VIH-SIDA (ANALISIS CLINICO)

Mg. BENITES AZABACHE JUAN CARLOS

Según estimaciones basadas en estadísticas del Ministerio de Salud
existen aproximadamente 76,000 casos de personas con el VIH/SIDA
Según las estadísticas del Ministerio de Salud hasta diciembre de 2007,
hay aproximadamente 76,000 personas con diagnóstico conocido
desde el inicio de la epidemia en el Perú (1983), de los cuales 14,806
han sido reportados en la última etapa de la enfermedad llamada SIDA.
655 niños han sido diagnosticados desde el inicio de la epidemia en el
Perú, de los cuales 393 en etapa SIDA.
Por lo tanto, más del 50% de las personas no saben su diagnóstico por
la naturaleza asintomática de la evolución de la infección que oscila entre
8 a 10 años.
Se reportan más de 3000 nuevas personas con SIDA cada año en el
ámbito nacional.
HIV EN EL PERU

El 80% de los afectados son Varones y 20% mujeres.
La mayoría de las personas adquiere la infección entre los 20 y
24 años de edad .
El 70% de los afectados tienen entre 20 y 39 años de edad.
El 96% de las personas adquirió el VIH por la Via Sexual, 3%
por la vía vertical(de madre a hijo) y el 1% por la vía parenteral
(Transfusiones, accidentes ocupaciones, tatuajes y otros).

Lima y Callao concentran el 70-75% de los
afectados.
Los departamentos de la Costa y Selva son los
más afectados.
Los principales departamentos conforme al número
de afectado notificados desde el inicio de la
epidemia son Lima, Callao, Ica, Loreto, La Libertad
y Ancash .

RETROVIRIDAE
* SUBFAMILIA ONCOVIRINAE
HTLV-I Linfomas y leucemias de células T
HTLV-II Leucemias de células T y ciertos linfomas
* SUBFAMILIA LENTIVIRINAE
VIH – 1
VIH – 2
* SUBFAMILIA SPUMAVIRINAE
No se ha asociado todavía a ningún tipo de
patología

RNARNA
VIH 1VIH 1 VIH 2VIH 2
proteínas de envoltura
gp 41
gp 120
proteínas de envoltura
gp 36
gp 125
proteínas gag
p 17
p 24
proteínas gag
p 16
p 26
transcriptasa reversatranscriptasa reversa
enzimas
p 66/51
p 31
enzimas
p 68
p 34
ESTRUCTURA DEL VIH

• El VIH-1 exhibe una gran variación genética a
través de tres diferentes grupos: M (mayor), O
(outlier), y N (nuevo) Las relaciones genéticas
equidistantes de los genes env del VIH-1 se han
definido dentro del grupo M, y comprenden los
subtipos que se han denominado por las letras
mayúsculas de la A-K. La predominancia de uno o
varios de los subtipos del VIH-1 se ha visto que
esta asociada con ciertas regiones geográficas.
Dentro del grupo O se han identificado al menos 5
subtipos, este grupo es considerado como muy
heterogéneo y presenta una homología menor al
50% con el grupo M del VIH-1. También se
conocen al menos cinco subtipos del VIH-2 .

Origen y Diseminación de la Epidemia
• VIH-1 y VIH-2
• VIH-1:
– Grupos N,O
– Grupo M, subtipos
y recombinaciones
• Diferentes Primates
• Diferentes vías de
introducción
• Diseminación en
poblaciones humanas

Grupos y subtipos genéticos del VIH-1 y su relación con VIH-2
Y VIS

Distribución mundial de los subtipos

Interacciones entre las glucoproteínas de
envoltura del VIH y la molécula CD4 y
los correceptores CCR5 o CXCR4, fusión
y entrada del VIH.

Secuencia inicial
de la infección por
el VIH adquirida
por vía sexual
hasta la
diseminación
viral.

Ciclo Vital del VIHCiclo Vital del VIH
•Rápida replicación
•10 billones de viriones
diarios
•Alta tasa de mutación
•1 sustitución del
genoma por ciclo
•Recombinación
•7-30 recambios por
ciclos

Tisulares Celulares
•Organos linfáticos.
•Tejido linfoide.
asociado a mucosa.
•Sistema nervioso
central.
•Líquido
cefalorraquideo.
•Genitales.
•Macrófagos.
•Microglía.
•Células de Langerhans.
•Linfocítos CD4 de
memoria inactivados.
Santuarios para HIV-1

EL VIH SI SE TRANSMITE POR:
1.- POR TENER RELACIONES SEXUALES CON UNA
PERSONA INFECTADA CON EL VIH, SIN LA
PROTECCION DE UN CONDON.
2.- POR RECIBIR SANGRE Y SUS DERIVADOS U
ORGANOS DE UNA PERSONA CON VIH/SIDA,
INCLUYENDO EL USO COMPARTIDO DE
JERINGAS NO ESTERILIZADAS ANTES DE
UTILIZARSE NUEVAMENTE.
3.- DE UNA MUJER EMBARAZADA CON VIH/SIDA
A SU HIJO DURANTE LA GESTACION, EN EL
MOMENTO DEL PARTO O AL AMAMANTARLO.

EL VIH NO SE TRANSMITE POR:
1.-Picaduras de insectos.
2.-El uso de instalaciones sanitarias como albercas, baños,
restaurantes, y otros lugares publicos.
3.-Saludar, abrazar, besar o tener cualquier contacto casual
con personas con VIH/SIDA.
4.-Comer en la misma vajilla o compartir utensilios con una
persona con VIH/SIDA.
5.-Vivir, trabajar, estudiar o realizar cualquier actividad, bajo
el mismo techo con personas con VIH/SIDA:
6.-Cuidar personas con VIH/SIDA.
7.-Cualquier circunstancia distinta a las tres causas enumeradas.

TRANSMISION DEL VIRUS
TIPO DE EXPOSICION PORCENTAGE DEL
TOTAL GLOBAL
RELACION SEXUAL 70-80%
VAGINAL 60-70%
ANAL 5-10%
VERTICAL 5-10%
TRANSFUSION SANGUINEA 3-5%
DROGAS I.V. (compartir agujas, etc.) 5-10%

Factores que aumentan el riesgo de
Infección
• Exposición
– Numero de parejas sexuales
– Pareja infectada con VIH
• Transmisión
– Carga Viral de la persona infectada
– Tipo de contacto sexual
• contacto anal es mas riesgoso que el vaginal
• vaginal es mas riesgoso que el oral
– Co-existencia de otras enfermedades de Transmisión
Sexual causan inflamación y ulceración de la mucosa
genital
– por no uso de métodos de barrera (condón)
#1-3-10

No todas las prácticas sexuales tienen el mismo riesgo
de infección
Riesgo muy alto
Riesgo
posible
Sin riesgo
Penetración
anal
Penetración
vaginal
Relaciones
buco-genitales
(fellatio
cunnilingus)
Masturbación
recíproca
Caricias, besos
íntimos,
masajes, etc.
<>

FACTORES BIOLÓGICOS RELACIONADOS
CON EL HUESPED QUE AFECTAN LA
TRANSMISIÓN SEXUAL DEL VIH.
• Última fase de la infección VIH
• Infección primaria por VIH
• Terapia antirretroviral
• Infección local (inflamación o úlcera en el tracto genital, el rectal o la
mucosa oral)
• Presencia de prepucio
• Métodos anticonceptivos:
- Barrera
- Anticonceptivos orales
- Agentes espermicidas
- DIU
• Menstruación
• Factores que disminuyen el pH cervicovaginal
• Trauma en tracto genital
• Embarazo

1234
semanas
meses años
HISTORIA NATURAL DEL VIH

HISTORIA NATURAL DE LA INFECCION POR
VIH
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
1000
1100
1200
0 3 6 9 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
CARGA VIRAL
LINFOCITOS CD4
ANTICUERPOS
INFECCION
AGUDA
SIDA
SEMANAS A Ñ O S
Síndrome Retroviral
Agudo
FASE CRONICA
ASINTOMATICA
Portador
Asintomático
FASE
SINTOMATICA
Infecciones
Oportunistas
102
102
104
105
106
107
Síntomas
Constitucionales

• Típica (60-70%): 10-11 años
• Rápida (10-20%): <5 años
• Lenta (5-15%): >15 años
• No-progresores (1%)
Evolución de la infección

Estadíos de la infección
• Síndrome retroviral agudo :Infección primaria:
• Infección asintomática o período de latencia
clínica (con o sin linfadenopatía persistente generalizada)
• Infección sintomática precoz
• Infección avanzada (SIDA): infecciones
oportunistas y neoplasias

I. Primoinfección
• Sd. Retroviral agudo generalmente
sintomático (50%-90%)
• Aparece 2 a 6 semanas post exposición
• Sd. mononucleósico: fiebre, rash, faringitis,
linfadenopatías, artralgias, mialgias,
letargia/CEG, anorexia/baja de peso.
• Durante este período se produce la
seroconversión

II. Latencia Clínica
• Entre seroconversión y SIDA
• Puede durar desde meses a años
• Constante replicación viral en
linfonodos
– 109
viriones/día
• Disminución del recuento de CD4
– 50 cels/mm3
/año
• Asintomático

III. Infección Síntomática Precoz
• Linfocitos T CD4+ < 500 cels/mm3
• Aparecen los primeros síntomas de
inmunodeficiencia (etapa B)
• Aumenta riesgo de evolución a SIDA

PATOLOGIAS DE ESTADIO
“B”
• Candidiasis Orofaríngea
• Leucoplaquia Vellosa
• Herpes zoster
• Neumonia bacteriana
• Vulvovaginitis micótica
• Displasia cervical
• Carcinoma cervical in situ
• Síntomas constitucionales: fiebre, baja de peso,
diarrea
• Angiomatosis bacilar

IV. SIDA
• Infecciones oportunistas
• Neoplasias
• Y/o recuento CD4+ < 200 cels/mm3
 Sin tratamiento la sobrevida no supera los
12 a 18 meses

DEFINICION DE CASO DE SIDA
ETAPA “C”
• Neumonia por
Pneumocisti Jiroveci
• Candidiasis esofagica
• Meningitis
Criptocococica
• Toxoplasmosis Cerebral
• Ca. cervicouteino
invasor
• Linfoma no Hodking
• Sarcoma de Kaposi
• Neumonias bacterianas
recurrentes
• TBC pulmonar y
extrapulmonar
• Demencia por VIH

Definición caso
Adolescentes y adultos
Recuento CD4
A
Asintomático, o
SRA
B
Sintomático no
A ni C
C
Condición
indicador SIDA
>500/mm3
>29%
A1 B1 C1
200-499/mm3
14-28%
A2 B2 C2
<200/mm3
<14%
A3 B3 C3
Categorías Clínicas
SIDA

Perfil inmunológico yPerfil inmunológico y
serológico de laserológico de la
infección por el VIHinfección por el VIH

El cuadro inmune celular : Historia de
la infección

Evolución de los marcadoresEvolución de los marcadores

Marcadores en la infección por HIV
RNA VIH
Ag p24
Ac anti-p24
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
Días
Ag / Ac
Detección de
p24
Detección de
anticuerpos
Umbral
Kits de tercera
generación
Período
ventana

Periodo VentanaPeriodo Ventana
• Intervalo de tiempo queIntervalo de tiempo que
transcurre desde que eltranscurre desde que el
individuo se infecta por elindividuo se infecta por el
VIH hasta que aparecenVIH hasta que aparecen
títulos de anticuerpostítulos de anticuerpos
detectables por los estudiosdetectables por los estudios
de laboratorio que sede laboratorio que se
utilizan para el diagnóstico.utilizan para el diagnóstico.
• Promedio de 6-8 semanas.Promedio de 6-8 semanas.

PRUEBAS DIAGNÓSTICAS (1)PRUEBAS DIAGNÓSTICAS (1)
• Pruebas directasPruebas directas
Buscan demostrar la presenciaBuscan demostrar la presencia
del virus o sus componentes:del virus o sus componentes:
– PCR para DNAPCR para DNA
– PCR para RNA o Carga viralPCR para RNA o Carga viral
– Antígeno p24Antígeno p24
– Cultivo viralCultivo viral

PRUEBAS DIAGNÓSTICAS (2)PRUEBAS DIAGNÓSTICAS (2)
• Pruebas indirectasPruebas indirectas
Detección de anticuerpos contra el virusDetección de anticuerpos contra el virus
producidos por el huésped luego de laproducidos por el huésped luego de la
infeccióninfección
• Pruebas de TamizajePruebas de Tamizaje. A través de ensayos de. A través de ensayos de
alta sensibilidad: ELISA, inmunodot,alta sensibilidad: ELISA, inmunodot,
aglutinaciones, etc.aglutinaciones, etc.
• Pruebas ConfirmatoriasPruebas Confirmatorias. Con ensayos de gran. Con ensayos de gran
especificidad: Western Blot,especificidad: Western Blot,
inmunofluorescencia indirecta, inmunoensayoinmunofluorescencia indirecta, inmunoensayo
en línea, etc.en línea, etc.

DiagnósticoDiagnóstico
DETECCIÓN DE ANTICUERPOSDETECCIÓN DE ANTICUERPOSDETECCIÓN DE ANTICUERPOSDETECCIÓN DE ANTICUERPOS
DETECCIÓN DE RNADETECCIÓN DE RNADETECCIÓN DE RNADETECCIÓN DE RNA
DIAGNÓSTICO
DONADORES DE SANGRE
Tamizaje: ELISA, Aglutinación, Pbas. Rápidas
Confirmación: Western Blot
Diferenciación: Inmunodot
DETECCIÓN DE ANTÍGENODETECCIÓN DE ANTÍGENODETECCIÓN DE ANTÍGENODETECCIÓN DE ANTÍGENO
DIAGNÓSTICO
Cultivo en linfocitos
Elisa
DIAGNÓSTICO
SEGUIMIENTO TERAPÉUTICO
Técnicas de Amplificación
CONTEO CD 4CONTEO CD 4CONTEO CD 4CONTEO CD 4 SEGUIMIENTO TERAPÉUTICO

Infección
Días10 20 30 40 50
Anticuerpos VIH
RNA VIH
VIH Antígeno p 24
Ventana serológica
Detección Temprana del VIHDetección Temprana del VIH
J:B. Jackson, Transfusión, 1995

Evolución del Diagnóstico del VIH
1st gen 2nd gen 3rd gen 4th gen
Elisa indirecto indirecto sandwich indirecto y directo
anti-HIV Ig
detección
IgG IgG IgG
IgM
Ac
Ag P24
Sensibilidad + ++ +++ ++++
Especificidad + ++ + +++ +++
Año aparición 1985 1987 1989 1997
Antígeno usado Lisado
Viral
Proteínas
recombinantes
y péptidos
sintéticos
Proteínas
recombinantes
y péptidos
sintéticos
Proteínas
recombinantes
y péptidos
sintéticos

Técnica Antígeno
EIA 1ª
generación
Lisado viral VIH-1
EIA 2ª
generación
Péptidos recombinantes/sintéticos de VIH-1 y
VIH-2
EIA/ 3ª
generación
VIH-2 y antígeno VIH-1 del grupo O
(outlayer o marginal)
EIA/ 4ª
generación
VIH-2 y VIH-1 "O", y anticuerpos para
detectar el antígeno p24
Pruebas de tamizaje: ELISA

Tamizaje por ELISATamizaje por ELISA
Fase sólida: Micropozos, Tubos, EsferasFase sólida: Micropozos, Tubos, Esferas
Antígenos y/o Anticuerpos unidos a la F.S.Antígenos y/o Anticuerpos unidos a la F.S.
Sistema de Revelado:Sistema de Revelado:
Reacción Enzimática: ColorReacción Enzimática: Color
Técnica que requiere equipos, SencillaTécnica que requiere equipos, Sencilla
Interpretación ObjetivaInterpretación Objetiva
Estándar de OroEstándar de Oro

DISMINUCIÓN DE LADISMINUCIÓN DE LA
VENTANA SEROLÓGICAVENTANA SEROLÓGICA
1985 1990 1994
Días
1995
ELISA INDIRECTA
rec/pept.
Sandwich
rec. / pept.
ELISA INDIRECTA
Lisado viral
Detección de Ag + Ac
Año
40
20
10

Pruebas rápidas para la detección de anticuerpos frente al VIH.
Técnica Antígeno
Dot-EIA 1ª
generación
VIH-2 en un único spot
Dot-EIA 2ª
generación
Péptidos recombinantes/sintéticos de VIH-1, VIH-
2 y VIH-1"O" en "spots" diferenciados para VIH-1
y VIH-2
Látex/Aglutina
ción pasiva
2 y VIH-1"O"
Inmunocromato
grafía capilar
2 y VIH-1"O"

SD BIOLINE HIV-1/2 3.0SD BIOLINE HIV-1/2 3.0
Test Procedure & Interpretation For Specimen

Principle of HIV-1/2 3.0 Rapid test
: Direct Sandwich System
- Capture : Test line 1 (Rec. HIV antigen gp41, p24)
Test line 2 (Rec. HIV antigen gp36)
- Detector : Rec. HIV ½ antigen gold conjugate
- Target protein : Antibody to HIV in specimen
C1
T2 T1
HIV Ab
Rec. HIV antigen
gp41, p24
Rec. HIV antigen gp36
Gold conjugate
Rec. HIV ½ antigen

Test ProcedureTest Procedure
1) Add 10 uL of serum or plasma, and then
2) Add 4 drops of assay diluents into the sample well(S)
4 drops
(110 ㎕ )

3) Wait 5~20 minutes after adding assay diluents.
Read the result
Migration Start Migration Completed
First reading : After 5 minutes
Final reading : In/around 20 minutes
※ Do NOT read after 20 minutes!!

3. Interpretation - I3. Interpretation - I
HIV-1 positive
(“C”, “1” line)
Notes:
1) If the color intensity of line “1” is darker than line “2”, you can interpret the result as
HIV-1 positive
2) If the bands thickness are very similar, very rarely, positive result for HIV-1 and 2 in
one patient is possible as there can be an homology in the amino acid sequence of
HIV Type-1 and Type-2. In this case, confirm test using Western Blot is recommended
to know exact virus type.
★ Do NOT read after 20 minutes!! ★
HIV-1 positive
(“C”, “1”, faint “2” line)
Reading point
Disregard this letter.
SD uses common device for other items too.

3. Interpretation - II3. Interpretation - II
HIV-2 positive
(“C”, “2” line)
Notes
• If the color intensity of line “2” is darker than line “1”, you can interpret the result as
HIV-2 positive.
• If the bands intensity are very similar, very rarely, both positive result for HIV-1 and 2
in one patient is may possible as there can be an homology in the amino acid
sequence of HIV Type-1 and Type-2. In this case, confirm test using Western Blot is
recommended to know exact virus type
★ Do NOT read after 20 minutes!! ★
HIV-2 positive
(“C, “2”, faint “1” line)

3. Interpretation - III3. Interpretation - III
Negative
(“C” line only)
Invalid
(No line)

Test Procedure & InterpretationTest Procedure & Interpretation
When using samples ofWhen using samples of
Whole BloodWhole Blood

 Wait 5~20 minutes after adding assay diluents.
Read the result
Migration Start Migration Completed
First reading : After 5 minutes
Final reading : In or around 20 minutes
※ Do NOT read after 20 minutes!

Microsoft Excel
¿öÅ©½ÃÆ®
HIV / AIDS CompetitorsHIV / AIDS Competitors
SD Abbott QUALPRO Orgenics ACON KHB
HIV 1
HIV 2

¿Y si existe una prueba
reactiva?

EstrategiaEstrategia 11 de la OMSde la OMS (*)(*)
Transfusión / TransplantesTransfusión / Transplantes
A1A1
A1 + A1 -A1 + A1 -
Considerar ReactivaConsiderar Reactiva Reportar negativaReportar negativa
(*) WHO, Weekly epidemiological record, N° 12, 21 March 1997(*) WHO, Weekly epidemiological record, N° 12, 21 March 1997

1) A1, A2 y A3 representan 3 diferentes1) A1, A2 y A3 representan 3 diferentes
ensayos.ensayos.
3) Se puede reportar este resultado.3) Se puede reportar este resultado.
4) En el caso de pacientes detectados por4) En el caso de pacientes detectados por
primera vez, se debe confirmar con unaprimera vez, se debe confirmar con una
segunda muestra.segunda muestra.
5) Se debe someter una segunda muestra5) Se debe someter una segunda muestra
del paciente después de 14 días.del paciente después de 14 días.
(*) WHO, Weekly epidemiological record,(*) WHO, Weekly epidemiological record,
N) 12, 21N) 12, 21
March 1997March 1997
A1A1 (1)(1)
A1 + A1 -A1 + A1 -
Reportar negativoReportar negativo (3)(3)
A2A2 (1)(1)
A1 + A2 + A1 + A2 -A1 + A2 + A1 + A2 -
Reportar positivoReportar positivo (4)(4)
repetir A1 y A2repetir A1 y A2
A1 + A2 + A1 + A2 - A1 - A2 -A1 + A2 + A1 + A2 - A1 - A2 -
Reportar positivoReportar positivo (4)(4) IndeterminadoIndeterminado (5)(5) NegativoNegativo (3)(3)
Vigilancia, diagnósticoVigilancia, diagnóstico

1) A1, A2 y A3 representan 3 diferentes ensayos.1) A1, A2 y A3 representan 3 diferentes ensayos.
3) Se puede reportar este resultado.3) Se puede reportar este resultado.
4) En el caso de pacientes detectados por primera4) En el caso de pacientes detectados por primera
vez, se debe confirmar con una segunda muestra.vez, se debe confirmar con una segunda muestra.
5) Se debe someter una segunda muestra del5) Se debe someter una segunda muestra del
paciente después de 14 días.paciente después de 14 días.
6) En ausencia de cualquier riesgo de infección por6) En ausencia de cualquier riesgo de infección por
VIH.VIH.
(*) WHO, Weekly epidemiological record, N° 12, 21(*) WHO, Weekly epidemiological record, N° 12, 21
March 1997March 1997
A1 + A1 -A1 + A1 -
A1+ A2+ A3+ A1+ A2+ A3- A1+A2- A3+ A1+ A2- A3-A1+ A2+ A3+ A1+ A2+ A3- A1+A2- A3+ A1+ A2- A3-
Reportar positivoReportar positivo (4)(4) indeterminadoindeterminado (5)(5) Alto RiesgoAlto Riesgo
indeterminadoindeterminado (5)(5)
DiagnósticoDiagnósticoA1A1 (1)(1)
A2A2 (1)(1)
A1+ A2+ A1+ A2 -A1+ A2+ A1+ A2 -
repetir A1 y A2repetir A1 y A2
A1+ A2+ A1+ A2 - A1- A2 -A1+ A2+ A1+ A2 - A1- A2 -
A3A3
Bajo riesgoBajo riesgo
Considerar negativoConsiderar negativo (6)(6)

CAUSAS DE FALSOS
POSITIVOS
EN LAS PRUEBAS DE
DETECCION DE ANTICUERPOS
ANTI-VIH

RELATIVAS AL SUERO
•Congelaciones y descongelaciones repetidas
•Almacenamiento a temperatura subóptima
•Aspecto lipídico o turbio del suero
•Contaminación microbiana
•Sueros tratados con calor (>= 60ºC)
•Errores de extracción o identificación
RELATIVAS A LA PRESENCIA DE
AUTOANTICUERPOS
•Personas con anticuerpos anti-HLA
•Enfermedades reumatoideas
•Lupus eritematoso
•Multitrasfundidos
•Trasplantados renales
•Multíparas

RELATIVAS A OTRAS CONDICIONES
•Hemodializados, fracaso renal crónico
•Administración previa de inmunoglobulinas
•Sueros postvacunales (gripe, hepatitis B)
•Infecciones agudas por virus DNA
•Enfermedad hepática alcohólica grave

CAUSAS DE FALSOS
NEGATIVOS
EN LAS PRUEBAS DE
DETECCION DE ANTICUERPOS
ANTI-VIH

•Período ventana que precede a la aparición
de anticuerpos
•Infección por tipos de VIH no detectables
por los antígenos incluidos en la prueba
•Tratamiento inmunosupresor prolongado
•Trasplante de médula ósea
•Disfunciones de los linfocitos B
•Plasmaféresis, exanguinotrasfusión
•Neoplasias
•Errores de extracción o identificación
•Fallos en el principio técnico o en el
proceso de fabricación del equipo
diagnóstico
•Respuestas anómalas ante la infección VIH

¿Y para confirmar el resultado?

Prueba Confirmatoria:Prueba Confirmatoria:
Western BlotWestern Blot

Prueba Confirmatoria:Prueba Confirmatoria:
Western BlotWestern Blot
• TIRAS DE NITROCELULOSA CONTIRAS DE NITROCELULOSA CON
PROTEÍNAS VIRALES SEPARADAS PORPROTEÍNAS VIRALES SEPARADAS POR
ELECTROFORESISELECTROFORESIS
• ESTÁNDAR DE OROESTÁNDAR DE ORO
• MUY ESPECIFICA, POCO SENSIBLEMUY ESPECIFICA, POCO SENSIBLE
• DEFINE SUBTIPOS O VARIANTESDEFINE SUBTIPOS O VARIANTES

Principales bandas del Western blot
Denominación Proteína Gen
gp160 Precursora de la envoltura
envgp120 Glucoproteína externa
gp41 Glucoproteína transmembrana
p55
Precursora del core
gag
p40
p24 Proteína principal
p17 Proteína de la matriz
p66
Transcriptasa inversa
polp51
p31 Endonucleasa

Western blotWestern blot
Paso 1:
Paso 2:
Paso 3:

Bio Rad Organon Cambridge

Patrón de bandas en el Western Blot del HIVPatrón de bandas en el Western Blot del HIV
Commercial Methods in Clinical Microbiology. 2000. ASM Press.
env gp160
gp120
gp 41
gag p55
p18
p24
pol p65
p51
p31

Commercial Methods in Clinical Microbiology, 2000. ASM Press.
*
*
*
Patrón de bandas en el Western Blot del HIVPatrón de bandas en el Western Blot del HIV

Interpretación del WBInterpretación del WB
NegativoNegativo:: ausencia de bandasausencia de bandas
PositivoPositivo::
– Reactividad a gp41 + gp120/160Reactividad a gp41 + gp120/160
óó
– Reactividad a p24 + gp120/160Reactividad a p24 + gp120/160
IndeterminadoIndeterminado::
– Presencia de cualquier banda quePresencia de cualquier banda que
no reúna los criterios para unno reúna los criterios para un
resultado positivo.resultado positivo.

Criterios para la interpretaciónCriterios para la interpretación
de una prueba de Western Blotde una prueba de Western Blot
ORGANIZACION CRITERIO (bandas)
ASTPHLD
CDC
Dos cualesquiera: p24, gp41,
gp120/gp160
USFDA p24, p31 y gp41 ó gp120/gp160
Cruz Roja Norteamericana Por lo menos 3 bandas, 1 de cada
producto de genes: GAG, POL y
ENV
CRSS Por lo menos 2 bandas: p24 ó p31;
gp41 ó gp120/gp160
OMS Por lo menos 2 bandas de la
envoltura

Criterios de interpretación delCriterios de interpretación del

Causas de Resultados Falsos Positivos e Indeterminados en‑
Western Blot HIV-1
 Ribonucleoproteinas humanas Normales
 Otros retrovirus humanos
 Anticuerpos contra antigenos mitocondriales,
nucleares, y celulas T
 Globulinas producidas durante gammopatia policlonal
 Proteinas en papel filtro
 Anticuerpos Anticarbohidratos
 Suero inactivado por calor
 Alta concentracion de bilirubinas en suero
 Anticuerpos adquiridos Pasivamente
Cordes RI, Ryan ME: Pitfalls in HIV testing: application and limitations of current tests.
Postgrad Med 98:177, 1995.

Confirmación de Resultados:Confirmación de Resultados:
1) Verificar resultado por duplicado1) Verificar resultado por duplicado
2) Aplicar solo a muestras2) Aplicar solo a muestras
repetidamenterepetidamente reactivasreactivas
3) Interpretación de acuerdo a la OMS3) Interpretación de acuerdo a la OMS
4) Verificar ELISA. Al menos de 14 a 304) Verificar ELISA. Al menos de 14 a 30
días posterioresdías posteriores
E1E1
E1 + (1) E1 -E1 + (1) E1 -
Reportar negativoReportar negativo
WESTERN BLOT 1 (2)WESTERN BLOT 1 (2)
POSITIVO WB 1 (3) NEGATIVO O INDETERMINADO (3)POSITIVO WB 1 (3) NEGATIVO O INDETERMINADO (3)
Reportar positivo VIHReportar positivo VIH
RECTIFICAR CON MUESTRA FRESCA (4)RECTIFICAR CON MUESTRA FRESCA (4)
POSITIVO WB 1 NEGATIVO O INDETERMINADOPOSITIVO WB 1 NEGATIVO O INDETERMINADO
Reportar positivo VIHReportar positivo VIH
WESTERN BLOT 2WESTERN BLOT 2SEGUIMIENTOSEGUIMIENTO

WB ofrece tres tipos de
resultados diferentes
• Positivo: Cuando cumple los criterios
de positividad adoptados por la técnica
que se está empleando (presencia de
ciertas bandas).
Negativo: Cuando ninguna de las
bandas presenta reacción.
Indeterminado: Cuando no es positivo
o negativo.

Principales causas de WB
indeterminado
• Reactividad inespecífica (ver falsos positivos)
• Infección por VIH-2 u otros retrovirus
humanos
• Seroconversión al VIH-1
• Estado avanzado de infección VIH-1
• Hijo de madre seropositiva
• Divergencias genéticas de la cepa del VIH-1
(africanos)

Criterios mínimos de positividad del Western blot
USFDA Existencia por lo menos de tres bandas: p24, p31 y gp41 u
otra glucoproteína
CRA Existencia de al menos 3 bandas una por cada uno de los 3
genes estructurales
CDC Al menos dos bandas: p24, gp41 y gp160/120
OMS Al menos dos bandas de envoltura

INFECCION POR VIH-SIDA
EVALUACION DE LA INFECCION

Evaluación de Laboratorio
de la Infección VIH
• Recuento de Subpoblación de
linfocitos CD4
– Evalúa el estado inmunológico
• Carga Viral
– Evalúa la cantidad de virus circulante

PRUEBAS DE LABORATORIO (MARCADORES SUBRROGADOS)
* CONTEO DE CELULAS LINFOCITARIAS CD4
-DEFINIR CASOS DE SIDA
-NORMAR CONDUCTAS PARA INICIO DE ANTIRRETROVIRALES
-VALORAR EL INICIO DE LA TERAPEUTICA PROFILACTICA
CONTRA AGENTES OPORTUNISTAS (CORRELACION CON EL
GRADO DE INMUNODEFICIENCIA)
* CUANTIFICACION DE LA CARGA VIRAL
-DECISION DE INICIO DE TERAPIA ANTIRRETROVIRAL
-MONITOREO DE LA RESPUESTA AL TRATAMIENTO
-VALOR PRONOSTICO (RIESGO DE PROGRESION DE LA
ENFERMEDAD Y SOBREVIDA)

Herpes zosterHerpes zoster
TBCTBC
CandidiasisCandidiasis oraloral
Neumon僘PNeumon僘P CariniiCarinii
CandidiasisCandidiasis esof疊 icaesof疊 ica
HerpesHerpes mucocutaneomucocutaneo
ToxoplasmosiToxoplasmosiss . .... ...
..............................................................................................................CryptococosisCryptococosis
CoccidiCoccidiomicosisomicosis
C.C. micobacterium aviummicobacterium avium CMVCMV
......................................................................................................................CriptosporidiosisCriptosporidiosis
INFECCIONES OPORTUNISTASINFECCIONES OPORTUNISTAS
Asociaci entre I. oportunistas y recuento CD4Asociaci entre I. oportunistas y recuento CD4
CD4
400
300
200
100 ------------------------------
50 ------------------------------------
TIEMPO
Diapo gentileza Dr Carlos Beltrán

Tiempo (meses)Tiempo (meses)
RecuentoCD4+RecuentoCD4+ Historia natural infección por VIHHistoria natural infección por VIH
200200

ENFERMEDADES INDICADORAS DE SIDA
-CANDIDIASIS DE ESOFAGO, TRAQUEA, BRONQUIOS O PULMON
-CARCINOMA CERVICAL INVASIVO
-COCCIDIOIDOMICOSIS EXTRAPULMONAR
-CRIPTOCOCOSIS EXTRAPULMONAR
-CRIPTOSPORIDIASIS CON DIARREA > 1 MES
-INFECCION POR CMV QUE NO SEA DE HIGADO, BAZO NI GANGLIOS L.
-HERPES SIMPLE CON ULCERAS MUCOCUTANEAS > 1 MES,
BRONQUITIS, NEUMONITIS O ESOFAGITIS.
-HISTOPLASMOSIS EXTRAPULMONAR
-DESGASTE ASOCIADO AL VIH
-ISOSPORIDIASIS CON DIARREA
-SARCOMA DE KAPOSI
-LINFOMA NO HODGKIN, SARCOMA INMUNOBLASTICO
-MYCOBACTERIUM AVIUM DISEMINADO
-MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS DISEMINADO O PULMONAR
-NEUMONIA POR P. CARINII
-SEPTICEMIA POR SALMONELLA RECURRENTE
-TOXOPLASMOSIS CEREBRAL

Enfermedades Oportunistas
en PVVS
Producto de dos factores:
• Exposición a microorganismos, infección
latente
• Inmunodepresión progresiva por el VIH

Enfermedades Oportunistas
Las enfermedades oportunistas son aquellas
que se desarrollan cuando el sistema
inmunológico está debilitado, y cuya
presentación o progreso es más severa en
pacientes inmunodeprimidos.
Virus, bacterias, parásitos y hongos son
responsables de la mayoría de las EO.

Las Enfermedades Oportunistas
 Reflejan la epidemiología localepidemiología local de las
enfermedades infecciosas y los estilos de vida
 Afectan todos los tejidos, la mayoría representa
reactivación de una infección latenteinfección latente
 Pueden ser transmitidas a personas no-VIH
 Son causa importante de morbi-mortalidad
 La incidencia de EO ha ↓ con la Profilaxis y
espectacularmente con la terapia antirretroviral
de gran actividad (TARGA)

El riesgo desarrollar EO esta relacionado relacionado con nivel linfocitos CD4…
Sin punto
de corte
Sarcoma de KaposiSarcoma de Kaposi
Tuberculosis pulmonarTuberculosis pulmonar
Herpes ZosterHerpes Zoster
Neumonía bacterianaNeumonía bacteriana
LinfomaLinfoma
<250/mm3
NeumocistosisNeumocistosis
Candidiasis esofágicaCandidiasis esofágica
Leucoencefalopatia multifocal progresivaLeucoencefalopatia multifocal progresiva
Virus herpes simpleVirus herpes simple
<100/mm3
NeurotoxoplasmosisNeurotoxoplasmosis
CriptococosisCriptococosis
Tuberculosis miliarTuberculosis miliar
Encefalopatía por VIHEncefalopatía por VIH
<50/mm3
Retinitis por Citomegalovirus (CMV)Retinitis por Citomegalovirus (CMV)
CriptosporidiosisCriptosporidiosis
Micobacteriosis atípicaMicobacteriosis atípica

En la era pre-TARGA el 80% de PVVS
fallecían a causa de una EO…
– La PROFILAXISPROFILAXIS para infecciones oportunistas
disminuyó la morbi-mortalidad en PVVS
– Posteriormente el desarrollo del TARGATARGA
disminuyó espectacularmente la incidencia y
mortalidad atribuible a EO.
– Las enfermedades oportunistas aún constituyenLas enfermedades oportunistas aún constituyen
un GRAVE problema en PVVS de recienteun GRAVE problema en PVVS de reciente
diagnostico o que desconocen su condición dediagnostico o que desconocen su condición de
PVVS.PVVS.

1000
900
600
550
500
450
250
200
150
100
50
0
Curso de la Infección y la Enfermedad por VIH en
Adultos: Puntos de decisión
3 6 9 12 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Sind. Retroviral
Agudo (25-70%)
Evaluación inicial
Profilaxis contra TBC
(Isoniacida)
Profilaxis contra P.jirovesii
y Toxoplasma (TMP-SMX)
Profilaxis contra MAC
Profilaxis secundaria
anti-micótica (criptococosis)
Profilaxis contra CMV
Semanas Años
CD4

Enfermedades Indicadoras más Frecuentes
según año de Diagnóstico de SIDA - Perú
FUENTE: Rev. Diagnostico.Vol 45.N°1.Ene-Mar 2006: Enfermedades oportunistas frecuentes en el
momento de reporte de caso de SIDA Perú periodo 1986-2004.

Pre-TARGA
Enfermedades Indicadoras de SIDA
HNDAC - Callao.2002 (n=274)
41%
15.9%
13%
6.2%
5.5%
3.4%
3.4%
4.1%
2%
2%
1.3%
0 10 20 30 40 50
Tuberculosis
NPC
Candidiasis Esofágica
Sindrome de Consumo
Criptococosis
Neurotoxoplasmosis
Isosporidiasis
Criptosporidiasis
Retinitis por CMV
Sarcoma de Kaposi
Encefalopatía por VIH

Mortalidad en pacientes con CD4<100/µL
con IP en USA 1994-1997
0
10
20
30
40
‘94 ‘95 ‘96 ‘97
Muertepor100personaño
0
20
40
60
80
100
TerapiaARVincluyendoIP
Muerte
ARV
Palella et al., NEJM, 1998
% TARGA
SIDA
Muerte
0
5
10
15
20
25
30
35
‘95 ‘96 ‘97 ‘98 ‘99 ‘00
100
80
60
40
20
0
Incidenciapor100paño
EuroSIDA, 2000
Mortalidad por SIDA incidencia
en Europa 1995-2000
Mortalidad por SIDA en países
desarrollados en la era del TARGA

Enfermedades oportunistas continúa
siendo un serio problema en PVVS en…
• en pacientes de reciente diagnóstico que
acuden por primera vez a los servicios de
salud afectados por alguna enfermedad
oportunista que pone en riesgo su vida y
desconocen su condición de PVVS,
• en PVVS que no reciben TARGA por mala
tolerancia o toxicidad,
• en PVVS con fracaso al TARGA por falta
de adherencia u otras condiciones.
El manejo de las EO continúa siendo un tema deEl manejo de las EO continúa siendo un tema de
actualidad en la atención integral de las PVVS.actualidad en la atención integral de las PVVS.

INFECCIONES OPORTUNISTAS
• Manifestaciones Gastrointestinales
– DIARREA
– ODINOFAGIA y DISFAGIA
• Manifestaciones Respiratorias
– TOS y DISNEA
• Compromiso Neurológico
– FOCAL
– NO FOCAL
• Fiebre
• Complicaciones oftalmológicas
• Complicaciones mucocutaneas
• Linfadenopatias

¿Cuáles son objetivos de las
intervenciones en el manejo integral de
las enfermedades oportunistas en
PVVS…
• Mejorar el acceso oportuno al tratamiento de
las enfermedades oportunistas.
• Reducir la morbilidad y mortalidad
atribuible a enfermedades oportunistas
mediante el manejo integral de las
complicaciones.
• Mejorar la calidad de vida de las PVVS.

Foto presentada al público en 1986. Muestra por primera vez
a una persona que vive con el virus en su etapa terminal, en
su piel el Sarcoma de Kaposi, un tipo de cancer

Candidiasis oral Leucoplaquia vellosa oral
Herpes zoster
Herpes
zoster

Pneumocystis jiroveci
• Hongo
• Disnea, fiebre, tos
seca
• Tto: cotrimoxazol
• CD4<200: profilaxis

Criptococosis
• Criptococo neoformans (hongo)
• Meningitis
• Fiebre, sudoración, malestar, cefalea
• Diagnóstico: punción lumbar
• Tratamiento: Anfotericina-B
• Profilaxis: Fluconazol

Candida albicans en esofago Criptococcus neoformans
Histoplasma capsulatum Coccidioidis inmitis

Toxoplasmosis
• Convulsiones
• Manifestaciones
neuropsiquiátricas
• Focalización
• Diagnóstico: TAC
cerebral
• Tto: sulfadiazina,
pirimetamina
• Profilaxis:
cotrimoxazol

Sarcoma de Kaposi
• Tumor vascular
• Herpes tipo 8
• Cutaneo-visceral
• Tto: terapia
antiretroviral
(quimioterapia en
algunos casos)

VIH-SIDA (ANALISIS CLINICO)

Recomendados

Recomendados

Más contenido relacionado

La actualidad más candente

La actualidad más candente (20)

Destacado

Destacado (20)

Similar a VIH-SIDA (ANALISIS CLINICO)

Similar a VIH-SIDA (ANALISIS CLINICO) (20)

Más de Botica Farma Premium

Más de Botica Farma Premium (20)

Último

Último (20)

VIH-SIDA (ANALISIS CLINICO)