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14 de abril del 2016
Acondicionamiento
Radicular
Facultadde Odontología
Posgrado de Periodoncia
1
INDICE
INTRODUCCION 02
MARCO TEORICO 02
Objetivo de los acondicionadores radiculares 03
Clasificacion de los Acondicionadores Radiculares 03
Ácido cítrico 03
Tetraciclina 05
EDTA 06
Fibronectina 07
Laminina 08
Doxiciclina 08
Minociclina 08
Ácido poliacrílico 09
Acondicionadores de unión dentina 09
Proteínas de la matriz del esmalte 09
Factores de crecimiento 10
Factor de crecimiento derivado de las plaquetas 10
Laser 11
DISCUSIÓN 12
CONCLUSIÓN 13
BIBLIOGRAFIA 14
2
INTRODUCCION
Para poder conseguir nueva inserción en las superficies radiculares con enfermedad periodontal,
es necesario eliminar el cálculo, placa dental y otras sustancias toxicas dentro o fuera de la
superficie radicular. Las raíces de las piezas afectados por periodontitis están hipermineralizado y
están contaminados. Por medio del raspado y alisado radicular se remueve estos depósitos en la
superficie radicular y también remueve el cemento contaminado. Debido a la instrumentación
queda el barrillo dentinario a nivel de la superficie radicular que queda entre el tejido gingival y la
superficie radicular.
El barrillo dentinario está compuesto de microrganismos, fragmentos de cemento, placa, calculo y
componentes de la matriz del cemento y presenta un grosor de aproximadamente 2- 15 um. Esta
capa impide la nueva inserción del tejido conectivo al a raíz. Por medio de acondicionadores de la
raíz ayudan a remover el barrillo dentinario de la superficie radicular, exponen las fibras colágenas,
produce una zona de desmineralización y abre los túbulos dentinarios.
Debido al reto que representa la regeneración de los tejidos periodontales para la terapéutica
periodontal, se ha realizado estudios en base a la incorporación de sustancias que poseen
propiedades biológicas, para ayudar en la cicatrización. Estas sustancias son los acondicionadores
radiculares.
En este trabajo se analizará los diversos agentes químicos utilizados como acondicionador
radicular para la cicatrización periodontal y sus fundamentos biológicos.
MARCO TEORICO
Acondicionamiento radicular: Biomodificación de la superficie radicular, luego de eliminar el
tejido de granulación y proporcionar un mejor acceso y visibilidad a la raíz, mediante la utilización
de sustancias cuyo propósito es crear un medio más favorable para la inserción de nuevas fibras
de tejido conectivo.
Basados en los estudios de Melcher , que sugieren que la superficie radicular puede ser repoblada
por células de cuatro fuentes diferentes: epitelio, tejido conectivo gingival, ligamento periodontal
y hueso alveolar, se han realizado diversos estudios con el fin de establecer la naturaleza de cada
cicatrización, según el tipo celular que repoblé la herida.(5)
La evidencia sugiere que solamente las células derivadas del ligamento periodontal son capaces
de producir nuevo cementoblastos, cemento y fibras de inserción, y que el epitelio, hueso y tejido
conectivo gingival no lo logran. Por lo tanto, se ha sugerido que la colonización de la superficie
radicular por cualquier clase de células diferentes a las células del ligamento periodontal evitará la
formación de una nueva inserción.(7)
Fardal y Lowenberg, mencionan que a superficie radicular que se encuentra expuesta a
consecuencia de una periodontitis, carece del estímulo quimiotáctico, para atraer a las células
capaces de producir regeneración periodontal. Debido a esto, se han utilizado diferentes sustancias
biológicas y químicas como el ácido cítrico, tetraciclina, fibronectina y laminina, entre otros, para
3
tratar de alcanzar la migración de las células del ligamento periodontal y de esta manera mejorar
los resultados en cuanto a la cicatrización. (7)
La aplicación de los factores de crecimiento en la superficie radicular también ha sido foco de
investigación recientemente.
Muchos otros agentes tales como ácido fosfórico, formalina, clorhexidina, peróxido de hidrógeno,
cloruro de cetilpiridio y sarcosina-n-lauroil sódico, factores y sales biliares Cohnns y fracciones
de plasma también se han investigado como agentes acondicionadores de las superficies
radiculares, pero hay escasa evidencia disponible para su uso en comparación con agentes tales
como ácido cítrico, hidrocloruro de tetraciclina o EDTA que son utilizados rutinariamente. (7)
Objetivo de los acondicionadores radiculares
Conseguir una nueva inserción y la neoformación de los tejidos periodontales, mediante el uso de
sustancias químicas con el intento de mejorar la condición de la superficie radicular para la
inserción de nuevas fibras de tejido conectivo, removiendo el barrillo dentinario producido durante
las sesiones de raspaje y alisado radicular, y abriendo los túbulos dentinarios.(4)
(1)
Ácido cítrico
Efectos del ácido cítrico en la superficie radicular
 remueve el barrillo dentinario
 desmineralización parcial de la superficie radicular para aumentar la posibilidad de nueva
inserción / reinserción y regeneración.
 tiene efecto antibacteriano.
 desintoxicación superficie de la raíz
4
 exposición del colágeno de la raíz y la apertura de los túbulos dentinarios.
 provoca la estabilización inicial del coágulo.
 se ha demostrado que producen más estabilización de coágulos en la superficie de la
dentina que el clorhidrato de tetraciclina, EDTA, citrato de sodio. (1)
Técnica de aplicación:
Diferentes técnicas han sido utilizadas para aplicar el ácido cítrico a la superficie de la raíz
incluyendo el uso de paletas de algodón, sumergiendo la muestra en la solución y con un cepillo
de pelo de camello como un aplicador.
La técnica de frotamiento fue sugerida por Register. Miller utilizo la técnica de cepillado usados
durante procedimientos de cobertura de la raíz. se ha demostrado que la aplicación de ácido cítrico
(ph = 1) durante 3 minutos usando una presión de frotamiento sobre la superficie resulta en una
eliminación completa del barrillo y la exposición de la superficie de la dentina radicular con
aberturas de los túbulos dentinarios hasta 8,88 micras. (13)
Inconvenientes de ácido cítrico:
 la formación de ambiente extremadamente ácido en los tejidos circundantes, lo que puede
resultar en una respuesta desfavorable en la curación de la herida respuestas
 su bajo ph puede inducir efectos citotóxicos cuando está en contacto directo con las células
periodontales.(1)
Los factores que influyen en los efectos del ácido cítrico sobre la superficie radicular son:
1. la concentración del ph ácido del ácido,
2. la duración de aplicación
3. modo de aplicación.(1)
Cole et al. en 1981 examinó los efectos del ácido cítrico en un estudio piloto después de la cirugía
a campo abierto. Se utilizó un diseño de boca dividida en 12 pacientes con periodontitis avanzada
que fueron tratados con pH ácido cítrico al 1 para 3 a 5 minutos en el grupo experimental. Hubo
un aumento del nivel de inserción de 2,1 mm para los dientes tratados con ácido en comparación
con 1,5 mm para los controles. (1)
Register y Burdick, en 1975, encontraron que en los grupos controles que no se les realizó
desmineralización, se formaba un epitelio largo de unión, hasta el sitio donde se había creado el
defecto óseo. De los dientes tratados, todos presentaron inserción perpendicular de fibras, e
incluso la formación de nuevo hueso, y cemento. También anotan, que la desmineralización no
produce efectos secundarios indeseables ni reabsorción radicular o respuesta pulpar. También se
observó, una cicatrización acelerada y una nueva formación de cemento en las superficies
radiculares tratadas con ácido, comparado con superficies radiculares no tratadas.
En 1980, Boyko y cols, y en 1983, Fermyhough y Page, observaron la inserción de fibroblastos en
cultivo, a raíces sanas que habían sido desmineralizadas. Estos investigadores encontraron que la
mayoría de las células, se adherían a las superficies desmineralizadas. (7)
Cogen y cols en 1984, estudiaron el efecto de varios tipos de tratamiento (alisado radicular, ácido
cítrico y una combinación de ambos) sobre los fibroblastos gingivales humanos, llegando a la
5
conclusión de que las superficies tratadas con ácido cítrico, mostraban una ligera disminución en
el número de células viables. Las superficies tratadas con ácido cítrico, no promueven el
crecimiento e inserción de fibras, sino se realiza un alisado radicular previo a la
desmineralización. Si se trata conjuntamente, se favorecerá la inserción y crecimiento de
fibroblastos, de manera similar a si se trata con alisado radicular solamente. (1)
Sterrett y cols en 1995, valoraron el efecto de la presión realizada durante la aplicación de ácido
cítrico sobre el cemento y la dentina en 60 especímenes humanos, extraídos para ser estudiados in
vitro y observar la topografía de la superficie radicular, sea cemento o dentina. Los resultados
mostraron que se encontraban más fibras en dentina y cemento, cuando se utilizaba ácido cítrico
al 30%, y cuando este era aplicado con el bruñido de la superficie, proporcionando una capacidad
regenerativa de los tejidos. (1)
Tetraciclina
Las tetraciclinas son un grupo de antimicrobianos bacteriostáticos eficaces contra una amplia gama
de microorganismos. La propiedad única de fármacos de este grupo es su capacidad para modular
la respuesta del huésped. Se ha demostrado que tiene inhibidores de metaloproteinasas de la matriz
y propiedades anti-inflamatorias. Junto con esto, el hidrocloruro de tetraciclina inhibe la unión de
microorganismos y tiene propiedades de acondicionamiento radicular. (5)
No sólo elimina el barrillo dentinario de la superficie, sino que también inhibe la actividad de
colagenasa y la resorción ósea y por sus efectos antimicrobianos locales. En un estudio
comparativo, se comparó el efecto del acondicionador de tetraciclina con cirugía a colgajo y se
comparó con la cirugía de colgajo solo. El análisis histológico reveló 0,27 mm de incremento
medio de la inserción de tejido conectivo y también cementogénesis fue visto en los sitios tratados
con tetraciclina. (5)
Efectos del clorhidrato de tetraciclina
 Mejora la unión y el crecimiento de los fibroblastos gingivales, facilitando de este modo la
regeneración.
 Tiene actividad anti-colagenasa.
 Tiene propiedades anti-inflamatorias.
 Tiene una alta sustantividad.
 Se inhibe la resorción ósea inducida por la hormona paratiroidea (5)
También tiene una relación indirecta con la regeneración. La aplicación de tetraciclina con pH bajo
aumenta la fibronectina y la otra matriz extracelular de la glicoproteína de unión a la superficie
radicular, mejorando así la unión de los fibroblastos y el crecimiento en la superficie radicular. Al
mismo tiempo que suprime la proliferación y el crecimiento de las células epiteliales. El
hidrocloruro de tetraciclina presenta una liberación sostenida de la superficie radicular durante al
menos 48 horas y hasta 14 días, lo que proporciona a sus propiedades anti-bacterianas durante el
periodo de curación. (1)
Wikesjo y col en 1986 demostraron que 10 o 100 mg / ml de soluciones de hidrocloruro de
tetraciclina eran suficientes para eliminar el barrillo dentinario y abrir los túbulos dentinarios. Una
6
solución 100 mg / ml de tetraciclina hidrocloruro con pH 1.6 se puede preparar mediante la mezcla
de 100 mg de polvo de hidrocloruro de tetraciclina en 1 ml de agua estéril. El tiempo de aplicación
sugerida es de 2-3 minutos ya que al aplicar más de 3 minutos puede alterar la cicatrización
periodontal. (13)
Trombelli y cols, en 1994, realizaron un estudio utilizando tetraciclina sobre superficies de dentina
y cemento en dientes humanos, no afectados periodontalmente, para determinar los efectos del
medicamento sobre la superficie radicular, tratada previamente con terapia mecánica. Los
resultados del estudio mostraron que la cantidad de matriz orgánica expuesta está más relacionada
a la estructura morfológica del cemento, y a la instrumentación mecánica, que a la concentración
y tiempo de aplicación de la solución de tetraciclina; sin embargo, en la superficie de la dentina,
el tratamiento con tetraciclina resultó en la remoción del barrillo dentinario procedente de la
instrumentación y en la exposición de numerosos túbulos dentinarios. (13)
Madison y Hokettb, realizaron un estudio para evaluar el efecto de la aplicación tópica de la
tetraciclina sobre la superficie radicular instrumentada, en humanos. 82 dientes con mal pronóstico
y a los cuales se les iba a realizar exodoncias, fueron preparados para ser tratados con clorhidrato
de tetraciclina HCL (pH 1.6), doxiciclina (pH 2.2), minociclina (pH 3.8) , sumicina (pH 4.4) y al
grupo control, se le administró solución salina (pH 5.1), por 0.5, 1, 3, 5 y 10 minutos. También
evaluó el efecto de la exposición de la superficie radicular a fibras de tetraciclina durante 1, 4, 7 y
10 días. Los resultados mostraron que la tetraciclina HCL, removía el barrillo dentinario dejando
una superficie limpia, y con los túbulos dentinarios abiertos, en tan sólo 30 segundos, superando
en tiempo a las otras tetraciclinas. La doxiciclina y la minociclina produjeron resultados similares
entre ellas, y fueron significativamente mejores que la sumicina y el grupo control, pero no tan
efectivos como el clorhidrato de tetraciclina. La remoción del barrillo dentinario fue alcanzada por
la doxyciclina y la Minociclina entre 5 y 10 minutos; sin embargo, la sumicina y la solución salina
fueron inefectivas en la remoción del barrillo dentinarios, y los túbulos dentinales permanecieron
parcial o totalmente ocluidos por el barrillo dentinarios. Cuando se evaluó el uso de las tiras
de tetraciclina, éstas no alteraron significativamente la superficie del barrillo dentinario. Los
resultados del estudio sugieren que el clorhidrato de tetraciclina es un buen agente acondicionante
de la superficie radicular, ya que presenta la capacidad para remover el barrillo dentinario y para
exponer los túbulos dentinarios. (13)
Ácido etilendiaminotetraacético (EDTA)
Es un agente quelante que se utiliza ampliamente durante el tratamiento de endodoncia. EDTA
ejerce su efecto a través de desmineralización quelantes de cationes divalentes a pH neutro. Las
soluciones de EDTA, pueden ser preparadas a pHs de 5, 6, 7, 8 y 9., y muchas veces, su pH puede
ser disminuido, a 4.6, si se disuelve con agua. (13)
Las concentraciones de iones de calcio y fosfato en la dentina y el cemento son muy bajas; el
EDTA secuestra los iones de calcio libres, y para satisfacer la solubilidad, la hidroxiapatita tiende
a disolverse, produciendo así, la desmineralización.
7
Los estudios han demostrado que la aplicación de 18% de EDTA en la superficie de la raíz mejora
la unión de los fibroblastos y la migración en la superficie de la raíz y también facilita el desarrollo
de un sistema de unión de fibras orientadas entre las superficies desmineralizadas. (13)
Por el contrario, los resultados de otros estudios que utilizan 24% de EDTA (pH 7,0-7,2) aplicados
a la superficie de raíz 2-3 minutos no mostró diferencias en la profundidad de sondaje, nivel de
inserción clínica y en la exploración niveles de hueso entre el tratamiento con EDTA y superficies
radiculares de control. (1)
También se demostró en un estudio que el uso de gel de EDTA como agente de acondicionamiento
de la superficie radicular afectada negativamente el resultado de cobertura de la raíz. La
investigación hecha en la estabilización del coágulo demostró que la adhesión de coágulo a la
superficie radicular de bio-ingeniería con EDTA obtuvo los peores resultados en comparación con
el ácido cítrico y el clorhidrato de tetraciclina. (1)
Blömlof en 1996, realizó dos estudios, en uno comparó las superficies del cemento, utilizando
EDTA como desmineralizante en dientes sanos, y en dientes con periodontitis, y encontró que los
procesos regenerativos proveen una matriz de colágeno intacta, que es capaz de activar sustancias
como factores de crecimiento, y sirve como una superficie biocompatible para la colonización de
células del ligamento periodontal. En el otro estudio, evaluó si un pH neutral del EDTA,
incrementaba la cicatrización, comparado con el pH bajo del ácido cítrico, y observó, que ambos
agentes desmineralizantes, producen los efectos deseados en la superficie radicular. (5)
Fibronectina
Es una glicoproteína de alto peso molecular de la matriz extracelular con un peso molecular de
aproximadamente 440 KDa. Es un dímero que consta de dos cadenas de monómeros casi idénticos
unidos por un par de enlaces disulfuro.
Está implicado en muchos procesos celulares, incluyendo la reparación de tejidos, embriogénesis,
coagulación de la sangre, y la migración y adherencia de las células. Tiene un efecto
quimioatrayente en fibroblastos y células mesenquimales y también promueve la adhesión celular
tanto a superficies radiculares y al colágeno. Actúa como una opsonina no específica. Se une a la
actina y ADN, promoviendo así la eliminación celular y restos de tejido por los macrófagos. Se ha
demostrado que la aplicación de la fibronectina a las superficies radiculares desmineralizadas
parciales mejora la nueva insercion y proliferación de las células del ligamento periodontal y del
área supra crestal. La concentración óptima para la aplicación de la fibronectina es 0,38 mg / ml
de solución salina. (13)
Una de las pruebas iniciales para los efectos de la fibronectina fue proporcionada por Terranova y
Martin, quienes demostraron que después de la aplicación de la fibronectina exógena, la unión de
los fibroblastos a la superficie de la raíz mejoró significativamente. Se ha demostrado que el ácido
cítrico acondicionado y aplicación posterior fibronectina da mejores resultados en comparación
con la aplicación de fibronectina exógena solamente. De acuerdo con Genco en 1993, la
fibronectina promueve la quimiotaxis, adhesión y crecimiento de las células mesenquimatosas,
8
promueve la fagocitosis, inhibe la adhesión de las células epiteliales, inhibe la condrogénesis,
inhibe la formación de miotubos y estimula la síntesis de la matriz. (7)
Caffesse y cols en 1985, realizaron un estudio en perros beagle donde compararon 4 m
odalidades de tratamiento: cirugía sola, cirugía con el uso de fibronectina, cirugía con el uso de
ácido cítrico, y cirugía con ácido cítrico y fibronectina. En este estudio se encontró que había
una mayor reinserción de tejido conectivo en los dientes tratados con ácido cítrico y fibronectina,
debido a una exposición del tejido blando a las fibras colágenas de la superficie radicular. Se
mejoró la reinserción fibrosa a expensas del epitelio que se encontraba directamente sobre el
cemento. Las áreas tratadas con cirugía y ácido cítrico, mostraron cantidades moderadas de
inserción fibrosa, mientras que las otras dos modalidades de tratamiento, mostraron el desarrollo
de un epitelio largo de unión. (1)
Laminina
Los componentes más abundantes de las membranas basales son los laminina y colágeno tipo IV.
Mientras que el colágeno tiene alguna actividad promotora de la adhesión la laminina ha
demostrado tener acciones potentes en las células: la adhesión celular, el crecimiento, la
diferenciación, y la migración. (1)
Se ha demostrado que la laminina promueve la quimiotaxis epiteliales gingivales y, además, el
movimiento de los fibroblastos gingivales. La afinidad de la laminina y la fibronectina no son los
mismos hacia la superficie mineralizada. Una superficie mineralizada atrae laminina que favorece
la proliferación epitelial mientras que una superficie desmineralizada atrae fibronectina y favorece
la proliferación de los fibroblastos. El papel de la laminina tiene que ser investigado para autenticar
su eficacia como agente de la superficie radicular. (1)
Doxiciclina
La doxiciclina pertenece al grupo tetraciclina. Es un agente anti-microbiano eficaz contra
patógenos periodontales. Junto con esto, tiene propiedades anti-enzimáticas. La aplicación tópica
de doxiciclina ha demostrado una sustantividad de larga duración en las superficies radiculares
periodontalmente enfermas. Se ha demostrado que el efecto anti-bacteriano de doxiciclina persiste
en la superficie de la raíz acondicionado hasta 14 días. A 100 mg / ml solución de doxiciclina se
puede obtener mediante la mezcla de doxiciclina en polvo (100 mg) en agua estéril (1 ml). Tiene
un pH de aproximadamente 2,2. (13)
Minociclina
Es una tetraciclina semisintética que tiene un buen potencial bacteriostático. Minociclina tiene un
pH bajo en solución concentrada, actúa como un quelante de calcio y su aplicación resulta en la
desmineralización del esmalte y de la superficie radicular y la eliminación de endotoxina.
9
Posee actividad anti-colagenasa y promueve la unión de los fibroblastos a la superficie de la raíz.
Varios estudios realizados para evaluar los efectos de la minociclina han demostrado su eficacia
comparable a la de otros miembros de este grupo. (13)
Ácido poliacrílico
Se ha utilizado como agente acondicionador de la superficie radicular. Su efecto grabado ácido
elimina el barrillo dentinario de la superficie de la raíz por lo que es más adecuado para la curación.
(1)
Un estudio comparó la cicatrización periodontal después de la aplicación de ácido poliacrílico
durante 20 segundos y la aplicación de ácido cítrico durante 3 minutos en la superficie de la raíz.
Los resultados demostraron una mayor adherencia del tejido conectivo a la superficie de la raíz en
el caso de los dientes tratados con ácido poliacrílico en comparación con los dientes tratados con
ácido cítrico. Debido a que un poco de los datos clínicos disponibles sobre el efecto del ácido
poliacrílico en la superficie de la raíz y sus efectos biológicos, la investigación clínica es más
requerido para autenticar su uso clínico. (1)
Acondicionadores de unión dentina
Los acondicionadores de unión dentina se han utilizado también como acondicionadores de la
superficie de la raíz. En estudio de un microscopio electrónico de barrido (SEM), la morfología de
la superficie de las raíces tratadas con acondicionador de adhesión a la dentina se comparó con la
de los agentes usados de forma rutinaria de la superficie de la raíz de desmineralizado, ácido cítrico
y clorhidrato de tetraciclina. Los resultados de este estudio indican similitudes morfológicas entre
superficies obtenidas con el agente de dentina acondicionado y otros materiales ácidos que se
utilizan habitualmente en la terapia regenerativa periodontal. (13)
Hay relativamente insuficiente la investigación clínica realizada en acondicionadores de adhesión
a la dentina como agentes acondicionadores de la superficie de la raíz y su potencial regenerativo.
Se requieren más estudios comparativos para investigar el comportamiento de los fibroblastos
hacia la superficie de la raíz tratada con acondicionadores de unión dentina en comparación con
los acondicionadores de superficie de raíz tradicional. (13)
Proteínas de la matriz del esmalte
Está bien establecido que las matrices orgánicas juegan un papel clave en la mineralización. Las
proteínas de la matriz del esmalte están involucradas en el desarrollo del diente temprano y juegan
un papel vital durante la formación de cemento, ligamento periodontal y el hueso alveolar. La
aplicación de proteínas de la matriz del esmalte en la superficie de raíz crea un entorno biológico
similar a la que durante el desarrollo dental favoreciendo la regeneración periodontal. (1)
La investigación inicial para evaluar el potencial de los derivados de la matriz del esmalte en la
regeneración periodontal se hizo en modelos animales. El primer experimento con animales se
llevó a cabo en monos para evaluar el potencial de proteínas de la matriz del esmalte en la
iniciación de la regeneración o la reformación de cemento acelular. Después de período de 8
10
semanas de curación, el sitio de prueba tenía una capa delgada de tejido duro con fibras extrínsecas
acelulares y fibras de colágeno que la inserción de indica la regeneración en estas áreas. (1)
Después se demostró, que los derivados de la matriz del esmalte fueron capaces de inducir la
formación de cemento acelular, éstos se aplicaron en defectos de dehiscencia experimentalmente
realizados en monos. Los resultados demostraron evidencia de regeneración periodontal. En este
estudio, se evaluaron varios vehículos de fármacos para determinar cuál de ellos admiten más
eficazmente el ara precipitar sobre la superficie de la raíz tratada. Se vio que el alginato de
propilenglicol (PGA) fue más eficaz que la hidroxietilcelulosa (HEC) o dextrano en la realización
y que permite la precipitación de las proteínas de la matriz. (13)
Factores de crecimiento
La aplicación de factores de crecimiento para la regeneración periodontal es un importante foco
de investigación en la actualidad. Varios factores de crecimiento que se cree que contribuyen a la
regeneración periodontal incluyen el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), factor
de crecimiento de insulina(IGF), factor de crecimiento transformante (TGF), factor de crecimiento
epidérmico (EGF), factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), y la proteína morfogenética ósea
(BMP). Estos factores de crecimiento promueven la proliferación de fibroblastos del ligamento
periodontal y favorecen la formación de hueso. (7)
Gamal et al en el 2012 investigaron la respuesta de los fibroblastos del ligamento periodontal al
factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF-BB) y factor de crecimiento de insulina (IGF-
1) aplicados en superficies radiculares acondicionados con tetraciclina. Llegaron a la conclusión
de que había un aumento significativo en los fibroblastos adherencia en el PDGF-BB y la
combinación de los grupos de tratamiento / PDGF-BB de IGF-1 en comparación con los controles,
así como en el grupo control. La combinación de PDGF-BB / IGF-1 no mejoró significativamente
la adhesión de células en comparación con PDGF-BB solo. (13)
Se evaluó en otro estudio el efecto de PDGF-BB en combinación con gel de EDTA sobre la
adhesión y proliferación de células en la superficie de la raíz. 8 especímenes se derivaron de 40
periodontitis dientes afectados y se dividieron en 5 grupos: grupo control (sin tratar), SRP (raspado
y alisado radicular) grupo, EDTA (24%) del grupo, PDGF (25 ng / ml) del grupo y EDTA
combinado + grupo de PDGF. Los resultados del estudio demostraron la adherencia celular
significativamente alto de PDGF y el grupo combinado, en comparación con el control y el grupo
de SRP (13)
Factor de crecimiento derivado de las plaquetas
Es una fuente autóloga del factor de crecimiento derivado de las plaquetas y del factor de
crecimiento transformante beta, obtenido a través de la concentración de las plaquetas, por
centrifugación de gradientes de densidad. Es utilizado para amplificar y acelerar los efectos de los
factores de crecimiento contenidos en las plaquetas, los cuales son los iniciadores universales de
casi todos los procesos de cicatrización. (7)
11
Diversos estudios realizados in vitro, han establecido que el factor de crecimiento derivado de las
plaquetas (PDGF), que se encuentra en los gránulos alfa de las plaquetas, posee ciertas
características que podrían promover y mejorar la cicatrización periodontal.
Ventajas de la utilización del plasma rico en plaquetas:
 Seguridad en el uso de una fuente autóloga, en lugar de una homóloga.
 Promoción en la cicatrización de los tejidos
 Mineralización más rápida del colágeno en la reparación
 Estabilidad temprana de los injertos
 No existe el potencial para transmisión de enfermedades (7)
Marx y cols.(2000) reportaron la utilización del plasma rico en plaquetas combinados con injertos
óseos autólogos en 40 pacientes con defectos óseos mayores a 5 cm en la mandíbula,
comparándolos con injertos óseos autógenos colocados en 40 pacientes con el mismo tipo de
defectos, y encontraron que, con el uso del plasma rico en plaquetas, la regeneración ósea es el
doble de rápida y la densidad ósea es mucho mayor que con los injertos óseos sin plasma rico en
plaquetas. (7)
Obarrio y cols(2000) reportaron el uso del plasma rico en plaquetas para el tratamiento de defectos
periodontales, en una serie de casos en humanos, con significativa reducción en la profundidad de
la bolsa y nueva formación ósea, visible radiográficamente a los 2 meses de tratamiento. (7)
Laser
Han sido estudiados por su efecto sobre la superficie de la raíz, así como por sus efectos sobre el
comportamiento de las células del ligamento periodontal. A pesar de que la terapia con láser ha
sido ampliamente estudiada en periodoncia para el desbridamiento de la bolsa, la cicatrización de
heridas y en diversos enfoques quirúrgicos, pero no hay suficientes datos disponibles en cuanto a
su eficacia como acondicionador radicular cuando se compara con otros acondicionadores de la
superficie de la raíz tradicionalmente utilizados.
Un estudio concluyó que el uso del co2 y er: yag en la configuración de energía determinado puede
tratar la hipersensibilidad de la dentina y reducir sus síntomas de manera significativa. Sin
embargo, el er: yag tiene un mayor efecto sobre la oclusión tubular con menos cambios térmicos;
por lo tanto, puede actuar como una herramienta útil acondicionado en tales condiciones. Un
estudio in vivo examinó alteraciones morfológicas en el epitelio de la bolsa periodontal con
presencia o ausencia de inflamación clínica tras el uso de la neodimio: itrio aluminio-granate (nd:
yag) de irradiación láser. Demostraron la viabilidad de la ablación de epitelio de la bolsa con un
láser de nd: yag láser utilizando parámetros de 2w de potencia (200 mj, 10 pps). Además, la
presencia o ausencia de inflamación clínica pareció tener un impacto en el grado de ablación
epitelial con láser.
La aplicación de láser en la superficie de raíz tiene un efecto significativo en unión de los
fibroblastos. En un estudio in vitro, el efecto de nd: yag se evaluó (en energía 75 mj a 20 pulsos /
seg usando una fibra de 320 micras de contacto de 1 minuto) en unión de los fibroblastos a las
12
superficies de la raíz no enfermas. El estudio concluyó que la exposición al láser desnaturaliza la
proteína de superficie que inhibe la inserción de los fibroblastos.
DISCUSIÓN
Silva y cols. en el 2015 compararon el efecto del ácido cítrico, EDTA, capsula y gel de tetraciclina.
Encontraron que todos dan lugar a la desmineralización y remoción del barrillo dentinario en la
superficie radicular. En el grupo de capsulas de tetraciclina produjo grandes residuos de
tetraciclina con varias zonas de desmineralización. El grupo EDTA presento más unión de los
fibroblastos que los otros grupos experimentales. Se observó una mayor adhesión de coágulos de
sangre en las raíces tratadas con gel de tetraciclina. EDTA y tratamiento de la superficie de gel de
tetraciclina eliminan la capa de barrillo sobre la superficie de la dentina y promueve la adhesión
de la red de fibrina y de fibroblastos. (2)
Lafferty TA y cols informaron que el condicionamiento con tetraciclina y ácido cítrico presentan
características superficiales comparables cuando se utiliza en superficies radiculares enfermos. Se
produce debido a que el pH del ácido cítrico (pH 1) y tetraciclina HCl (pH 1,6) es suficientemente
ácida para exponer número similar y considerable de los túbulos dentinarios mientras pH de
doxiciclina (pH 2,2) fue menos ácida en comparación con los otros dos agentes. Estos resultados
están de acuerdo con estudios realizados por Shetty y cols en el 2008. (15)
Leite y cols en el 2010 encontraron que el acondicionador tetraciclina tuvo el mayor número de
túbulos dentinarios abiertos en comparación con el ácido cítrico y doxiciclina. Los que fueron
tratados con doxiciclina tenían el menor número de túbulos abiertos entre los tres agentes
utilizados. [8,18,19] Por el contrario, Sterrett JD, Simmons J, Whitford G, y Russell CM
encontraron que la solución de ácido cítrico (pH 1,6) fue más eficaz que la tetraciclina (150 mg /
ml) en la desmineralización de la dentina que podría atribuirse a la concentración menor (150 mg
/ ml) de tetraciclina usado. (8)
En otro estudio realizado por Khan y cols en el 2014 compararon los valores de la profundidad
de sondaje y regeneración ósea al inicio y a los 6 meses entre dos grupos (Primer grupo
regeneración tisular guiada + acondicionador y el segundo grupo solo regeneración tisular guiada).
Se observó una disminución en los valores de profundidad de sondaje y más regeneración ósea
después del tratamiento en ambos grupos. Se encontró que no existe diferencia significativa. (14)
Amaral y cols en el 2011encontró la presencia de barrillo dentinario en 80% del grupo de EDTA,
33,3% del grupo de tetraciclina y 0% del grupo de tetraciclina. Los números de túbulos dentinarios
abiertos fueron: tetraciclina = 43,8 ± 25,2; ácido cítrico = 39,3 ± 37; ácido fosfórico = 12,1 ± 16,3;
EDTA = 4,4 ± 7,5 y 2,3 ± control = 5,7. El grupo ácido cítrico difería significativamente de los
otros excepto para el grupo de tetraciclina. Se encontró en este estudio que el orden de mejor
acondicionador es el siguiente ácido cítrico> tetraciclina> ácido fosfórico> EDTA. Esta
información puede ser de valor como un parámetro adicional para la elección de uno de ellos para
el acondicionamiento radicular. (3). Estos resultados son comparables con el estudio realizado por
Nanda Tarun y cols en el 2014 (12)
13
Existe poca literatura científica con respecto al uso de proteínas de matriz de esmalte. Hedden y
cols en el 2006 realizaron un estudio de seguimiento de 5 años y encontraron ganancias en el nivel
de inserción después de la terapia regenerativa con el uso de proteínas de la matriz del esmalte en
defectos intraóseos. (9)
Un estudio realizado por Gamal en el 2012 demostraron que el ácido cítrico combinado con
crecimiento derivado de plaquetas factor de BB mostró mejores resultados que el clorhidrato de
EDTA y la tetraciclina en unión de las células del ligamento periodontal en las superficies de raíz.
(10)
A pesar del gran número de investigaciones con este tipo de agentes químicos hasta la fecha,
ningún estudio ha comparado sus efectos sobre los eventos biológicos iniciales relacionados con
el éxito de la terapia periodontal regenerativa. (6)
CONCLUSIONES
Está bien establecido que la superficie radicular enfermo no favorece la regeneración del
periodonto, debido a sus características de la superficie. Se ha demostrado que la
desmineralización altera la superficie de radicular, creando una superficie más aceptable que puede
influir en los acontecimientos en la cicatrización de heridas. Los estudios en vivo y estudios in
vitro indican claramente un mayor potencial de unión de las células y fibras a las superficies
radiculares desmineralizada. Otros factores, como la estabilización de la herida también pueden
desempeñar un papel importante en la extensión y la previsibilidad de la cicatrización de la herida
periodontal tras la desmineralización superficie de la radicular.
El acondicionamiento radicular apropiado regula la absorción de proteínas plasmáticas, mejora la
adhesión del coágulo de sangre y estimular la deposición de colágeno en contra de la superficie
radicular.
Los acondicionadores radiculares eliminan el barrillo dentinario sobre la superficie radicular,
descubre y abre los túbulos dentinarios, y expone la matriz de colágeno de la dentina. Muchos
agentes se han utilizado para este propósito. El acondicionamiento radicular se suele combinar con
otros procedimientos como la regeneración tisular guiada y un injerto de hueso para lograr mejores
resultados.
En la actualidad las investigaciones se centran en la aplicación de factores de crecimiento en la
superficie radicular para lograr un ambiente más propicio para la regeneración. Hay muchas
dificultades en la aplicación del factor de crecimiento que incluyen la purificación y extracción de
estos factores de crecimiento, identificación de vehículo apropiado para ellos, y conseguir la
concentración adecuado y costo.
14
BIBLIOGRAFÍA
1. Akhilesh H. Shewale1*, Root Surface Biomodification: Current Status and a
Literature Review on Available Agents for Periodontal Regeneration, British Journal
of Medicine & Medical Researchb13(2): 1-14, 2016
2. Aline Cristina Silva, Camilla Christian Gomes Moura, Biological Effects of a Root
Conditioning Treatment on Periodontally Affected Teeth – An In Vitro Analysis
Braz. Dent. J. [online]. 2016, vol.27, n.2, pp.160-168. ISSN 1806-4760.
3. AMARAL NG, REZENDE MLR; Comparison among four commonly used
demineralizing agents for root conditioning. A scanning electron microscopy; J Appl
oral Science;2011;19(5): 469-75
4. Angelo Mariotti;Efficacy of chemical root Surface modifiers in treatment of
periodontal disease. A systematic review, Ann Periodontol; vol 8;n1 dec 2003 pg 205-
226
5. Bhushan K, Chauhan G, Prakash S (2016) Root Biomodification in Periodontics - The
Changing Concepts. J Dent Oral Care Med 2(1): 105.
6. Chahal, Gurparkash Singh et al. “Effect of Citric Acid, Tetracycline, and Doxycycline
on Instrumented Periodontally Involved Root Surfaces: A SEM Study.” Journal of
Indian Society of Periodontology 18.1 (2014): 32–37.
7. Giovanna Chadid , Biomodificación radicular TRATAMIENTO PERIODONTAL
REGENERATIVO: BIOMODIFICACION DE LA SUPERFICIE RADICULAR,
FACTORES DE CRECIMIENTO Y MORFOGENOS ABR2006 - 21:09
8. Leite FR, Sampaio JE, Zandim DL, Dantas AA, Leite ER, Leite AA. Influence of root-
surface conditioning with acid and chelating agents on clot stabilization.Quintessence
Int. 2010; 41:341–9. J Indian Soc Periodontol. 2014 Jan-Feb; 18(1): 32–37.
9. Heden; Five-Year Follow-Up of Regenerative Periodontal Therapy With Enamel
Matrix Derivative at Sites With Angular Bone Defects J Periodontol February 2006
10. Ibero Sagastibelza I,Castro Lara J. Bascones Martínez A. Factores de crecimiento y
periodoncia. Una revisión bibliográfica actualizada. Av Periodon Implantol. 2012;
14,3: 115-128.
11. M. Goldstein, A CRITICAL EVALUATION OF METHODS FOR ROOT
COVERAGE; Crit Rev Oral BiolMed 7(l):87-98 (1996)
12. Nanda Tarun;Root conditioning in periodontology-Revisted; Journal of natura
science, Biology and Medicine;July 2014 Vol 5 Issue 2
13. Nitin Saroch, MDs, Root surface bio-modification ; Periobasics pg 200-215
14. Ruby Khan; Periodontal Regeneration by Application of Chemical Root
Conditioning to Intrabony Defects Utilizing Bioresorbable Membrane: A
Comparative Study, OHDM - Vol. 13 - No. 2 - June, 2014
15. Shetty B, Dinesh A, Seshan H. The comparative effects of tetracyclines and citric acid
on dentin root surface of periodontally involved human teeth: A scanning electron
microscope study. J Indian Soc Periodontol. 2008; 12:8–15.

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Acondicionamiento radicular en Periodoncia

  • 1. 14 de abril del 2016 Acondicionamiento Radicular Facultadde Odontología Posgrado de Periodoncia
  • 2. 1 INDICE INTRODUCCION 02 MARCO TEORICO 02 Objetivo de los acondicionadores radiculares 03 Clasificacion de los Acondicionadores Radiculares 03 Ácido cítrico 03 Tetraciclina 05 EDTA 06 Fibronectina 07 Laminina 08 Doxiciclina 08 Minociclina 08 Ácido poliacrílico 09 Acondicionadores de unión dentina 09 Proteínas de la matriz del esmalte 09 Factores de crecimiento 10 Factor de crecimiento derivado de las plaquetas 10 Laser 11 DISCUSIÓN 12 CONCLUSIÓN 13 BIBLIOGRAFIA 14
  • 3. 2 INTRODUCCION Para poder conseguir nueva inserción en las superficies radiculares con enfermedad periodontal, es necesario eliminar el cálculo, placa dental y otras sustancias toxicas dentro o fuera de la superficie radicular. Las raíces de las piezas afectados por periodontitis están hipermineralizado y están contaminados. Por medio del raspado y alisado radicular se remueve estos depósitos en la superficie radicular y también remueve el cemento contaminado. Debido a la instrumentación queda el barrillo dentinario a nivel de la superficie radicular que queda entre el tejido gingival y la superficie radicular. El barrillo dentinario está compuesto de microrganismos, fragmentos de cemento, placa, calculo y componentes de la matriz del cemento y presenta un grosor de aproximadamente 2- 15 um. Esta capa impide la nueva inserción del tejido conectivo al a raíz. Por medio de acondicionadores de la raíz ayudan a remover el barrillo dentinario de la superficie radicular, exponen las fibras colágenas, produce una zona de desmineralización y abre los túbulos dentinarios. Debido al reto que representa la regeneración de los tejidos periodontales para la terapéutica periodontal, se ha realizado estudios en base a la incorporación de sustancias que poseen propiedades biológicas, para ayudar en la cicatrización. Estas sustancias son los acondicionadores radiculares. En este trabajo se analizará los diversos agentes químicos utilizados como acondicionador radicular para la cicatrización periodontal y sus fundamentos biológicos. MARCO TEORICO Acondicionamiento radicular: Biomodificación de la superficie radicular, luego de eliminar el tejido de granulación y proporcionar un mejor acceso y visibilidad a la raíz, mediante la utilización de sustancias cuyo propósito es crear un medio más favorable para la inserción de nuevas fibras de tejido conectivo. Basados en los estudios de Melcher , que sugieren que la superficie radicular puede ser repoblada por células de cuatro fuentes diferentes: epitelio, tejido conectivo gingival, ligamento periodontal y hueso alveolar, se han realizado diversos estudios con el fin de establecer la naturaleza de cada cicatrización, según el tipo celular que repoblé la herida.(5) La evidencia sugiere que solamente las células derivadas del ligamento periodontal son capaces de producir nuevo cementoblastos, cemento y fibras de inserción, y que el epitelio, hueso y tejido conectivo gingival no lo logran. Por lo tanto, se ha sugerido que la colonización de la superficie radicular por cualquier clase de células diferentes a las células del ligamento periodontal evitará la formación de una nueva inserción.(7) Fardal y Lowenberg, mencionan que a superficie radicular que se encuentra expuesta a consecuencia de una periodontitis, carece del estímulo quimiotáctico, para atraer a las células capaces de producir regeneración periodontal. Debido a esto, se han utilizado diferentes sustancias biológicas y químicas como el ácido cítrico, tetraciclina, fibronectina y laminina, entre otros, para
  • 4. 3 tratar de alcanzar la migración de las células del ligamento periodontal y de esta manera mejorar los resultados en cuanto a la cicatrización. (7) La aplicación de los factores de crecimiento en la superficie radicular también ha sido foco de investigación recientemente. Muchos otros agentes tales como ácido fosfórico, formalina, clorhexidina, peróxido de hidrógeno, cloruro de cetilpiridio y sarcosina-n-lauroil sódico, factores y sales biliares Cohnns y fracciones de plasma también se han investigado como agentes acondicionadores de las superficies radiculares, pero hay escasa evidencia disponible para su uso en comparación con agentes tales como ácido cítrico, hidrocloruro de tetraciclina o EDTA que son utilizados rutinariamente. (7) Objetivo de los acondicionadores radiculares Conseguir una nueva inserción y la neoformación de los tejidos periodontales, mediante el uso de sustancias químicas con el intento de mejorar la condición de la superficie radicular para la inserción de nuevas fibras de tejido conectivo, removiendo el barrillo dentinario producido durante las sesiones de raspaje y alisado radicular, y abriendo los túbulos dentinarios.(4) (1) Ácido cítrico Efectos del ácido cítrico en la superficie radicular  remueve el barrillo dentinario  desmineralización parcial de la superficie radicular para aumentar la posibilidad de nueva inserción / reinserción y regeneración.  tiene efecto antibacteriano.  desintoxicación superficie de la raíz
  • 5. 4  exposición del colágeno de la raíz y la apertura de los túbulos dentinarios.  provoca la estabilización inicial del coágulo.  se ha demostrado que producen más estabilización de coágulos en la superficie de la dentina que el clorhidrato de tetraciclina, EDTA, citrato de sodio. (1) Técnica de aplicación: Diferentes técnicas han sido utilizadas para aplicar el ácido cítrico a la superficie de la raíz incluyendo el uso de paletas de algodón, sumergiendo la muestra en la solución y con un cepillo de pelo de camello como un aplicador. La técnica de frotamiento fue sugerida por Register. Miller utilizo la técnica de cepillado usados durante procedimientos de cobertura de la raíz. se ha demostrado que la aplicación de ácido cítrico (ph = 1) durante 3 minutos usando una presión de frotamiento sobre la superficie resulta en una eliminación completa del barrillo y la exposición de la superficie de la dentina radicular con aberturas de los túbulos dentinarios hasta 8,88 micras. (13) Inconvenientes de ácido cítrico:  la formación de ambiente extremadamente ácido en los tejidos circundantes, lo que puede resultar en una respuesta desfavorable en la curación de la herida respuestas  su bajo ph puede inducir efectos citotóxicos cuando está en contacto directo con las células periodontales.(1) Los factores que influyen en los efectos del ácido cítrico sobre la superficie radicular son: 1. la concentración del ph ácido del ácido, 2. la duración de aplicación 3. modo de aplicación.(1) Cole et al. en 1981 examinó los efectos del ácido cítrico en un estudio piloto después de la cirugía a campo abierto. Se utilizó un diseño de boca dividida en 12 pacientes con periodontitis avanzada que fueron tratados con pH ácido cítrico al 1 para 3 a 5 minutos en el grupo experimental. Hubo un aumento del nivel de inserción de 2,1 mm para los dientes tratados con ácido en comparación con 1,5 mm para los controles. (1) Register y Burdick, en 1975, encontraron que en los grupos controles que no se les realizó desmineralización, se formaba un epitelio largo de unión, hasta el sitio donde se había creado el defecto óseo. De los dientes tratados, todos presentaron inserción perpendicular de fibras, e incluso la formación de nuevo hueso, y cemento. También anotan, que la desmineralización no produce efectos secundarios indeseables ni reabsorción radicular o respuesta pulpar. También se observó, una cicatrización acelerada y una nueva formación de cemento en las superficies radiculares tratadas con ácido, comparado con superficies radiculares no tratadas. En 1980, Boyko y cols, y en 1983, Fermyhough y Page, observaron la inserción de fibroblastos en cultivo, a raíces sanas que habían sido desmineralizadas. Estos investigadores encontraron que la mayoría de las células, se adherían a las superficies desmineralizadas. (7) Cogen y cols en 1984, estudiaron el efecto de varios tipos de tratamiento (alisado radicular, ácido cítrico y una combinación de ambos) sobre los fibroblastos gingivales humanos, llegando a la
  • 6. 5 conclusión de que las superficies tratadas con ácido cítrico, mostraban una ligera disminución en el número de células viables. Las superficies tratadas con ácido cítrico, no promueven el crecimiento e inserción de fibras, sino se realiza un alisado radicular previo a la desmineralización. Si se trata conjuntamente, se favorecerá la inserción y crecimiento de fibroblastos, de manera similar a si se trata con alisado radicular solamente. (1) Sterrett y cols en 1995, valoraron el efecto de la presión realizada durante la aplicación de ácido cítrico sobre el cemento y la dentina en 60 especímenes humanos, extraídos para ser estudiados in vitro y observar la topografía de la superficie radicular, sea cemento o dentina. Los resultados mostraron que se encontraban más fibras en dentina y cemento, cuando se utilizaba ácido cítrico al 30%, y cuando este era aplicado con el bruñido de la superficie, proporcionando una capacidad regenerativa de los tejidos. (1) Tetraciclina Las tetraciclinas son un grupo de antimicrobianos bacteriostáticos eficaces contra una amplia gama de microorganismos. La propiedad única de fármacos de este grupo es su capacidad para modular la respuesta del huésped. Se ha demostrado que tiene inhibidores de metaloproteinasas de la matriz y propiedades anti-inflamatorias. Junto con esto, el hidrocloruro de tetraciclina inhibe la unión de microorganismos y tiene propiedades de acondicionamiento radicular. (5) No sólo elimina el barrillo dentinario de la superficie, sino que también inhibe la actividad de colagenasa y la resorción ósea y por sus efectos antimicrobianos locales. En un estudio comparativo, se comparó el efecto del acondicionador de tetraciclina con cirugía a colgajo y se comparó con la cirugía de colgajo solo. El análisis histológico reveló 0,27 mm de incremento medio de la inserción de tejido conectivo y también cementogénesis fue visto en los sitios tratados con tetraciclina. (5) Efectos del clorhidrato de tetraciclina  Mejora la unión y el crecimiento de los fibroblastos gingivales, facilitando de este modo la regeneración.  Tiene actividad anti-colagenasa.  Tiene propiedades anti-inflamatorias.  Tiene una alta sustantividad.  Se inhibe la resorción ósea inducida por la hormona paratiroidea (5) También tiene una relación indirecta con la regeneración. La aplicación de tetraciclina con pH bajo aumenta la fibronectina y la otra matriz extracelular de la glicoproteína de unión a la superficie radicular, mejorando así la unión de los fibroblastos y el crecimiento en la superficie radicular. Al mismo tiempo que suprime la proliferación y el crecimiento de las células epiteliales. El hidrocloruro de tetraciclina presenta una liberación sostenida de la superficie radicular durante al menos 48 horas y hasta 14 días, lo que proporciona a sus propiedades anti-bacterianas durante el periodo de curación. (1) Wikesjo y col en 1986 demostraron que 10 o 100 mg / ml de soluciones de hidrocloruro de tetraciclina eran suficientes para eliminar el barrillo dentinario y abrir los túbulos dentinarios. Una
  • 7. 6 solución 100 mg / ml de tetraciclina hidrocloruro con pH 1.6 se puede preparar mediante la mezcla de 100 mg de polvo de hidrocloruro de tetraciclina en 1 ml de agua estéril. El tiempo de aplicación sugerida es de 2-3 minutos ya que al aplicar más de 3 minutos puede alterar la cicatrización periodontal. (13) Trombelli y cols, en 1994, realizaron un estudio utilizando tetraciclina sobre superficies de dentina y cemento en dientes humanos, no afectados periodontalmente, para determinar los efectos del medicamento sobre la superficie radicular, tratada previamente con terapia mecánica. Los resultados del estudio mostraron que la cantidad de matriz orgánica expuesta está más relacionada a la estructura morfológica del cemento, y a la instrumentación mecánica, que a la concentración y tiempo de aplicación de la solución de tetraciclina; sin embargo, en la superficie de la dentina, el tratamiento con tetraciclina resultó en la remoción del barrillo dentinario procedente de la instrumentación y en la exposición de numerosos túbulos dentinarios. (13) Madison y Hokettb, realizaron un estudio para evaluar el efecto de la aplicación tópica de la tetraciclina sobre la superficie radicular instrumentada, en humanos. 82 dientes con mal pronóstico y a los cuales se les iba a realizar exodoncias, fueron preparados para ser tratados con clorhidrato de tetraciclina HCL (pH 1.6), doxiciclina (pH 2.2), minociclina (pH 3.8) , sumicina (pH 4.4) y al grupo control, se le administró solución salina (pH 5.1), por 0.5, 1, 3, 5 y 10 minutos. También evaluó el efecto de la exposición de la superficie radicular a fibras de tetraciclina durante 1, 4, 7 y 10 días. Los resultados mostraron que la tetraciclina HCL, removía el barrillo dentinario dejando una superficie limpia, y con los túbulos dentinarios abiertos, en tan sólo 30 segundos, superando en tiempo a las otras tetraciclinas. La doxiciclina y la minociclina produjeron resultados similares entre ellas, y fueron significativamente mejores que la sumicina y el grupo control, pero no tan efectivos como el clorhidrato de tetraciclina. La remoción del barrillo dentinario fue alcanzada por la doxyciclina y la Minociclina entre 5 y 10 minutos; sin embargo, la sumicina y la solución salina fueron inefectivas en la remoción del barrillo dentinarios, y los túbulos dentinales permanecieron parcial o totalmente ocluidos por el barrillo dentinarios. Cuando se evaluó el uso de las tiras de tetraciclina, éstas no alteraron significativamente la superficie del barrillo dentinario. Los resultados del estudio sugieren que el clorhidrato de tetraciclina es un buen agente acondicionante de la superficie radicular, ya que presenta la capacidad para remover el barrillo dentinario y para exponer los túbulos dentinarios. (13) Ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) Es un agente quelante que se utiliza ampliamente durante el tratamiento de endodoncia. EDTA ejerce su efecto a través de desmineralización quelantes de cationes divalentes a pH neutro. Las soluciones de EDTA, pueden ser preparadas a pHs de 5, 6, 7, 8 y 9., y muchas veces, su pH puede ser disminuido, a 4.6, si se disuelve con agua. (13) Las concentraciones de iones de calcio y fosfato en la dentina y el cemento son muy bajas; el EDTA secuestra los iones de calcio libres, y para satisfacer la solubilidad, la hidroxiapatita tiende a disolverse, produciendo así, la desmineralización.
  • 8. 7 Los estudios han demostrado que la aplicación de 18% de EDTA en la superficie de la raíz mejora la unión de los fibroblastos y la migración en la superficie de la raíz y también facilita el desarrollo de un sistema de unión de fibras orientadas entre las superficies desmineralizadas. (13) Por el contrario, los resultados de otros estudios que utilizan 24% de EDTA (pH 7,0-7,2) aplicados a la superficie de raíz 2-3 minutos no mostró diferencias en la profundidad de sondaje, nivel de inserción clínica y en la exploración niveles de hueso entre el tratamiento con EDTA y superficies radiculares de control. (1) También se demostró en un estudio que el uso de gel de EDTA como agente de acondicionamiento de la superficie radicular afectada negativamente el resultado de cobertura de la raíz. La investigación hecha en la estabilización del coágulo demostró que la adhesión de coágulo a la superficie radicular de bio-ingeniería con EDTA obtuvo los peores resultados en comparación con el ácido cítrico y el clorhidrato de tetraciclina. (1) Blömlof en 1996, realizó dos estudios, en uno comparó las superficies del cemento, utilizando EDTA como desmineralizante en dientes sanos, y en dientes con periodontitis, y encontró que los procesos regenerativos proveen una matriz de colágeno intacta, que es capaz de activar sustancias como factores de crecimiento, y sirve como una superficie biocompatible para la colonización de células del ligamento periodontal. En el otro estudio, evaluó si un pH neutral del EDTA, incrementaba la cicatrización, comparado con el pH bajo del ácido cítrico, y observó, que ambos agentes desmineralizantes, producen los efectos deseados en la superficie radicular. (5) Fibronectina Es una glicoproteína de alto peso molecular de la matriz extracelular con un peso molecular de aproximadamente 440 KDa. Es un dímero que consta de dos cadenas de monómeros casi idénticos unidos por un par de enlaces disulfuro. Está implicado en muchos procesos celulares, incluyendo la reparación de tejidos, embriogénesis, coagulación de la sangre, y la migración y adherencia de las células. Tiene un efecto quimioatrayente en fibroblastos y células mesenquimales y también promueve la adhesión celular tanto a superficies radiculares y al colágeno. Actúa como una opsonina no específica. Se une a la actina y ADN, promoviendo así la eliminación celular y restos de tejido por los macrófagos. Se ha demostrado que la aplicación de la fibronectina a las superficies radiculares desmineralizadas parciales mejora la nueva insercion y proliferación de las células del ligamento periodontal y del área supra crestal. La concentración óptima para la aplicación de la fibronectina es 0,38 mg / ml de solución salina. (13) Una de las pruebas iniciales para los efectos de la fibronectina fue proporcionada por Terranova y Martin, quienes demostraron que después de la aplicación de la fibronectina exógena, la unión de los fibroblastos a la superficie de la raíz mejoró significativamente. Se ha demostrado que el ácido cítrico acondicionado y aplicación posterior fibronectina da mejores resultados en comparación con la aplicación de fibronectina exógena solamente. De acuerdo con Genco en 1993, la fibronectina promueve la quimiotaxis, adhesión y crecimiento de las células mesenquimatosas,
  • 9. 8 promueve la fagocitosis, inhibe la adhesión de las células epiteliales, inhibe la condrogénesis, inhibe la formación de miotubos y estimula la síntesis de la matriz. (7) Caffesse y cols en 1985, realizaron un estudio en perros beagle donde compararon 4 m odalidades de tratamiento: cirugía sola, cirugía con el uso de fibronectina, cirugía con el uso de ácido cítrico, y cirugía con ácido cítrico y fibronectina. En este estudio se encontró que había una mayor reinserción de tejido conectivo en los dientes tratados con ácido cítrico y fibronectina, debido a una exposición del tejido blando a las fibras colágenas de la superficie radicular. Se mejoró la reinserción fibrosa a expensas del epitelio que se encontraba directamente sobre el cemento. Las áreas tratadas con cirugía y ácido cítrico, mostraron cantidades moderadas de inserción fibrosa, mientras que las otras dos modalidades de tratamiento, mostraron el desarrollo de un epitelio largo de unión. (1) Laminina Los componentes más abundantes de las membranas basales son los laminina y colágeno tipo IV. Mientras que el colágeno tiene alguna actividad promotora de la adhesión la laminina ha demostrado tener acciones potentes en las células: la adhesión celular, el crecimiento, la diferenciación, y la migración. (1) Se ha demostrado que la laminina promueve la quimiotaxis epiteliales gingivales y, además, el movimiento de los fibroblastos gingivales. La afinidad de la laminina y la fibronectina no son los mismos hacia la superficie mineralizada. Una superficie mineralizada atrae laminina que favorece la proliferación epitelial mientras que una superficie desmineralizada atrae fibronectina y favorece la proliferación de los fibroblastos. El papel de la laminina tiene que ser investigado para autenticar su eficacia como agente de la superficie radicular. (1) Doxiciclina La doxiciclina pertenece al grupo tetraciclina. Es un agente anti-microbiano eficaz contra patógenos periodontales. Junto con esto, tiene propiedades anti-enzimáticas. La aplicación tópica de doxiciclina ha demostrado una sustantividad de larga duración en las superficies radiculares periodontalmente enfermas. Se ha demostrado que el efecto anti-bacteriano de doxiciclina persiste en la superficie de la raíz acondicionado hasta 14 días. A 100 mg / ml solución de doxiciclina se puede obtener mediante la mezcla de doxiciclina en polvo (100 mg) en agua estéril (1 ml). Tiene un pH de aproximadamente 2,2. (13) Minociclina Es una tetraciclina semisintética que tiene un buen potencial bacteriostático. Minociclina tiene un pH bajo en solución concentrada, actúa como un quelante de calcio y su aplicación resulta en la desmineralización del esmalte y de la superficie radicular y la eliminación de endotoxina.
  • 10. 9 Posee actividad anti-colagenasa y promueve la unión de los fibroblastos a la superficie de la raíz. Varios estudios realizados para evaluar los efectos de la minociclina han demostrado su eficacia comparable a la de otros miembros de este grupo. (13) Ácido poliacrílico Se ha utilizado como agente acondicionador de la superficie radicular. Su efecto grabado ácido elimina el barrillo dentinario de la superficie de la raíz por lo que es más adecuado para la curación. (1) Un estudio comparó la cicatrización periodontal después de la aplicación de ácido poliacrílico durante 20 segundos y la aplicación de ácido cítrico durante 3 minutos en la superficie de la raíz. Los resultados demostraron una mayor adherencia del tejido conectivo a la superficie de la raíz en el caso de los dientes tratados con ácido poliacrílico en comparación con los dientes tratados con ácido cítrico. Debido a que un poco de los datos clínicos disponibles sobre el efecto del ácido poliacrílico en la superficie de la raíz y sus efectos biológicos, la investigación clínica es más requerido para autenticar su uso clínico. (1) Acondicionadores de unión dentina Los acondicionadores de unión dentina se han utilizado también como acondicionadores de la superficie de la raíz. En estudio de un microscopio electrónico de barrido (SEM), la morfología de la superficie de las raíces tratadas con acondicionador de adhesión a la dentina se comparó con la de los agentes usados de forma rutinaria de la superficie de la raíz de desmineralizado, ácido cítrico y clorhidrato de tetraciclina. Los resultados de este estudio indican similitudes morfológicas entre superficies obtenidas con el agente de dentina acondicionado y otros materiales ácidos que se utilizan habitualmente en la terapia regenerativa periodontal. (13) Hay relativamente insuficiente la investigación clínica realizada en acondicionadores de adhesión a la dentina como agentes acondicionadores de la superficie de la raíz y su potencial regenerativo. Se requieren más estudios comparativos para investigar el comportamiento de los fibroblastos hacia la superficie de la raíz tratada con acondicionadores de unión dentina en comparación con los acondicionadores de superficie de raíz tradicional. (13) Proteínas de la matriz del esmalte Está bien establecido que las matrices orgánicas juegan un papel clave en la mineralización. Las proteínas de la matriz del esmalte están involucradas en el desarrollo del diente temprano y juegan un papel vital durante la formación de cemento, ligamento periodontal y el hueso alveolar. La aplicación de proteínas de la matriz del esmalte en la superficie de raíz crea un entorno biológico similar a la que durante el desarrollo dental favoreciendo la regeneración periodontal. (1) La investigación inicial para evaluar el potencial de los derivados de la matriz del esmalte en la regeneración periodontal se hizo en modelos animales. El primer experimento con animales se llevó a cabo en monos para evaluar el potencial de proteínas de la matriz del esmalte en la iniciación de la regeneración o la reformación de cemento acelular. Después de período de 8
  • 11. 10 semanas de curación, el sitio de prueba tenía una capa delgada de tejido duro con fibras extrínsecas acelulares y fibras de colágeno que la inserción de indica la regeneración en estas áreas. (1) Después se demostró, que los derivados de la matriz del esmalte fueron capaces de inducir la formación de cemento acelular, éstos se aplicaron en defectos de dehiscencia experimentalmente realizados en monos. Los resultados demostraron evidencia de regeneración periodontal. En este estudio, se evaluaron varios vehículos de fármacos para determinar cuál de ellos admiten más eficazmente el ara precipitar sobre la superficie de la raíz tratada. Se vio que el alginato de propilenglicol (PGA) fue más eficaz que la hidroxietilcelulosa (HEC) o dextrano en la realización y que permite la precipitación de las proteínas de la matriz. (13) Factores de crecimiento La aplicación de factores de crecimiento para la regeneración periodontal es un importante foco de investigación en la actualidad. Varios factores de crecimiento que se cree que contribuyen a la regeneración periodontal incluyen el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), factor de crecimiento de insulina(IGF), factor de crecimiento transformante (TGF), factor de crecimiento epidérmico (EGF), factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), y la proteína morfogenética ósea (BMP). Estos factores de crecimiento promueven la proliferación de fibroblastos del ligamento periodontal y favorecen la formación de hueso. (7) Gamal et al en el 2012 investigaron la respuesta de los fibroblastos del ligamento periodontal al factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF-BB) y factor de crecimiento de insulina (IGF- 1) aplicados en superficies radiculares acondicionados con tetraciclina. Llegaron a la conclusión de que había un aumento significativo en los fibroblastos adherencia en el PDGF-BB y la combinación de los grupos de tratamiento / PDGF-BB de IGF-1 en comparación con los controles, así como en el grupo control. La combinación de PDGF-BB / IGF-1 no mejoró significativamente la adhesión de células en comparación con PDGF-BB solo. (13) Se evaluó en otro estudio el efecto de PDGF-BB en combinación con gel de EDTA sobre la adhesión y proliferación de células en la superficie de la raíz. 8 especímenes se derivaron de 40 periodontitis dientes afectados y se dividieron en 5 grupos: grupo control (sin tratar), SRP (raspado y alisado radicular) grupo, EDTA (24%) del grupo, PDGF (25 ng / ml) del grupo y EDTA combinado + grupo de PDGF. Los resultados del estudio demostraron la adherencia celular significativamente alto de PDGF y el grupo combinado, en comparación con el control y el grupo de SRP (13) Factor de crecimiento derivado de las plaquetas Es una fuente autóloga del factor de crecimiento derivado de las plaquetas y del factor de crecimiento transformante beta, obtenido a través de la concentración de las plaquetas, por centrifugación de gradientes de densidad. Es utilizado para amplificar y acelerar los efectos de los factores de crecimiento contenidos en las plaquetas, los cuales son los iniciadores universales de casi todos los procesos de cicatrización. (7)
  • 12. 11 Diversos estudios realizados in vitro, han establecido que el factor de crecimiento derivado de las plaquetas (PDGF), que se encuentra en los gránulos alfa de las plaquetas, posee ciertas características que podrían promover y mejorar la cicatrización periodontal. Ventajas de la utilización del plasma rico en plaquetas:  Seguridad en el uso de una fuente autóloga, en lugar de una homóloga.  Promoción en la cicatrización de los tejidos  Mineralización más rápida del colágeno en la reparación  Estabilidad temprana de los injertos  No existe el potencial para transmisión de enfermedades (7) Marx y cols.(2000) reportaron la utilización del plasma rico en plaquetas combinados con injertos óseos autólogos en 40 pacientes con defectos óseos mayores a 5 cm en la mandíbula, comparándolos con injertos óseos autógenos colocados en 40 pacientes con el mismo tipo de defectos, y encontraron que, con el uso del plasma rico en plaquetas, la regeneración ósea es el doble de rápida y la densidad ósea es mucho mayor que con los injertos óseos sin plasma rico en plaquetas. (7) Obarrio y cols(2000) reportaron el uso del plasma rico en plaquetas para el tratamiento de defectos periodontales, en una serie de casos en humanos, con significativa reducción en la profundidad de la bolsa y nueva formación ósea, visible radiográficamente a los 2 meses de tratamiento. (7) Laser Han sido estudiados por su efecto sobre la superficie de la raíz, así como por sus efectos sobre el comportamiento de las células del ligamento periodontal. A pesar de que la terapia con láser ha sido ampliamente estudiada en periodoncia para el desbridamiento de la bolsa, la cicatrización de heridas y en diversos enfoques quirúrgicos, pero no hay suficientes datos disponibles en cuanto a su eficacia como acondicionador radicular cuando se compara con otros acondicionadores de la superficie de la raíz tradicionalmente utilizados. Un estudio concluyó que el uso del co2 y er: yag en la configuración de energía determinado puede tratar la hipersensibilidad de la dentina y reducir sus síntomas de manera significativa. Sin embargo, el er: yag tiene un mayor efecto sobre la oclusión tubular con menos cambios térmicos; por lo tanto, puede actuar como una herramienta útil acondicionado en tales condiciones. Un estudio in vivo examinó alteraciones morfológicas en el epitelio de la bolsa periodontal con presencia o ausencia de inflamación clínica tras el uso de la neodimio: itrio aluminio-granate (nd: yag) de irradiación láser. Demostraron la viabilidad de la ablación de epitelio de la bolsa con un láser de nd: yag láser utilizando parámetros de 2w de potencia (200 mj, 10 pps). Además, la presencia o ausencia de inflamación clínica pareció tener un impacto en el grado de ablación epitelial con láser. La aplicación de láser en la superficie de raíz tiene un efecto significativo en unión de los fibroblastos. En un estudio in vitro, el efecto de nd: yag se evaluó (en energía 75 mj a 20 pulsos / seg usando una fibra de 320 micras de contacto de 1 minuto) en unión de los fibroblastos a las
  • 13. 12 superficies de la raíz no enfermas. El estudio concluyó que la exposición al láser desnaturaliza la proteína de superficie que inhibe la inserción de los fibroblastos. DISCUSIÓN Silva y cols. en el 2015 compararon el efecto del ácido cítrico, EDTA, capsula y gel de tetraciclina. Encontraron que todos dan lugar a la desmineralización y remoción del barrillo dentinario en la superficie radicular. En el grupo de capsulas de tetraciclina produjo grandes residuos de tetraciclina con varias zonas de desmineralización. El grupo EDTA presento más unión de los fibroblastos que los otros grupos experimentales. Se observó una mayor adhesión de coágulos de sangre en las raíces tratadas con gel de tetraciclina. EDTA y tratamiento de la superficie de gel de tetraciclina eliminan la capa de barrillo sobre la superficie de la dentina y promueve la adhesión de la red de fibrina y de fibroblastos. (2) Lafferty TA y cols informaron que el condicionamiento con tetraciclina y ácido cítrico presentan características superficiales comparables cuando se utiliza en superficies radiculares enfermos. Se produce debido a que el pH del ácido cítrico (pH 1) y tetraciclina HCl (pH 1,6) es suficientemente ácida para exponer número similar y considerable de los túbulos dentinarios mientras pH de doxiciclina (pH 2,2) fue menos ácida en comparación con los otros dos agentes. Estos resultados están de acuerdo con estudios realizados por Shetty y cols en el 2008. (15) Leite y cols en el 2010 encontraron que el acondicionador tetraciclina tuvo el mayor número de túbulos dentinarios abiertos en comparación con el ácido cítrico y doxiciclina. Los que fueron tratados con doxiciclina tenían el menor número de túbulos abiertos entre los tres agentes utilizados. [8,18,19] Por el contrario, Sterrett JD, Simmons J, Whitford G, y Russell CM encontraron que la solución de ácido cítrico (pH 1,6) fue más eficaz que la tetraciclina (150 mg / ml) en la desmineralización de la dentina que podría atribuirse a la concentración menor (150 mg / ml) de tetraciclina usado. (8) En otro estudio realizado por Khan y cols en el 2014 compararon los valores de la profundidad de sondaje y regeneración ósea al inicio y a los 6 meses entre dos grupos (Primer grupo regeneración tisular guiada + acondicionador y el segundo grupo solo regeneración tisular guiada). Se observó una disminución en los valores de profundidad de sondaje y más regeneración ósea después del tratamiento en ambos grupos. Se encontró que no existe diferencia significativa. (14) Amaral y cols en el 2011encontró la presencia de barrillo dentinario en 80% del grupo de EDTA, 33,3% del grupo de tetraciclina y 0% del grupo de tetraciclina. Los números de túbulos dentinarios abiertos fueron: tetraciclina = 43,8 ± 25,2; ácido cítrico = 39,3 ± 37; ácido fosfórico = 12,1 ± 16,3; EDTA = 4,4 ± 7,5 y 2,3 ± control = 5,7. El grupo ácido cítrico difería significativamente de los otros excepto para el grupo de tetraciclina. Se encontró en este estudio que el orden de mejor acondicionador es el siguiente ácido cítrico> tetraciclina> ácido fosfórico> EDTA. Esta información puede ser de valor como un parámetro adicional para la elección de uno de ellos para el acondicionamiento radicular. (3). Estos resultados son comparables con el estudio realizado por Nanda Tarun y cols en el 2014 (12)
  • 14. 13 Existe poca literatura científica con respecto al uso de proteínas de matriz de esmalte. Hedden y cols en el 2006 realizaron un estudio de seguimiento de 5 años y encontraron ganancias en el nivel de inserción después de la terapia regenerativa con el uso de proteínas de la matriz del esmalte en defectos intraóseos. (9) Un estudio realizado por Gamal en el 2012 demostraron que el ácido cítrico combinado con crecimiento derivado de plaquetas factor de BB mostró mejores resultados que el clorhidrato de EDTA y la tetraciclina en unión de las células del ligamento periodontal en las superficies de raíz. (10) A pesar del gran número de investigaciones con este tipo de agentes químicos hasta la fecha, ningún estudio ha comparado sus efectos sobre los eventos biológicos iniciales relacionados con el éxito de la terapia periodontal regenerativa. (6) CONCLUSIONES Está bien establecido que la superficie radicular enfermo no favorece la regeneración del periodonto, debido a sus características de la superficie. Se ha demostrado que la desmineralización altera la superficie de radicular, creando una superficie más aceptable que puede influir en los acontecimientos en la cicatrización de heridas. Los estudios en vivo y estudios in vitro indican claramente un mayor potencial de unión de las células y fibras a las superficies radiculares desmineralizada. Otros factores, como la estabilización de la herida también pueden desempeñar un papel importante en la extensión y la previsibilidad de la cicatrización de la herida periodontal tras la desmineralización superficie de la radicular. El acondicionamiento radicular apropiado regula la absorción de proteínas plasmáticas, mejora la adhesión del coágulo de sangre y estimular la deposición de colágeno en contra de la superficie radicular. Los acondicionadores radiculares eliminan el barrillo dentinario sobre la superficie radicular, descubre y abre los túbulos dentinarios, y expone la matriz de colágeno de la dentina. Muchos agentes se han utilizado para este propósito. El acondicionamiento radicular se suele combinar con otros procedimientos como la regeneración tisular guiada y un injerto de hueso para lograr mejores resultados. En la actualidad las investigaciones se centran en la aplicación de factores de crecimiento en la superficie radicular para lograr un ambiente más propicio para la regeneración. Hay muchas dificultades en la aplicación del factor de crecimiento que incluyen la purificación y extracción de estos factores de crecimiento, identificación de vehículo apropiado para ellos, y conseguir la concentración adecuado y costo.
  • 15. 14 BIBLIOGRAFÍA 1. Akhilesh H. Shewale1*, Root Surface Biomodification: Current Status and a Literature Review on Available Agents for Periodontal Regeneration, British Journal of Medicine & Medical Researchb13(2): 1-14, 2016 2. Aline Cristina Silva, Camilla Christian Gomes Moura, Biological Effects of a Root Conditioning Treatment on Periodontally Affected Teeth – An In Vitro Analysis Braz. Dent. J. [online]. 2016, vol.27, n.2, pp.160-168. ISSN 1806-4760. 3. AMARAL NG, REZENDE MLR; Comparison among four commonly used demineralizing agents for root conditioning. A scanning electron microscopy; J Appl oral Science;2011;19(5): 469-75 4. Angelo Mariotti;Efficacy of chemical root Surface modifiers in treatment of periodontal disease. A systematic review, Ann Periodontol; vol 8;n1 dec 2003 pg 205- 226 5. Bhushan K, Chauhan G, Prakash S (2016) Root Biomodification in Periodontics - The Changing Concepts. J Dent Oral Care Med 2(1): 105. 6. Chahal, Gurparkash Singh et al. “Effect of Citric Acid, Tetracycline, and Doxycycline on Instrumented Periodontally Involved Root Surfaces: A SEM Study.” Journal of Indian Society of Periodontology 18.1 (2014): 32–37. 7. Giovanna Chadid , Biomodificación radicular TRATAMIENTO PERIODONTAL REGENERATIVO: BIOMODIFICACION DE LA SUPERFICIE RADICULAR, FACTORES DE CRECIMIENTO Y MORFOGENOS ABR2006 - 21:09 8. Leite FR, Sampaio JE, Zandim DL, Dantas AA, Leite ER, Leite AA. Influence of root- surface conditioning with acid and chelating agents on clot stabilization.Quintessence Int. 2010; 41:341–9. J Indian Soc Periodontol. 2014 Jan-Feb; 18(1): 32–37. 9. Heden; Five-Year Follow-Up of Regenerative Periodontal Therapy With Enamel Matrix Derivative at Sites With Angular Bone Defects J Periodontol February 2006 10. Ibero Sagastibelza I,Castro Lara J. Bascones Martínez A. Factores de crecimiento y periodoncia. Una revisión bibliográfica actualizada. Av Periodon Implantol. 2012; 14,3: 115-128. 11. M. Goldstein, A CRITICAL EVALUATION OF METHODS FOR ROOT COVERAGE; Crit Rev Oral BiolMed 7(l):87-98 (1996) 12. Nanda Tarun;Root conditioning in periodontology-Revisted; Journal of natura science, Biology and Medicine;July 2014 Vol 5 Issue 2 13. Nitin Saroch, MDs, Root surface bio-modification ; Periobasics pg 200-215 14. Ruby Khan; Periodontal Regeneration by Application of Chemical Root Conditioning to Intrabony Defects Utilizing Bioresorbable Membrane: A Comparative Study, OHDM - Vol. 13 - No. 2 - June, 2014 15. Shetty B, Dinesh A, Seshan H. The comparative effects of tetracyclines and citric acid on dentin root surface of periodontally involved human teeth: A scanning electron microscope study. J Indian Soc Periodontol. 2008; 12:8–15.