El documento describe los procedimientos para obtener suero o plasma a partir de muestras de sangre y realizar análisis bioquímicos. Explica que el suero se obtiene dejando la sangre coagular, mientras que el plasma requiere anticoagulantes. También describe cómo medir proteínas plasmáticas totales, albúmina, globulinas y fibrinógeno, e interpretar posibles alteraciones en sus niveles.
7. Los laboratorios clínicos pueden utilizar suero o plasma para
las determinaciones bioquímicas.
El uso del suero es el más difundido para este tipo de
determinaciones, se obtiene a partir de una muestra de
sangre extraída sin anticoagulante, esperando el tiempo
necesario para la formación del coágulo y retracción. El
promedio del tiempo de formación
Del coágulo es de entre 15 y 30 min,
para la mayoría de las especies;
en el caso de los rumiantes, el tiempo
que se requiere es de entre 1 y 2 horas,
por esta razón se pueden enviar al
laboratorio muestras de plasma
empleando la heparina de litio o
heparina de sodio como anticoagulante.
8. Si se va a obtener suero, es necesario dejar la sangre en reposo a
temperatura ambiente, es decir de 15 a 25 °C, para la adecuada
formación del coágulo. Una vez formado, debe ser separado de las
paredes del tubo o jeringa donde se obtuvo la muestra, esto se
puede hacer utilizando un palillo de madera o una pipeta Pasteur;
posteriormente, centrifugar a1500 G (3000 rpm) durante 10 min,
transferir dicho suero a otro
recipiente y taparlo. No se
debe tratar de centrifugar ni
colocar la muestra en
refrigeración antes de que
esté bien formado el coágulo,
ya que estos manejos
provocarán que se prolongue
el tiempo de coagulación y
será inadecuada su evaluación.
9. Para llevar a cabo análisis bioquímicos
(glucosa, Na, K, Cl, P, bicarbonato, actividad de enzimas),
es necesario separar el suero del coágulo o el plasma de las
células dentro de un periodo de una hora después de tomada la
muestra, debido a que si el tiempo es mayor,
los parámetros a medir variarán como consecuencia
de un intercambio entre las fases celular y líquida de la sangre.
Para los análisis de bioquímica clínica completa es suficiente
extraer entre 3 y 5 mL de plasma, éste se obtiene a partir de
7-10 mL de sangre aproximadamente. En los laboratorios que
emplean microtécnicas, incluso es suficiente 1.5 mL de plasma.
10. Las muestras de plasma, suero u orina deben protegerse de la luz
cuando se necesite hacer mediciones de bilirrubina total y
bilirrubina directa. La exposición de las muestras ala luz
fluorescente o la luz solar disminuye la concentración de
bilirrubina hasta 50% por hora. Si existe el interés de medir los
valores del perfil lipémico (ácidos grasos libres, colesterol,
triglicéridos, lípidos totales), su determinación se hará con base
en suero, no en plasma.
Para la determinación de glucosa y bicarbonato se debe
centrifugar la muestra desangre dentro de 30 a 60 min y transferir
inmediatamente el suero o el plasma al tubo limpio y tapar. El
contacto prolongado de los leucocitos y eritrocitos con el suero o
plasma disminuye significativamente las concentraciones de
bicarbonato y glucosa (hasta un10% por hora).
11.
12. Las proteínas plasmáticas (pp) son un grupo heterogéneo de
proteínas con diversas funciones, pesos moleculares y densidades
de carga eléctrica. Pero, en general, se incluyen principalmente en
dos grupos: albúmina y globulinas (en esta última fracción están
incluidos fibrinógeno, complemento y anticuerpos, entre otras
proteínas).
La concentración de proteínas en el plasma, en determinado
momento, está en función del equilibrio hormonal, nutricional,
balance hídrico y de otros factores que afectan el estado de
salud, así como el estado de renovación de las distintas
proteínas. Por lo anterior, la interpretación de las
concentraciones de proteínas en la sangre debe considerar los
datos generales del paciente, como especie, raza, edad, sexo; así
como los datos de historia clínica (tipo y frecuencia de la
alimentación, enfermedades previas al problema actual) y datos
de anamnesis (información sobre el problema actual).
14. El término disproteinemia literalmente se refiere a cualquier alteración
en la cantidad de proteínas de la sangre. Este concepto incluye una
anormalidad del contenido de proteínas totales y de proteínas
individuales.
Para evaluar esa alteración se requiere determinar:
-la concentración de proteínas plasmáticas totales o proteínas séricas
- concentración de fibrinógeno
- determinación bioquímica de albúmina y globulinas así como la
relación albúmina/globulinas.
15. DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS PLASMÁTICAS
Las proteínas plasmáticas pueden ser determinadas a partir del
plasma que se encuentra en la parte superior de un tubo capilar
centrifugado para la determinación del hematocrito (Hto). Se
rompe el tubo por arriba de la capa leucoplaquetaria, se deposita
una gota en el refractómetro clínico y se realiza la lectura en la
escala de proteínas o sólidos totales. Ya que, tanto el Hto, como
las pp son afectados por el estado de hidratación del paciente, es
de utilidad determinar ambos, para evaluar anemias, eritrocitosis
y disproteinemias.
17. HIPERPROTEINEMIAS
La causa más frecuente de este tipo de alteración se relaciona con:
Hemoconcentración:
Algunos signos clínicos que se pueden mencionar en la anamnesis son: vómito,
diarrea, poliuria, ascitis, fiebre, sudoración profusa y, en equinos, algunos casos
de síndrome abdominal agudo.
Inflamación:
En caso de que ésta sea aguda, la causa de hiperproteinemia puede deberse a
un aumento de fibrinógeno; en el caso de inflamación crónica, la elevación de
proteínas totales puede ser atribuida al aumento en la síntesis de globulinas.
Neoplasias:
Por ejemplo plasmocitoma (conocido también como mieloma múltiple) y
linfosarcoma, cuando el valor de las proteínas plasmáticas es igual o mayor a
100 g/L.
18. HIPOPROTEINEMIAS
Se deben considerar las siguientes causas:
Disminución en la síntesis proteica:
provocada por insuficiencia hepática, alimentación con escasa cantidad de
proteínas, síndrome de mala digestión (insuficiencia exocrinapancreática),
síndrome de mala absorción (enteropatía con pérdida de proteínas) e insuficiencia
cardiaca congestiva.
Pérdida de proteínas:
por vía renal (glomerulonefropatía), a través del intestino (diarrea con pérdida de
proteínas), por quemaduras, hemorragia, secuestro a espacios terceros.
Edad:
los animales recién nacidos tienen concentraciones de pp más bajas que los
animales adultos. El consumo del calostro provoca una elevación temporal. Luego
el total de proteínas plasmáticas se incrementa gradualmente con la edad hasta
llegar a los valores de referencia para los animales adultos.
Sobrehidratación (hemodilución):
La anamnesis puede mencionar terapia de líquidos previa a la toma de la muestra
19. FIBRINÓGENO
Es una proteína producida y almacenada en los microsomas
de los hepatocitos, hasta que es necesario. Su vida media
va de dos a tres días. Además de participar en la
coagulación, sirve como defensa migrando hacia los sitios
de lesión para confinar los procesos patológicos
inflamatorios.
21. HIPERFIBRINOGENEMIA
Es la elevación del fibrinógeno en la sangre y ocurre durante
procesos inflamatorios, puede estimarse por una modificación
de la técnica de pp y microhematocrito.
El fibrinógeno es estimado mediante la diferencia de las lecturas
en la concentración de pp entre 2 tubos de microhematocrito. La
primera lectura es la rutinaria para pp y la segunda lectura se
realiza a partir de un tubo de microhematocrito que se ha
calentado en un rango de 56 a 58 °C por 3 minutos. El
fibrinógeno es precipitado por el calentamiento y removido por
centrifugación.
La diferencia entre ambas lecturas equivale a la concentración
de fibrinógeno. La estimación del fibrinógeno es usada
más frecuentemente en bovinos y caballos.
22. HIPOFIBRINOGENEMIA
Es la disminución en las concentraciones de fibrinógeno y se
detecta en:
-muestras de sangre con coágulos
-enfermedades hepáticas (los datos de la anamnesis deben ser
acordes con coagulopatías)
-eliminación rápida del fibrinógeno por fibrinolisinas, como
ocurre en choque
-neoplasias extensas de vejiga, páncreas o próstata
-coagulaciónintravascular diseminada
-leucemia granulocítica del perro e infecciones estreptocócicas
del caballo y el perro
23. ALBÚMINAS Y GLOBULINAS
Albúmina
La albúmina plasmática representa alrededor de los dos tercios de las proteínas del
compartimento circulatorio y la mitad de la albúmina total del organismo.
Sintetizada por el hepatocito, su vida media es de aproximadamente 20 días. 80%
de la presión oncótica del plasma se atribuye a la albúmina, que es la principal
responsable de los movimientos acuosos entre el medio intravascular y el medio
intersticial. Su segunda función en el plasma es garantizar el transporte de diversas
sustancias, entre las que se encuentran: bilirrubina, ácidos grasos, medicamentos
(fenilbutazona, fenitoína y otros) y hormonas.
Globulinas
La concentración de la mayor parte de las proteínas es calculada; a las proteínas
séricas seles resta la concentración de albúmina. La prueba de turbidez de sulfato
de zinc es utilizada como una prueba tamiz para determinar la absorción de las
inmunoglobulinas del calostro en potros y becerros.
25. HIPERALBUMINEMIA
Suele ocurrir básicamente por hemoconcentración, por lo
que se asocia a la relación alúmina: globulinas (A :G) normal.
HIPOALBUMINEMIA
Se relaciona con las causas mencionadas en
hipoproteinemias, tales como sobrehidratación, dietas
deficientes en proteínas, síndrome de mala digestión,
síndrome de mala absorción, disminución en la producción
por enfermedad hepática, pérdidas a través del riñón y
pérdida a espacios terceros.
27. HIPERGLOBULINEMIA
Indica proceso inflamatorio crónico. También puede llegarse a
observaren neoplasias como linfosarcoma bovino o
plasmocitoma.
HIPOGLOBULINEMIAS
Los animales recién nacidos (que no han tomado calostro)
tienen concentraciones menores de globulinas en relación con
las concentraciones de los adultos.
En animales adultos se atribuye a inmunodeficiencias.
28. RELACIÓN ALBÚMINA : GLOBULINAS
(A : G)
Es un valor calculado, obtenido de dividir la albúmina entre las
globulinas.
Disminución de la relación A : G = Aumento de globulinas por las
causas previamente mencionadas, disminución de albúmina.
Elevación de la relación A : G = Hipogammaglobulinemia
(frecuente en becerros), inmunodeficiencia congénita,
inmunodeficiencia adquirida.