Determinacion de proteinas mediante el metodo de kjeldahl nutricion
Universidad nacional santa
1. UNIVERSIDAD NACIONAL
SANTA
FACULTAD DE INGENIERIA
E.A.P AGROINDUSTRIAL
SAPONIFICACION
CURSO : QUIMICA ORGANICA
PRACTICA : 8
PROFESOR : Roger Armando Romero U.
INTEGRANTES : Yupanqui Bacilio Ivon Carla.
FECHA DE ENTREGA: 11/12 /12
2. I.
I. INTRODUCCION
V) RESULTADOS Y DISCUCIONES:
1. ACCION REDUCTORA DE LOS AZUCARES:
a) PRUEBA DE FEHLING
Carbohidrato Sin calor Con calor PRUEBA
Glucosa N.R.
Precipitado color rojo ladrillo,
con liquido amarillo oscuro
POSITIVA
Fructosa N.R.
Precipitado color rojo ladrillo,
con liquido amarillo oscuro
Xilosa N.R.
Precipitado color rojo ladrillo ,
con liquido amarillo oscuro
Galactosa N.R.
Precipitado color rojo ladrillo,
con liquido amarillo oscuro y
celeste en la parte de abajo
Maltosa N.R.
Precipitado rojo ladrillo, con
liquido mostaza
Lactosa N.R.
Precipitado rojo ladrillo, con
liquido mostaza
Sacarosa N.R. N.R. NEGATIVA
NUEVO CHIMBOTE - PERU
3. “... En estos 5 tubos se realizó la prueba de fehling para determinar cual de los
carbohidratos es un azúcar reductor y a cada tubo se le llevó al mechero para ser
calentado respectivamente y si se tornaba de color rojo ladrillo la prueba era
positiva…”
http://centros.edu.xunta.es/iesastelleiras/depart/bioxeo/lgazon/presen/bac2/bio/pdf/gli
cid.pdf
“...Al igual que las aldosas, las cetosas también dan positiva la reacción de Fehling a
pesar de que el grupo cetona no puede oxidarse a acido. La explicacion es que en
medio básico las cetosas se isomerizan fácilmente a las correspondientes aldosas
que si se oxidan…”
http://www.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/organica/guia_7
_carbohidratos.pdf
“…Se pudo observar que el color de la muestra cambio de color azul a color rojo
ladrillo. Entonces quiere decir que en la muestra hubo presencia de monosacáridos,
esdecir, la muestra salió
positiva…”http://www.monografias.com/trabajos82/practicade-reconocimiento-
carbohidratos/practicade-reconocimiento-carbohidratos2.shtml
La sacarosa es un disacárido que no posee carbonos anoméricos libres por lo que
carece de poder reductor y la reacción con el licor de Fehling es
negativahttp://es.answers.yahoo.com/question/index?qid=20080524155606AAER8nt
“…Luego de colocarlo a baño maría durante 5 minutos observamos que este
carbohidratos se oxido y en el fondo del recipiente se observando precipitado rojizo
que demuestra la presencia del óxido cúprico este color demuestra que este es un
monosacárido…”http://www.fsalazar.bizland.com/pdf/POLISACARIDOS.pdf
“…Estos resultados nos indican que los azúcares: glucosa, maltosa y lactosa tienen
carácter reductor…”
http://www.uniquindio.edu.co/uniquindio/ntic/trabajos/10/davidyoscar/paginas/reccar
b.htm
4. b) PRUEBA DE TOLLENS:
CARBIHIDRATO SIN CALOR CON CALOR PRUEBA
GLUCOSA Color negro
Formación del
espejo deplata
Positiva
FRUCTOSA
Transparente con
precipitado
MALTOSA Color negro
SACAROSA Color negro
“…reaccionan con el reactivo de Tollen debido a que los azucares contienen
grupo(s) hidroxilo en su molécula, lo cual hace que forme un complejo de color
plata tipo espejo…
”http://ar.answers.yahoo.com/question/index?qid=20070621183022AA2awPD
“..Al haber verificado que después de haber echado el reactivo de tollens se tornó la
película de palta superior se prueba que este disacárido rompió su enlace en
glucosa y fructosa…”http://www.buenastareas.com/ensayos/Poder-Reductor-
Formaci%C3%B3n-De-Osazonas-y/1993022.html
“…Son todos azucares. Los azucares soncarbohidratos. Los carbohidratos tienen el
grupo aldehído -CHO. (Aldosas) Como el grupo aldehído reacciona positivamente
con el reactivo de Tollens, esas sustancias reaccionan positivamente con el reactivo
de Tollens…”
http://ar.answers.yahoo.com/question/index?qid=20070621183022AA2awPD
5. 2. ENSAYO DE MOLISH
CARBOHIDRATO ANILLO Precipitado Color obtenida Prueba
GLUCOSA Color violeta
en liquido
transparente
y violeta
Precipitado
color blanco
Un violeta
claro
homogéneo
en toda la
reacción
Positiva y
exotérmica
FRUCTOSA Sin precipitado
“…Observamos que la reacción tomo una coloración violeta rojizo demostrando
que es positivo para monosacáridos adema se nota que la reacción fue exotérmica
pues libero calor después de reaccionar.
Luego de esa reacción se mezcla con el alfa-naftol en presencia de ácido sulfúrico
atacando la zona del doble enlace del grupo carbonilo uniéndose en un compuesto
mixto pues presenta sustituyentes ácidos y fenolicos que toma una coloración rojiza
violeta en un anillo del tubo de ensayo…”
http://es.scribd.com/doc/7244232/CARBOHIDRATOS
“…Ensayo de Molisch: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de
carbohidratos enel que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con ácido
sulfúrico concentrado hasta Monosacáridos y se convierten en derivados del
furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales Reaccionan con α-naftol formando un
color púrpura violeta
Incoloro: No es Carbohidrato.Anillo rojo violeta:Si es Carbohidrato…”
http://www.fsalazar.bizland.com/pdf/POLISACARIDOS.pdf
3. HIDROLISIS ACIDA DE LA SACAROSA
6. HIDROLISIS Y NEUTRALIZACION:Luego de calentar (la reacción sucedió rápidamente ya que
se hace con una sustancia inorgánica por lo cual acelera la reacción) un precipitado blanco
lechoso con liquido transparente que al mover la solución se hacía uniforme logrando hasta
aquí descomponer la sacarosa en glucosa y fructosa, luego de agregarle las gotas de
fenolftaleína con hidróxido de sodio pasamos la solución de medio acido a básico con un
pH=7
PRUEBA ENSAYADA CON FELHING: luego de descomponer la sacarosa obtenemos un color
transparente con un pequeño precipitado. al cual al agregarle feling resulta la prueba
positiva por aue formación del precipitado color rojo ladrillo
“…Sin embargo, en presencia de ClH y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir,
incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que la
forman, glucosa y fructosa, que sí son reductores …”
http://es.answers.yahoo.com/question/index?qid=20080524155606AAER8nt
“…Como se veía en la experiencia 1 la sacarosa daba la reacción de Fehling
negativa, por no presentar grupos hemiacetálicos libres. Ahora bien, en presencia
del ácido clorhídrico (HCl) y en caliente, la sacarosa se hidroliza descomponiéndose
en los dos monosacáridos que la forman (glucosa y fructosa)…”
http://www.uniquindio.edu.co/uniquindio/ntic/trabajos/10/davidyoscar/paginas/reccar
b.htm
4. HIDROLISIS ENZIMATICA:
“…La maltosa está compuesta por dos monosacáridos unidas por lo tanto el
producto de hidrolisis acida de la sacarosa daría una fructosa y una glucosa. La
reacción enzimática de hidrolisis está diseñada para que la enzima añada al enlace
glicosidico una molecula de agua, de esta manera rompe el enñlace entre los
sacáridos...”
http://es.answers.yahoo.com/question/index?qid=20091201160609AAKyTsa
“…Estas enzimas ejercen un efecto catalítico hidrolizante, es decir, producen la
ruptura de enlaces por agua según: H-OH + R-R’ → R-H + R’-OH. Se nombran
mediante el nombre del sustrato seguido de la palabra hidrolasa, y cuando la
enzima es específica para separar un grupo en particular, éste puede utilizarse como
prefijo…” http://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3lisis_enzim%C3%A1tica
5. REACCION DEL ALMIDON CON IODO:
7. Obtuvimos: una color violeta que al ser sometida al calor se vuelve transparente
.pudimos observar también que al enfriarla vuelve a la color original siendo la
reacción reversible
“…yodo se introduce entre las espiras de la molécula de almidón. No es por tanto,
una verdadera reacción química, sino que se forma un compuesto de ique modifica
las propiedades físicas de esta molécula, apareciendo la coloración azul
violeta.http://www.uniquindio.edu.co/uniquindio/ntic/trabajos/10/davidyoscar/pagin
as/reccarb.htmnclusión
“…La prueba del yodo es una reacción química usada para determinar la presencia
u alteración de almidón u otros polisacáridos. Una solución de yodo - diyodo
disuelto en una solución acuosa de yoduro de potasio - reacciona con almidón
produciendo un color púrpura
profundo…”http://es.wikipedia.org/wiki/Prueba_del_yodo
“…El almidón y el yodo forman un complejo de yoduro de almidón, de color azul
violáceo. Si se le agrega unas gotas de lugol a una muestra y esta permanece de
color amarillento, la reacción es negativa…”
http://es.answers.yahoo.com/question/index?qid=20080125091029AAtqDlB
“…Con este método puede identificarse el almidón.Este método se usa para
identificar polisacáridos. El almidón en contacto con unas gotas de Reactivo de
Lugol (disolución de yodo y yoduro potásico) toma un color azul-violeta
característico…”http://www.uniquindio.edu.co/uniquindio/ntic/trabajos/10/davidyo
scar/paginas/reccarb.htm
VI) CUESTIONARIO
1. FORMULE LA REACCION QUIMICA DE CADA UNO DE LAS PRUEBAS DE
ENSAYO
1. ACCION REDUCTORA DE LOS AZUCARES:
8. a. PRUEBA DE FEHLING:
CH2OH(CHOH)NCOONa + 4COONa(CHOH)nCOONa+ Cu2O + 3NaOH
b. PRUEBA DE TOLLENS
CH2OH (CHOH)NCHO + 2Ag(NH3)2OH --à CH2OH(CHOH)NCOOH + 2Ag + NH4OH +
3NH3
2. ENSAYO DE MOLISH
3. HIDROLISIS ACIDA DE LA SACAROSA:
4. HIDROLISIS ENZIMATICA:
9. 5. REACCION DEL ALMIDON CON IODO
2. MENCIONE LAS APLICACIPONES Y USOS DE LOS PRINCIPALES CARBOHIDRATOS
LACTOSA:Este azúcar se encuentracomotal en la leche SEUTILIZA PARA :Leche fluida,
Leche en polvo , Helado, Yogurt, Queso
MALTOSA: Noexiste comotal enla naturaleza,yse obtiene apartir de la hidrólisis del
almidon (un polisacárido de reserva en vegetales). Cereales germinantes y la malta.
Fructosa: Se utiliza como azúcar baja en calorías, pues proporciona casi el mismo
dulzor con menor cantidad que la sacarosa (azúcar común), es utilzada en bebidas y
dulces
Glucosa:Se utilizacomoexcipiente de tabletas,lahayenpolvoy líquida,muy utilizada
enrefrescosydulces
10. Sacarosa: Añadida a casi todos los productos dulces: galletas, pasteles, mermeladas,
etc,es el azúcar de caña, también se le encuentra en el néctar de las flores. La
sacarosa esel edulcorante másutilizadoen el mundo industrializado, aunque ha sido
enparte reemplazadaenlapreparaciónindustrial de alimentos por otros endulzantes
tales como jarabes de glucosa, o por combinaciones de ingredientes funcionales y
endulzantes de alta intensidad.
XILOSA: se encuentra ampliamente distribuida en distintas materias vegetales:
madera (cerezo), paja, etc. También se puede encontrar en los tejidos
conectores como en el páncreas o el hígado. Su función es principalmente
alimenticia pero también se utiliza para hacer pruebas de la absorción
intestinal.
Galactosa: que se convierte en glucosa en el hígado como aporte energético.
Además, forma parte de los glucolípidos y las glucoproteínas de las membranas
celulares de las células, sobre todo de las neuronas.
11. VII) CONCLUSIONES:
El reactivo de fehling nos permite identificar la presencia de carbohidratos
reductores,son azúcares reductores solo aquellos que poseen un grupo
aldehído o un carbono anomérico libre capaz de oxidarse como los
monosacáridos que pueden ser: aldosas(xilosa, galactosa, glucosa) o
cetosas (fructosas); y los disacáridos (lactosa y maltosa). Pero también
obtuvimos un carbohidrato no reductos como la sacarosa ya que la prueba
nos resultó negativa por que la sacarosa no presentar grupos
hemiacetálicos (Los hemiacetales son reductores mientras que los
hemicetales no lo son) libres, por lo tanto no existe la posibilidad de
interconversión, un caso parecido es también el del almidón.
En la prueba de Tollens la adhesión del espejo de plata al tubo de ensayo
demuestra positivo para un monosacárido. Y en un disacárido demuestra
que ha roto su enlace como fue el caso de la sacarosa (glucosa +fructosa) y
la maltosa(glucosa + glucosa )
El reactivo de Molish sirve para identificar cualquier carbohidrato.El cambio
de coloración violeta demuestra que la reaccion fue positiva para
losmonosacáridos (glucosa y fructosa) El ataque con ácido sulfúrico arranca
una molécula de agua y transforma el monosacárido en un derivado
furfurilico.La unión con el alfa –naftol es donde realmente se da el cambio
de coloración con radicales de ácido sulfónicos existentes en el alfa-naftol.
El alfa-naftol ataca el grupo carbonilo del radical formilo del derivado
furfurilico.
la Hidrolisis ACIDA nos permite descomponer los disacáridos y nos resultó
positiva es decir se una molécula de agua y se descompone en los
monosacáridos en el caso de la sacarosa en glucosa y fructosa
PODEMOS DECIR QUE por haberse utilizado una sustancia inorgánica la
descomposiciónocurrió rápidamente y pudimos comprobarlo con fehling ya
que obtuvimos un precipitado rojo ladrillo la prueba de fehling fue positiva
por ya teníamos la fructosa y glucosa, lo cual no sucedió en la primera
reacción directamente con la sacarosa .además logramos neutralizar la
reacción con la fenolftaleína e hidróxido de sodio para tener un pH 7
En la hidrolisis enzimática también obtuvimos la reacción. En esta reacción
las enzimas actúan de la misma forma que el HCl pero de manera más lenta
12. por ser orgánica, pero comprobamos con el reactivo de fehling que si se
logró descomponer en dos monosacáridos (fructosa y glucosa).ya que
obtuvimos el precipitado rojo ladrillo.
EN LA REACCION CON IODO nos permite identificar el almidón. Este
método se usa para identificar polisacáridos. Y la prueba fue positiva al
obtener violeta también Se descubrió Yodo separamás de las moléculas de
Almidóncuandoel aguaestabacaliente haciendode estareacción una reacción débil
(colortransparente) ,mientrasque con el agua fría ocurría lo contrario el Almidón se
uniera más convirtiendo esta reacción en unareacción fuerte por ese motivo se
afianzo su color violeta.
XI) BIBLIOGRAFIA
http://www.fsalazar.bizland.com/pdf/POLISACARIDOS.pdf
http://www.buenastareas.com/ensayos/Poder-Reductor-Formaci%C3%B3n-De-
Osazonas-y/1993022.html
http://centros.edu.xunta.es/iesastelleiras/depart/bioxeo/lgazon/presen/bac2/bi
o/pdf/glicid.pdf
http://es.scribd.com/doc/7244232/CARBOHIDRATOS
http://www.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/organica
/guia_7_carbohidratos.pdf
http://www.monografias.com/trabajos82/practicade-reconocimiento-
carbohidratos/practicade-reconocimiento-carbohidratos2.shtml
http://es.answers.yahoo.com/question/index?qid=20080524155606AAER8nt
http://www.uniquindio.edu.co/uniquindio/ntic/trabajos/10/davidyoscar/paginas
/reccarb.htm
http://www.uniquindio.edu.co/uniquindio/ntic/trabajos/10/davidyoscar/paginas
/reccarb.htm
http://www.uniquindio.edu.co/uniquindio/ntic/trabajos/10/davidyoscar/paginas
/reccarb.htm