anticuerpos

1. ANTICUERPOS

11. COMPOSICIÓN QUÍMICA Y CARGA ELECTROSTÁTICA
GLUCOPROTEÍNAS CATIÓNICAS (+)
g-globulinas b-globulinas
Ánodo
(+)
Cátodo
(-)
α1 α2 β1 β2 g
Albúminas Globulinas
INMUNOGLOBULINAS

12. Estructura de las Inmunoglobulinas
 Cadenas pesadas (H) y livianas (L)
 Puentes disulfuro
 Región en bisagra
 Bucles
 Región Fab y región Fc
 Regiones constantes y variables de cadenas H y L
 Regiones hipervariables y sitios de unión de Ag

13. Cadenas pesadas
(H)
Cadenas livianas
(L)
N terminal
C terminal
g μ a ε d
k l
Puentes
disulfuro
“Bucle”
Región en
bisagra

14. C terminal
Fragmentos Fab
Papaína
Fragmento Fc
Hidratos de carbono
Fijación del
complemento
Unión al antígeno
H
L
H
N terminal

15. H
L
N terminal
C terminal
VH
VL
CL
CH1
CH2
CH3
Región
VARIABLE
Región
CONSTANTE
Sitio de unión a Ag o
PARATOPE
Segmentos
HIPERVARIABLES

16. VARIACIÓN EN LOS DOMINIOS SEGÚN LA CLASE DE Ig
Ig G Ig M
Ig A
Ig D
Ig E

17. Estructura
pentamérica
de la Ig M
Estructura
dimérica de la Ig A
Cadena
J
Cadena
J
Componente
secretor

18. Formación de la IgA2

20. Estructura del Anticuerpo:
• En la región V hay:
– 3 CDR: Regiones Determinantes
de la Complementariedad. Son
hipervariables.
– 4 FR: Regiones de armazón o
entramado.
• El PARATOPE es una porción de las
CDR (Regiones Fab).
• Las regiones Fc intervienen en la
fijación del complemento o la unión
a tejidos.

23. Linfocitos B
• Los Linfocitos B seleccionados se
diferencian a:
• Células plasmáticas
• correceptores CD19/CD21 y CD81
• Células de Memoria
• CD40

24. Inmunoglobulinas
Conc
suero
Vida
media
Fijac
Comp
Placent
a
Mucosas Alergia
s
Estruc
IgG 13.5 21 1 a 3 + + - - Mono
IgM 1.5 10 3+ - - - Pentá
mero
IgA 3.55 6 - - + - Dímero
IgD 0.03 3 - - - - Mono
IgE 0.00005 2 - - - + mono

25. IgG
Fijación de Complemento
 IgG1
2+
Atraviesa placenta y es una Opsonina
 IgG2
1+
 IgG3
3+
Atraviesa placenta y es una Opsonina
 IgG4
Negativo
Atraviesa placenta

26. Clases de Inmunoglobulinas: características
gg-bg-bbgMovimiento
electroforético
7S8S11S19S7SCoeficiente de
sedimentación
180.000200.000360.000900.000180.000
monómeromonómerodímero
(monómero)
pentámeromonómeroEstructura
Ig DIg EIg AIg MIg G
PM (Da)

27. IgDIgEIgAIgMIgG
k-lk-lk-lk-lk-lCadena liviana
Bazo
G. linfáticos
Vías digestivas
y respiratorias
Vías digestivas y
respiratorias
Bazo
G. linfáticos
Méd. ósea
Bazo
G. linfáticos
Méd. ósea
Principal lugar
de síntesis
13119112,9% Hidratos de
Carbono
deamgCadena pesada

28. RUMIANTES EQUINO
PORCINO
CARNÍVOROS
SUERO Ig G Ig G Ig G
CALOSTRO Ig G Ig G Ig G
LECHE Ig G Ig A Ig A
DISTRIBUCIÓN EN SUERO, CALOSTRO Y LECHE
Inmunoglobulinas predominantes

29. VALENCIA DE UNIÓN AL ANTÍGENO
(cantidad de sitios de unión )
IgG IgM IgA IgE IgD
2 5 (10) 2 ó 4 2 2
UNIÓN a Ag

30. Setiembre 2005
RESPUESTA PRIMARIA Y SECUNDARIA

31. Setiembre 2005
Principales características respuesta primaria y secundaria
Componente Respuesta primaria Respuesta secundaria
Células B
Tiempo respuesta
Duración respuesta
Isotipo anticuerpo
Afinidad del anticerpo
No preactivadas
(vírgenes)
Generalmente 5-10 días
Corta
Predominante IgM
Baja
Memoria
Generalmente 1-5 días
Largo periodo
Predominante IgG
Alta

32. Producción de Ig en respuesta primaria y secundaria
Concentración
Ig en suero
Total
Total
10 15 20 25 / 3 10 15 30
IgG
IgG
IgM
IgMAg Ag
Latencia Latencia
días

33. PRIMARIA SECUNDARIA
Latencia Larga Corta
Síntesis Ig Lenta Rápida
Persistencia AC Baja Alta
Ig predominante Ig M Ig G
Título máximo AC Bajo Alto
Dosis de inmunógeno
necesaria
Alta Baja

34. Funciones efectoras
IgG IgM IgA IgE IgD
Aglutinación + +++ + - -
Precipitación +++ + + + -
Fijación de
complemento
+ +++ - - -
Neutralización + ++ + - -
Opsonización ++ +++ - - -
Citotoxicidad Ac
dependiente
++ - - + -
Inmunidad en
mucosas
- - ++ - -
Traspaso por
placenta
++ - - - -

35. Célula Plasmática
NÚCLEO
Cadena H
Péptido
Adicional
Vesícula secretora
o de Russell
Hemimolécula
Carbohidratos
Aparato
de Golgi
Líquido
Extracelular
R.E.R.
Ribosoma Cadena L
Síntesis de inmunoglobulinas

36. SÍNTESIS DE Ig A secretoria (Ig AS)
Luz intestinal
Célula plasmática
submucosa
Ig A dimérica
Receptor de Ig
polimérica (pIgR)
Ig As Componente secretor
Enterocito

37. Degradación de Ig
21-30 díasVIDA MEDIA
70%Sistema
retículoendotelial
(S.R.E.)
30%Hepática
DEGRADACIÓN

38. Clases de anticuerpos: IgG:
• Monómero
• Dos zonas de unión al
antígeno (dos fragmentos
Fab)
• Cuatro subclases (Ig1, Ig2,
Ig3, Ig4)
• La Ig más abundante en el
plasma (80%).
• Bajo Pm  Difunde bien a
otros líquidos corporales y
atraviesa la barrera
placentaria.

39. Clases de anticuerpos: IgG:
• Neutraliza toxinas
bacterianas
• Activa el complemento
• Sensibiliza y agrega
microorganismos para
estimular su fagocitosis
(opsonización).
• Activa el complemento.
• Es la Ig más importante en
la respuesta inmunitaria
secundaria (linfocitos B2 de
memoria).

40. Subclase
de IgG
nº de
puentes S-S
concentración
en suero (en
mg/ml)
opsonina
s
Activación
del
compleme
nto
IgG1 2 9 +++ ++
IgG2 4 3 +/- +
IgG3 11 1 +++ +++
IgG4 4 0.5 - -
http://www.ugr.es/~eianez/inmuno/cap_05.htm
Algunos datos sobre las subclases de IgG

41. Clases de anticuerpos: IgM
• Elevado Pm (“macroglobulina”)
• Pentámero de Ig
• Los 5 monómeros están unidos por
puentes disulfuro y la “proteína j”
• 10 fragmentos fab para unión al Ag
• Confinada al espacio intravascular
• Eficaz en la aglutinación y citolisis de
microorganismos
• Respuesta inmunitaria primaria:
Papel predominante (aparición
temprana)

42. Clases de anticuerpos: IgA
Dos subclases:
• IgA1: Monomérica. En plasma
(poco abundante).
• IgA2: Dimérica. Predominante en
secreciones externas (saliva,
lagrimal, nasal, leche materna, etc).
• Monomeros unidos por puentes
disulfuro y proteína j
• Tiene otra cadena polipeptídica
denominada COMPONENTE
SECRETOR (sIgA), producida por
las células de las mucosas que la
protege de la proteolisis
enzimática y facilita su
transporte.

43. Clases de anticuerpos: IgA
• Inhibe la adherencia de
los microorganismos a la
superficie de las células
de las mucosas, por lo
que es una primera línea
de defensa frente a las
infecciones.
• También es importante
en el procesamiento de
los antígenos
alimentarios en el
intestino.

45. Clases de anticuerpos: IgD
• Monómero
• Poco abundante en
plasma
• Se encuentra en la
superficie de algunos
linfocitos B sanguíneos

46. Clases de anticuerpos: IgE
• Monómero
• Baja concentración en plasma.
• Se encuentra en la superficie de los
mastocitos y los basófilos
• Es la mediadora de las reacciones
de hipersensibilidad inmediata
(alergias).
• Confiere protección local frente a
ciertos patógenos grandes, como
helmintos: sirve para reclutar
células plasmáticas a través de una
reacción de inflamación aguda.
• Está aumentada en infecciones
parasitarias.

57. UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN
BIOMEDICINA
• Métodos y Técnicas de Estudio en Biología
Celular
UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN
BIOMEDICINA

58. UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN
BIOMEDICINA
• Inmunoblotting (western blot), Dot/slot blot
• Inmunocitoquímica
• Inmunofluorescencia
• Inmunoprecipitación
• ELISA/EIA/RIA
• Cromatografía de inmunoafinidad
• Microscopia electrónica (morfología)
UTILIZACIÓN DE ANTICUERPOS EN
BIOMEDICINA

59. Estructura de los anticuerpos

60. Tipos de Anticuerpos

61. Anticuerpos monoclonales
1. Inmunización del ratón
2. Extracción del bazo
3. Preparación de
hibridomas
(mieloma+B)
4. Selección de los clones
5. Producción y uso de
anticuerpos

65. Anticuerpos policlonales
1. Inmunización del conejo
2. Recuerdos
3. Extracción de sangre
4. Preparación del suero
5. Purificación del anticuerpo
(métodos opcionales)
6. Caracterización del
antisuero

66. Anticuerpos policlonales