2. El ARN mensajero obtenido
después de la transcripción se
conoce como transcrito primario
o ARN precursor (pre-ARN), que
en la mayoría de los casos no se
libera del complejo de
transcripción en forma totalmente
activa, sino que ha de sufrir
modificaciones antes de ejercer su
función (procesamiento o
maduración del ARN).
3. Maduración
Procariotas: Si el ARN formado es ARNm, no
hay maduración; si se trata de ARNr o ARNt,
hay un transcrito primario que sufre un
proceso de 'cortes y empalmes.
Eucariotas: Maduración se produce en el
núcleo y la hace un enzima llamada RNPpn,
que elimina los nuevos intrones (I) formados.
4.
5.
6. Comienza a modificarse poco Se trata de una modificación covalente
después de la trascripción que implica 3 tipos de enzimas
Esta modificación conduce a la
incorporación singular de un Las enzimas son la fosfatasa,
nucleótido protector sobre el NPT en guanililtranferasa, y la metilasa
la posición 5’ terminal del ARN
Este nucleótido es
normalmente purínico,
ATP, el mismo que
actuó como cebador
en la transcripción
7.
8. Se da en 2 fases
a) Una desfosforilación previa
b) guanililación a costa del GTP
9. El conjunto de estas 2 reacciones es la
En la segunda reacción se
incorporación al ARNm de tan solo un
transfiere un grupo guanililo
residuo de guanosina
La estructura terminal
Esta caperuza tiene una estructura resultante se conoce como
singular que no se la encuentra en caperuza de guanina o
ningún otro nucleótido caperuza 5’
Además ejerce un efecto protector de la molécula frente a las
exonucleasas, marca el pre ARNm para su empleo como
sustrato en otras reacciones de procesamiento del núcleo y
sirve como punto de union del ARNm a los ribosomas al
iniciar la síntesis proteica
10.
11. Los 3 primeros nucleótidos de la Estas enzimas emplean el S- adenosil – L
5’ son modificados por las - metionina como coenzima donadora
metiltranferasas del grupo metilo
La estructura terminal
Esta metilacion puede tener resultante se conoce como
lugar sobre varias posiciones caperuza de guanina o
caperuza 5’
En el n7 de la guanosina En el 2’- OH de la ribosa En el 2’ OH de la ribosa
terminal para formar la adyacente forma la siguiente reacción
caperuza 0, la reacción caperuza 1 la reacción forma la caperuza 2 la
la cataliza la ARNm la cataliza la ARNm cataliza la ARNm
(guanina – N7- (nucleosido -2’- (nucleosido -2’-
)metiltranferasa O)metiltranferasa O)metiltranferasa
12.
13.
14. 0 Otra peculiaridad del ARNm eucariotico es que el
extremo 3’ del ARNm no corresponde a la posición
donde se termina la transcripción si no que deriva de
la molécula de pre – ARNm o hetero ARN
15.
16.
17. Sobre el extremo 3’-OH
resultante del corte por Como consecuencia de esto se añade al
endonucleasa actúa una ARN ARN un gran número de residuos de
polimerasa especial que no usa adelinato formando la cola de
molde y acepta como sustrato poliadenilato o cola poli (A)
solo al ATP POLI (A)
POLIMERASA
Participa en procesos como en el Esta estructura que permanece
transporte del ARNm al citoplasma y intacta hasta la formación final
la determinación y la estabilidad de la del ARN
vida media del ARNm
19. Poliadenilación del extremo 3’
• Sobre el extremo 3’ OH del • Esta estructura permanece
corte por la endonucleasa
actúa, poli (A) polimerasa, intacta hasta la formación
que no usa molde y usa como final de ARNm
sustrato al ATP.
• Como consecuencia, se añade
• Puede participar en
al ARNm un gran número de procesos de tan gran
residuos de adenilato (AMP), significado como el
tomando una “cola” de
poliadenilato o poli (A), de transporte de ARNm al
longitud típica entre 40 y 250 citoplasma y la
nt (como excepción los ARNm determinación, en parte,
de histonas carecen de esta
cola). de la estabilidad y vida
media del ARNm
20. SITIOS DE POLIADENILACIÓN
ALTERNATIVA
0 Puede ocurrir algo similar 0 Dependiendo del sitio 3’
a la ocurrencia de sitios poliadenilado, la
alternativos de inicio de la
transcripción pero en el proteína resultante
extremo 3’. puede anclarse a
0 En este caso hallándose membrana o ser
sobre un mismo gen varios secretada, de acuerdo al
sitios susceptibles de ser estadío de desarrollo en
poliadenilados como es el que se encuentra la
caso del gen para la cadena
pesada m de célula.
inmunoglobulina.
22. • La etapa inicial de la maduración postranscripcional
del transcrito primario hasta dar el ARNm eucariótico
consiste en la eliminación de los intrones y la unión o
empalme de los exones.
• En el núcleo de las células eucariotas existen
partículas ribonucleoproteicas, los espliceosomas,
formados por ARN pequeño nuclear (ARNsn =”small
nuclear”) y proteínas, cuyas moléculas de ARN
catalizan el corte de intrones y el empalme de exones.
23. Magnitud de los intrones
• Lo mas frecuente es que la longitud total de los
intrones supere ampliamente a la suma de los exones,
por lo que el tamaño del gen depende fuertemente del
número y longitud de sus intrones.
• Aunque las cifras son variables, se habla de hasta 40
intrones por gen y de una longitud de hasta 20 kb por
intron. Los exones son de tamaño mucho más
pequeño, típicamente inferior a 1 kb.
24. Secuencias que delimitan el
intrón
• La eliminación de un intrón está determinada por su
secuencia, y no por su tamaño.
• Solo intervienen 2 secuencias específicas, que definen
los extremos del intrón, y otra de su interior,
conocidas en su conjunto como sitios o centros de
corte y empalme o de splicing.
• Todos los sitios de corte y empalme parecen ser
equivalentes, mientras que la secuencia del resto del
intrón no tiene trascendencia sobre el proceso.
25. SPLICING ALTERNATIVO
0 Puede ocurrir que uno más
0 Es un mecanismo muy exones sean removidos (dando
difundido, que permite una proteína más corta), o que
uno o más intrones no sean
que un solo gen pueda removidos (dando una
codificar para más de proteína más larga).
0 Una familia de 6 proteínas
una proteína. llamadas ASF (factores de
0 Los cortes sobre el splicing alternativo)
responsables de reconocer y
RNAhn deben seleccionar los lugares para los
cortes alternativos, contienen
producirse con absoluta serina y arginina por lo que se
precisión las llama también proteinas
SR.
26. Secuencias que delimitan el
intrón
• Un cambio en el sitio de corte (por ejemplo, por
mutación de uno de los nucleótidos consenso
esenciales) daría lugar a un ajuste erróneo: se
utilizaría para el corte y empalme la siguiente
secuencia consenso, si la hubiera, con lo que el intrón
o parte de él quedaría incluido en el ARNm.
• Esto conduciría a la síntesis de un polipéptido
alterado, con una inserción grande en su secuencia de
aminoácidos, o incluso con cambio de tosa la
secuencia a partir del punto de alteración debido a un
desplazamiento del marco de lectura.
28. Maduración ARNr y ARNt
PROCARIOTAS
-3 RNAr
Transcrito Reacciones de 1.Adición de 2.Modificación
primario corte (RNAsas) -1 o varios grupos metilos de nucleótidos.
RNAt
30. Vías de silenciado asociado al ARN
Interfiere un elemento básico (ARN de
interferecnia que es un ARN báscio de unos
21-27 nucleótidos:
Se distinguen:
Los micro ARNs (miRNAs)
Los RNA interferentes pequeños
(siRNAs)
Los RNA interferentes asociados a
repeticiones (rasiRNAs)
31. Micro RNAs (miRNAs)
0 Son transcitos por la RNA Polimerasa II como mirARNas
primarios (pri-mirARNas).
34. Vías en las que interviene el ARNi en el
núcleo:
Metilación del
ADN dirigida por
ARN.
Formación de
heterocromatina
dirigina por
ARNi.
Eliminación de
ADN.
Silenciado del
ADN no apareado
durante la
meiosis.