Descripción del trabajo de laboratorio de la cátedra de Química Orgánica I del Inst Sup del Prof Joaquín V González - Bs As - Argentina - Ciclo lectivo 2013

1. Trabajo practico Nº 3
Cromatografía
DRA. ALEJANDRA SALERNO
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
INSTITUTO SUPERIOR DEL PROFESORADO “JOAQUÍN V.
GONZÁLEZ”
CÁTEDRA DE QUÍMICA ORGÁNICA I
2013

2. Objetivo
Separación de los componentes de una muestra
binaria de colorantes mediante cromatografía
preparativa en columna
Azul de metileno
+
Rojo de metilo

4. N
S N
+
CH3
N
CH3
CH3 CH3
Cl-
CAS [7220-79-3]
C16H18ClN3S . 3 H2O
PF 373.90
Azul de metileno Basic Blue 9

5. N
CH3
CH3
ONaO
CAS [845-10-3]
C15H14N3O2Na
PF 291.28
Rojo de Metilo sal sódica

6. PASOS A SEGUIR
1. Elección de la FM
2. Preparación de la columna
3. Relleno de la columna
4. Siembra
5. Elución
6. Análisis de las fracciones
obtenidas

7. Elección de FM por cromatografía analítica en
capa fina (tlc, Thin Layer Chromathograpy )
1
Preparamos los
capilares para la
siembra

8. FE: gel de sílice
FM: 1) diclorometano
2) metanol
3) diclorometano: metanol 3:1
4) diclorometano: metanol 30:1
Calle 1: mezcla de colorantes
Revelado: luz visible
Preparamos cuatro
cubas con las FMs 1-4
sembramos cuatro
placas con la mezcla de
colorantes

9. Eluímos una placa en
cada cuba
Desarrollo del cromatograma:
Extremo
sumergido en
el solvente
Avance del
frente del
solvente
Comienza la
separación
Continúa la
separación
Analizamos los resultados Elección de la FM1

10. Calculen Rf de cada colorante en cada uno de los cromatogramas
Rf = 0-1

11. 2, 3 Preparación y relleno de la columna
Que necesitamos??

12. - Se utilizan columnas de vidrio con un
estrechamiento inferior
- Se coloca un algodón en el extremo inferior
- Se agrega la fase estacionaria sola o en suspensión
en la fase móvil

13. Para tener en cuenta en este paso COLUMNA BIEN COMPACTADA
burbujas canales
irregular

14. QUE EL BORDE DE LA COLUMNA ESTE PAREJO
QUE NO HAYA FRACTURAS NI BURBUJAS, NI SE SEQUE

15. 4 Siembra de la mezcla a separar
La mezcla a separar se deposita sobre la parte superior de la FE (0.5
mL), cuidadosamente, y luego una pequeña cantidad de algodón, si es un sólido se
disuelve en una mínima cantidad de FM

16. 5 Elución de la columna
1) FM1 = CH2Cl2: MeOH (30:1)
2) FM2 = CH2Cl2: MeOH:AcH (30:10:4)
- La elución se realiza por gravedad
- Las fracciones que tienen el mismo
contenido se juntan en mismo recipiente

17. Desarrollo FM1

18. Desarrollo FM2

19. 6 Análisis de las fracciones obtenidas por tlc
Eluato 1 Eluato 2
Localización e identificación de los
componentes:
Testigo de rojo de metilo
Testigo de azul de metileno
Eluato 1
Eluato 2
FE silica gel sin indicador
FM CH2Cl2:MeOH
(30:1)
Revelado: luz visible
T1,2 E1 E2
conclusiones
Cálculo Rf