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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumna: Pardo Leiva Yasmani Carlos
Curso: Quinto Año Paralelo: “B”
Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 17 de Junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 24 de Junio del 2014
Grupo N°: 3
PRÁCTICA N° 3
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR METANOL
Animal de Experimentación: Cobayo.
Vía de Administración: Vía Intraperitonial.
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por Metanol puro.
2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el Metanol.
3. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de Metanol.
MATERIALES
 Jeringuilla de 10cc
 Probeta
 Cronómetro
 Equipo de disección
 Bisturí
 Vaso de precipitación
 Erlenmeyer
 Equipo de destilación.
 Tubos de ensayo
 Pipetas
 Bata de Laboratorio
 Guantes de látex
 Mascarilla
 Gorro
 Zapatone
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SUSTANCIAS
 Metanol Puro.
 Lámina de Cobre
 Solución de Ácido tartárico.
 NaOH 0.1 N
 Permanganato de potasio al 1%
 Ácido sulfúrico puro
 Ácido oxálico
 Fushina bisulfatada
 Cloruro de fenilhidracina al 4%
 Nitroprusiato de sodio al 2.5 %
 Ácido clorhídrico
 Cloruro de fenil hidracina
 Ferricianuro de potasio al 5%,
 Ácido cromotrópico..

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PROCEDIMIENTO
1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo.
2. La bioseguridad: colocarse la mascarilla, bata de laboratorio, gorro, zapatones y los
guantes.
3. Disponer y medir la sustancia que se va a administrar (Metanol).
4. Administrar 10ml de Metanol puro por vía intraperitoneal.
5. Colocar el cobayo en la panema.
6. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo muere.
7. Amarramos al cobayo en la tabla de disección.
8. Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte.
9. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir al cobayo.
10. Observamos los cambios que presentan sus órganos.
11. Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el
recipiente adecuado (Vaso de precipitación).
12. A las vísceras ya picadas le añadimos 25ml de ácido tartárico. Esto lo llevamos a un balón.
13. Procedemos a destilar.
14. El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor, se practican las
diferentes reacciones de reconocimiento.
Reacciones y Conducta Post-Administración
Tiempo de muerte: 1 minuto 20 segundos (7:52 – 7:53)
Síntomas: Picazón, Convulsión, Secreción Ocular, Presencia de Orina.
7.52 Se inyectó la dosis al cobayo. Le presenta picazón.
7:53 Cae al suelo presentando convulsión, y a los 20 segundos Muere.
GRAFICOS
Administrando la sustancia toxica
por vía Intraperitonial
Colocamos el cobayo
En la panema y observamos
sus manifestaciones
Rasurando al cobayo.
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3

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Disección del cobayo Colocando las vísceras y fluidos (picadas lo más finas posibles)
Acidificando con ácido
tartárico.
Destilamos colocando
con 50 perlas de vidrio
Realizando las reacciones en el destilado que obtuvimos.
Armamos el equipo
de destilación.
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN LA MUESTRA
Reconocimiento en Medios Biológicos
 Reacción de Schiff
Reacción Positivo no característico coloración violeta en la capa superficial.
 Reacción de Rimini
Reacción Positivo Característico Coloración azul intenso
 Reacción con la fenil hidracina.
Reacción Positivo no característico Coloración roja
Reacción de Marquis.
Reacción Positivo Característico Coloración violeta.

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 Reacción con ácido Cromotrópico.
Reacción Reacción Negativa No se produjo Coloración roja.
 Reacción de Hehner
Reacción Reacción Negativa No se produjo Coloración violeta
OBSERVACIONES
Pude observar que al administrar Metanol puro por vía intraperitoneal al cobayo, éste presentó
picazón, convulsiones, se orinó, se observó además secreción ocular y por ultimo presentó
necropsia de la mayor parte de las vísceras al momento de abrirlo.
Observar con que sustancia se va a trabajar, ya que por su toxicidad se debe usar guantes y
mascarilla.
CONCLUSIONES
Al final de esta práctica la reacción que presenta el cobayo ante la intoxicación con metanol puro,
aprendimos como el metanol en una sustancia que puede provocar grandes daños en los organismos
vivos, observamos lo que provoca internamente el metanol y los signos que presento el cobayo
cuando a este se le administro la sustancia, cabe mencionar que la dosis depende del peso del ser
vivo en este caso del cobayo.
RECOMENDACIONES
 Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
 Realizar las reacciones de identificación en la Sorbona.
 No pipetear las sustancias con la boca.
 Preparar correctamente las sustancias a la concentración que se requiere.

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 Tener mucho cuidado con el líquido y vísceras ya que contienen concentraciones del
metanol.
CUESTIONARIO
¿Cuáles son las aplicaciones y usos del metanol?
El metanol tiene una gran variedad de aplicaciones industriales. Su uso más frecuente como materia
prima para la producción de metil-butil-éter, que es un aditivo para la gasolina. Se emplea en la
fabricación de formaldehído, ácido acético, cloro metanos, metacrilato de metilo, metilaminas,
dimetil tereftalato, o como solvente o anticongelante en pinturas en aerosol, pinturas de pared,
limpiadores para carburadores y compuestos para limpiar parabrisas de automóviles.
El metanol también se emplea como anticongelante en vehículos, solvente de tintas, tintes, resinas,
adhesivos, biocombustibles y aspartame. El metanol puede ser también añadido al etanol para hacer
que éste no sea apto para el consumo humano (el metanol es altamente tóxico) y para vehículos de
modelismo con motores de combustión interna.
El metanol es un sustituto potencial del petróleo. Se puede usar directamente como combustible
reemplazando la gasolina en las mezclas gasolina-diesel. El metanol tiene mayor potencial de uso
respecto a otros combustibles convencionales debido a que con esta sustancia se forma menor
cantidad de ozono, menores emisiones de contaminantes.
¿Cuáles son los síntomas más comunes por intoxicación con metanol?
Los síntomas pueden abarcar:
 Pulmones y vías respiratorias
o dificultad respiratoria
o paro respiratorio
 Ojos
o ceguera
o visión borrosa
o dilatación de las pupilas
 Corazón y vasos sanguíneos
o convulsiones
o presión arterial baja
 Sistema nervioso:
o comportamiento agitado
o coma
o mareo
o dolor de cabeza
o crisis epiléptica
 Piel y uñas
o uñas y labios azulados
 Estómago e intestinos
o dolor abdominal (fuerte)
o diarrea
o problemas con la función
hepática
o náuseas
o pancreatitis
o vómito
 Otros: fatiga, calambres en las piernas, debilidad
¿Cuál es la Dosis Letal del Metanol?
Ingerir elevadas cantidades de metanol puede causar dolor de cabeza, mareo, náusea, vómitos y
muerte (de 20 a 25 g se tiene una dosis mortal). Tomar más de medio litro o más puede causar
ceguera o pérdida de la visión, ya que puede dañar seriamente el nervio óptico. Una exposición

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crónica puede ser causa de daños al hígado o de cirrosis. La dosis letal de metanol para los humanos
varía entre 0,3 gramos y 1 gramo por kilogramo de masa corpórea.
BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA
 Toxicidad por metanol y su efecto sobre las vías visuales
Disponible en: vitae.ucv.ve/pdfs/VITAE_3373.pdf
 Metanol 4.19
Disponible en: www.minambiente.gov.co/documentos/Guia19.pdf
Revisado
Día Mes Año
Machala, 24 de Junio del 2014
______________________ _____________________
Yasmani Pardo Leiva Bioq. Carlos García. Mg. Sc.
Estudiante Catedrático
GLOSARIO
Anión gap: El anión gap es la diferencia entre los aniones plasmáticos que habitualmente no se
miden (proteínas, sulfatos, fosfatos y ácidos orgánicos como lactato y piruvato) y cationes
plasmáticos que habitualmente no se miden (K+, Ca2+
, Mg2+
). El anion gap normal es entre 8 - 12
mEq/l.
Cetoacidosi Diabética: La cetoacidosis diabética (CAD) hace referencia a una descompensación de
la diabetes mellitus que, junto con el estado hiperosmolar y la hipoglucemia - secundaria al
tratamiento, son las tres principales complicaciones agudas de la diabetes mellitus. A diferencia de

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las complicaciones crónicas, esta complicación se desarrolla en cuestión de horas y pone en peligro
la vida del paciente, por lo que se considera una urgencia médica.
Metanol: También conocido como alcohol de madera o alcohol metílico (o raramente alcohol de
quemar), es el alcohol más sencillo. Su fórmula química es CH3OH (CH4O).
Nefrolitiasis: Es la presencia de litos (piedras) en el riñón, y cuando éstos se encuentran en la vía
urinaria, se denomina al cuadro Urolitiasis, debe ser manejada por un equipo de médicos
(Nefrólogos, Urólogos, y eventualmente Endocrinólogos).
Nistagmus: Es un tipo de movimiento involuntario de los ojos. Usualmente es de lado a lado, pero
a veces es de arriba abajo o en forma circular (movimiento rotatorio incontrolable). El movimiento
varía entre lento y rápido y usualmente involucra ambos ojos. El nistagmus ocurre más
frecuentemente en la infancia, pero también puede adquirirse después en la vida.
Vértigo: Es una sensación ilusoria o alucinatoria de movimiento de los objetos que nos rodean o de
nuestro propio cuerpo, por lo común, una sensación de giro. El vértigo suele deberse a un trastorno
en el sistema vestibular.
ANEXOS:

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METANOL
El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro y volátil a temperatura ambiente. Por sí mismo es
inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos.
Fuentes de exposición.
Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la fabricación de plásticos,
material fotográfico, componentes de la gasolina, anticongelantes, líquido limpia cristales, líquido
para fotocopias, limpiadores de hogar.
La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o intencionada. También se han
dado casos de intoxicación por adulteración de bebidas alcohólicas.
Toxicocinética.
Cuando se ingiere, se absorbe rápidamente a partir del tracto gastrointestinal, y los niveles en la
sangre alcanzan su pico a los 30-60 minutos de la ingestión, dependiendo de la presencia o ausencia
de comida. La intoxicación usualmente se caracteriza por un periodo de lactancia (40 minutos a 72
horas), durante el cual se observan síntomas. Esta fase se sigue de acidosis con anión gap elevado y
de síntomas visuales.
El metabolismo del metanol comprende la formación de formaldehido por una oxidación catalizada
a través del alcohol deshidrogenasa. El formaldehido es 33 veces más toxico que el metanol, pero es
rápidamente convertido a ácido fórmico, que es 6 veces más toxico que el metanol. Los niveles de
ácido fórmico se correlacionan con el grado de acidosis y la magnitud del anión gap. También la
mortalidad y los síntomas visuales se correlacionan con el grado de acidosis.
Mecanismo de acción.
El metanol se absorbe por vía oral a través de la piel, y por vía respiratoria. Su volumen de
distribución es de 0.6 L/Kg. Se distribuye en el agua corporal y es prácticamente insoluble en la
grasa. El hígado lo metaboliza en su mayor parte a través del alcohol-deshidrogenasa, hacia
formaldehido, que es rápidamente convertido a ácido fórmico por el aldehído-deshidrogenasa, el
cual es finalmente oxidado a dióxido de carbono. El 3-5% se excreta por el pulmón y el 12% por vía
renal. La vida media es de unas 12 horas, que puede reducirse a 2.5 mediante hemodiálisis. La
eliminación sigue una cinética de primer orden a baja dosis y durante la hemodiálisis, mientras que
sigue una cinética de orden cero a altas dosis.
Se piensa que el ácido fórmico es el responsable de la toxicidad ocular asociada a la intoxicación
por metanol, por inhibición de la citocromo oxidasa en el nervio óptico. Tanto el ácido fórmico,
como el ácido láctico, parecen ser los responsables de la acidosis metabólica y del descenso del
bicarbonato.
El metanol afecta principalmente al SNC, produciendo deterioro del nivel de conciencia,
convulsiones y coma. La dosis toxica es de 10 a 30ml, considerándose potencialmente letal una
dosis de 60 a 240ml; los niveles plasmáticos tóxicos son superiores a 0.2g/l, y potencialmente
mortales los que superan 1g/l.

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Cuadro clínico.
La intoxicación por metanol habitualmente se produce por ingestión, pero también puede ocurrir
por absorción cutánea y por inhalación. El inicio del cuadro puede ser precoz, o retrasarse hasta 24
horas, si se han ingerido también alimentos. Los principales signos y síntomas son:
a. Perdida de agudeza visual con edema de papila. Además, puede aparecer nistagmus
(movimiento involuntario de los ojos. Usualmente es de lado a lado, pero a veces es de
arriba abajo o en forma circular: es un movimiento rotario, incontrolable) y alteración de
los reflejos pupilares. Asimismo, puede desarrollarse pérdida de visión y ceguera
irreversible por atrofia del nervio óptico.
b. Taquipnea mediada por acidosis y parada respiratoria súbita.
c. Síntomas digestivos como dolor abdominal, anorexia, náuseas y vómitos, acompañados, a
veces, de aumento de transaminasas y enzimas pancreáticos.
d. Síntomas neurológicos que van desde la confusión hasta el coma profundo, convulsiones,
cefalea, vértigo, infarto de ganglios basales, etc.
e. Alteraciones hemodinámicas como bradiarritmias, hipotensión, y depresión miocárdica.
f. La acidosis metabólica es un hallazgo constante en todos los casos graves, y se debe
principalmente al ácido fórmico. También está aumentado el anión gap.
Diagnóstico.
El diagnóstico puede hacerse por la historia clínica a través del paciente o de los acompañantes. Sin
una historia clínica de ingestión de metanol, el diagnóstico diferencial es amplio, e incluye
cetoacidosis diabética, pancreatitis, nefrolitiasis, meningitis, hemorragia subaracnoidea, etc.
En estos pacientes, está indicado realizar al ingreso analítica de sangre y orina de rutina. Además, es
importante obtener una gasometría arterial para determinar acidosis metabólica. El diagnóstico de
certeza nos lo dará el nivel de metanol en sangre.
Tratamiento.
El tratamiento inicial de la intoxicación aguda por metanol es de soporte. Es prioritario asegurar la
vía aérea y mantener una ventilación y circulación adecuadas. La recuperación del paciente parece
estar directamente relacionada con el intervalo de tiempo transcurrido entre la ingestión del tóxico y
el inicio del tratamiento. También depende del grado de acidosis, que a su vez, es también en parte,
función del tiempo.
Para prevenir la absorción se hará lavado gástrico, a ser posible en las dos primeras horas o en las 4
primeras horas si la ingesta se acompañó de alimentos. El carbón activado y los catárticos son
ineficaces. Puede realizarse infusión de etanol para bloquear la metabolización hepática del metanol
por inhibición competitiva del alcohol deshidrogenasa, y forzar la eliminación del tóxico por rutas
extra hepáticas. Para conseguir los niveles plasmáticos óptimos de etanol (entre 1 y 2 g/l), se
administra un bolo vía intravenosa de 1.1 ml/Kg disuelto en 100 ml de suero glucosado al 5% a
pasar en 15 minutos; a continuación 0.1 ml/Kg/h disueltos cada vez en 100ml de suero glucosado al
5%; si se trata de un alcohólico crónico, la dosis de mantenimiento es de 0.2 ml/Kg/h. La perfusión

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de etanol debe hacerse por vía central para evitar tromboflebitis. Deben controlarse periódicamente
los niveles de etanol, y ajustar la dosis de perfusión.
Es necesario el aporte de volumen para la deshidratación y la inhibición de la hormona
antidiurética, que se realiza con suero salino. Se administrara bicarbonato para corregir la acidosis.
Se debe administrar ácido fólico que se aumenta la oxidación de ácido fórmico a dióxido de
carbono y agua.
La diuresis forzada no es eficaz, pero con la hemodiálisis se consigue depurar tanto el metanol
como el ácido fórmico y el formaldehido. Los criterios para indicar la diálisis serian cualquiera de
los siguientes: metanol >0.5g/l, acidosis metabólica con pH <7.20, trastornos visuales o
disminución de nivel de conciencia. Si se indica diálisis deben mantenerse durante varias horas, y
no interrumpirse hasta que el metanol sea <0.2g/l. Para controlar las convulsiones se utiliza
diazepan y fenitoína.
Reacciones de reconocimiento
Reconocimiento en medios biológicos
Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prácticamente no existe por lo ques
es necesario en el respectivo aldehído, con tal propósito. Este se consigue mediante un sencillo
método que consiste calentar al rojo una lámina de cobre (exenta de grasa y otras impurezas) e
introducirla en el destilado, repitiéndose la operación hasta cuando la lámina comienza a desprender
pequeñas partículas color gris en el destilado, lo cual nos indica que hemos conseguido el propósito
de transformar el metanol en metanal.
En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el
reconocimiento de formaldehído, así:
1. Reacción de Schiff.- Se produce color violeta
2. Reacción de Rimini.- Origina color azul intenso.
3. Con la fenil hidracina.- Da color rojo grosella.
4. Reacción de Marquis.- Se obtiene un color violeta.
5. Con el ácido cromotrópico.- Da color rojo.
6. Reacción de Hehner.- Se produce color violeta o color rojo violeta.