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ECOLOGÍA
MICROBIANA
ORAL
2016
María Cecilia PortaMaría Cecilia Porta
Biofilm supragingival
COEXISTENCIA
El ser humano está constituido por
1013 células
(10.000.000.000.000)
Es el huésped de
1014 microorganismos
(100.000.000.000.000)
“cualquier vida, es, de hecho, una coexistencia”“cualquier vida, es, de hecho, una coexistencia”
ECOLOGÍA
Definición
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es un complejo o un
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se compone de 2 partes principales
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en un entorno específico
que comprende los elementos físicos y bioquímicos del
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El habitat de un organismo
es el lugar donde este se establece,
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NICHO
El nicho de un organismo designa el hábitat
que ocupa y, al mismo tiempo, el papel de
desempeña en él o la función que cumple
ECOSISTEMAS
eubiosis
disbiosis
CARACTERÍSTICAS DE LOS
ECOSISTEMAS ORALES
VARIABILIDAD
ESPECIFICIDAD
HETEROGENEIDAD
CANTIDAD
Estudio del microbioma
Habitualmente estudiamos la microbiota normal o
patológica mediante diferentes técnicas que
incluyen:
• Exámenes microscópicos en fresco y por coloraciones
• Cultivos
• Pruebas de crecimiento
• Pruebas bioquímicas
• Pruebas serológicas
• Estudios de metabolismo
• Estudios moleculares
• Estos estudios nos han permitido conocer el 20-25%, ya que esta es la cifra de los MOs
que forman el MH y que han podido cultivarse .Por supuesto que estas técnicas nos han
proporcionado hasta ahora un conocimiento valioso de la etiología de las infecciones.
Sin embargo, los estudios moleculares más complejos nos permitirán conocer “el otro
lado de la microbiota” y por lo tanto, de las infecciones y procesos patológicos cuya
naturaleza desconocemos. Precisamente son proyectos adicionales financiados por el
PMH para estudiar la asociación de componentes específicos y dinámica del MH con una
variedad
• de condiciones patológicas, desarrollando herramientas y tecnologías, que incluyen el
aislamiento y secuenciación de MOs no cultivados (o cultivables).
• La metagenómica constituye un nuevo campo de análisis basado en las tecnologías más
recientes de secuenciación del ADN, que permite el análisis de poblaciones completas
de microorganismos sin necesidad de aislar cada uno por separado.
• • Basada en las tecnologías más recientes de secuenciación del ADN.
• • Permite el análisis de poblaciones completas de microorganismos.
• • No se necesita de aislar cada uno por separado.
• • Analiza el genoma de todos los organismos de una población a la vez.
• • Estudia la respuesta de una determinada comunidad de microorganismos ante
determinados factores.
• • Comprueba cómo se modifica el conjunto de genomas de dicha comunidad en
respuesta a diferentes estímulos.
ECOSISTEMAS ORALES
MUCOSA
labios – mejillas – paladar duro y blando
DORSO DE LENGUA
SUPERFICIES DENTALES
superficies libres – proximales – puntos y fisuras
SURCO GINGIVAL
MATERIALES BIOCOMPATIBLES
SALIVA
SALIVA
108 microorganismos  ml
Cocos Gram positivos facultativos 44%
Cocos Gram negativos anaerobios estrictos 15%
Bacilos Gram positivos facultativos 15%
COMPOSICION
Inorgánicos
Calcio Fosfatos Magnesio Floruros
Orgánicos
Carbohidratos Proteínas ricas en prolina Glucoproteínas
Mucinas Alfa-amilasas
Peroxidasa salival Anhidrasa carbónica
Lactoferrina Lisozima
Fibronectina
Inmunoglobulina A
FUNCIONES
DIGESTIÓN
PROTECCIÓN
Capacidad amortiguadora
Eliminación de azúcares
Capacidad remineralizante
Prevención de la deshidratación
Neutralizante
Acción antibacteriana
Enzimática
Lisozima – lactoperoxidasa
Anticuerpos
PMN
ADHERENCIA
Proteínas salivales
• Tamponantes : anhidrasa carbónica, histatina
• Digentivas: amilasa, mucina
• Mineralizantes: cystatina, histatina, PRP, estaterina
• Lubricantes: mucina, estaterina
• Componentes de PDA: amilasa, cystatina estaterinamucina, PRP,
• Antibacterianas: amilasa, cystatina, histatina, mucina, peroxidasa, lisozima
• lactoferrina
• Antivirales: cistatina, mucina
• Antifungicas: histatina
Características funcionales
de las proteínas salivales
• Capacidad de complejarse: (complejos
homotípicos y heterotípicos)
• Son multifuncionales (pleiotropismo)
• Presentan redundancia
• Son anfipáticas: inhiben y permiten
adherencia microbiana
Sistema Inmune Mucosal Común: MALT
“Mucosa Associated Limphoid Tissue”
Inmunidad Adaptativa en
Cavidad Bucal: Mucosas
• Los tractos digestivo,
respiratorio y genitourinario
constituyen cavidades
internas del organismo
tapizadas por membranas
mucosas (más de 400m2)
• Albergan la microbiota
comensal, pero protegen
contra la invasión a la región
sistémica, estéril, del
organismo
Denominaciones del MALT
según el sitio anatómico
• GALT: gut associated linfoid tissue
(Tejido linfoide asociado a mucosa intestinal)
• BALT: mucosa bronquial
• SALT: piel (skin)
• OALT: mucosa bucal (oral)
Tejido linfoide asociado a la nasofaringe: NALT
En cavidad bucal: Anillo de Waldeyer
• La respuesta del MALT es de tipo humoral con
producción de IgA dimérica
• IgA dimérica (IgAs) es transportada hacia la
saliva a través del epitelio mucoso o glandular
Importancia del MALT
• 85% del tejido linfoide y 67% de la producción
total de anticuerpos
• Protección anti-Caries: IgAs
• Vacunas actuales: estimulación del MALT
IgAs (IgA secretada)
• Bloquea interacciones adhesina-receptor (ag I/II o P1 de
S.mutans), interfiriendo con la formación de la placa
dental.
• Reduce la adherencia
• Bloquea interacciones de S.mutans con colonizadores
tempranos (adhesinas)
• Inhibe la producción de glucanos por GTF
• Protege las áreas coronales y cervicales del diente
• Es la principal inmunoglobulina intacta en el biofilm (de
saliva y fluido crevicular gingival (FCG).
Papel de la Microbiota Comensal:
ejemplos
• Streptococcus sanguis antagoniza con
Aggregatibacter actinomycetemcomitans
produciendo peróxido en presencia de O2
• S. sanguis y otros streptococci bucales
antagonizan con Cándida albicans compitiendo
por la biotina requerida por el hongo
Respuesta Inmune Adquirida
• Caries en el dominio salival
Acción de IgAs:
• inhibe la adhesión de los
microorganismos a la
superficie dental e
• inhibe la acción de la
glucosil transferasa (GTF)
• Caries en el dominio gingival
Acción de IgM e IgG:
• inhiben adherencia
bacteriana, acción de la GTF,
aglutinan y opsonizan
bacterias para ser
fagocitados por los fagocitos
presentes en el líquido
gingival
• Activan complemento
Desarrollo de Inmunidad en el
dominio salival
Antes de 6 meses de edad:
• Defensas inespecíficas
• IgAs materna
• Bajas cantidades de IgM e IgG
• El MALT comienza a ser estimulado
a medida
que la cavidad bucal y los tractos
gastrointestinal, génitourinario y
respiratorio
superior empiezan a ser colonizados
Después de los 6 meses:
• Aparece IgAs propia inducida por
colonizadores tempranos:
S. mitis, S salivarious, S. oralis y S.
sanguis
• Cuando erupcionan dientes:
S.mutans y S.sobrinus
• Factores inmunitarios maternos
disminuyen
• MALT completa su desarrollo
funcional
FACTORES DE LA CAVIDAD ORAL QUE INFLUYEN EN EL
CRECIMIENTO DE LOS MICROOGANISMOS
Los factores que regulan
la composición, el desarrollo,
la cantidad, la coexistencia y
la distribución de la microbiota oral
en los diversos ecosistemas primarios
se conocen como
determinantes ecológicos
DETERMINANTES ECOLÓGICOS
Fisicoquímicos
Adhesión, Agregación, y Coagregación
Nutricionales
Protectores del Hospedador
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Fenómeno de repulsión entre superficies
Interacción de moléculas lipofílicas y adhesinas hidrofóbicas
GTF
glucano
Avidez enzima sustrato
MECANISMOS DE COLONIZACIÓN
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-
-
-
-
++
++
++
++
++
++
++
Aproximaciones directas por cationes
e indirectas por glucoproteinas
alejamiento de zonas electronegativas por organulos
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FLORA
MICROBIOTA
MICROBIOTA NORMAL = COMENSAL
MICROBIOTA NORMAL
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Dominante
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MICROBIOTA TRANSITORIA
MICROBIOTA NORMAL RESIDENTE
DOMINANTE
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Rothia
Arachnia
Veillonella
MICROBIOTA NORMAL
SUPLEMENTARIA
Streptococcus
Staphylococcus
Lactobacillus
Bacteroides
Prevotella
Fusobacterium
Selenomona
Neisseria
Mycoplasma
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MICROBIOTA TRANSITORIA
Streptococcus β hemolítico
Staphylococcus aureus
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Neisserias patógenas
NATURALEZA DE LA
MICROBIOTA ORAL
1000
especies Solo 20 especies
son residentes
Cómo se adquiere y forma la
microbiota
• Al pasar por el canal del parto (12-15 horas).
• Al iniciar la lactancia materna y/o artificial.
• Contacto con la madre y otros.
• Ambiente
• Desarrollo ecológico: el desarrollo de la flora
o microbiota es el producto de la interacción
genética del huésped y de los
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lactobacilos,
corinebacterias,
estafilococos,
micrococos,
bacilos gram negativos
entéricos,
levaduras
y estreptococos
desaparecen a los 2 – 5 días
después del nacimiento para ser
reemplazados por la microbiota
ASOCIACIONES BIOLÓGICAS
neutras
antagónicas
sinérgicas
comensalismo
mutalismo
parasitismo
oportunistas
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sinérgicas
SUCESIÓN
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9. ecología

  • 3. COEXISTENCIA El ser humano está constituido por 1013 células (10.000.000.000.000) Es el huésped de 1014 microorganismos (100.000.000.000.000) “cualquier vida, es, de hecho, una coexistencia”“cualquier vida, es, de hecho, una coexistencia”
  • 4. ECOLOGÍA Definición La ecología es la rama de la biología que estudia las relaciones entre los diferentes organismos entre sí y de estos con su medio.
  • 5. ECOSISTEMA es un complejo o un sistema de interacciones establecidas entre grupos de organismos y su medio físico o inanimado. se compone de 2 partes principales la comunidad biótica que incluye todos los organismos vivos del y el medio abiótico en un entorno específico que comprende los elementos físicos y bioquímicos del ecosistema
  • 6. HABITAT El habitat de un organismo es el lugar donde este se establece, dentro del ecosistema
  • 7. NICHO El nicho de un organismo designa el hábitat que ocupa y, al mismo tiempo, el papel de desempeña en él o la función que cumple
  • 9. CARACTERÍSTICAS DE LOS ECOSISTEMAS ORALES VARIABILIDAD ESPECIFICIDAD HETEROGENEIDAD CANTIDAD
  • 10. Estudio del microbioma Habitualmente estudiamos la microbiota normal o patológica mediante diferentes técnicas que incluyen: • Exámenes microscópicos en fresco y por coloraciones • Cultivos • Pruebas de crecimiento • Pruebas bioquímicas • Pruebas serológicas • Estudios de metabolismo • Estudios moleculares
  • 11. • Estos estudios nos han permitido conocer el 20-25%, ya que esta es la cifra de los MOs que forman el MH y que han podido cultivarse .Por supuesto que estas técnicas nos han proporcionado hasta ahora un conocimiento valioso de la etiología de las infecciones. Sin embargo, los estudios moleculares más complejos nos permitirán conocer “el otro lado de la microbiota” y por lo tanto, de las infecciones y procesos patológicos cuya naturaleza desconocemos. Precisamente son proyectos adicionales financiados por el PMH para estudiar la asociación de componentes específicos y dinámica del MH con una variedad • de condiciones patológicas, desarrollando herramientas y tecnologías, que incluyen el aislamiento y secuenciación de MOs no cultivados (o cultivables). • La metagenómica constituye un nuevo campo de análisis basado en las tecnologías más recientes de secuenciación del ADN, que permite el análisis de poblaciones completas de microorganismos sin necesidad de aislar cada uno por separado. • • Basada en las tecnologías más recientes de secuenciación del ADN. • • Permite el análisis de poblaciones completas de microorganismos. • • No se necesita de aislar cada uno por separado. • • Analiza el genoma de todos los organismos de una población a la vez. • • Estudia la respuesta de una determinada comunidad de microorganismos ante determinados factores. • • Comprueba cómo se modifica el conjunto de genomas de dicha comunidad en respuesta a diferentes estímulos.
  • 12. ECOSISTEMAS ORALES MUCOSA labios – mejillas – paladar duro y blando DORSO DE LENGUA SUPERFICIES DENTALES superficies libres – proximales – puntos y fisuras SURCO GINGIVAL MATERIALES BIOCOMPATIBLES SALIVA
  • 13. SALIVA 108 microorganismos ml Cocos Gram positivos facultativos 44% Cocos Gram negativos anaerobios estrictos 15% Bacilos Gram positivos facultativos 15%
  • 14. COMPOSICION Inorgánicos Calcio Fosfatos Magnesio Floruros Orgánicos Carbohidratos Proteínas ricas en prolina Glucoproteínas Mucinas Alfa-amilasas Peroxidasa salival Anhidrasa carbónica Lactoferrina Lisozima Fibronectina Inmunoglobulina A
  • 15. FUNCIONES DIGESTIÓN PROTECCIÓN Capacidad amortiguadora Eliminación de azúcares Capacidad remineralizante Prevención de la deshidratación Neutralizante Acción antibacteriana Enzimática Lisozima – lactoperoxidasa Anticuerpos PMN ADHERENCIA
  • 16. Proteínas salivales • Tamponantes : anhidrasa carbónica, histatina • Digentivas: amilasa, mucina • Mineralizantes: cystatina, histatina, PRP, estaterina • Lubricantes: mucina, estaterina • Componentes de PDA: amilasa, cystatina estaterinamucina, PRP, • Antibacterianas: amilasa, cystatina, histatina, mucina, peroxidasa, lisozima • lactoferrina • Antivirales: cistatina, mucina • Antifungicas: histatina
  • 17. Características funcionales de las proteínas salivales • Capacidad de complejarse: (complejos homotípicos y heterotípicos) • Son multifuncionales (pleiotropismo) • Presentan redundancia • Son anfipáticas: inhiben y permiten adherencia microbiana
  • 18. Sistema Inmune Mucosal Común: MALT “Mucosa Associated Limphoid Tissue” Inmunidad Adaptativa en Cavidad Bucal: Mucosas • Los tractos digestivo, respiratorio y genitourinario constituyen cavidades internas del organismo tapizadas por membranas mucosas (más de 400m2) • Albergan la microbiota comensal, pero protegen contra la invasión a la región sistémica, estéril, del organismo
  • 19. Denominaciones del MALT según el sitio anatómico • GALT: gut associated linfoid tissue (Tejido linfoide asociado a mucosa intestinal) • BALT: mucosa bronquial • SALT: piel (skin) • OALT: mucosa bucal (oral)
  • 20. Tejido linfoide asociado a la nasofaringe: NALT
  • 21. En cavidad bucal: Anillo de Waldeyer
  • 22. • La respuesta del MALT es de tipo humoral con producción de IgA dimérica • IgA dimérica (IgAs) es transportada hacia la saliva a través del epitelio mucoso o glandular
  • 23. Importancia del MALT • 85% del tejido linfoide y 67% de la producción total de anticuerpos • Protección anti-Caries: IgAs • Vacunas actuales: estimulación del MALT
  • 24. IgAs (IgA secretada) • Bloquea interacciones adhesina-receptor (ag I/II o P1 de S.mutans), interfiriendo con la formación de la placa dental. • Reduce la adherencia • Bloquea interacciones de S.mutans con colonizadores tempranos (adhesinas) • Inhibe la producción de glucanos por GTF • Protege las áreas coronales y cervicales del diente • Es la principal inmunoglobulina intacta en el biofilm (de saliva y fluido crevicular gingival (FCG).
  • 25. Papel de la Microbiota Comensal: ejemplos • Streptococcus sanguis antagoniza con Aggregatibacter actinomycetemcomitans produciendo peróxido en presencia de O2 • S. sanguis y otros streptococci bucales antagonizan con Cándida albicans compitiendo por la biotina requerida por el hongo
  • 26. Respuesta Inmune Adquirida • Caries en el dominio salival Acción de IgAs: • inhibe la adhesión de los microorganismos a la superficie dental e • inhibe la acción de la glucosil transferasa (GTF) • Caries en el dominio gingival Acción de IgM e IgG: • inhiben adherencia bacteriana, acción de la GTF, aglutinan y opsonizan bacterias para ser fagocitados por los fagocitos presentes en el líquido gingival • Activan complemento
  • 27. Desarrollo de Inmunidad en el dominio salival Antes de 6 meses de edad: • Defensas inespecíficas • IgAs materna • Bajas cantidades de IgM e IgG • El MALT comienza a ser estimulado a medida que la cavidad bucal y los tractos gastrointestinal, génitourinario y respiratorio superior empiezan a ser colonizados Después de los 6 meses: • Aparece IgAs propia inducida por colonizadores tempranos: S. mitis, S salivarious, S. oralis y S. sanguis • Cuando erupcionan dientes: S.mutans y S.sobrinus • Factores inmunitarios maternos disminuyen • MALT completa su desarrollo funcional
  • 28. FACTORES DE LA CAVIDAD ORAL QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO DE LOS MICROOGANISMOS Los factores que regulan la composición, el desarrollo, la cantidad, la coexistencia y la distribución de la microbiota oral en los diversos ecosistemas primarios se conocen como determinantes ecológicos
  • 29. DETERMINANTES ECOLÓGICOS Fisicoquímicos Adhesión, Agregación, y Coagregación Nutricionales Protectores del Hospedador Antagónicos Bacterianos Dosis infecciosa
  • 31. Constitución inicial de la microbiota
  • 32. Fenómeno de repulsión entre superficies Interacción de moléculas lipofílicas y adhesinas hidrofóbicas GTF glucano Avidez enzima sustrato MECANISMOS DE COLONIZACIÓN
  • 33. Complementariedad entre superficies - - - - ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ Aproximaciones directas por cationes e indirectas por glucoproteinas alejamiento de zonas electronegativas por organulos y acortamiento del espacio que separa las superficies
  • 35. MICROBIOTA NORMAL = COMENSAL MICROBIOTA NORMAL RESIDENTE o INDIGENA o AUTOCTONA Dominante Suplementaria MICROBIOTA TRANSITORIA
  • 38. MICROBIOTA TRANSITORIA Streptococcus β hemolítico Staphylococcus aureus Enterobacterias Neisserias patógenas
  • 39. NATURALEZA DE LA MICROBIOTA ORAL 1000 especies Solo 20 especies son residentes
  • 40. Cómo se adquiere y forma la microbiota • Al pasar por el canal del parto (12-15 horas). • Al iniciar la lactancia materna y/o artificial. • Contacto con la madre y otros. • Ambiente • Desarrollo ecológico: el desarrollo de la flora o microbiota es el producto de la interacción genética del huésped y de los microorganismos (MOs) residentes.
  • 41. lactobacilos, corinebacterias, estafilococos, micrococos, bacilos gram negativos entéricos, levaduras y estreptococos desaparecen a los 2 – 5 días después del nacimiento para ser reemplazados por la microbiota
  • 43. SUCESIÓN Se conoce como sucesión a la sustitución de unos microorganismos por otros, en respuesta a modificaciones que afectan a las características intrínsecas del lugar en el que habitan