1. Autor. Mg. Q.F. Daniel Ñañez del Pino (2021)
UNIVERSIDAD FRANKLIN ROOSEVELT
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
CURSO DE FITOQUIMICA
GUÍA DE PRÁCTICAS
Origanumvulgare L. (LAMIACEAE)
AUTOR: Mg. Q.F. Daniel Ñañez del Pino
AÑO: 2021
2. Autor. Mg. Q.F. Daniel Ñañez del Pino (2021)
PRACTICA N°. 03: CARBOHIDRATOS: OLIGOSACARIDOS
Un carbohidrato que puede ser hidrolizado en dos moléculas de monosacáridos es llamado disacárido, los más
importantes son la lactosa (leche), la sacarosa (azúcar común) y la maltosa, por otro lado un carbohidrato que tienen
entre tres y diez monosacáridos unidos también por enlaces glucósidos, es denominado oligosacáridos.
CLASIFICACION DE
OLIGOSCARIDOS
HOMOGENEOS HETEROGENEOS
REDUCTOR
MALTOSA
CELUBIOSA
LACTOSA
NO – REDUCTOR
TREHALOSA SACAROSA
Competencias
- Al término de la práctica el estudiante será capaz de identificar los oligosacáridos presentes en las especies
vegetales,ello se realizará mediante reacciones específicas de identificación.
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Materiales y Reactivos.
Materiales Reactivos
Tubos de ensayo
Beaker
Mechero
Fosforo
Gradilla
Embudo
Papel de filtro
Matraz Erlenmeyer
Bureta
Pipeta volumétrica
Pro pipeta
Bagueta
Goteros
Rvo. Molish
Rvo. Antrona
Rvo. Barfoed
Rvo. Fehling A, B Y C
Rvo. bendict
Rvo. Tollens
Rvo. Herail
Rvo. Pozzi-Scott
Potasa alcohólica 50%.
I. ANALISIS CUALITATIVO
A) LACTOSA FUENTE: Leche de animal.
ENSAYO PROCEDIMIENTO REACCION
POSITIVA
FUNDAMENTO
REACCIONES GENERALES
MOLISH
(Alfa naftol 2% + H2SO4)
0.5mL de MP+0.5 mL sol.
reactivo
Formación de anillo purpura
ANTRONA
(Antrona 2% + H2SO4)
0.5mL de MP+0.5 mL sol.
reactivo
Coloración verde azulada.
REACCIONES DE DIFERENCIACION DE MONOSACARIDOS Y DISACARIDOS
BARFOED
(ácido acético + acetato
cúprico)
0.5mL de MP+1 mL sol.
Reactivo + calentar
pp- rojo (5-7 min,
monosacáridos; 10 -12
disacáridos)
REACCIONES DE AZUCARES REDUCTORES
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R. FEHLING
(Cu2SO4 + tartrato de Na y K
+ NaCO3)
0.5mL de MP+1 mL sol.
Reactivo + calentar
Precipitado
rojo ladrillo
R. BENEDICT
(+tartrato de Na + Cu2SO4 +
NaCO3
0.5mL de MP+1 mL sol.
Reactivo + calentar
Precipitado
rojo ladrillo
R. TOLLENS
(AgN03 + NH4OH)
0.5mL de MP+1 mL sol.
Reactivo + calentar
Formación de espejo de plata
B). SACAROSA FUENTE: caña de azúcar, remolacha azucarera.
REACCIONES GENERALES
MOLISH
(Alfa naftol 2% + H2SO4)
0.5mL de MP+0.5 mL sol.
reactivo
Formación de anillo purpura
ANTRONA
(Antrona 2% + H2SO4)
0.5mL de MP+0.5 mL sol.
reactivo
Coloración verde azulada.
REACCIONES DE DIFERENCIACION DE MONOSACARIDOS Y DISACARIDOS
BARFOED
(ácido acético + acetato
cúprico)
0.5mL de MP+1 mL sol.
Reactivo + calentar
pp- rojo (5-7 min,
monosacáridos; 10 -12
disacáridos)
REACCIONES DE AZUCARES REDUCTORES
R. FEHLING
(Cu2SO4 + tartrato de Na y K
+ NaCO3)
0.5mL de MP+1 mL sol.
Reactivo + calentar
Precipitado
rojo ladrillo
R. BENEDICT
(+tartrato de Na + Cu2SO4 +
NaCO3
0.5mL de MP+1 mL sol.
Reactivo + calentar
Precipitado
rojo ladrillo
R. TOLLENS
(AgN03 + NH4OH)
0.5mL de MP+1 mL sol.
Reactivo + calentar
Formación de espejo de plata
5. Autor. Mg. Q.F. Daniel Ñañez del Pino (2021)
(Vi) 10 mL M.P. + HCl cc D: 1.19,
10 gts.
REACCIONES DE PARTICULRES
R. HERAIL
(Nitrato cobaltoso +
NaOH50%)
0.5mL de MP+1 mL sol.
A+1mL sol.B
Color violeta azulada
R. POZZI - SCOTT
(Molibdato de amonio 15%)
0.5mL de MP+1 mL sol.
reactivo + H2SO4 en zona.
Formación de anillo violeta
R. POTASA ALCOHOLICA
50%.
0.5mL de MP+1 mL sol.
reactivo + calentar
pp. incoloro de aspecto
cristalino
II. ANALISIS CUANTITATIVO
Determinación cuantitativa de azucares por el método de Fehling.
Definición
Cantidad de azúcar reductornecesario, para reducir totalmente, el cobre contenido en un volumen determinado de S.R.
Fehling, hasta el estado de óxido cuproso.
Fundamento
Los disacáridos no reductores se hidrolizan fácilmente en medio acido (inversión) por poseer una unión glicosidica
furanosica.
Reactivos
S.R. Fehling A, B y C de título conocido
NaOH 10%
HCl cc, D: 1.9
Papel indicador
Técnica operatoria
1. hidrolizar la muestra problema
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Muestra problema preparada
FUEGO DIRECTO
Calendar en BM., por 20 30 min. Manteniendo el volumen constante con agua destilada.
a. Prepara 10mL de M.P + HCl cc D: 1.9, 10 gotas.
b. Calentar en baño maría por 20 – 30 minutos, manteniendo el volumen constante con agua destilada.
2. Neutralizar el hidrolizado: dejar enfriar y neutralizar la muestra con NaOH al 10% hasta ligera alcalinidad.
3. Completar a un volumen proporcional que facilite los cálculos, transferir a una fiola el contenido de vaso, enjuagar
este con porciones de agua destilada que se añaden a la fiola y completar volumen (VF), agitar bien y agregar a una
bureta para realizar la titulación.
4. Dosificar esta solución siguiendo el método de fehling, teniendo cuidado de mantener siempre en constante
ebullición.
Titular a ebullición constante hasta elviraje de color azul a amarillo.
Cálculos
El número de Ml gastado delvolumen final (VF) se relaciona con el volumen inicial que se tomó de la muestra el cual
se multiplica por el número de mL gasto en la titulación.
V. Inicial…..........................................V. final
X….................................................gasto en la titulación
X= gasto real del volumen inicial
10mL Fehling A + 10 mL
Fehling B + 5 mL de
Fehling C + 25 mL de agua
destilada.
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Hallar el porcentaje de azúcar reductor (A.R)
X…................................T.F
100mL….......................Y
Y= % de azúcares reductores (monosacáridos)
NOTA: para expresar el resultado en el disacárido sacarosa,se multiplica por el factor 0.95, que resulta de dividir el
P.M. 342 del disacárido (D) entre el P.M. 360 de 2 monosacáridos.
Cuestionario.
1. Describa la importancia de los oligosacáridos en el campo de la farmacología.
2. Mencione medicamentos que en su composición tenga (genina y oligosacárido).
3. Mencione con que otros reactivos de lo mencionado se puede identificar los oligosacáridos
4. Describa que azucares se separarmediante cromatografía en capa fina. Explique detalladamente.