En este power point presentado por Guillermo Rodríguez, Director Científico de Biótica y Mireia Lázaro, Directora comercial de Biótica, se trata todo lo relacionado con esta técnica alternativa: Qué es la legionella y si de verdad la conocemos, qué es Legipid, si está validado y certificado, qué se necesita para usarlo, cuál es el flujo de trabajo para utilizarlo, qué beneficios aporta, cómo encaja en el marco legislativo actual y qué problemas está ya resolviendo.

1. Vs. april 2015
Legipid® Legionella Fast Detection,
cuantificando Legionella spp. en 1h
Mireia Lázaro/ Guillermo Rodríguez
Biótica, Bioquímica Analítica, S.L.
Castellón, 11 de Julio de 2017

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¿De verdad conocemos la Legionella?
- “Dejar de crecer” no es morir: la cloración de Chang, 2006
- 60 ºC, >30 min ó 0’5-20 mg/L Cloro, 60 min, Lp 1 día sin nutrientes
- la cultivabilidad cae 6-8 logaritmos !!
- la envoltura está dañada en un 17-47 % de las células
- En los ambientes “low nutrient” (agua potable) la Legionella “hambrienta” se hace más
resistente a los tratamientos (y la que sale de las amebas, también)
- ¿Qué sabemos realmente de los biocidas? Y de los aerosoles?
- ¿Cuál es la relación con otros microorganismos?
-B. subtilis decreció la concentración of L. pneumophila de 53.000 UFC/L a menos de
1.000 UFC/L en una TR (efecto probiótico!!)
- ¿Debemos revisar los niveles de actuación?
-Ducha de 15 minutos: la concentración de Legionella requerida para contraer la
enfermedad sería de 106–108 CFU/L en agua, 101–103 CFU/m3 en aire

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¿Qué és Legipid®?
• Test rápido para la detección de Legionella spp. en muestras
de agua.
• Está basado en partículas inmunomagnéticas y anticuerpos
específicos contra Legionella spp.
• Validado por laboratorios ISO 17025
• El único que ha conseguido certificación internacional, AOAC
RI
• Acreditable por las distintas entidades de acreditación( ej.
ENAC, ACCREDIA, NATA, UKAS…)

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Es la cantidad de UFC que se esperaría en un cultivo de la
misma muestra, en condiciones de máxima cultivabilidad.
100 % células capaces de
crecer0 % interferentes
¿Qué mide el test Legipid®?

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Method modification of the Legipid® Legionella fast detection test kit.
Guillermo Rodríguez Albalat, Begoña Bedrina Broch, Marisa Jiménez Bono
J AOAC Int. 2014 Sep-Oct; 97(5): 1403–1409. doi: 10.5740/jaoacint.14-029
Comparing methods of determining Legionella spp. in complex water
matrices Álvaro Díaz-Flores, Juan Carlos Montero, Francisco Javier Castro,
Eva María Alejandres, Carmen Bayón, Inmaculada Solís, Roberto
Fernández-Lafuente, Guillermo Rodríguez
BMC Microbiol. 2015; 15: 91. Published online 2015 Apr
29. doi: 10.1186/s12866-015-0423-7
¿Está validado y certificado Legipid®?

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¿Qué necesito para utilizar Legipid®?

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Formatos Legipid®

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A. FILTRACIÓN B. ANÁLISIS C. RESULTADO
Captura Marcado Detección
¿Cuál es el flujo de trabajo con Legipid®?

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Resultados el mismo día
 Detección de viables y VBNC
 Útil en matrices complejas
 Buena sensibilidad
 Bajo coste
 CFUeq vs CFU
Fácil implementación
 Evidencia peer-reviewed disponible
 Validado y Certificado (AOAC)
 Cumple norma UNE100030
 Útil en rutina y brote
 Beneficio para la salud pública
¿ Qué beneficios tiene Legipid®?

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- Anexo F, punto F.2 Ensayos Microbiológicos (Legionella spp):
- versión en vigor de la Norma UNE-ISO 11731 o
- por técnica que presente un protocolo validado por organismo competente
de certificación nacional o internacional (PCR, método inmunomagnético,
etc.)”
- El Artículo 6 /RD865/2003, “Con carácter complementario se tendrá en cuenta
lo establecido en la Norma UNE 100030”:
¿Cómo encaja Legipid® en el marco regulatorio?
- Programa de actuación /muestreo del agua- Determinaciones in situ
- propio titular de la instalación o entidades externas.
- los kits deben cumplir la Norma UNE-ISO 17381 u otra norma equivalente.

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En resumen……
El Kit Legipid® cumple los criterios de la Norma UNE-100030
(complementaria al RD865/2003)
- Método alternativo al cultivo: protocolo certificado AOAC-RI
- Kit in situ según norma UNE-ISO 17381
Y además……
El Kit Legipid® dispone de una autorización expresa del Ministerio
de Sanidad para su uso en piscinas, jacuzzis y spas de acuerdo con
el RD742/2013

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¿Por qué Legipid® es un método disruptivo?
- Cambia nuestra visión de Legionella
-Hasta ahora: la bacteria cultivable
- A partir de ahora: cultivable, persistente, no cultivable Click
- Mejora nuestra percepción objetiva de los tratamientos
- Hasta ahora: pérdidas de cultivabilidad
- A partir de ahora: deterioro de la envoltura celular (virulencia) Click
-Amplía mercados pero también transforma modelos de negocio
- El resultado (1 h) habilita acciones ajustadas en el tiempo (oportunas),
en el espacio (totales o parciales), en intensidad (cuantificación) Click
- El cliente tiene información “fresca” en el mismo día
- Añade una valor preventivo a la gestión de un brote Click

14. 14
¿Qué problema estamos resolviendo para nuestros
clientes?
-Biótica no es sólo una empresa “que vende tests de Legionella”, sino que
“capacita al cliente para mejorar su prevención y control del riesgo”
- Fiabilidad y rapidez de la información analítica
- Significado del parámetro “Legionella sp”
- Oportunidad del “decision-making” Click
- En el futuro, el cliente “quiere obtener y compartir información”
PERO sin ejecución humana de los análisis (“hands-off”) Click Click
- Biótica quiere ayudar a “proteger la salud de todos”

15. 15
GRACIAS POR SU
ATENCIÓN
Conéctate a los métodos
rápidos.
www.biotica.es

16. 16
4
casos
confirmados
45
casos
confirmados
—
0 1 2 3 4 5 6 7 8
8 SEMANAS
ST87
+
Neg
13/12/15
24/12/15
Microbiota
26/12/15
Lp 3
15/12/15
23/12/15
Draft
ISO/DIS
11731
Lp 1
28/12/15
ST899
+
15/01/16
15/01/16
Lp 1
<100
Lp 8
<100
ST899
+
ST1324
28/01/16
27/01/16
+ — — —
Cultivo ISO11731Legipid® (SIM) SBT
23/12/15 04/01/16 11/01/16
HIPÓTESIS
EPIDEMIOLÓGICA
MÁS PROBABLE
03/02/16
La rapidez analítica protege la salud de las personas

17. 17

18. 18
2 HORAS DE CONTACTO
11%
16 HORAS DE CONTACTO
100%INACTIVACIÓN
DIÓXIDO DE CLORO
Muestras de L pneumophila, incubadas en agitación
de rodillos y oscuridad a pH 8.0 y tª> 22 ºC
ClO20-200 ppm
INACTIVACIÓN
Envoltura celular
Acción biocida
1
2
3
4
5
INCUBACIÓN FILTRACIÓN Y ANÁLISIS
TORRE DE REFRIGERACIÓN

19. 19
DIAGNÓSTICO INICIAL
LIMPIEZA
DESINFECCIÓN
EVALUACIÓN FINAL
4
MESES
Ronda 1
29 MUESTRAS
P
L
C
55%
31%
17%
44 MUESTRAS
P
L C
Ronda 2
19%
11%
18%
10-15
días
24-48
horas
1-3
horas
Legipid PCR Cultivo

20. 20
PREVENCIÓN
AVANZADA
Plan de Prevención con técnica
rápida
Norma UNE-EN 100030
Legipid® - 1 hora
(Resultados concluyentes
en 1 hora)
TOMA DE
MUESTRAS
El mismo día que el
análisis
USUARIOS
PROTEGIDOS
Sin interrupción de
actividades
CENSO
Instalaciones de riesgo
identificadas
COSTE ÓPTIMO
Reducir períodos
prolongados de cierre y
reapertura
PCR- 2 días
Resultados en 48 horas
Cultivo- 10-12 días
(Resultados no concluyentes,
MICROBIOTA)
DECISIÓN
OPORTUNA - 1 hora
RD742/2013

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