargar una pipeta de Westergreen y en el momento
de llegar a la marca 0, poner en marcha el cronómetro.
Asegurarse que la pipeta esta en una posición de 90 º
respecto la superficie, exenta de vibraciones o
cualquier factor que modifique la VSG.
⚫ 3- Transcurridos 60 minutos exactos, leer la
sedimentación eritrocitaria, que se expresa en
mm/hora y comparar los resultados obtenidos con los
resultados normales.
29. ERITROSEDIMENTACION
Velocidad de sedimento globular
La velocidad se ve afectada por tres factores:
Eritrocitos - Plasma - Factores mecánicos
y técnicos
⚫ Eritrocitos: Tamaño de los hematíes
⚫ Los hematíes en la sangre se hallan separados unos de
otros ya que tienen cargas negativas, se repelen. En
algunos estados patológicos las proteínas plasmáticas se
alteran y hacen que los hematíes se coloquen en pilas de
monedas, aumentando de peso y aumenta la velocidad
de sedimentación.
⚫ Composición del plasma: un aumento de los niveles de
proteínas plasmáticas lleva a un aumento de la velocidad.
30. ⚫ La velocidad es menor en los niños que en los adultos.
⚫ En los ancianos aumenta un poco de forma fisiológica.
⚫ El aumento de la VSG es una respuesta inespecífica del
organismo al deterioro tisular y denota la presencia de
enfermedad, aunque no calibra su gravedad.
⚫ Está aumentada en:
⚫ Infecciones agudas y crónicas
⚫ Tumores
⚫ Enfermedades degenerativas
⚫ Enfermedades crónicas (nefrosis, IRC, artritis
reumatoide
⚫ De forma fisiológica: embarazo
31. ANTICOAGULANTES
CARACTERÍSTICAS
⚫ No alterar el tamaño de los hematíes.
⚫ No producir hemólisis.
⚫ Evitar al máximo la agregación plaquetaria.
⚫ No alterar la morfología de los leucocitos.
⚫ No debe diluir la muestra ( vol de anticoag
agregado)
32. Sangre tratada con
anticoagulante
⚫ Debe procesarse lo antes posible, incluso
mantenida bajo refrigeración (4º C)
⚫ El tiempo máximo entre la extracción de
la sangre y su procesamiento depende del
coagulante de elección y no debe ser más
de 4 horas, a excepción del EDTA que
puede ser hasta 24 horas(en refrigeración
a 4 ºC)
33. ANTICOAGULANTES
SÓLIDOS EDTA
⚫Es la sal disódica o tripotásica del ácido
etilendiaminotetracético.
⚫Realizan su acción a través de un efecto
quelante sobre el calcio, al fijarlo impiden
su activación y, por ende, la coagulación
sanguínea.
34. EDTA
Ventajas
⚫ Respeta la morfología eritrocitaria (especialmente la sal tripotásica) y
leucocitaria.
⚫ Asegura la conservación de los elementos formes sanguíneos durante
24horas si la sangre se mantiene a 4 ºC.
⚫ Al inhibir la aglutinación de las plaquetas, facilita su recuento o su
expresión semicuantitativa a partir del frotis.
⚫ La concentración recomendada de EDTA es de 1,5 mg/mL. de sangre.
⚫ Mayor cantidad de anticoagulante: retracción celular, con disminución
del hematocrito y mayor cc de la hemoglobina
⚫ Menor cantidad de anticoagulante produce formación de micro
agregados que pueden alterar los resultados
.
35. EDTA
Desventajas
En exceso afecta a los eritrocitos y a los
leucocitos → encogimiento y cambios en su
forma.
Debe cuidarse de agregar la cantidad
correcta de sangre al anticoagulante.
36. Heparina
⚫ Es un mucopolisacáridoácido.
⚫ Si no se agita rápidamente con la sangre
después de extraída pueden formarse
microcoágulos.
⚫ No altera el volumen eritrocitario ni la
morfología de los leucocitos.
⚫ No es recomendable para el frotis sanguíneo
porque produce un fondo azul en la lámina.
⚫ La heparina de sodio o litio puede usarse en
forma sólida o líquida, en proporción de 0,1 -
0,2 mg de heparina por 1 mL de sangre
37. ANTICOAGULANTES LÍQUIDOS
⚫ Citrato trisódico
⚫ Pruebas de hemostasia y la velocidad de sedimentación.
⚫ Actúa a través de la precipitación del calcio.
⚫ La concentración depende de la prueba por realizar.
Hemostasia proporción de 1: 9 (0,5 mL de anticoagulante
para 4,5 mL de sangre total).
VSG (Velocidad de Sedimentación Globular) es1:4 (0,5
mL de anticoagulante para 2 mL de sangre).
⚫ Oxalato sódico
Recomendado para las pruebas de hemostasia. Se emplea en
proporción de un volumen de anticoagulante para 4 vol. de
sangre
38. Otros anticoagulantes
Anticoagulante de Wintrobe
⚫ Mezcla de oxalato de amonio y potasio.
⚫ Actúa por precipitación del calcio.
⚫ Se emplea en forma de polvo en
proporción de 2 de oxalato de amonio por
1 de oxalato de potasio. La cantidad
recomendada es de 2 mg x mL de sangre.
No afecta el volumen globular medio y
puede usarse para determinaciones
de hemoglobina, hematocrito y
recuento globular.
⚫ Para los extendidos queda limitada a los
primeros minutos.
39. Que anticoagulante utilizo en cada
determinación?
Código de colores de los tapones de los
tubos de acuerdo a la norma ISO 6710
40. Toma de muestra
⚫ MUESTRAS SANGUINEAS
⚫ Las venopunciones se deben estandarizar
en términos de la hora de recolección.
⚫ Tiempo de aplicación del torniquete.
⚫ La postura durante la toma de sangre
⚫ La temperatura de transporte y el almacenamiento.
⚫ Los datos obtenidos de sangre venosa no pueden
compararse con los obtenidos de sangre de capilares
o arteriales
⚫ Valores hematológicos dependen de la edad, sexo
hábito de fumar, hora de día, posición erecta o supina
del paciente durante la toma, duración de la estasis
venosas producida por el torniquete y la
administración de líquidos y drogas.
41. Interferencias analíticas
⚫ Hemólisis:
Lisis anormal de los eritrocitos, la lisis provoca
una descarga de la enzima adenilatocinasa.
↑ concentración sérica del potasio, magnesio,
LDH, fosfatasaácida y aldolasa.
Larga permanencia de la sangre total en un
recipiente.
Contaminación de la sangre con detergentes,
agua, choque térmico.
Las muestras deben obtenerse por
succión suave.
La muestra debe trasvasarse lentamente
por las paredes del tubo después de ser
eliminada la aguja.
42. ⚫Lipemia:
Provocada por una concentración alta de
triglicéridos en el suero provocara
resultados aparentemente altos para
todas las sustancias cuyas
determinaciones se basan en la
absorbancia a las mismas longitudes de
onda en que las partículas de lípido
también absorben luz.
43. ⚫Ictericia:
Puede interferir en las determinaciones de
Albúmina, en los ensayos de colesterol que
utilizan como reactivo el cloruro férrico, en las
determinaciones de glucosa basadas en el
método de la o-toluidina y en las proteínas
totales por Biuret, o las reacciones que usen
filtro a 405 o a 520.
44. PREPARACIÓN DEL PACIENTE
⚫ Ayuno del paciente: El paciente concurrirá con 8 hs
de ayuno para efectuarse cualquier tipo
de extracción sanguínea siendo la excepción
la determinación
de triglicéridos y perfil lipídico para las cuales el
ayuno será de 12 hs
⚫ Si exceptuamos la glucosa, los triglicéridos y el fósforo
inorgánico, los demás elementos sanguíneos no se alteran
significativamente después de un desayuno “normal” por
lo que el paciente no precisa guardar ayuno absoluto
antes de la toma de sangre.
⚫ Lipemia, puede provocar interferencias con un gran
numero de determinaciones químicas, debida a la
turbidez.
45. Momento para la obtención de
los especimenes sanguíneos
⚫Variaciones diurnas de importancia. Ej:
cortisol, hierro,glucosa, triglicéridos y
estriol.
⚫Variaciones de 30 a 50 % durante el
día.
⚫Obtener las muestras sanguíneas de 7
a 9 hs de la mañana (ritmos
circadianos o ritmos biológicos)
46. Ejercicio antes de la toma
⚫ Actividad muscular tiene efectos, tanto
transitorios como de larga duración, sobre
diversos parámetros químicos.
⚫ Incrementos de las actividades de las
enzimas musculares medidas en suero,
⚫ “El paciente no habrá realizado
ejercicios previo a la extracción
de la muestra sanguínea”
47. Posición del paciente
⚫Debe tranquilizarse al paciente, (el
estrés provocado por la flebotomia
puede afectar los resultados del
laboratorio)
⚫ Las modificaciones posiciónales
afecta: Albúmina, proteínas, diversas
enzimas, calcio,
bilirrubina, colesterol, triglicéridos,
angiotensina, aldosterona y renina.
49. Torniquete
⚫ Puede producir éxtasis venoso localizado
⚫ La muestra se hace hemoconcentrada→
valores erróneamente altos para todos las π
⚫ El ejercicio excesivo del puño debe evitarse, →puede
producir elevación en la concentración de K, LDH.
⚫ Determinaciones de Lactato deben ser tomadas sin
torniquete.
⚫ “El uso del torniquete no debe exceder de 1
minuto y su presión no debe ser excesiva
50. Transporte de las muestras
⚫ Los tubos deben ser transportados en el menor tiempo
posible al laboratorio.
⚫ Deben mantenerse en posición vertical(promueve la
formación del coagulo y minimizar la agitación del
liquido) →reduce la posibilidad de hemólisis
⚫ El tubo tapado elimina la posibilidad de contaminación
exógena de la muestra, evaporación, posibilidad de
derrame y la producción de aerosoles al momento de la
centrifugación.
⚫ Las muestras para la determinación de estado ácido-
base deben transportarse en hielo.
⚫ Debe evitarse la exposición a la luz especialmente
porque se afectarían las vitaminas A yB6, beta-
carotenos, porfirinas y bilirrubina.
⚫ Las muestras deben ser enviadas lo mas rápido
posible al laboratorio para evitar la degradación
de muchos analitos
51. Xenobióticos
⚫ Alcoholismo:
Ingestión de etanol produce incrementos de la
concentración plasmática de lactato,ácido úrico y
metabolismo del etanol.
Los alcohólicos crónicos → HDL-Colesterol, Gama-GT y
Ácido úrico ↑↑, volumen corpuscular medio ↑ al
normal
⚫ Tabaquismo:
↑↑ concentración de la Carboxihemoglobina,
catecolamina, cortisol sérico, ↑del hematocrito y la Hb
⚫ Variabilidad iatrogénica:
Causadas por medicamentos o actos terapéuticos o
diagnósticos.
Fármacos dos categorías:
a) Efectos debidos a las propiedades farmacológicas o
tóxicas de las drogas
b) Efectos debidos a la interferencia con la prueba de
laboratorio.
52. ⚫ Alteraciones gestacionales:embarazo →cambios
profundos en diversos procesos metabólicos y
bioquímicos: orina, hipófisis, tiroides, corteza
suprarrenal, lípidos séricos, proteínas séricas, función
hepática y glucosuria. ↓Hb, ↓Hto.
⚫ A las mujeres en edad fértil deberá
preguntárseles si están o pudieran
estar embarazadas, dado que, este estado
altera muchas determinaciones y debe
tenerse en cuenta
⚫ Deberá realizarse un pequeño interrogatorio
al paciente para saber si toma algún
medicamento o esta en tratamiento, pues
estos pueden interferir en algunas
determinaciones