Este documento describe los diferentes métodos para procesar muestras líquidas para análisis citológico, incluyendo centrifugación, bloque celular, citocentrifugación y filtración. Explica que el método de fijación depende del tipo de muestra, ya sea de alta o baja densidad proteica. También destaca que el bloque celular complementa la citología al permitir realizar técnicas adicionales y mejorar la especificidad del diagnóstico.
1. Manejo de muestras líquidas
Procesamiento de líquidos
corporales y cavidades
Seminario 5, Segundo semestre 2014
Citopatología
Mayarling Troncoso M
2. Citología de Muestras Líquidas
• Tiene como objetivo detectar cualquier anormalidad citológica
mediante la coloración Papanicolau.
• Para un diagnóstico seguro y óptimo:
-Muestra fresca
-Historia clínica adecuada
-Preparación de la muestra inmediata
-Fijación correcta
3.
4. Problemas muestras líquidas
• Densidad
-Muestras baja densidad protéica sensibles a cambios osmóticos
-Muestras de alta densidad protéica sensibles a coagulación
• Autólisis
- Células fuera de su medio natural sensibles a necrosis
**FUNDAMENTAL BUENA FIJACIÓN
5. Manejo de muestras líquidas
Muestra alta densidad protéica
-Líquido pleural
-Líquido ascítico
-Líquido sinovial
-Líquido pericárdico
** Recolectados en tubo con
anticoagulante, tratados con Liquofix o
solución Formol-Ringer-Alcohol.
Muestra baja densidad protéica
-Lavado bronquial
-Lavado peritoneal
-Quistes de mama
**Tratados con alcohol 70 en partes
iguales con la muestra y ser procesado
antes de las dos horas.
• Muestra líquida: muestra donde las células están suspendidas en un
Líquido: exudado, transudado, suero fisiológico, etc.
6. Norma y manejo de biopsias y citología Hospital Padre Hurtado
7. Manejo de muestras líquidas
DIFERENTE FIJACIÓN
DIFERENTES MUESTRAS
COMPLICADO
(PROCESOS)
(IMPLEMENTACIÓN)
IGUAL FIJACIÓN
SIMPLE
(PROCESOS)
(IMPLEMENTACIÓN)
8. Liquofix
• Medio conservador, fijador y anticoagulante de muestras
líquidas.
• Mantiene ambiente isotónico de muestras.
• Permite manejo y traslado de muestras al laboratorio sin
apremio de tiempo y temperatura (recomendación:
procesamiento antes de 24hrs).
• No interfiere en reacciones de coloración o ICQ.
• Buenos detalles nucleares tanto de estructura y cromatina,
permiten una fiel imagen de rastros benignos y malignos.
• Citoplasmas, diferenciaciones estructurales y afinidades
tintoriales intactos.
9. Liquofix
• Consideraciones:
-Solución transportadora que no produce coagulación
-Tiempos prolongados causan sobrefijación con alteración de la tinción
(cariopicnosis) y mala adhesividad de la muestra
-Importante dejar secar los bordes de la muestra en porta (semiseco)
para evitar desprendimiento o derrame de la muestra al fijar en
alcohol.
-Muestra apta para realizar block celular
13. • Estudios muestran que la citología puede ser mas resolutiva (96,7%
vs. 47,0% ) y es más sensible para diagnosticar malignidad (87,5%
frente al 56,2%). Pero un 3,2% de diagnósticos de malignidad con el
BC que escapaba al diagnóstico de la citología. Se recomienda en el
realizar primero la citología y luego como examen complementario
el block celular, que permite añadir especificidad al observar la
arquitectura de la lesión, realizar técnicas complementarias al PAP
como la H/E, IHQ, etc
14. BC de PAAF de ganglio linfático con metástasis de
carcinoma de células escamosas (H&E, 400x)
Citología de PAAF de ganglio linfático con metástasis de
carcinoma de células escamosas (PAP, 400x)
16. • El procesamiento del BC es un método simple y de confianza después
de revisar los extendidos citológicos. La citología es un procedimiento
diagnóstico más sensible que el BC para el diagnóstico de malignidad
(87,5% frente al 56,2%). Sin embargo, el 3,2% de los BC permite hacer
un diagnóstico de malignidad que se escapa al diagnóstico citológico
17. • Bloques celulares aumenta de forma significativa la capacidad para realizar
con más facilidad técnicas de inmunohistoquímica que ayudan a la mejor
tipificación de las neoplasias, y además aporta un diagnóstico morfológico
exclusivo en algunos casos.
• En cuanto a su utilidad en patología benigna, de forma general parece
aumentar su rentabilidad, aunque en la única entidad en la que se ha
estudiado de forma concreta ha sido en la sarcoidosis19-22. Los primeros
estudios se realizaron a partir de punciones realizadas con ultrasonografía
esofágica (EUS-FNA)20,21. Von Bartheld et al.20 observaron que en
pacientes con el diagnóstico final de sarcoidosis, en el 33% de las citologías
negativas pudieron verse granulomas en el bloque celular.
19. Procesamiento
Filtros de nitrocelulosa
• El filtro de membrana estándar para la mayoría de las aplicaciones en
laboratorio para partículas y células en el rango de 0,1 µm hasta 5,0
µm. Los residuos de la filtración se encuentran habitualmente en la
superficie del filtro lo que permite su recuperación física y estudios
microscópicos
PROCESADOR THINPREP
Recolección de la muestra
Solución PreservCyt®
https://www.youtube.com/watch?v=d_CvtSfZ2Hc
20. Procesamiento
Impronta de coágulos
• El material obtenido por punciones o lavados pueden contener restos
hemáticos y microfragmentos de tejido formando coágulos, los cuales
pueden ser procesados:
- IMPRONTA
- BLOCK CELULAR
21.
22. Caso
• Paciente masculino
• 88 años
• Macroscopía: se recibe líquido pleural : 20 ml. De líquido de aspecto
citrino.
• Procesamiento: se centrifuga a 1.000 rpm por 10 minutos. Se realiza
extendido celular para tinción PAP y realización de Block celular con
coágulo.
23. Marcado pleomorfismo y tamaño nuclear, binucleación, hipercromasia y macronucléolo. Importante destacar la
Alta relación núcleo citoplasma.
https://citotecs.wordpress.com/2013/07/11/derrame-de-cavidades-citopreparacion/
24. Discusión
• Es importante cumplir con los parámetros establecidos para realizar
un diagnóstico óptimo y seguro de cada muestra
• Tener en cuenta la técnica a utilizar para el procesamiento de las
muestras líquidas, sus ventajas, desventajas, costos, etc.
• Uso de block celular complementario a citología. Beneficios
25. Bibliografía
• JUAN DÍAZ et al. Utilidad de la citocentrifugación en el diagnóstico
bacteriológico microscópico de fluidos corporales.
• Francisco Javier Torres Gómez, A. UTILIDAD DEL MÉTODO DE
FILTRACIÓN-ADHESIÓN EN CITOLOGÍA URINARIA
• http://www.thermoscientific.com/en/product/cytospin-4-
cytocentrifuge.html
• http://www.cytologystuff.com/es/study/section1.htm
• http://www.lablinsan.cl/imagenes_ficha_7/fichasWeb7_4.pdf
• https://citotecs.wordpress.com/2013/07/11/derrame-de-cavidades-
citopreparacion/