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FISIOLOGÍA Y METABOLISMO
                BACTERIANO

 Permite conocer el modo de vida y el hábitat de diferentes
especies bacterianas

   Permite formular medios de cultivo para el aislamiento
      e identificación de los patógenos participantes.



  Permite conocer y entender el modo de acción de algunos
                     Antimicrobianos.
Panorama del metabolismo y nutrición bacteriana


                    Sistema vivo



              Dirigir reacciones químicas



                      Moléculas:
                estructuras específicas



                     Crecimiento
Panorama del metabolismo y nutrición bacteriana



         Crecimiento                             Nutrientes




 Aumento de los constituyentes        Productos químicos que provienen 
químicos celulares en cantidades      del exterior a partir de los cuales se 
          apropiadas                         construye una célula 




                              Metabolismo
Panorama del metabolismo y nutrición bacteriana


                           Todos los procesos químicos que tienen 
          Metabolism                 lugar en una célula
Energía
              o


                           Proceso en el que una célula sintetiza 
          Anabolismo o
                            todos sus componentes a partir de 
           Biosíntesis
                           nutrientes tomados del medio exterior



                               Reacciones que conducen a la 
                           producción de energía utilizable por la 
           Catabolismo                 célula (ATP)
Metabolismo bacteriano


   Oxidación­Reducción


La utilización de energía química en organismos vivos implica reacciones REDOX
      
          Oxidación: Se  define como la pérdida de electrones de una molécula
     
       Reducción: Se define como la ganancia de electrones de una molécula



                  
                     Donadores de electrones: Molécula que se oxida
                 
                   Aceptores de electrones: Molécula que se reduce
Mecanismos para la producción de
                             energía
Rx preparativas                Rx oxidación              Glucólisis
                                              
                                                 Etapa  I:  se  consumen  2  moléculas  de 
                                              ATP  y  no  hay  transferencia  de 
                                              electrones

                                              
                                                 Etapa  II:  ocurre  transferencia  de 
                                              electrones:  NAD+  acepta  2  átomos  de 
                                              hidrógeno y se convierte en NADH. 



                                              
                                                
                                                   Ganancia  neta  del  organismo:  2 

                                              moléculas  de  ATP  por  molécula  de 
    Aldolasa
                                              glucosa.
Fermentación


El ácido pirúvico acepta electrones del NADH para
   formar ácido láctico, etanol, butanol, mientras
          genera NAD+ para la glicolisis.

La fermentación no produce ningún ATP más que
       los 2 ATP formados en la glicolisis.
Metabolismo bacteriano

       Fermentación                               Fermentación 
        alcohólica                                   láctica

En levaduras, el piruvato se reduce a 
                                                En bacterias, el piruvato se 
    etanol con liberación de CO2
                                                  reduce a ácido láctico




                                  Piruvato 
                                decarboxilasa

                                                                Lactato DH


           Alcohol DH

                                                                Fosforilación a nivle de sustrato
Respiración aeróbica
Cadena respiratoria 
           transportadora de electrones


                     Sistema asociado a membranas 

     Funciones: (1) Aceptar electrones  de un donador y transferirlos a 
                               un aceptor 
                  (2) Conservar energía durante la transferencia de 
                    electrones para   sintetizar ATP 
Composición química de una célula
                      bacteriana

La  masa  celular  está  formada  por  sustancias  constituidas  por  4  tipos  de 
átomos

     Carbono (50%)                   
                                     Esqueleto de 

     Nitrógeno (12%)                macromoléculas

     Oxígeno 

     Hidrógeno

Nutrientes:
 Macronutrientes: Se requieren en altas cantidades: C, H, O, N, P, S, Mg, Fe




 Micronutrientes: Se requieren en bajas cantidades: Cu, Mn, Ni, Zn

Visión global del
crecimiento microbiano

   Crecimiento: Aumento en el
        número de células

     Procesos biosintéticos



        2000 reacciones


   Síntesis de macromoléculas:
      DNA, RNA, proteínas



Ensamblaje de macromoléculas: Pared
 celular, membrana citoplasmática,
          flagelos, ribosomas
Fisión Binaria





    Se originan 2 células hijas a partir de una célula madre

    Todos los constituyentes celulares incrementan de manera adecuada
LA DINÁMICA DE CRECIMIENTO
REQUERIMIENTOS
         BACTERIANOS


             METABOLISMO

Liberación de energía   Requerimiento de energía
     catabolismo               anabolismo
REQUERIMIENTOS BACTERIANOS
REQUERIMIENTOS BACTERIANOS
FUENTE DE CARBONO


Dióxido de carbono (CO2)


Compuestos orgánicos: Glucosa,
Galactosa
Fuente de carbono:
       Fuente de carbono:
    Autótrofos: Requieren CO22
    Autótrofos: Requieren CO
Heterótrofos: Requieren compuestos
Heterótrofos: Requieren compuestos
              orgánicos
              orgánicos
Fuente de energía
      Fuente de energía
Fototrofas: Luz como fuente de
Fototrofas: Luz como fuente de
            energía.
            energía.
Quimiotrofas: Rx químicas como
Quimiotrofas: Rx químicas como
      fuente de energía.
       fuente de energía.
Fuente de electrones
     Fuente de electrones
           Litotrofos:
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  Compuestos inorgánicos como
  Compuestos inorgánicos como
     fuente de electrones.
      fuente de electrones.
         Organotrofos:
         Organotrofos:
compuestos orgánicos como fuente
compuestos orgánicos como fuente
         de electrones
         de electrones
FUENTE DE NITRÓGENO


Orgánicos: Aminoácidos.


Inorgánicos: NO3, NH3, N2.
FUENTE DE FÓSFORO
Fosfato inorgánico: PO4.


Algunos organofosfatados: Hexosas-6-
fosfato.
FUENTE DE AZUFRE


Inorgánica: SO4, H2S.
Orgánica: Aminoácidos azufrados
Tipos nutricionales


Fotolitoautotrofa:
Energía: luz
Electrones: Compuesto inorgánico
Carbono: CO2.
Fotoorganoheterotrofa:


Energía: Luz
Electrones: Compuestos orgánicos
Carbono: Compuestos orgánicos.
Quimiolitoautotrofa


Energía: Rx químicas.
Electrones: Compuestos inorgánicos.
Carbono: CO2
REQUERIMIENTOS DE LOS
                     MICROORGANISMOS

REQUERIMIENTOS ENERGÉTICOS           REQUERIMIENTOS DE CARBONO

En función de la fuente de energía   En función de la fuente de carbono
Fotótrofos: Luz                      Autótrofos: CO2 (CIANOBACTERIAS)
Quimiótrofos: Oxidan compuestos      Heterótrofos: Compuestos orgánicos
químicos                             Carbonados




            Fotoautótrofos: Luz + CO2. Bacterias
            fotosintéticas
            Fotoheterótrofos: Algunas bacterias
            fotosintéticas
            Quimioautótrofos o quimiolitotrofos: Usan como
            fuente de energía compuestos inorgánicos
            reducidos: NO2, H2, Fe++...
TEMPERATUR
                            Hipertermófilas
Psicrófilas    A




                         Termófilas
              Mesófila
              s
HIPERTERMÓFILAS                     PSICRÓFILAS
150-500 °C
RELACIONADOS CON FENÓMENOS              15-20 °C
VOLCÁNICOS. USA, NUEVA ZELANDA,         AGUAS O TERRENOS FRÍOS
ITALIA, INDONESIA JAPÓN                 PRODUCEN TOXINAS




                                             MESÓFILAS
           TERMÓFILAS                 25-40 °C
  50-60 °C Facultativos y obligados   SOPORTAN CORTOS
  Bacillus stearotermophilus (65-75   PERÍODOS DE EXPOSICIÓN A
  °C)                                 ELEVADAS TEMPERATURAS
                                      Escherichia coli
TEMPERATURAS CARDINALES
  Temperatura de mínimo crecimiento
  Temperatura más baja en la cual la
  bacteria puede dividirse

  Temperatura de máximo crecimiento
  Temperatura más alta en la cual la
  bacteria puede dividirse

  Temperatura de óptimo crecimiento
  Temperatura en la cual la bacteria crece
  más rápidamente (tiempo de generación
  más corto)
Acidófilas        pH
  pH 1-5,4

                                                   Alcalófilas
                                                   7- 11,5
                                                   Alcaligenes fecalis



                 Neutrófilas
                        5,4- 8
                 Causan enfermedades
             En mamíferos Escherichia coli               Vibrio cholerae 
Anaerobias Obligados
        Aerobias Obligados
                                       No realizan fosforilación oxidativa,
   Capaces de crecer en
                                       mueren en presencia de oxígeno,
  presencia de oxígeno y no
                                     carecen de enzimas como la catalasa.
  llevan a cabo fermentación
  Pseudomonas                                     Clostridium

         Microaerófilas
                                                Anaerobios aerotolerantes
                                O2
Crecen bien a bajas
concentraciones de oxígeno,                     Respiran anaeróbicamentre,
pero no resisten altas                          pero pueden sobrevivir en
concentraciones.                                presencia de oxígeno.
Streptococos Neisseria                          Lactobacillus


                     Anaerobios facultativos
                     Crece tanto en presencia como en
                     ausencia de Oxigeno .
                     E. coli
Medio de Cultivo
El material alimenticio en el que crecen
         los microorganismos

               El Cultivo
 El crecimiento de los microorganismos

Uno de los sistemas más importantes para
 la identificación de microorganismos es
  observar su crecimiento en sustancias
alimenticias artificiales preparadas en el
                laboratorio
MEDIOS DE CULTIVO


                SEGÚN                SEGÚN
              SU ESTADO         SU FINALIDAD EN
                FÍSICO           MICROBIOLOGÍA



 LÍQUIDO                                      NO SELECTIVOS




  SÓLIDO                                          SELECTIVOS




SEMI-SÓLIDO                                   ENRIQUECIDOS




                                              DIFERENCIALES
Sólidos

           CULTIVAR
           BACTERIAS
           AISLAR CULTIVOS
           PUROS
           CONTAJE
           AGAR 1,5-2 %



Líquidos
                             Semisólidos
AGUA                         MENOR CONCENTRACION
PEPTONA                      DE AGAR
                             MOVIMIENTO
NO SELECTIVOS:
       PERMITEN CRECIMIENTO DE GRAN VARIEDAD
                DE MICROORGANISMOS

                     SELECTIVOS
         PERMITEN EL CRECIMIENTO DE UN TIPO DE
   MICROORGANISMOS E INHIBEN EL CRECIMIENTO DE OTROS



AGAR VERDE BRILLANTE: INHIBE EL CRECIMIENTO DE GRAM-POSITIVAS
PERMITE EL CRECIMIENTO DE GRAM-NEGATIVAS (Salmonella)
DIFERENCIALES
PERMITEN ESTABLECER DIFERENCIAS
ENTRE DIVERSOS TIPOS DE MICROORGANISMOS
(POSEEN CONSTITUYENTES)
EVIDENCIAR UN CAMBIO OBSERVABLE

                    LACTOSA + INDICADOR
                    DE pH




           ENRIQUECIMIENTO
         SELECTIVOS QUE SE LE
        AGREGA, SANGRE, SUERO
               ALBÚMINA
       (PARA MICROORGANISMOS
              EXIGENTES)                  AGAR S-S
Técnicas de siembra
Siembra por estría en placa
Vertido de agar en placa
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Fisiología y metabolismo bacteriano: claves para entender su modo de vida

  • 1.
  • 2. FISIOLOGÍA Y METABOLISMO BACTERIANO  Permite conocer el modo de vida y el hábitat de diferentes especies bacterianas  Permite formular medios de cultivo para el aislamiento e identificación de los patógenos participantes.  Permite conocer y entender el modo de acción de algunos Antimicrobianos.
  • 3. Panorama del metabolismo y nutrición bacteriana Sistema vivo Dirigir reacciones químicas Moléculas: estructuras específicas Crecimiento
  • 4. Panorama del metabolismo y nutrición bacteriana Crecimiento Nutrientes Aumento de los constituyentes  Productos químicos que provienen  químicos celulares en cantidades  del exterior a partir de los cuales se  apropiadas construye una célula  Metabolismo
  • 5. Panorama del metabolismo y nutrición bacteriana Todos los procesos químicos que tienen  Metabolism lugar en una célula Energía o Proceso en el que una célula sintetiza  Anabolismo o todos sus componentes a partir de  Biosíntesis nutrientes tomados del medio exterior Reacciones que conducen a la  producción de energía utilizable por la  Catabolismo célula (ATP)
  • 6. Metabolismo bacteriano Oxidación­Reducción La utilización de energía química en organismos vivos implica reacciones REDOX   Oxidación: Se  define como la pérdida de electrones de una molécula   Reducción: Se define como la ganancia de electrones de una molécula  Donadores de electrones: Molécula que se oxida   Aceptores de electrones: Molécula que se reduce
  • 7. Mecanismos para la producción de energía Rx preparativas Rx oxidación Glucólisis    Etapa  I:  se  consumen  2  moléculas  de  ATP  y  no  hay  transferencia  de  electrones    Etapa  II:  ocurre  transferencia  de  electrones:  NAD+  acepta  2  átomos  de  hidrógeno y se convierte en NADH.     Ganancia  neta  del  organismo:  2  moléculas  de  ATP  por  molécula  de  Aldolasa glucosa.
  • 8. Fermentación El ácido pirúvico acepta electrones del NADH para formar ácido láctico, etanol, butanol, mientras genera NAD+ para la glicolisis. La fermentación no produce ningún ATP más que los 2 ATP formados en la glicolisis.
  • 9. Metabolismo bacteriano Fermentación  Fermentación  alcohólica láctica En levaduras, el piruvato se reduce a  En bacterias, el piruvato se  etanol con liberación de CO2 reduce a ácido láctico Piruvato  decarboxilasa Lactato DH Alcohol DH Fosforilación a nivle de sustrato
  • 11. Cadena respiratoria  transportadora de electrones  Sistema asociado a membranas    Funciones: (1) Aceptar electrones  de un donador y transferirlos a  un aceptor      (2) Conservar energía durante la transferencia de  electrones para   sintetizar ATP 
  • 12.
  • 13.
  • 14. Composición química de una célula bacteriana La  masa  celular  está  formada  por  sustancias  constituidas  por  4  tipos  de  átomos   Carbono (50%)                    Esqueleto de    Nitrógeno (12%) macromoléculas   Oxígeno    Hidrógeno Nutrientes:  Macronutrientes: Se requieren en altas cantidades: C, H, O, N, P, S, Mg, Fe   Micronutrientes: Se requieren en bajas cantidades: Cu, Mn, Ni, Zn 
  • 15. Visión global del crecimiento microbiano Crecimiento: Aumento en el número de células Procesos biosintéticos 2000 reacciones Síntesis de macromoléculas: DNA, RNA, proteínas Ensamblaje de macromoléculas: Pared celular, membrana citoplasmática, flagelos, ribosomas
  • 16. Fisión Binaria  Se originan 2 células hijas a partir de una célula madre  Todos los constituyentes celulares incrementan de manera adecuada
  • 17. LA DINÁMICA DE CRECIMIENTO
  • 18. REQUERIMIENTOS BACTERIANOS METABOLISMO Liberación de energía Requerimiento de energía catabolismo anabolismo
  • 20. FUENTE DE CARBONO Dióxido de carbono (CO2) Compuestos orgánicos: Glucosa, Galactosa
  • 21. Fuente de carbono: Fuente de carbono: Autótrofos: Requieren CO22 Autótrofos: Requieren CO Heterótrofos: Requieren compuestos Heterótrofos: Requieren compuestos orgánicos orgánicos
  • 22. Fuente de energía Fuente de energía Fototrofas: Luz como fuente de Fototrofas: Luz como fuente de energía. energía. Quimiotrofas: Rx químicas como Quimiotrofas: Rx químicas como fuente de energía. fuente de energía.
  • 23. Fuente de electrones Fuente de electrones Litotrofos: Litotrofos: Compuestos inorgánicos como Compuestos inorgánicos como fuente de electrones. fuente de electrones. Organotrofos: Organotrofos: compuestos orgánicos como fuente compuestos orgánicos como fuente de electrones de electrones
  • 24. FUENTE DE NITRÓGENO Orgánicos: Aminoácidos. Inorgánicos: NO3, NH3, N2.
  • 25. FUENTE DE FÓSFORO Fosfato inorgánico: PO4. Algunos organofosfatados: Hexosas-6- fosfato.
  • 26. FUENTE DE AZUFRE Inorgánica: SO4, H2S. Orgánica: Aminoácidos azufrados
  • 28. Fotoorganoheterotrofa: Energía: Luz Electrones: Compuestos orgánicos Carbono: Compuestos orgánicos.
  • 29. Quimiolitoautotrofa Energía: Rx químicas. Electrones: Compuestos inorgánicos. Carbono: CO2
  • 30. REQUERIMIENTOS DE LOS MICROORGANISMOS REQUERIMIENTOS ENERGÉTICOS REQUERIMIENTOS DE CARBONO En función de la fuente de energía En función de la fuente de carbono Fotótrofos: Luz Autótrofos: CO2 (CIANOBACTERIAS) Quimiótrofos: Oxidan compuestos Heterótrofos: Compuestos orgánicos químicos Carbonados Fotoautótrofos: Luz + CO2. Bacterias fotosintéticas Fotoheterótrofos: Algunas bacterias fotosintéticas Quimioautótrofos o quimiolitotrofos: Usan como fuente de energía compuestos inorgánicos reducidos: NO2, H2, Fe++...
  • 31. TEMPERATUR Hipertermófilas Psicrófilas A Termófilas Mesófila s
  • 32. HIPERTERMÓFILAS PSICRÓFILAS 150-500 °C RELACIONADOS CON FENÓMENOS 15-20 °C VOLCÁNICOS. USA, NUEVA ZELANDA, AGUAS O TERRENOS FRÍOS ITALIA, INDONESIA JAPÓN PRODUCEN TOXINAS MESÓFILAS TERMÓFILAS 25-40 °C 50-60 °C Facultativos y obligados SOPORTAN CORTOS Bacillus stearotermophilus (65-75 PERÍODOS DE EXPOSICIÓN A °C) ELEVADAS TEMPERATURAS Escherichia coli
  • 33. TEMPERATURAS CARDINALES Temperatura de mínimo crecimiento Temperatura más baja en la cual la bacteria puede dividirse Temperatura de máximo crecimiento Temperatura más alta en la cual la bacteria puede dividirse Temperatura de óptimo crecimiento Temperatura en la cual la bacteria crece más rápidamente (tiempo de generación más corto)
  • 34. Acidófilas pH pH 1-5,4 Alcalófilas 7- 11,5 Alcaligenes fecalis Neutrófilas 5,4- 8 Causan enfermedades En mamíferos Escherichia coli             Vibrio cholerae 
  • 35. Anaerobias Obligados Aerobias Obligados No realizan fosforilación oxidativa, Capaces de crecer en mueren en presencia de oxígeno, presencia de oxígeno y no carecen de enzimas como la catalasa. llevan a cabo fermentación Pseudomonas Clostridium Microaerófilas Anaerobios aerotolerantes O2 Crecen bien a bajas concentraciones de oxígeno, Respiran anaeróbicamentre, pero no resisten altas pero pueden sobrevivir en concentraciones. presencia de oxígeno. Streptococos Neisseria Lactobacillus Anaerobios facultativos Crece tanto en presencia como en ausencia de Oxigeno . E. coli
  • 36. Medio de Cultivo El material alimenticio en el que crecen los microorganismos El Cultivo El crecimiento de los microorganismos Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio
  • 37. MEDIOS DE CULTIVO SEGÚN SEGÚN SU ESTADO SU FINALIDAD EN FÍSICO MICROBIOLOGÍA LÍQUIDO NO SELECTIVOS SÓLIDO SELECTIVOS SEMI-SÓLIDO ENRIQUECIDOS DIFERENCIALES
  • 38. Sólidos CULTIVAR BACTERIAS AISLAR CULTIVOS PUROS CONTAJE AGAR 1,5-2 % Líquidos Semisólidos AGUA MENOR CONCENTRACION PEPTONA DE AGAR MOVIMIENTO
  • 39. NO SELECTIVOS: PERMITEN CRECIMIENTO DE GRAN VARIEDAD DE MICROORGANISMOS SELECTIVOS PERMITEN EL CRECIMIENTO DE UN TIPO DE MICROORGANISMOS E INHIBEN EL CRECIMIENTO DE OTROS AGAR VERDE BRILLANTE: INHIBE EL CRECIMIENTO DE GRAM-POSITIVAS PERMITE EL CRECIMIENTO DE GRAM-NEGATIVAS (Salmonella)
  • 40. DIFERENCIALES PERMITEN ESTABLECER DIFERENCIAS ENTRE DIVERSOS TIPOS DE MICROORGANISMOS (POSEEN CONSTITUYENTES) EVIDENCIAR UN CAMBIO OBSERVABLE LACTOSA + INDICADOR DE pH ENRIQUECIMIENTO SELECTIVOS QUE SE LE AGREGA, SANGRE, SUERO ALBÚMINA (PARA MICROORGANISMOS EXIGENTES) AGAR S-S
  • 41. Técnicas de siembra Siembra por estría en placa
  • 42. Vertido de agar en placa
  • 43.
  • 44. La confianza en sí mismo es el primer decreto del éxito