Clase 17 Artrologia MMII 3 de 3 (Pie) 2024 (1).pdf
DIAGNOSTICO-DENGUE-2021.pptx
1. Lic. María Paquita García
Mendoza Responsable
Laboratorio de Referencia Nacional de Metaxénicas
virales Centro Nacional de Salud Pública
Instituto Nacional de Salud
Curso de “Fortalecimiento de la vigilancia epidemiológica de dengue y
otras arbovirosis en Lima Metropolitana y Callao”
29 de abril del 2021
Serotipos circulantes, toma, conservación y procesamiento de
muestra, tipos de pruebas diagnostico
2. EEV, EEE, EEO
ESL,
WN
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD
Hantavirus
Arbovirus y fiebres
hemorragicas
Filoviridae:
Ebola
Bunyaviridae Flaviviridae Togaviridae
Fiebrede Oropouche
Virus Zika
Fiebre Amarilla
Dengue
Mayaro
Chikungunya
LABORATORIO DE REFERENCIA NACIONAL METAXENICAS VIRALES
Laboratorio
s:
NB2
NB3
3. GENERALIDADES
Flavivirus: Virus del
Dengue
Ralf Bartenschlager & Sven Miller. Molecular aspects of Dengue virus replication. Future Microbiol. (2008) 3(2), 155–165
ARN +
Dímero E
Virion
intracelular
(inmaduro)
Virion
extracelular
(maduro)
Trímero E
Virion
endosomal
(pH bajo)
Proteína prM
Parte pr de la
proteínaprM
Proteína M
ProteínaC
(nucleocápside)
• Familia: Flaviviridae.
• Genero: Flavivirus
• Vector: Aedes aegypti
• Es un virusARN monocatenario +.
• Tiene 4 serotipos (DEN-1, 2, 3, 4 y 5? ) y 19
genotipos
• ContieneGENES:
- Estructurales: prM (pre M), E (envoltura) y C
(cápside).
- No estructurales: NS1, NS2A, NS2B, NS3,
NS4A, NS4B y NS5.
4. DENV-1
5 genotipos: I, II, III, IV yV
DENV-2
5 genotipos:América,América/Asia,Asia I,
Asia II,Cosmopolita y Selvático (exclusivo de
primates no humanos)
DENV-3
4 genotipos: I, II, III, IV
Nota:Algunas clasificaciones incluyen el
genotipoV.
DENV- 4
4 genotipos: I, II, III y Selvático (exclusivo de
primates no humanos)
SEROTIPO GENOTIPO
AÑO DE INGRESO
PERÚ
DENV-1 América/África 1990
DENV-2
América 1995
América/Asia 2001-2017
Cosmopolita 2019
DENV-3 India 2001
DENV-4 Indonesia 2001
Fuente: LRN Metaxénicas virales del INS
8. 1. Ficha clínica
2. Tipo de muestra
3. Obtención de muestra
4. Preparación para el
embalaje y envío de la
muestra
5. Transporte de muestra
9. Ficha de investigación
clínica para la Vigilancia de
Dengue, Chikungunya, Zika,
Fiebre Amarilla y otros
arbovirus
Se registraran los datos de
caso sospechoso en forma
completa y legible.
http://www.dge.gob.pe/portal/docs/tools/dengue
/fichaarbovirosis.pdf
1. Fichaclínica-epidemiológica
10. Código de
color
Aditivo Muestra Análisis
Sin aditivo Suero
Química
Serología
Gel/Sin aditivo Suero
Química
Serología
Citrato Plasma Coagulación
EDTA Plasma Hematología
Heparina Plasma
Química
Serología
Citrato Plasma
Velocidad
Horaria de
Sedimentación
Fluoruro Plasma Glucosa
La muestra validada para el
diagnostico de Dengue es
SUERO.
Para la obtención de suero se
utilizarán tubos de extracción
al vacío sin anticoagulantes
(Tapa roja o amarilla)
2.Tipo de muestra
11. 2.Tipo de muestra
En el caso de fallecidos, se
colectará 2 cm3 de hígado, el
mismo que será remitido de
la siguiente manera:
a) 1 cm3 en un frasco con
formol neutro al 10% y
enviar en embalaje a
temperatura ambiente; y
b) 1 cm3 en un frasco sin
preservantes. Este último
será congelado de
inmediato y enviado en
cadena de frio
1 – 2 cm
12. Identificar correctamente al paciente. Rotulación inmediata frente al
paciente
Selección del sitio de venopunción. Preferida vena mediana cubital
Limpiar antes de la venopunción con alcohol al 70%
Aplicar el torniquete aproximadamente de
8-10 cm por encima del sitio de la
venopunción
Se colectará sangre en un tubo de
extracción al vacío sin anticoagulante de 7
cm3 (para extraer 2 cm3 de suero).
Invertir el tubo 5 veces para mezclar el
activador de sangre.
13. Centrifugar la muestra según las
especificaciones del fabricante del
los tubos posterior a la
coagulación de la muestra (30-60
minutos). No pasar de dos horas.
Separar el suero, el cual es estable
hasta 48 horas de 2-4ºC, después
de 48 horas en congelación a -
20ºC.
14. Rotular el criovial
Rotular con plumón indeleble en
la parte externa del criovial la
siguiente información:
• Apellidos y nombres
• Fecha de obtención
• Procedencia
Observación:
No usar iniciales
4. Preparación para el embalaje y envío
de la muestra
15. Los crioviales deben ser colocados
en una gradilla, soporte o
portaviales para asegurar su
transporte en posición vertical con
la finalidad de evitar derrames.
Asegurar que la muestra se
mantenga en cadena de frío
durante su transporte ( 2⁰ – 8⁰ C).
Transporte de muestra
16. + +
1
Recipiente
primario hermético
2
Envase
secundario hermético
3
Embalaje
exterior
Triple
empaque
Usar de 3 a 4 Kg
de refrigerantes
* Adjuntar la documentación: ficha(s) y oficio en un
sobre adherido al envase exterior.
CADENA
DE FRIO
TEMPERATURA
AMBIENTE (sin
refrigerantes)
17. M e t o d o d e
Diagnostico
E n f e r m e d a d
T i e m p o d e e n f e r m e d a d p a r a la
o b t e n c i ó n d e muestr as
M u e s t r a
Biológica
Cantidad
M i n i m a
Requerida
Conser vaci ó n y
Tr anspor te
T i e m p o d e
Resultado e n el
Netlab
Elisa antigeno NS1 D e n g u e
S u e r o : Pacientes con tiempo de
enfermedad ≤ 5 días (Periodo
Virémico)
Suero 2 m L
Estéril
(enviar a T° por
debajo de +8 °C)
3 días
qRT -P CR (detección
de A R N viral) y
aislamiento Viral
Dengue,
Chikunguna, Zika y
otras arbovirosis
S u e r o : Pacientes co n tiempo de
enfermedad ≤ 5 días (Periodo
Virémico)
Suero 2 m L
Estéril
(enviar a T° por
debajo de +8 °C) 3 días para qRT -PCR
30 días para
Aislamiento viral
Zika
Or ina: Pacientes co n tiempo de
enfermedad 6 a 15 días
Orina 2 m L
Zika
S e m e n : E n c a s o de so specha de
transmisión sexual
Semen 2 m L
Zika
LCR: E n pacientes co n Guillan Barré
confirmado, sindrome congénito o
sintomas neurológicos.
L C R 1 m L
Dengue,
Chikunguna, Zika y
otras arbovirosis
Tejido: muestra de Higado, cerebro,
riñon, placenta, cordón umbilical.
Asimismo a caso s de abortos o
natimuertos sospechosos a Zika
Tejido 1 c m 3
Estéril
(enviar a T° por
debajo de +8 °C)
Histopatología e
I H Q
Dengue,
Chikunguna, Zika y
otras arbovirosis
Tejido: muestra de Higado, cerebro,
riñon, placenta, cordón umbilical.
Asimismo a caso s de abortos o
natimuertos sospechosos a Zika
Tejido 1 c m 3
Enviar e n formol 1 0 %
a temperatura
ambiente
7 días para I H Q
ELISA (detección de
I g M e IgG)
Dengue,
Chikunguna, Zika y
otras arbovirosis
S u e r o : Pacientes co n tiempo de
enfermedad 6 a 15 días
Suero 2 m L
Estéril
(enviar a T° por
debajo de +8 °C)
3 días
Zika
LCR: E n pacientes co n Guillan Barré
confirmado,sindrome neurológicos o
sintomas neurológicos.
L C R 1 m L
RM 982-2016 - NTS 125-MINSA/2016/CDC-INS “Normativa Técnica de Salud para la vigilancia epidemiológica y diagnostico
de laboratorio de dengue, chikungunya, zika y otras arbovirosis”
Criterios para la Obtención y conservacíon y transporte de muestra para el diagnóstico
de Dengue, Chikungunya, Zika, Fiebre Amarilla y otros Arbovirus
18. Ministerio de Salud
RM 980-2016/MINSA
NTS N° 125-MINSA/2016/CDC-INS
“Normativa Técnica de Salud
para la vigilancia
epidemiológica y diagnostico
de laboratorio de dengue,
chikungunya, zika y otras
arbovirosis”
19. FINALIDAD
Contribuir a prevenir, controlar la transmisión del dengue, chikungunya, zika y otras
arbovirosis y a mitigar el ingreso de estas enfermedades en escenarios donde no hay
transmisión en el Perú.
OBJETIVO GENERAL
Fortalecer las acciones de vigilancia epidemiológica y diagnóstico para la detección
temprana de losarbovirus emergentes y remergentes, así como el monitoreo de brotesy
epidemias
OBJETIVOS ESPECIFICOS
• Establecer los procedimientos para lacaptación decasos, registro, notificación e
investigación de los casos de dengue, chikungunya, zika y otras arbovirosis, sus
secuelasy complicaciones en el Sistema Nacional deVigilancia Epidemiológica.
• Establecerlas estrategias de vigilancia epidemiológicade dengue, chikungunya, zika
yotrasarbovirosis, sus secuelasycomplicaciones.
• Estandarizar los procedimientos de obtención, conservacióny transportede muestras
biológicas para su procesamiento, así como para el diagnóstico de dengue,
chikungunya, zikayotras arbovirosis en el Perú.
Normativa Técnica de Salud para la vigilancia
epidemiológica y diagnostico de Laboratorio de Dengue,
Chikungunya, Zika y otras Arbovirosis
23. Es muy importante conocer la fecha de iniciode síntomas
(En general Fiebre) para asociarlo a la prueba de
diagnosticoa realizar.
Datos importantes para el personal de Laboratorio:
Fechade inicio de síntomas
Fechade tomade muestra.
Tipode muestra
El tiempodeenfermedad esta asociado directamentea la
carga viral y/oel título deanticuerpos
24. Aparición de
síntomas
Periodo de
incubación
Fuente:Adaptado de Sullivan N Pathology (2014)
Tiempo en días
Periodo de incubación:
Humanos: 3 - 6 días
Mosquitos: 7 - 14 días
Inf
e
cció n
+1 +2 +3 +
4
+5 +6 +7 +8 +9 +10 +11 +12 +13 +14 +15 +16
0
-1 -2 -3 -4
ARN viral
IgG
IgM
25. METODOS DIRECTOS
Son aquellosquedetectan:
1. Presencia deantígeno NS1 del
virus Dengue:
- ELISA NS1
2. Presencia degenomaviral e
identificación de serotipo:
- RT-PCR MULTIPLEXen
tiempo real
3. Aislamiento en cultivos
celulares del serotipode
Dengue.
Son aquellos que reconocen
componentes humorales
(Anticuerpos) producidos por la
exposiciónal virus:
1. Anticuerpos específicos
antivirales por técnicas
inmunológicas (ELISA IgM,
ELISA IgG).
2. Neutralización
METODOS INDIRECTOS
27. Pruebas para muestras ≤ 5 días
Serológicas:
Moleculares:
Virológicas:
ELISA Antígeno NS1
RT-PCR tiempo real Multiplex.
Secuenciación genética (genotipos).
Aislamientoviral en línea C6-36.
Pruebas para muestras ≥ 6 días
Serológicas: in house
- ELISA IgM Tariki para dengue (Prod. porel INS)
- ELISA IgG decaptura paradengue (Infección secundaria).
- ELISA IgG Indirecta (Infección pasada).
PRNT prueba de neutralización por reducción de placa
28. - ELISA NS1
- RT PCR tiempo real Multiplex
- Aislamiento viral
- Secuenciación genética.
- ELISA IgM
- ELISA IgG de captura
- ELISA IgG Indirecta
- PRNT
Diagnóstico
DENGUE
1
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD
10
días
5 6
29. NS1
Proteína No Estructural tipo 1:
- Altamenteconservada.
- Producida porel Virusdel Dengue.
- Se leencuentraasociada a la membranadel virusy
tambiénen forma libre.
30. 1) Prueba ELISA
AgNS
1
• Detecta antígeno NS1.
• Suero de 1-5 días.
• Diagnóstico temprano de
dengue.
V.Kumarasamya,A.H.AbdulWahaba,S.K.Chuab,Z. Hassana,Y.K.Chema, M. Mohamada and K.B.Chua. Evaluation
of a commercial dengue NS1 antigen-capture ELISA for laboratory diagnosis of acute dengue virus infection.
Journal ofVirologicalMethodsVolume 140, Issues 1-2, March 2007, Pages 75-79
Sensibilidad 93%
Especificidad 100%
Sensibilidad (97.3%) en Inf. Aguda primaria
Sensibilidad (70.0%) en Inf. Aguda secundaria
VPP 100%
VPN 97.3%.
31. 91.30% 88.89% 90.00% 91.55%
50.00%
100.00%
90.00%
80.00%
70.00%
60.00%
50.00%
40.00%
30.00%
20.00%
10.00%
0.00%
1er día 2do día 3er día 4to día 5to día TE ≤ 5días
Especificidad ELISA NS1
100.00%
Tiempo de
enfermedad
Especificidad
ELISA NS1
N
1er día 50.00% 4
2do día 100.00% 38
3er día 91.30% 48
4to día 88.89% 43
5to día 90.00% 37
TE ≤ 5días 91.55% 169
* Comparado con la seroconversión de ELISA IgG
Fuente: LRN Metaxénicas Virales – INS.
32. Pruebas
inmunocromatográficas
«Pruebas rápidas»
Definición: Ensayo basadoen la unión antígeno-
anticuerpo.
Se fundamenta en la migración de anticuerpos o
antígenos (Del SUERO del paciente) por capilaridad
en una membrana de nitrocelulosa, estas se unen a
un conjugado duranteel recorrido por la membranay
retenidos finalmenteen la “Zona de Captura” .
La retención en esta zona permite la coloración de los
complejos inmunes, por la exposición permanente en
este lugar.
34. I. No existe suficiente evidencia científica que recomiende
el uso masivo de las pruebas inmunocromatográficas, por
la baja sensibilidad (estudios Instituto Nacional de Salud y
laboratorios colaboradores de la OMS)
III.
II. Toda prueba inmunocromatográfica debe ser CONFIRMADA
con pruebas diagnósticas estándares (aislamiento, PCR,
ELISA NS1 o ELISA IgM/IgG).
Podrían constituir en una herramienta clínica para el
diagnóstico de casos graves y la vigilancia de dengue en
áreas geográficamente distantes a los laboratorios de
referencia regional.
IV. Se sugiere el uso de varios marcadores en simultaneo para
incrementar la sensibilidad de las pruebas IC. (Combos)
35. RT-PCR Y RT- PCR TIEMPO REAL
• Two-Step (RT y PCR por
separado)
• One-Step
• Con Sondas Taqman
• Con SYBR Green
RT-PCR convencional
RT-PCR tiemporeal
36. DIAGNOSTICO MOLECULAR DE DENGUE
RT-PCR EN TIEMPO REAL:
- Uso de sondas TaqMan
- Pares de Primers para
DENV 1, 2, 3 y 4
INS
- Verificación y Reproducibilidad
de la prueba RT-PCR.
-Protocolos estandarizados y
validados.
40. DEN-1 F 5-CAAAAGGAAGTCGTGCAATA-3
DEN-1 C 5-CTGAGTGAATTCTCTCTACTGAACC-3
DEN-1 FAM 5-CATGTGGTTGGGAGCACGC-3 BHQ-1
DEN-2 F 5-CAGGTTATGGCACTGTCACGAT-3
DEN-2 C 5-CCATCTGCAGCAACACCATCTC-3
DEN-2 HEX 5-CTCTCCGAGAACAGGCCTCGACTTCAA-3 BHQ-1
DEN-3 F 5-GGACTGGACACACGCACTCA-3
DEN-3 C 5-CATGTCTCTACCTTCTCGACTTGTCT-3
DEN-3 TxRed 5-ACCTGGATGTCGGCTGAAGGAGCTTG-3 BHQ-2
DEN-4 F 5-TTGTCCTAATGATGCTGGTCG-3
DEN-4 C 5-TCCACCTGAGACTCCTTCCA-3
DEN-4 Cy5 5-TTCCTACTCCTACGCATCGCATTCCG-3 BHQ-3
Ct
41. Técnica de Biología celular mediante la cual se obtiene
cepas puras a partir de muestras biológicas como suero,
orina, tejidos o fluidos biológicos.
Existen dos líneas celulares usadas para aislar Virus
Dengue:
1) Línea C6/36
2) Linea Vero
La línea C6/36 es mas susceptible a la replicación del Virus
Dengue.
La evidencia de la presencia de un virus es el efecto
citopático.
45. IMPLEMENTACION: 2008 -2010
TRANSFERENCIA: 2010 lotes pilotos
PRUEBA
DIAGNÓSTICA
SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD
TARIKI IgM
DENGUE - INS 99.3% 98%
PRUEBA DE
REFERENCIA
TARIKI IgM
DENGUE INS
+ - Total
+ 149 2 154
- 1 100 101
Total 150 102 255
46.
47. El reporte de un alto porcentaje de muestras negativas a
Dengue, demanda considerar la realización del
diagnóstico diferencial.
El diagnóstico diferencial se realizará frente a infecciosas
prevalentes en la región, según el enfoque sindrómico.
48. Asintomático
Síndromesclínicos
Febril
Exantemático
febril/artritis
Fiebre hemorrágica
Encefalitis
Microcefalia (Zika)
Guillain Barré
Familia
(Género)
Virus
Togaviridae
(Alphavirus)
Chikungunya
Mayaro
Encefalitis Equina del Este
Encefalitis Equina Venezolana
Encefalitis Equina del Oeste
Flaviviridae
(Flavivirus)
Dengue 1, 2, 3 & 4
Fiebre amarilla
Rócio
Encefalitis de San Luis
Nilo del Oeste
Zika
Bunyaviridae
(Ortobunyavirus)
(Phlebovirus)
Caraparu & otros virus del Grupo C
Catu & otros virus del Grupo Guama
Guaroa
Encefalitis de California
Oropouche
Alenquer & otros Phlebovirus
Rhabdoviridae
(Vesiculovirus)
Virus de la estomatitis vesicular
49. Muestra de suero tomada
1-5 día de síntomas
Positivo
RT-PCRDENV
Negativo
Tipificar
RT-PCRCHKV
Positivo Positivo
RT-PCRZIKV
DENV
Positivo Negativo
CHIKV ZIKV
50. Paciente febril agudo con
sospecha de dengue
Tomar 7 mL de sangre y enviar 2 mL de
suero al Laboratorio de Salud Pública
Si el tiempo de
enfermedad ≤ 5 días
ELISA NS1
ELISA NS1
Reactivo
Envío al INS/LRR
implementado para
identificación de
serotipos por
RT-PCR
ELISA NS1
No Reactivo
ELISA IgM
Caso confirmado
de Dengue
ELISA IgM
Reactivo
ELISA IgM
No reactivo
Caso confirmado
de Dengue
Solicitar segunda
muestra de
suero
ELISA IgM
Reactivo
ELISA IgM
No reactivo
Caso confirmado
de Dengue
Caso descartado
de Dengue
Si el tiempo de
enfermedad > 5 días
ELISA IgM
ELISA IgM
Reactivo
ELISA IgM
No Reactivo
Caso confirmado
de Dengue
TE ≤ 10 días TE > 10 días
Solicitar
segunda muestra
de suero
ELISA IgM
Reactivo
ELISA IgM
No reactivo
Caso confirmado
de Dengue
Caso descartado
de Dengue
Caso descartado
de Dengue
52. Comprende conjunto de procesos y actividades
que siguen a la fase analítica
Revisión sistemáticade los resultados obtenidos.
Validación
Interpretaciónde Laboratorio
Liberación
Informe
Transmisión de los resultados
Almacenamiento y resguardo tanto de los resultados obtenidos,
comode las muestras analizadas.
53. “DETRÁS de cada muestra hay un paciente”
“El laboratorio debe diseñar sistemas de control
interno para verificar que la calidad alcanzada es
la especificada….Se debería poner especial
atención a la eliminación de errores en el proceso
de manejode muestras, solicitudes deexámenes,
informes, etc”.
54. CASO CONFIRMADO CASO DESCARTADO
Se debe considerar cuando existe uno ó
más de las siguientes criterios:
• Resultado Positivo por RT-PCR.
• Resultado Positivo de aislamiento viral.
• Resultado Positivo a antígeno NS1
• Resultado Positivo de IgM en una sola
muestra.
• Evidencia de seroconversión en IgG en
muestras pareadas.
Se debe considerar cuando existe los
siguientes criterios:
• Resultado Negativo de IgM en una sola
muestra con tiempo de enfermedad
mayor a 10 días.
• Resultado Negativo IgG, en muestras
pareadas, la segunda muestra tomada
con un tiempo de enfermedad mayor a
10 días.
NOTA: Las pruebas negativas de RT-PCR, aislamiento viral o NSI,
no descartan el caso o la enfermedad.
GUIA TECNICA: GUIA DE PRÁCTICA CLÍNICA PARA LA ATENCION DE CASOS DE DENGUE EN EL PERÚ
56. La ficha clínico-epidemiológica es
importante en la interpretación de
los resultados, por que los datos
clínicos y epidemiológicos nos
ayudan a correlacionar los
resultados de las pruebas, así
como también a orientar el
diagnóstico diferencial con otras
etiologías
57. Situación 1 Situación 2
Primera muestrade 1-3 días
Primera muestra de 1-3 días
ELISA Ag NS1: Positivo
qRT-PCR: Positivo
Aislamiento viral: Positivo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo
ELISA IgG: Negativo
Segunda muestra de 15-30 días
ELISA IgM: Positivo
ELISA IgG: Negativo o Positivo débil
Interpretación
Infección reciente e infección primaria
ELISAAg NS1: Positivo
qRT-PCR: Positivo
Aislamiento viral: Positivo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo
ELISAIgG: Positivo (cuantitativo)
Segunda muestra de 15-30 días
ELISAIgM: Positivo
ELISA IgG: Positivo
Interpretación
Infección reciente e infección secundaria
58. Situación 1 Situación 2
Primera muestrade 4-5 días
Primera muestrade 4-5 días
ELISAAg NS1: NEGATIVO O POSITIVO
qRT-PCR: Negativo o Positivo
Aislamiento viral: Negativo o Positivo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISAIgM: Negativo o Positivo débil
ELISAIgG: Negativo
Segunda muestra de 15-30 días
ELISAIgM: Positivo
ELISAIgG: Negativo o Positivo débil
Interpretación
Infección reciente primaria
ELISAAg NS1: NEGATIVO O POSITIVO
qRT-PCR: Negativo o Positivo
Aislamiento viral: Negativo o Positivo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISAIgM: Negativo o Positivo débil
ELISAIgG: Positivo
Segunda muestra de 15-30 días
ELISAIgM: Positivo
ELISA IgG: Positivo
Interpretación
Infección reciente y secundaria
59. Situación 1
Primera muestrade 1-5 días
Situación 2
Primera muestrade 1-5 días
ELISAAg NS1: NEGATIVO
qRT-PCR: Negativo
Aislamiento viral: Negativo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo
ELISA IgG: Negativo
Segunda muestra de 15-30 días
ELISAIgM: Negativo
ELISA IgG: Negativo
Interpretación
No existe infección reciente por dengue.
ELISAAg NS1: NEGATIVO
qRT-PCR: Negativo
Aislamiento viral: Negativo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo
ELISAIgG: Positivo
En segunda muestra de 15-30 días
ELISAIgM: Negativo
ELISAIgG: Positivo
Interpretación
No existe infección reciente, solo hay
evidencia de infección pasada
Hacer diagnostico diferencial
60. Situación 1 Situación 2
Primera muestrade >5 días
Primera muestra de >5 días
ELISA IgM: Negativo o Positivo débil
ELISA IgG: Negativo
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo o Positivo débil
ELISA IgG: Negativo
En segunda muestra de 15-30 días:
ELISA IgM: Positivo
ELISA IgG: Negativo
Interpretación
Infección reciente primaria
ELISA IgM: Negativo o Positivo débil
ELISA IgG: Positivo (cuantitativo)
Procesar la primera y segunda muestra
Primera muestra
ELISA IgM: Negativo o Positivo débil
ELISA IgG: Positivo
En segunda muestra de 15-30 días:
ELISA IgM: Positivo
ELISA IgG: Positivo (cuantitativo)
Interpretación
Infección reciente y secundaria
61. PRUEBA RESULTADO INTERPRETACION OBSERVACION
ELISA NS1 1 -5
DIAS
POSITIVO
CASO DE DENGUE (CON
CLINICA)
INESPECIFICO: PAC. ENF.
AUTOINMUNE.
NEGATIVO NO DESCARTA CASO SE SOLICITA SEGUNDA MUESTRA
RT- PCR 1 - 5
DIAS
POSITIVO
CASO DE DENGUE (CON
CLINICA) CONTAMINACIÓN
NEGATIVO NO DESCARTA CASO SE SOLICITA SEGUNDA MUESTRA
ELISA IGM 6 -
10 DIAS
POSITIVO
CASO DE DENGUE (CON
CLINICA)
INESPECIFICO: PAC. ENF.
AUTOINMUNE, LEPT. MALARIA
NEGATIVO NO DESCARTA CASO SE SOLICITA SEGUNDA MUESTRA
ELISA IGG 1 -
5 DIAS
POSITIVO
INFECCION SECUNDARIA
DENGUE CON LA CLINICA Y PCR Y NS1
NEGATIVO
INFECCION PRIMARIA
DENGUE
Lab. Ref. Nacional de Metaxenicas Virales-INS
INSTITUTO NACIONAL DE
SALUD
63. Red de laboratorios para el diagnóstico de dengue
Puerto Maldonado
Cajamarca
Tumbes
Piura
Chiclayo
La Libertad
Huaraz
Lima**
Huancayo
Huancavelica
Ayacucho
Arequipa
Bagua
Tarapoto
Pucallpa
Iquitos
Cusco
Abancay
Puno
Tacna
1 LAB. DE REFERENCIANACIONAL
24 LAB. DE REFERENCIA REGIONAL
ELISA (IgM y Ag.NS1)
RT-PCR
4 DISAS - LIMA
65. Problema:
El conocimiento sobre la diversidad genética del virus del dengue en las
Américas Región es muy limitado.
Objetivo:
Desarrollar el conocimiento genómico del virus del dengue en la región y con
esta base establecer una vigilancia genómica del dengue de manera
sistemática, a través de los sistemas de vigilancia integrados.
73. Genotipos circulantes en
Perú
SEROTIPO GENOTIPO
AÑO DE INGRESO
PERÚ
DENV-1 América/África 1990
América 1995
DENV-2 América/Asia 2001/2010
Cosmopolita 2019
DENV-3 India 2001
DENV-4 Indonesia 2001
Fuente: Instituto Nacional de Salud
74. DENV-1:GENOTIPO V – (AMERICA)
DENV-2:GENOTIPO COSMOPOLITA
DENV-2:GENOTIPO COSMOPOLITA
75. Figura N° 1.- Árbol filogenético del DENV-1
GenotipoV durante el brotede dengue en Iquitos y
otras regionesdel Perú, 2019-2020.
78. CONCLUSIONES:
- En los últimos 5 años, se observa la circulación de los 4 serotipos dedengue, en diferentes
regiones.
- En los últimos 10 años, se evidencia la circulación del genotipo America Asia del
DENV-2.
- El 2019 se registra el ingreso del nuevogenotipo “Cosmopolita” a la Región
Madrede Dios, al Perú ya las Américas y su dispersión a Cusco y Puno
RECOMENDACIONES:
- Se debe realizar lavigilanciade ladispersión del genotipo “Cosmopolita” del DENV 2 yel
genotipo Américadel DENV 1.
- Es importante fortalecery sistematizar laVigilanciade Serotipos y Genotiposde los 4 serotipos
dedengueen el Perú.
