Practicas de laboratorio para el reconocimiento de carbohidratos, lípidos y proteínas

1. Facultad de
Ciencias de la Salud
Escuela Académica
Profesional de
Enfermería
Docente: Mg. Carmen Rosa Terry Borjas

2. EN5002: BIOLOGÍA
PRÁCTICA DE LABORATORIO N° 3
Reconocimiento de carbohidratos, lípidos y proteínas

3. Logro de la sesión
Al finalizar la sesión el
estudiante, reconoce los
carbohidratos lípidos y proteínas
mediante pruebas de laboratorio
y desarrolla un informe.

4. Recordemos la clase teórica……………….
¿ Recordemos sobre los carbohidratos, lípidos y proteínas ?

5. PRÁCTICA N° 3
1.- RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
Los carbohidratos constituyen compuestos químicos formados
principalmente por carbono, hidrógeno y oxígeno. Químicamente se
definen como polialcoholes con un grupo aldehído o cetona.
Estas Biomoléculas ejercen funciones fundamentales en los seres vivos,
como: estructurales (celulosa), reserva de alimento (almidón), reserva
energética (glucógeno), energía inmediata (glucosa).
Pueden clasificarse atendiendo a varios criterios: de acuerdo al número
de monómeros que constituyen al carbohidrato, al número de carbonos
de sus monómeros, según el grupo funcional que posee ese monómero
(Aldosa y cetosa)
Laboratorio:
1.- Reconocimiento de monosacáridos (Reactivo de Feling A y Feling B)
2.- Reconocimiento de polisacárido (Prueba de Lugol)

6. Fundamento del reactivo de Fehling
El reactivo de Fehling se utiliza para la determinación de azúcares
reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa, fructuosa y
algunos disacáridos como la lactosa y maltosa.
El fundamento del reactivo de Fehling se debe al poder reductor del
grupo carbonilo de los aldehídos o cetonas. Éste se oxida a ácido y
reduce la sal de cobre en medio alcalino a óxido de cobre, formando
un precipitado de color anaranjado.
El reactivo de Fehling está formado por dos soluciones acuosas:
▪ Fehling A: CuSO4 disuelto en H2O
▪ Fehling B: NaOH y tartrato Na-K disuelto en agua
Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso, para evitar
la precipitación del hidróxido de cobre.
Glucosa Sacarosa
Óxido de
cobre

7. FUNDAMENTO DE LA PRUEBA DE LUGOL (Yodo)
FUNDAMENTO
El lugol es un reactivo que se usa para identificar polisacáridos.
El almidón es un polisacárido vegetal formado por dos componentes: la
amilosa y la amilopectina. El cual se colorea de morado oscuro en presencia
de yodo debido no a una reacción química sino a la adsorción o fijación de
yodo en la superficie de la molécula de amilosa, lo cual sólo ocurre en frío.
Como reactivo se usa una solución denominada lugol que contiene yodo y
yoduro potásico.

8. Reconocimiento de monosacáridos y polisacáridos
VIDEO……..
https://www.youtube.com/watch?v=Loaa_agy5WU
https://www.youtube.com/watch?v=NwmBv8eD0vM

9. RECONOCIMIENTO DE
CARBOHIDRATOS
I.- Materiales:
2- Procedimiento:
2.1 Reconocimiento de monosacáridos (Reactivo de Feling)
2.2 Reconocimiento de polisacáridos (Prueba de Lugol)
3.- Resultados (Dibujar y explicar los resultados)

10. Reconocimiento de Lípidos
Los lípidos se definen como un grupo heterogéneo
químicamente de compuestos que son insolubles en
agua pero solubles en disolventes orgánicos tales
como éter, cloroformo, benceno o acetona. Todos los
lípidos contienen carbón, hidrógeno y oxígeno, y
algunos también contienen fósforo y nitrógeno.
Laboratorio
Reconocimiento de lípidos con el colorante Sudan III

11. FUNDAMENTO
El Sudan III es una solución que se usa en laboratorio para el
reconocimiento de lípidos (grasas) mediante su tinción, por lo tanto
es soluble en ellas predominantemente utilizado para colorear o teñir
triglicéridos y otros lípidos.
Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el
colorante Sudán III ( Tiene afinidad por los lípidos)
Sudan III ( Rojo escarlata)
TINCIÓN CON SUDÁN III

12. VIDEO……..
Reconocimiento de lípidos
https://www.youtube.com/watch?v=Dsx00q1voC4

13. RECONOCIMIENTO DE LIPIDOS
1. Materiales:
2. Procedimiento: Sudan III
3. Resultados (Dibujar y explicar los resultados)

14. Reconocimiento de proteínas
Las proteínas son macromoléculas compuestas por carbono,
hidrógeno, oxígeno y nitrógeno. La mayoría también contienen
azufre y fósforo. Las mismas están formadas por la unión de
varios aminoácidos, unidos mediante enlaces peptídicos.
Las proteínas desempeñan un papel fundamental para la vida y
son las Biomoléculas más versátiles y más diversas.
Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las
que destacan: Estructural (colágeno y queratina), Reguladora
(insulina y hormona del crecimiento), Transportadora
(hemoglobina), Defensiva (anticuerpos), Enzimática (sacarasa y
pepsinasa).

15. Coagulación de las proteínas

16. PRUEBA DE BIURET
Este reactivo se utiliza para identificar los péptidos y las proteínas,
pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace
peptídico CO- NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.
El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina
(gracias a la presencia de NaOH o KOH).
La reacción se basa en la formación de un compuesto de color
violeta, debido a la formación de un complejo coloreado entre los
iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno
que forma parte de los enlaces peptídicos. La intensidad de color
depende de la concentración de proteínas.

17. Prueba de Xantoproteica
Es un método que se puede utilizar para determinar
la presencia de aminoácidos portadores de grupos
aromáticos, especialmente en presencia de
tirosina, triptófano y fenilalanina que pueden estar
de forma libre o constituyendo proteínas solubles,
péptidos o polipéptidos.

18. Reconocimiento de proteínas
VIDEO……..
https://www.youtube.com/watch?v=R5Wp_MTJmS8

19. RECONOCIMIENTO DE
PROTEÍNAS
I. Materiales:
2. Procedimiento:
2.1 Coagulación de las proteínas (Desnaturalización)
2.2 Prueba de Biuret
2.3 Prueba Xantoproteica
3. Resultados.( Dibujar y explicar sus resultados)

20. Conclusiones
Mencione 3 conclusiones del reconocimiento de carbohidratos
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Mencione 3 conclusiones del reconocimiento de lípidos.
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Mencione 3 conclusiones del reconocimiento de proteínas.
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21. Cuestionario
1.- Explique el fundamento de la prueba de Molish y Barfoed?
2.- ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína?, explique.
3.- ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del Biuret?, explique.
4.- Explique las causas que producen la desnaturalización de una proteína.
5.- Explique otros métodos utilizados para identificar a los lípidos.
6.- Explique como se puede obtener jabón a partir de los lípidos.

22. Reflexión
• ¿Qué tema hemos tratado hoy’?
• ¿ Qué pruebas se ha utilizado para determinar
monosacárido y polisacáridos?
• ¿Para qué se utiliza el Sudan III ?
• ¿Cuándo se produce la coagulación de las proteínas?
• ¿Qué prueba usaría para saber si una proteína tiene el
aminoácido tirosina?
• ¿Cómo puedo aplicar lo aprendido en mi carrera?
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23. FUENTES DE INFORMACIÓN
1. Baynes J, Dominiczack M. Bioquímica Médica. 4ta. Ed. España: Elseiver Mosby; 2015.
2. Curtis H, Barnes S. Invitación a la biología. 7ma Ed. Argentina: Médica Panamericana; 2015.
4. Nelson D, Cox M. Principios de Bioquímica. 6ta Ed. España: Omega; 2015.
5. Voet D. Fundamentos de la Bioquímica. 4ta Ed. Argentina: Médica Panamericana; 2016.

24. Consideraciones finales:
reflexión, análisis y preguntas

25. DESARROLLO DE LA GUÍA DE PRÁCTICA Y
ELABORACIÓN DEL INFORME N° 3
TRABAJO
GRUPAL

26. Gracias