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Transcripción del ADN
Transcripción:
 Es el proceso por el cual la
información cifrada en forma de
secuencia de cuatro bases (A,T,C,G) en
una cadena de ADN se plasma en una
información escrita en el mismo
lenguaje (A,U,C,G) en forma de cadena
de ARN.
 Síntesis de una molécula de ARN
complementaria de una hebra de ADN.
Transcripción del ADN:
Hay diversos tipos de ARN en la
célula:
 Ribosómico: (ARNr) Es el 70% del
ARN, mientras que sus precursores
forman el 5%.
 Mensajero: (ARNm) el 3% del ARN
celular y sus precursores (ARN nuclear
heterogéneo o hnRNA) son aprox. 7%.
 De Transferencia( ARNt) constituye el
15%.
Diferencia entre ADN y ARN
Mecanismo general de la
Transcripción.
 En las células procarióticas:
La Enzima es capaz de catalizar la
síntesis de las tres clases de
ARN( ARNm, ARNr y ARNt )
 Las células eucarióticas emplean
tres ARN polimerasas diferentes:
ARN polimerasa I: Sintetiza
precursores de ARN ribosómico.
(Gen I)
ARN polimerasa.
ARN polimerasa II: Sintetiza
precursores de ARN mensajero. Esta
polimerasa requieren factores de
transcripción para que se una a los
promotores del ADN. (Gen II)
ARN polimerasa III: Sintetiza ARN de
transferencia, ARN ribosómico de 5S
y otros pequeños ARN (núcleo celular
y citoplasma). (Gen III)
Otros tipos de ARN polimerasa se
encuentran en la mitocondria y en el
núcleo del ribosoma.
Mecanismo general de la Transcripción
 Unidad de transcripción.
 Hebra codificadora o con sentido.
 Hebra complementaria o antisentido.
 Características:
 Selectivo.
 Reiterativo.
Transcripción de genes de Procariótica
La transcripción utiliza una de las
cadenas del ADN como molde. Se
desplaza del extremo 3’ al 5’, por lo
que el ARN crece en dirección 5’ a 3’.
Etapas de la transcripción
Iniciación.
Elongación.
Terminación.
Etapas de la transcripción
Iniciación:
Ocurre la unión de la ARN polimerasa
al ADN, tras lo cual se produce la
migración a un lugar de iniciación del
ADN, el promotor ( Complejo Cerrado).
Favorece la apertura parcial de las dos
cadenas del ADN (Complejo Abierto)
con rupturas de enlaces de las bases.
Etapas de la transcripción
Etapas de la transcripción
Elongación:
La ARN polimerasa provoca una
“burbuja” de transcripción y
añade ribonucleótidos
trifosfatados libres
complementarios a la siguiente
base expuesta del ADN molde y se
van formando nuevos enlaces.
FASES DE TRANSCRIPCIÓN
FASES DE TRANSCRIPCIÓN
FASES DE TRANSCRIPCIÓN.
FASES DE TRANSCRIPCIÓN.
FASES DE TRANSCRIPCIÓN.
FASES DE TRANSCRIPCIÓN.
FASES DE TRANSCRIPCIÓN
MODELO DE BURBUJA
La polimerasa avanza de manera
continua y el transcrito se retiene en el
complejo mediante la formación de
pares de base con el molde.
FASES DE TRANSCRIPCIÓN
Terminación:
Reconocimiento de secuencias
específicas en el ADN molde que
actúan como señales para la
terminación de la transcripción.
La cadena de ARN y la polimerasa
se disocian del molde de ADN.
FASES DE TRANSCRIPCIÓN
FASES DE TRANSCRIPCIÓN.
HORQUILLA DE TERMINACIÓN
La estructura en horquilla se
forma debido a la
complementariedad entre las
bases de la propia cadena de ARN.
TRANSCRIPCIÓN EN
PROCARIOTAS.
En ella podemos distinguir las
siguientes fases:
a) Iniciación: la ARN polimerasa se une a
un cofactor que permite su unión a
una región del ADN llamada promotor,
la cual posee una secuencia TATAAT ó
TTGACA.
b) Elongación: la ARN polimerasa recorre
la hebra de ADN hacia su extremo 5´
sintetizando una hebra de ARNm en
dirección 5´-3´
TRANSCRIPCIÓN EN
PROCARIONTES.
c) Finalización: presenta dos variantes. En
una interviene un cofactor "p" y en otra
no interviene dicho cofactor. El
proceso finaliza al llegar a una
secuencia rica en G y C (zona llamada
operador). El ADN vuelve a su forma
normal y el ARNm queda libre.
d) Maduración: si lo que se forma es un
ARNm no hay maduración, pero si se
trata de un ARNt o ARNr hay procesos
de corte y empalme.
ARN polimerasa en Eucarióticas.
 Requiere de factores de transcripción
para formar un complejo
multiproteíco.
 Se clasifican en :
A) Generales.
B) Específicos o inducibles
ARN polimerasa en las
Eucarióticas.
 Al igual que en procariotas, en
las células eucariotas la
transcripción está mediada por
la polimerasa de ARN.
TRANSCRIPCIÓN EN
EUCARIONTES
A) Iniciación: la ARN polimerasa II se une a
una zona del ADN llamada promotor
(posee secuencias CAAT y TATA)
B) Elongación: la síntesis continua en
sentido 5´-3´. Al poco se añade una
caperuza (metil-guanosín trifosfato) al
extremo 5´.
C) Finalización: parece que está
relacionado con la secuencia TTATTT.
Ahora interviene un poli-A polimerasa
que añade una cola de poli-A al pre-
ARNm (ARNhn).
TRANSCRIPCIÓN EN
EUCARIONTES.
D) Maduración: se produce en el
núcleo y la hace un enzima
llamada RNPpn, que elimina
los nuevos intrones (I)
formados.
E) Posteriormente las ARN
ligasas empalman los exones
(E) y forman el ARNm.
Diferencias en la transcripción entre
Procariotas y Eucariotas.
En eucariotas la maquinaria de
transcripción es mucho más
compleja.
 Poseen varias ARN polimerasas
diferentes, con funciones
especializadas
 Todas las enzimas eucariotas
requieren factores proteicos
adicionales (factores de
transcripción).
Cambios Postranscripcionales
 Tipos de reacciones :
1. Recorte de las cadenas
polinucleotídicas.
2. Modificación de bases y
nucleósidos.
3. Adición de secuencias a ambos
extremos de la cadena de ARN.
Cambios Postranscripcionales
En el ARNr y ARNt sufren reacciones
de corte y modificaciones de
nucleótidos.
ARNr por ARNasas.
ARNt se producen recorte terminal de
los extremos 5 ' y 3 ‘. adición de la
secuencia –CCA en el extremo 3 ‘ y
modificaciones de químicas de bases y
nucleósidos.
EL ARN de eucarioticas ( ARN nuclear
heterogéneo, ARNhn)
Cambios Postranscripcionales
Caperuza (adición y metilación de
GTP en el 5' , enlaces fosfodiéster
atípico 5' → 5‘), en el extremo 3 se
añaden residuos adenilicos ( cola
de poliA)
Inhibidores de la transcripción.
Antibióticos Tipos I:
Se unen a la ARN polimerasa, inactivándola de
modo directo.
 Rifamicinas y su derivado (rifampicina):
Inhibición especifica a la subunidad beta. No
tiene efecto sobre la polimerasa nucleares
eucarioticas.
Estreptodiligina: Inhibición de la elongación.
Inhibidores de la transcripción.
 α Amanitina: (Amanita phalloides): Inhibidor
especifico ARN polimerasa II en la etapa de
elongación en las eucarioticas.
Antibióticos Tipos II :
 La transcripción se inactiva indirectamente. Se une en
el ADN girasa procariótica. Impide la replicación y la
transcripción.
 Actinomicina D: ( Streptomyces) Inhibición
inespecífica. Se intercala en el dúplex de ADN (G-
C). Inhibe la formación de complejos abiertos.
Inhibidores de la transcripción.
 Acridina y sus derivados.
 La Daunomicina y sus derivados
(Quimioterapéuticos)
 Bromuro de Etidio Tinción del ADN. No es
Antibiótico
Antibióticos Tipos III :
 La transcripción se inactiva indirectamente. Se une
en el ADN.
 Cumermicina.
 Novobiocina.
 Ácido Nalidíxico.
Bibliografía
Biología Molecular de José Luque y Ángel
Herráez.
Biología Molecular de Ricardo Paniagua.

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Tema 4 Transcripción del ADN

  • 2. Transcripción:  Es el proceso por el cual la información cifrada en forma de secuencia de cuatro bases (A,T,C,G) en una cadena de ADN se plasma en una información escrita en el mismo lenguaje (A,U,C,G) en forma de cadena de ARN.  Síntesis de una molécula de ARN complementaria de una hebra de ADN.
  • 3. Transcripción del ADN: Hay diversos tipos de ARN en la célula:  Ribosómico: (ARNr) Es el 70% del ARN, mientras que sus precursores forman el 5%.  Mensajero: (ARNm) el 3% del ARN celular y sus precursores (ARN nuclear heterogéneo o hnRNA) son aprox. 7%.  De Transferencia( ARNt) constituye el 15%.
  • 5. Mecanismo general de la Transcripción.  En las células procarióticas: La Enzima es capaz de catalizar la síntesis de las tres clases de ARN( ARNm, ARNr y ARNt )  Las células eucarióticas emplean tres ARN polimerasas diferentes: ARN polimerasa I: Sintetiza precursores de ARN ribosómico. (Gen I)
  • 6. ARN polimerasa. ARN polimerasa II: Sintetiza precursores de ARN mensajero. Esta polimerasa requieren factores de transcripción para que se una a los promotores del ADN. (Gen II) ARN polimerasa III: Sintetiza ARN de transferencia, ARN ribosómico de 5S y otros pequeños ARN (núcleo celular y citoplasma). (Gen III) Otros tipos de ARN polimerasa se encuentran en la mitocondria y en el núcleo del ribosoma.
  • 7. Mecanismo general de la Transcripción  Unidad de transcripción.  Hebra codificadora o con sentido.  Hebra complementaria o antisentido.  Características:  Selectivo.  Reiterativo.
  • 8. Transcripción de genes de Procariótica La transcripción utiliza una de las cadenas del ADN como molde. Se desplaza del extremo 3’ al 5’, por lo que el ARN crece en dirección 5’ a 3’.
  • 9. Etapas de la transcripción Iniciación. Elongación. Terminación.
  • 10. Etapas de la transcripción Iniciación: Ocurre la unión de la ARN polimerasa al ADN, tras lo cual se produce la migración a un lugar de iniciación del ADN, el promotor ( Complejo Cerrado). Favorece la apertura parcial de las dos cadenas del ADN (Complejo Abierto) con rupturas de enlaces de las bases.
  • 11. Etapas de la transcripción
  • 12. Etapas de la transcripción Elongación: La ARN polimerasa provoca una “burbuja” de transcripción y añade ribonucleótidos trifosfatados libres complementarios a la siguiente base expuesta del ADN molde y se van formando nuevos enlaces.
  • 19. FASES DE TRANSCRIPCIÓN MODELO DE BURBUJA La polimerasa avanza de manera continua y el transcrito se retiene en el complejo mediante la formación de pares de base con el molde.
  • 20. FASES DE TRANSCRIPCIÓN Terminación: Reconocimiento de secuencias específicas en el ADN molde que actúan como señales para la terminación de la transcripción. La cadena de ARN y la polimerasa se disocian del molde de ADN.
  • 22. FASES DE TRANSCRIPCIÓN. HORQUILLA DE TERMINACIÓN La estructura en horquilla se forma debido a la complementariedad entre las bases de la propia cadena de ARN.
  • 23. TRANSCRIPCIÓN EN PROCARIOTAS. En ella podemos distinguir las siguientes fases: a) Iniciación: la ARN polimerasa se une a un cofactor que permite su unión a una región del ADN llamada promotor, la cual posee una secuencia TATAAT ó TTGACA. b) Elongación: la ARN polimerasa recorre la hebra de ADN hacia su extremo 5´ sintetizando una hebra de ARNm en dirección 5´-3´
  • 24. TRANSCRIPCIÓN EN PROCARIONTES. c) Finalización: presenta dos variantes. En una interviene un cofactor "p" y en otra no interviene dicho cofactor. El proceso finaliza al llegar a una secuencia rica en G y C (zona llamada operador). El ADN vuelve a su forma normal y el ARNm queda libre. d) Maduración: si lo que se forma es un ARNm no hay maduración, pero si se trata de un ARNt o ARNr hay procesos de corte y empalme.
  • 25. ARN polimerasa en Eucarióticas.  Requiere de factores de transcripción para formar un complejo multiproteíco.  Se clasifican en : A) Generales. B) Específicos o inducibles
  • 26. ARN polimerasa en las Eucarióticas.  Al igual que en procariotas, en las células eucariotas la transcripción está mediada por la polimerasa de ARN.
  • 27. TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIONTES A) Iniciación: la ARN polimerasa II se une a una zona del ADN llamada promotor (posee secuencias CAAT y TATA) B) Elongación: la síntesis continua en sentido 5´-3´. Al poco se añade una caperuza (metil-guanosín trifosfato) al extremo 5´. C) Finalización: parece que está relacionado con la secuencia TTATTT. Ahora interviene un poli-A polimerasa que añade una cola de poli-A al pre- ARNm (ARNhn).
  • 28. TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIONTES. D) Maduración: se produce en el núcleo y la hace un enzima llamada RNPpn, que elimina los nuevos intrones (I) formados. E) Posteriormente las ARN ligasas empalman los exones (E) y forman el ARNm.
  • 29. Diferencias en la transcripción entre Procariotas y Eucariotas. En eucariotas la maquinaria de transcripción es mucho más compleja.  Poseen varias ARN polimerasas diferentes, con funciones especializadas  Todas las enzimas eucariotas requieren factores proteicos adicionales (factores de transcripción).
  • 30. Cambios Postranscripcionales  Tipos de reacciones : 1. Recorte de las cadenas polinucleotídicas. 2. Modificación de bases y nucleósidos. 3. Adición de secuencias a ambos extremos de la cadena de ARN.
  • 31. Cambios Postranscripcionales En el ARNr y ARNt sufren reacciones de corte y modificaciones de nucleótidos. ARNr por ARNasas. ARNt se producen recorte terminal de los extremos 5 ' y 3 ‘. adición de la secuencia –CCA en el extremo 3 ‘ y modificaciones de químicas de bases y nucleósidos. EL ARN de eucarioticas ( ARN nuclear heterogéneo, ARNhn)
  • 32. Cambios Postranscripcionales Caperuza (adición y metilación de GTP en el 5' , enlaces fosfodiéster atípico 5' → 5‘), en el extremo 3 se añaden residuos adenilicos ( cola de poliA)
  • 33. Inhibidores de la transcripción. Antibióticos Tipos I: Se unen a la ARN polimerasa, inactivándola de modo directo.  Rifamicinas y su derivado (rifampicina): Inhibición especifica a la subunidad beta. No tiene efecto sobre la polimerasa nucleares eucarioticas. Estreptodiligina: Inhibición de la elongación.
  • 34. Inhibidores de la transcripción.  α Amanitina: (Amanita phalloides): Inhibidor especifico ARN polimerasa II en la etapa de elongación en las eucarioticas. Antibióticos Tipos II :  La transcripción se inactiva indirectamente. Se une en el ADN girasa procariótica. Impide la replicación y la transcripción.  Actinomicina D: ( Streptomyces) Inhibición inespecífica. Se intercala en el dúplex de ADN (G- C). Inhibe la formación de complejos abiertos.
  • 35. Inhibidores de la transcripción.  Acridina y sus derivados.  La Daunomicina y sus derivados (Quimioterapéuticos)  Bromuro de Etidio Tinción del ADN. No es Antibiótico Antibióticos Tipos III :  La transcripción se inactiva indirectamente. Se une en el ADN.  Cumermicina.  Novobiocina.  Ácido Nalidíxico.
  • 36.
  • 37. Bibliografía Biología Molecular de José Luque y Ángel Herráez. Biología Molecular de Ricardo Paniagua.