2003. Apuntes de Citología Ginecológica. Tema 4. Para Técnicos de Anatomía Patológica y Citología

1. 1
TOMA DE MUESTRA Y CITOLOGÍA NORMAL EN VCE.
1 TOMA DE LA MUESTRA:
1.1 Test de Papanicolaou habitual o convencional:
- Es la forma en que siempre se han realizado las tomas y la preparación de
la muestra, desde que lo puso en marcha Papanicolaou en 1927.
- Las células son obtenidas raspando las mucosas mediante la denominada triple
toma de Wied, que consiste en depositar sobre un portaobjetos muestras
obtenidas de:
- fondo de saco vaginal posterior,
- porción del ectocérvix y
- endocérvix.
- Para ello se utiliza :
- una espátula tipo Ayre (toma vaginal y exocervical) y
- Una torunda de algodón o cepillo apropiado (toma endocervical).
- La toma vaginal se deposita en la zona más próxima a la parte esmerilada del
portaobjetos,
- A continuación se deposita la toma exocervical y
- En el extremo opuesto la toma endocervical.
- La preparación se fija inmediatamente en alcohol de 96º
- Se tiñe con Papanicolaou, cuyos colorantes son:
- Hematoxilina para el núcleo
- Para el citoplasma:
- Orange G
- EA (mezcla de tres colorantes: eosina, verde luz y pardo Bismark).
1.2 Técnica monocapa (Monolayer Autocyte Thinprep):
- La técnica monocapa para citología cérvico vaginal es una alternativa al
tradicional test de Papanicolaou.
- Los frotis convencionales son extendidos en el porta por el ginecólogo tras
recoger la muestra. Los portaobjetos monocapa son preparados en el
laboratorio por un instrumento especializado, estandarizando la técnica.
- Para recoger la muestra cervical se utiliza un kit de un solo uso. El kit contiene
un envase lleno de fluido, un filtro de un solo uso, un portaobjetos y un
dispositivo de toma de muestra (el cepillo cervical de Rover). El líquido
especial contiene un fijador, un agente mucolítico, y un agente que produce
1 BETHESDA 2001
1. Tipo de muestra:
- Pap test
- Monocapa
2. Adecuación de la muestra:
- Satisfactoria (describir presencia o ausencia de células endocervicales y/o de la zona
de transformación, así como si hay sangre, inflamación,..)
- Insatisfactoria (especificar razón):
•Muestra rechazada/no procesada (especificar)
•Procesada y examinada, pero insatisfactoria (especificar razón)

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hemólisis para aumentar la eficacia de capturar solamente las células que nos
interesan
- El ginecólogo obtiene la muestra cervical con el cepillo cervical de Rovers, una
mezcla de cepillo y espátula de plástico. Se gira 360º sobre todo el cérvix,
quedando representado endocérvix, la zona de transformación y el ectocérvix.
- El dispositivo de recolección se pone en el envase lleno de líquido especial
(Cyto Rich GIN) y se agita suavemente para distribuir las células en el líquido.
El 100 % de las células capturadas pasarán en buenas condiciones al líquido.
- El líquido que contiene la muestra se envía al laboratorio.
- La técnica de la preparación monocapa requiere el material y equipo
especializado. El laboratorio debe adquirir el equipo necesario..
- El líquido se filtra con un instrumento especial usando un proceso de
vacío. Cuando una sola capa de células se captura en el filtro, las células se
transfieren a un porta para la fijación y tinción. El proceso requiere la
dedicación especial de un técnico.
- La técnica de ThinPrep fue aprobada por la Administración de Fármacos
y Alimentos en USA (FDA) el 21 de mayo de 1996. Hasta la fecha,
ThinPrep es el único sistema que ha sido aprobado por el FDA para la
citología ginecológica.
- La primera ventaja para el diagnóstico es que los contaminantes (ej., sangre,
moco, algunas células inflamatorias) han sido eliminados al realizar una
preparación monocapa de células cérvico vaginales bien conservadas. Con esto
mejora la visualización citológica y es recomendable en determinadas
situaciones clínicas.
- Las células en el Cyto Rich GIN se conservan bien durante 60 horas a
temperatura ambiente, antes de procesarlas en el laboratorio. Ya en el
laboratorio podemos conservar material en nevera hasta 14 meses para poder
realizar nuevas extensiones y técnicas especiales (técnicas para glucógeno,
moco, inmunoperoxidasa, biología molecular,...)
- La interpretación de la preparación monocapa de citología cérvico vaginal se
realiza de la manera tradicional. La superficie de porta a barrer se reduce a
menos de 1 cm2
(un círculo en el centro del porta).
- La necesidad de dedicar más tiempo a la preparación y los costes del kit hacen
que el procedimiento sea más costoso que la técnica tradicional del test de Pap.
- (En cambio sí se ahorraría tiempo en el screening, cuya velocidad se puede
multiplicar por 3 o por 5).
2 BARRIDO (Screening) realizado por el Citotécnico:
- Los frotis deben ser examinados efectuando un recorrido preestablecido, de
izquierda a derecha y de arriba a abajo (movimiento en zig-zag).
- La observación se suele hacer con el objetivo de 10 x, pasando al de mayores
aumentos para detalles concretos.
- El punteado de las preparaciones se hace en las zonas dudosas o que necesiten
corrección

3. 3
3 ADECUACIÓN DE LA MUESTRA:
3.1 Satisfactoria (describir presencia o ausencia de células endocervicales y/o de
la zona de transformación, así como si hay sangre, inflamación, .. ):
- Presencia (al menos 2 grupos de 5 células cada uno) de células endocervicales,
metaplásicas o células de reserva de la zona de transformación.
- Información clínica relevante
- Suficientes células escamosas bien conservadas.
3.2 Insatisfactoria (especificar razón):
3.2.1 Muestra rechazada/no procesada (especificar):
- Componente escamoso escaso (células escamosas bien preservadas y
visualizadas ocupando menos del 10% de la superficie del frotis).
- Sangre, inflamación, áreas gruesas, mala fijación, desecación, artefacto,
contaminantes, etc. que impiden la interpretación de aproximadamente el 75% o
más de las células epiteliales.
- Frotis técnicamente inaceptable (por ej. Uno roto y que no puede ser reparado o
un material celular que está inadecuadamente preservado).
- Ausencia de identificación de la paciente en la muestra y/o petición.
3.2.2 Procesada y examinada, pero insatisfactoria (especificar razón):
- La muestra da información útil, sin embargo la interpretación puede estar
comprometida. Esto ocurre cuando:
- Sangre, inflamación, áreas gruesas, mala fijación, artefactos, contaminantes,
etc. que oscurezcan parcialmente el frotis, e impida la valoración de, entre el
50% y el 75% de las células epiteliales.
- Carece de componente endocervical y zona de transformación
- Carece de información clínica adecuada de la paciente (edad y último día del
período menstrual, como mínimo, e información adicional, si es el caso).
4 INFORMACIÓN CLÍNICA RELEVANTE:
1.- Nombre y edad del paciente
2.- Fecha de la última regla
3.- Fecha de la toma
4.- Forma de obtención de la toma
5.- Administración de hormonas
6.- Uso de dispositivos intrauterinos
7.- Maniobras instrumentales recientes
8.- Terapéuticas recibidas (Radioterapia, quimioterapia, crioterapia, láser ...)
9.- Clínica más relevante (leucorrea, metrorragia, pólipos...)

4. 4
5 CÉLULAS NORMALES EN CITOLOGÍA VCE:
- Células escamosas de vagina y ectocérvix ( basales, parabasales, intermedias y
superficiales).
- Leucocitos polinucleares neutrófilos.
- Células endocervicales
- Otras células de la zona de transformación (metaplásicas y de reserva)
- Histiocitos mononucleados y multinucleados
- Hematíes
- Células endometriales (glandulares y del estroma, así como histiocitos
acompañantes en el éxodo).
- Linfocitos
- Fibroblastos
- Espermatozoides
- Bacilo de Döderlein.
6 CITOLOGÍA DEL ENDOMETRIO:
- Histología (HE):El endometrio es la mucosa que tapiza el interior de la
cavidad uterina.
- Durante la etapa reproductora de la mujer, el endometrio sufre
cíclicamente cambios morfológicos en respuesta a la actividad hormonal
de los ovarios.
- El endometrio tiene componentes epiteliales y mesenquimales, que
sufren una serie de variaciones cíclicas condicionadas hormonalmente. El
tercer componente importante histológicamente son los vasos
sanguíneos.
- La célula de revestimiento, tanto de la superficie como de las glándulas
es cilíndrica alta.
- Citología:
- En condiciones fisiológicas normales, no se encuentran células
endometriales en los frotis de cérvix y vagina, salvo cuando se produce la
descamación periódica del endometrio durante la menstruación.
- Se considera normal la presencia de células endometriales entre los días 1
y 10 del ciclo (en algunos casos se pueden ver hasta el día 12). Se suelen
ver en la parte correspondiente a la toma vaginal.
- La presencia de células endometriales en la segunda mitad del ciclo o
después de la menopausia es un signo de alarma, y se debe estudiar a la
paciente.
- En general estas células están en diferentes grados de degeneración
- Las células glandulares se presentan formando acúmulos tridimensionales
de células con escaso citoplasma y núcleos pequeños, con cromatina
compacta y tendencia a la superposición nuclear.
- De forma más rara se observan tubos glandulares ramificados o incluso
láminas o placas
- Las células del estroma endometrial a diferencia de las células glandulares,
suelen presentarse en grupos laxos (célula suelta).Son células de núcleos

5. 5
alargados con distribución regular de la cromatina y citoplasmas mal
conservados
- Se denomina éxodo en general a la presencia de células endometriales en
los frotis vaginales durante la menstruación
- Se denominan éxodos en sentido estricto a la presencia de células
endometriales (glandulares y estromales con imagen en rueda de carro)
junto a regueros de histiocitos.
- El diagnóstico diferencial de las células endometriales se debe hacer
con las células endocervicales:
- Las endocervicales tienen más citoplasma, y las endometriales menos
- cuando forman grupos las endocervicales suelen tener un espesor de una
célula, contrariamente a los endometriales que tienen varias capas de
células, demostrable moviendo el micrométrico del microscópico y
consiguiendo enfocar a diferentes capas de células
- Aspiración endometrial para obtención directa de frotis endometriales
se ha realizado durante tiempo para obtener más información; actualmente
está en desuso porque son oscuros, y no siempre es posible determinar en
que fase del ciclo nos encontramos.
- Una combinación de frotis vaginal y biopsia endometrial es más simple y
más informativa.
7 CITOLOGÍA DEL ENDOCÉRVIX:
- Histología (HE): El endocérvix es la mucosa que tapiza el canal
endocervical, el cual comunica a su vez la cavidad uterina con la vagina.
- La mucosa endocervical reviste el conducto que comunica el orificio cervical
externo con la cavidad endometrial.
CÉLULAS ENDOMETRIALES:
- Núcleo:
- Más pequeño, oscuro, cromatina más grumosa (aunque uniforme en las bien
conservadas), más activo y degenerado que el de las endocervicales.
- Si están desnudos tienden a adherirse y superponerse entre sí (en las
glandulares)
- Más alargados, con citoplasma borroso y en láminas más laxas (estromales)
- Citoplasma:
- Escaso y borroso, basófilo, pálido como fondo ténue (glandulares)
- Degenerado, se pierde o presenta vacuolas.
- Grupos:
- Grumos densos o bolas aglomeradas, con superposición nuclear y tendencia
tridimensional
- Estroma: láminas laxas o filas (difícil de distinguir de las glandulares si están
degeneradas).

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- El epitelio de revestimiento, es monoestratificado y constituido por células
cilíndricas altas.
- Estas células son de dos tipos: secretoras de moco, que son más abundantes y
ciliadas, que son escasas y se encuentran aisladas o en pequeños grupos.
- El epitelio columnar sufre numerosas invaginaciones en el seno de una lámina
propia de tejido conectivo.
- Dichas invaginaciones del epitelio funcionan a modo de glándulas secretoras de
moco.
- Bajo el epitelio columnar simple se pueden apreciar las denominadas células de
reserva, las cuales poseen capacidad de desarrollo pluripotencial (componente
columnar y componente escamoso).
-
- El paso del ectocérvix al endocérvix, que suele ser un cambio brusco y se
denomina zona de transición. En la mujer en edad fértil sufre con frecuencia
fenómenos de metaplasia escamosa.
- Células endocervicales de forma cilíndrica o columnar
- Las células secretoras muestran un aspecto morfológico muy variable.
- Pueden ser alargadas, cortas, caliciformes, etc.
- Pueden estar solas o formando grupos.
- En grupos, si se ven los perfiles, muestran una empalizada,
- mientras que si se observan por encima tienen forma de panal, con bordes
poligonales.
- El citoplasma es finamente vacuolado y
- el núcleo tiene una cromatina fina y se suele situar en la zona basal.
- Alteraciones en el tamaño del núcleo son frecuentes, pero siempre mantienen
una textura cromatínica blanda.
- Las células ciliadas tienen un aspecto similar, sólo que muestran cilios en su
polo apical.
- Debido a la rápida degeneración de estas células puede desaparecer
completamente el citoplasma y sólo se observan núcleos desnudos.
- Se requiere la presencia de células endocervicales para que una muestra de
triple toma sea representativa.
- En casos de hiperplasia de células de reserva pueden observarse en citología
células con pequeños núcleos hipercromáticos y escasos citoplasmas
8 ZONA DE TRANSFORMACIÓN DEL ECTOCERVIX
- Anatomía e Histología:
- Se denomina zona de transformación, al lugar donde se produce la transición
entre el epitelio plano poliestratificado que recubre el ectocérvix y el epitelio
cilíndrico monoestratificado que recubre el endocérvix.
- En la niña y las mujeres jóvenes, esta zona coincide con el orificio cervical
externo, pero conforme la mujer se hace adulta el limite se sitúa por fuera del
orificio cervical externo al ectocérvix.
- El revestimiento epitelial por un epitelio cilíndrico en un medio adverso como
es la vagina sufre un proceso de adaptación sustituyéndose por un epitelio
plano poliestratificado en un proceso de metaplasia.

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- En las mujeres post menopausicas, la unión se sitúa dentro del canal
endocervical.
- Este área tiene muchísima importancia porque es aquí donde se originan los
primeros cambios que producen el carcinoma de cérvix.
- Citología:
- Las células metaplásicas tienen varios grados de maduración.
- Las más inmaduras son redondeadas, con núcleo central, regular, con
cromatina blanda.
- Conforme madura, el citoplasma se hace más poligonal, con extremos
puntiagudos, y el núcleo se hace más pequeño.
- Las células suelen descamar en planos con bordes celulares nítidos.
9 EPITELIO ESCAMOSO DE EXOCÉRVIX Y VAGINA:
- Histología (HE):El exocérvix es la mucosa que tapiza la parte del cuello
uterino que aflora en la vagina .
- Está formado por un epitelio pavimentoso estratificado no queratinizado,
de similares características al de la vagina, aunque un poco más
adelgazado, que descansa sobre una lámina propia de tejido conectivo.
- Histológicamente se distingue una capa profunda de células cúbicas
denominada estrato basal, conforme vamos ascendiendo las células muestran
un citoplasma mayor, constituyendo el estrato espinoso , y cuando las células
maduran, se hacen más alargadas y delgadas, constituyendo el estrato
superficial.
- Lás células se originan en la capa basal que es la que tiene capacidad para
dividirse y conforme ascienden en el epitelio maduran hasta que se descaman
en superficie.
- La diferenciación entre los distintos tipos celulares del epitelio se hace más
evidente en las preparaciones citológicas que en la histología.
- El epitelio escamoso, y el de la pared lateral de la vagina en especial, responde
también cíclicamente con cambios morfológicos a la acción de las hormonas
sexuales femeninas durante la etapa reproductora de la mujer.
- En la Citología cérvico vaginal VCE, se pueden ver los tres tipos celulares,
si bien la observación de células basales es poco frecuente en los frotis. Sus
características citológicas son:
- De forma generalizada, se puede decir que el tamaño de las células crece de las
capas inferiores a las superiores, mientras que el tamaño del núcleo disminuye.
- Con la tinción de Papanicolaou, el citoplasma de las células maduras toma un
color rosa a rojo claro, las demás células (parabasales. e intermedias) ;se tiñen
de color azul claro a verdoso.
- En las células profundas la cromatina nuclear se dispone como una fina red,
mientras que va madurando se densifica hasta que en las células superficiales
sólo se observa un masa uniforme sin ninguna textura.
- La transición entre los distintos tipos celulares es imprecisa y su delimitación es
sólo subjetiva

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- Células superficiales:
- Son iguales a las intermedias en tamaño y forma (40 a 80 micras, poligonal) y
se distinguen de ellas por su núcleo picnótico.
- Este núcleo, con Papanicolaou es oscuro o negro y pequeño , sin estructura
reconocible.
- El citoplasma es rosa o rojo claro, cambiando la apetencia por los colorantes.
- Suelen presentarme aisladas.
- De vez en cuando tienen algunos granos de queratohialina que suelen estar
agrupados en torno al núcleo
- Células intermedias:
- Son células aplanadas con forma poligonal,
- Con un diámetro de 40 a 80micras .
- Su citoplasma es azulado
- Aunque puede ser rosado en algunos casos. En procesos inflamatorios el
cambio del pH hace que el citoplasma se vuelva eosinofílico
- Los bordes celulares se encuentran ligeramente doblados.
- El núcleo es central , mayor que en las superficiales y con cromatina fina de
aspecto vesicular, donde apreciamos su detalle cromatínico. El aspecto del
núcleo es el principal criterio para tipificar estas células
- Se suelen presentar agrupadas
- Células parabasales:
- Son células redondas u ovales y están situadas en los estratos más profundos
del epitelio escamoso.
- Su diámetro oscila entre 15 y 30 micras.
- El citoplasma es denso y azulado (si bien menos intenso que el de las células
basales), y de limites netos.
- El núcleo está situado centralmente y presenta una fina estructura reticular.
- Son células poco abundantes en mujeres sexualmente maduras.
- Células basales:
- Se originan en el estrato basal y son las más pequeñas del epitelio (12 - 20
micras).
- Histológicamente son cúbicas, pero al descamarse adoptan una forma
redondeada u oval.
- Con la tinción de Papanicolaou. su citoplasma se tiñe de azul verdoso de forma
más intensa que el resto de las células.
- El núcleo es vesiculoso y ocupa 1/3 del área celular. La cromatina es fina y
granulosa.
- En los frotis citológicos no aparecen células basales, ni siquiera en las atrofias
más intensas..
- Por tanto su presencia indica siempre una alteración epitelial.

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10 OTROS ELEMENTOS CELULARES EN CITOLOGÍA VCE:
- Durante los primeros días del ciclo Además de los elementos epiteliales
descritos, otro tipo de células principalmente hematológicas, se pueden
encontrar en los frotis.
- Hematíes: La presencia de sangre en los frotis es muy común, viéndose los
hematies como células redondeadas, anucleadas y teñidas de una coloración
rojiza.
- Leucocitos: Siempre existen leucocitos en la vagina como mecanismo de
protección y por tanto su presencia en los frotis es habitual. En la toma
endocervical, entremezclados con el moco, su presencia es más llamativa.
- Su volumen duplica al de los hematíes, y su núcleo es irregular y lobulado.
El citoplasma se tiñe débilmente de azul o no se tiñe. Debido a su corta vida
media, se hallan en los frotis formas degenerativas variadas o sólo
fragmentos nucleares.
- Linfocitos: Son mucho más raros en los frotis.
- Suelen ser pequeños, con núcleo redondeado y muy escaso citoplasma.
- Existen linfocitos más grandes y que muestran un citoplasma más grande y
azulado. Estos pueden provocar problemas de diagnóstico diferencial con las
células de displasia grave, sobre todo cuando hay muchos, como en el caso
de la cervicitis folicular.
- Histiocitos: Son muy frecuentes.
- Tienen una forma y un tamaño muy variado, con un citoplasma laxo.
- El núcleo es ovoideo, alargado o reniforme y habitualmente se sitúa
excéntricamente en el citoplasma.
- Pueden estar aislados o formando grupos, y a veces están inmersos en masas
de moco.
- Se pueden encontrar formas binucleadas o multinucleadas e incluso células
gigantes.
- Se encuentran más frecuentemente en los frotis menstruales, en
inflamaciones o en tumores necrosados.
- Plantean graves problemas de diagnóstico diferencial con células
endocervicales, endometriales o displásicas.
- Fibroblastos: Son poco frecuentes, son fusiformes, alargados y el núcleo
no muestra atipia. Sólo se observan cuando ha habido una erosión reciente
del epitelio.
- Espermatozoides:Suelen ser relativamente frecuentes.

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- Tienen una cabeza donde está el núcleo, que se ve como un punto, cuando
se observa con objetivos de bajo aumento; pudiéndose observar una cola
filiforme con objetivo de gran aumento.
- Se presentan agrupados como en “bancos de peces”.
- Se debe hacer diagnóstico diferencial con esporas cuando pierden la cola en
procesos degenerativos.
11 FLORA VAGINAL NORMAL:
- La flora vaginal varía de persona a persona, pero normalmente el organismo
predominante es el Lactobacillus o bacilo de Döderlein.
- Es un bacilo Gram positivo que se tiñe de azul pálido con Papanicolaou.
- De forma alargada y tamaño variable
- Es particularmente abundante en los frotis citolíticos, con abundantes células
intermedias en la fase premenstrual del ciclo. Transforma el glucógeno que
acumulan en ácido láctico, por un mecanismo de glucólisis anaeróbico, creando
un ambiente ácido que impide el desarrollo de microorganismos patógenos.