PRACTICA N° 3

1. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Nombre: Valeria Alejandra Sánchez Álvarez
Docente: Bioq. Farm. Carlos García MsC.
Curso: Quinto Año Paralelo: “B”
Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 17 de Junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 24 de Junio del 2014
PRÁCTICA N° 3
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR METANOL
Animal de Experimentación: Cobayo café.
Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la aplicación de Metanol vía
intraperitoneal.
2. Observar las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el Metanol.
3. Reconocer mediante pruebas de identificación la presencia de Metanol.
MATERIALES
 Bata de Laboratorio
 Bisturí
 Cronómetro
 Equipo de destilación.
 Equipo de disección
 Erlenmeyer
 Guantes de látex
 Jeringuilla de 10cc
 Mascarilla
 Pipetas
 Probeta
 Tubos de ensayo
 Vaso de precipitación
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SUSTANCIAS
1. Ácido Clorhídrico.
2. Ácido cromotropico
3. Ácido Oxálico
4. Ácido Sulfúrico puro
5. Ácido tartárico
6. Alcohol
7. Cloruro de Fenil Hidracina al 4%
8. Cloruro Ferrico.
9. Ferricianuro de potasio al 5-10%
10. Fushinabisufatada (Reactivo de Schiff)
11. Hidróxido de Potasio al 12%
12. Hidróxido de Sodio
13. Leche
14. Metanol
15. Nitroprusiato de Sodio al 2.5%
16. Permanganato de potasio al 1%
PROCEDIMIENTO
1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo.
2. Administrar 10ml de Metanol por vía intraperitoneal
3. Colocar el cobayo en el Panema, para la observación.
4. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte.
5. Colocamos al cobayo en la tabla de disección.
6. Procedemos rasurarle toda la parte abdominal para facilitar la disección.
7. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir al cobayo, y observamos los sus órganos
teniendo en cuenta los cambios que se han presentado.
8. Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el
balón de destición junto con las perlas.
9. Añadimos 25ml de ácido tartárico.
10. Procedemos a destilar, en el equipo de Destilación.
11. El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor, se
practican las diferentes reacciones de reconocimiento.
Reacciones y Conducta Post-Administración
Tiempo de muerte: 1 minuto (7:52 – 7:53)
Síntomas:
 Agitación en la respiración,
 Convulsión e Hipoxia
 Presencia de Orina

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Sustancia toxica por
vía Intraperitonial
Observamos
sus manifestaciones
Rasurando al
cobayo
 Secreción ocular
 Somnolencia
 Muerte
Reacciones:
1. Reacción de Schiff.- 1ml de muestra añadimos 1ml de permanganato de potasio al
1%, mezclamos y adicionamos 3 gotas de ácido sulfúrico, dejar reposar por 3
minutos, agregar unas gotas de solución saturada de ácido oxálico(hasta que
decolore la muestra), agregarle nuevamente 3 gotas de ácido sulfúrico puro, añadir
1ml de Fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff). Produce un color violeta intenso si
es positivo.
2. Reaccion de Rimini.- 5ml del destilado agregar 10 gotas de cloruro de
fenilhidracina al 4% + 1ml de solución de hidróxido de sodio. Produce una
coloración azul intensa si es positivo.
3. Con lla fenil hidracina.- Acidificar 1medio fuertemente con ácido clorhídrico y
agregamos 1 ml de muestra, a esto le agregamos un pedacito de cloruro de fenil
hidracina, 3 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5%, posterior a esto
añadir unas gotas de hidróxido de potasio al 12%. Produce una coloración de rojo
grosella en caso de ser positivo.
4. Con el ácido Cromotrópico.- 1 ml de muestra + ácido cromotrópico+ 3 gotas de
ácido sulfúrico, llevarlo a la llama. Produce una coloración roja después de
calentarla a la llama si es positivo.
5. Reacción de Hehner.-1 gota del destilado+4 ml de leche+ 3 gotas de acido
sulfúrico concentrado con cloruro férrico). Produce coloración violeta o un azul
violeta si es positivo.
GRAFICOS
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Acidificando con ácido
tartárico.
Armamos el equipo
de destilación.
Destilamos colocando
con 50 perlas de
vidrio
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN LA MUESTRA
Muestra Primaria
Convertinos la muestra de metanol a metanal; calentando una lamina de cobre al rojo vivo.
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Disección del
cobayo
Colocando las
vísceras y fluidos
Acidificando con
ácido tartárico.

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Reconocimiento en Medios Biológicos
 Reacción de Schiff
Reacción Positivo no característico coloración violeta en la capa superficial.
 Reacción de Rimini
Reacción Positivo Característico Coloración azul
 Reacción con la fenil hidracina.
Reacción Positivo Característico Coloración rojiza

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 Reacción con ácido Cromotrópico.
Reacción Positivo característico Coloración roja.
 Reacción de Hehner
Reacción Reacción Negativo Coloración palida.
OBSERVACIONES
Mediante reacciones de identificación se puede identificar la presencia de Metanol
sustancia que es muy toxica.
Se observaron los efectos que causa el Metanol en el cobayo.

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CONCLUSIONES
Al culminar la practica puedo decir que al realizar la misma se logro identificar los efectos
que causa el Metanol sobre un organismo, concluyendo que la exposición directa de el
mismo es muy toxico.
Las pruebas de identificación evidenciaron la presencia de él toxico Metanol en el cobayo.
RECOMENDACIONES
 Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla,
zapatones.
 Evitar el contacto directo del toxico, ya que puede causar serios daños.
 Trabajar con absoluta seriedad y responsabilidad para evitar accidentes.
CUESTIONARIO
Que es el Metanol?
Es un derivado natural e inodoro del metabolismo de muchos alimentos consumidos
normalmente.
Que son Intoxicaciones?
Se produce por exposición, ingestión, inyección o inhalación de una sustancia toxica
siempre y cuando sea de composición química ya que si el compuesto es natral se le
llamara ingesta excesiva y esto por cualquier sustancia química, natural, procesada o
creada.
Es peligroso para consumo humano?
Si el consumo de metanol genera una serie de reaciones como segera,dolor de cabeza y la
muerte si no es tratada a tiempo.
GLOSARIO
Somnolencia
Es la necesidad exagerada para el sueño. Es un estado en el que ocurre una fuerte necesidad
de dormir o en el que se duerme durante periodos prolongados.
Irritación
Estado inflamatorio o una reacción dolorosa del organismo causados principalmente por
algún tipo de alergia a agentes químicos o a otros estímulos.
Hipoxia
Es un estado en el cual el cuerpo completo o una región del cuerpo, se ve privado del
suministro adecuado de oxigeno.

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Convulsión
Es un síntoma transitorio caracterizado por la actividad neuronal en el cerebro que conlleva
a hallazgos físicos peculiares como la contracción y distensión repetida y temblorosa de
uno o varios músculos de forma brusca y generalmente violenta.
Cefalea
Hace referencia a los dolores y molestias en la región de la cabeza.
BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA
INTOXICACIONES (en línea) (Fecha de Consulta: 15 de Junio del 2014) Disponible en:
www.webconsultas.com/categoria/salud-al-dia/intoxicaciones
SCIELO(en línea) (Fecha de Consulta: 15 de Junio del 2014) Disponible en:
www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=s17288-5917200002000010
IRRITACION(en línea) (Fecha de Consulta: 15 de Junio del 2014) Disponible en:
es.thefreedictionary.com/irritación
MEDLINEPLUS(en línea) (Fecha de Consulta: 15 de Junio del 2014) Disponible en:
www.nlm.nih.gov/medilineplus/spanish/ency/article
MEDLINEPLUS(en línea) (Fecha de Consulta: 15 de Junio del 2014) Disponible en:
www.nlm.nih.gov/medilineplus/spanish/seizures.html
Machala, 17 de Junio del 2014
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Valeria Alejandra Sánchez Álvarez Bioq. Carlos García. Mg. Sc.
Estudiante Docente
Revisado
Día Mes Año

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ANEXOS:

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METANOL
El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro y volátil a temperatura ambiente. Por sí mismo
es inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos.
Fuentes de exposición.
Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la fabricación de
plásticos, material fotográfico, componentes de la gasolina, anticongelantes, líquido limpia
cristales, líquido para fotocopias, limpiadores de hogar.
La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o intencionada. También se
han dado casos de intoxicación por adulteración de bebidas alcohólicas.
Toxicocinética.
Cuando se ingiere, se absorbe rápidamente a partir del tracto gastrointestinal, y los niveles
en la sangre alcanzan su pico a los 30-60 minutos de la ingestión, dependiendo de la
presencia o ausencia de comida. La intoxicación usualmente se caracteriza por un periodo
de lactancia (40 minutos a 72 horas), durante el cual se observan síntomas. Esta fase se
sigue de acidosis con anión gap elevado y de síntomas visuales.
El metabolismo del metanol comprende la formación de formaldehido por una oxidación
catalizada a través del alcohol deshidrogenasa. El formaldehido es 33 veces más toxico que
el metanol, pero es rápidamente convertido a ácido fórmico, que es 6 veces más toxico que
el metanol. Los niveles de ácido fórmico se correlacionan con el grado de acidosis y la
magnitud del anión gap. También la mortalidad y los síntomas visuales se correlacionan
con el grado de acidosis.
Mecanismo de acción.
El metanol se absorbe por vía oral a través de la piel, y por vía respiratoria. Su volumen de
distribución es de 0.6 L/Kg. Se distribuye en el agua corporal y es prácticamente insoluble
en la grasa. El hígado lo metaboliza en su mayor parte a través del alcohol-deshidrogenasa,
hacia formaldehido, que es rápidamente convertido a ácido fórmico por el aldehído-
deshidrogenasa, el cual es finalmente oxidado a dióxido de carbono. El 3-5% se excreta por
el pulmón y el 12% por vía renal. La vida media es de unas 12 horas, que puede reducirse a
2.5 mediante hemodiálisis. La eliminación sigue una cinética de primer orden a baja dosis y
durante la hemodiálisis, mientras que sigue una cinética de orden cero a altas dosis.
Se piensa que el ácido fórmico es el responsable de la toxicidad ocular asociada a la
intoxicación por metanol, por inhibición de la citocromo oxidasa en el nervio óptico. Tanto
el ácido fórmico, como el ácido láctico, parecen ser los responsables de la acidosis
metabólica y del descenso del bicarbonato.
El metanol afecta principalmente al SNC, produciendo deterioro del nivel de conciencia,
convulsiones y coma. La dosis toxica es de 10 a 30ml, considerándose potencialmente letal

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una dosis de 60 a 240ml; los niveles plasmáticos tóxicos son superiores a 0.2g/l, y
potencialmente mortales los que superan 1g/l.
Cuadro clínico.
La intoxicación por metanol habitualmente se produce por ingestión, pero también puede
ocurrir por absorción cutánea y por inhalación. El inicio del cuadro puede ser precoz, o
retrasarse hasta 24 horas, si se han ingerido también alimentos. Los principales signos y
síntomas son:
a. Perdida de agudeza visual con edema de papila. Además, puede aparecer nistagmus
(movimiento involuntario de los ojos. Usualmente es de lado a lado, pero a veces es
de arriba abajo o en forma circular: es un movimiento rotario, incontrolable) y
alteración de los reflejos pupilares. Asimismo, puede desarrollarse pérdida de visión
y ceguera irreversible por atrofia del nervio óptico.
b. Taquipnea mediada por acidosis y parada respiratoria súbita.
c. Síntomas digestivos como dolor abdominal, anorexia, náuseas y vómitos,
acompañados, a veces, de aumento de transaminasas y enzimas pancreáticos.
d. Síntomas neurológicos que van desde la confusión hasta el coma profundo,
convulsiones, cefalea, vértigo, infarto de ganglios basales, etc.
e. Alteraciones hemodinámicas como bradiarritmias, hipotensión, y depresión
miocárdica.
f. La acidosis metabólica es un hallazgo constante en todos los casos graves, y se debe
principalmente al ácido fórmico. También está aumentado el anión gap.
Diagnóstico.
El diagnóstico puede hacerse por la historia clínica a través del paciente o de los
acompañantes. Sin una historia clínica de ingestión de metanol, el diagnóstico diferencial es
amplio, e incluye cetoacidosis diabética, pancreatitis, nefrolitiasis, meningitis, hemorragia
subaracnoidea, etc.
En estos pacientes, está indicado realizar al ingreso analítica de sangre y orina de rutina.
Además, es importante obtener una gasometría arterial para determinar acidosis metabólica.
El diagnóstico de certeza nos lo dará el nivel de metanol en sangre.
Tratamiento.
El tratamiento inicial de la intoxicación aguda por metanol es de soporte. Es prioritario
asegurar la vía aérea y mantener una ventilación y circulación adecuadas. La recuperación
del paciente parece estar directamente relacionada con el intervalo de tiempo transcurrido
entre la ingestión del tóxico y el inicio del tratamiento. También depende del grado de
acidosis, que a su vez, es también en parte, función del tiempo.
Para prevenir la absorción se hará lavado gástrico, a ser posible en las dos primeras horas o
en las 4 primeras horas si la ingesta se acompañó de alimentos. El carbón activado y los
catárticos son ineficaces. Puede realizarse infusión de etanol para bloquear la
metabolización hepática del metanol por inhibición competitiva del alcohol deshidrogenasa,
y forzar la eliminación del tóxico por rutas extra hepáticas. Para conseguir los niveles

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plasmáticos óptimos de etanol (entre 1 y 2 g/l), se administra un bolo vía intravenosa de 1.1
ml/Kg disuelto en 100 ml de suero glucosado al 5% a pasar en 15 minutos; a continuación
0.1 ml/Kg/h disueltos cada vez en 100ml de suero glucosado al 5%; si se trata de un
alcohólico crónico, la dosis de mantenimiento es de 0.2 ml/Kg/h. La perfusión de etanol
debe hacerse por vía central para evitar tromboflebitis. Deben controlarse periódicamente
los niveles de etanol, y ajustar la dosis de perfusión.
Es necesario el aporte de volumen para la deshidratación y la inhibición de la hormona
antidiurética, que se realiza con suero salino. Se administrara bicarbonato para corregir la
acidosis. Se debe administrar ácido fólico que se aumenta la oxidación de ácido fórmico a
dióxido de carbono y agua.
La diuresis forzada no es eficaz, pero con la hemodiálisis se consigue depurar tanto el
metanol como el ácido fórmico y el formaldehido. Los criterios para indicar la diálisis
serian cualquiera de los siguientes: metanol >0.5g/l, acidosis metabólica con pH <7.20,
trastornos visuales o disminución de nivel de conciencia. Si se indica diálisis deben
mantenerse durante varias horas, y no interrumpirse hasta que el metanol sea <0.2g/l. Para
controlar las convulsiones se utiliza diazepan y fenitoína.
Reacciones de reconocimiento
Reconocimiento en medios biológicos
Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prácticamente no existe por
lo que es necesario en el respectivo aldehído, con tal propósito. Este se consigue mediante
un sencillo método que consiste calentar al rojo una lámina de cobre (exenta de grasa y
otras impurezas) e introducirla en el destilado, repitiéndose la operación hasta cuando la
lámina comienza a desprender pequeñas partículas color gris en el destilado, lo cual nos
indica que hemos conseguido el propósito de transformar el metanol en metanal.
En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el
reconocimiento de formaldehído, así:
1. Reacción de Schiff.- Se produce color violeta
2. Reacción de Rimini.- Origina color azul intenso.
3. Con la fenil hidracina.- Da color rojo grosella.
4. Reacción de Marquis.- Se obtiene un color violeta.
5. Con el ácido cromotrópico.- Da color rojo.
6. Reacción de Hehner.- Se produce color violeta o color rojo violeta.