El documento describe un método para analizar 39 pesticidas en pimientos y tomates mediante cromatografía de gases con detector de nitrógeno-fósforo. El método utiliza acetona, acetonitrilo y acetato de etilo para la extracción de muestras, seguido de una extracción líquido-líquido con acetato de etilo y n-hexano/ciclohexano. El método es rápido, sensible y utiliza pequeños volúmenes de solventes, con buena recuperación y baja detección. Las ventajas incl

1. MÉTODO DE MULTIRESIDUOS
PARA EL ANÁLISIS DE
PESTICIDAS EN PIMIENTO Y
TOMATE POR CG CON DETECTOR
DE NITROGENO-FÓSFORO
Ana Moya
Celia Mejias
Lidia Montero
María Rangel
Réka Cane
Santiago Montalvo
Steven de La Peña

2. 1. INTRODUCCIÓN
 Aplicación de pesticidas esencial para controlar plagas y
enfermedades en cultivos.
 Pesticidas calidad y productividad cosechas.
 Inconveniente residuos en frutas y verduras niveles
máximos de residuos para limitar pesticidas en alimentos.
 Difícil determinar residuos pesticidas por la complejidad de analitos
implicados.
 Técnica más usada para su análisis GC con detectores como
fotómetro de llama, fósforo de nitrógeno y de captura electrónica.
 Objetivo trabajo método rápido multirresidual para análisis
de 39 pesticidas en pimiento y tomate.

3. 2.1. MATERIALES Y PATRONES
 Los pesticidas patrones usados fueron:
Acetona, acetonitrilo, diclorometano, etil-acetato,
ciclohexano y n-hexano.
 Se prepararon soluciones patrón de concentración
10µg/ml.
 Se inyectaron soluciones estándar para obtener la
linealidad del detector y los límites de detección de los
pesticidas (0,05 y 2µg/ml).

4. 2.2. APARATOS
 Cromatógrafo de gases, Agilent modelo HP6890, equipado
con un detector de P-N y un inyector automático split-
splitless modelo 7683.
 Fue empleada una columna capilar fundida HP_5MSI (30m X
0,25mm) y un espesor de película de 0,25µm.
 El CG fue equipado con un detector de espectroscopia de
masas modelo 5973N, operando en modo ionización por
impacto de e- con una energía ionizante de 79eV.
 La temperatura de la fuente de iones(cámara de ionización) fue
de 230ºC y la del cuadrupolo (separador magnético) de 150ºC.

5. Espectrometría de masas
 Consta de 3 partes
principales:
Cámara de ionización,
lugar donde se generan
los electrones que
bombardean la muestra
y la “convierten” en
iones.
Separador magnético
(cuadrupolo), selecciona
los que pasan en función
de su m/z.
Detector, genera una señal
eléctrica proporcional al
número de iones que
inciden.

6. 2.2. APARATOS
Condiciones de operación:
 Inyector 250ºC
 Detector 325ºC
 N2 como gas auxiliar a 25ml/min
 He como gas portador
 H2 y aire entre 3-60ml/min
Gradiente de temperaturas:
70ºC 25ºC/min 150ºC 3ºC/min 200ºC
(2 min) (0 min)
8ºC/min
Ttotal=41,87min 280ºC
(10min)

7. El análisis se realizó con SIM (Monitoreo
selectivo de iones)
+/- 0.1 min
del tiempo
esperado
Dentro
del 10%

8. 2.2. APARATOS.
Preparación de la muestra
 Extracción de la muestra: homogeneizador
PT2000
 Desecación de la muestra:
 Centrifugación: centrífuga Eppendorf5810R
 Evaporación: rotavapor Büchhi R-205
2.3.Preparación de la muestra.
 En dos invernaderos orgánicos fueron cultivados
vegetales libres de pesticidas. Fueron usados como
patrón interno.
 Las muestras reales fueron cogidas en 6
invernaderos experimentales.

9. Preparación de la muestra
10 g
20 mL
AcetonaAcetona
2 min
Acetato de
etilo/ciclohexano
(1/1, v/v)
Acetato de
etilo/ciclohexano
(1/1, v/v)
20 mL
10min
Extracto
Fase
orgánicaResiduo

10. 3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN.
 Extractantes:
1. Acetona
2. Acetonitrilo
3. Acetato de etilo
 Extracción líquido-líquido acetato de etilo
etilo acetato de n-hexano+ciclohexano.
 Residuos de plaguicidas

11. 3.1 DETERMINACIÓN
CROMATOGRAFÍA DE GASES
 Prueba acetato de etilo
 no fue continuado
 elevadas cantidades de agua residual en la fase
orgánica
 Buenos resultados
1. acetato de etilo / ciclohexano
2. acetato de etilo / mezclas de n-hexano.
 Relación de acetona / acetato de etilo / ciclohexano de
2/1/1 = separación satisfactoria
 Alta sensibilidad
 Alta selectividad

12. 3.1 DETERMINACIÓN
CROMATOGRAFÍA DE GASES
 La ausencia de interferencias de co sustratos extraídos
simultáneamente se confirmó por el extracto del blanco
 El método desarrollado:
 Extractos limpios del blanco sin interferencias
durante CG.
 No necesaria la limpieza de las muestras de origen
vegetal.

13. 3.2. VALIDACIÓN DEL MÉTODO
► La respuesta del NPD en la concentración testada (0,05 – 2 μg
ml-1
) a todos los pesticidas fue lineal.
► Rango de Límites de detección (LODs)  0,1 y 4,4 μg kg-1
.

14. 3.2. VALIDACIÓN DEL MÉTODO
► Recuperación:
- Estudio de recuperación de cada pesticida  Evaluación
de la eficiencia
de la extracción.
- Recuperaciones obtenidas para todos pesticidas:

15. 3.3. DETERMINACIÓN EN MUESTRAS REALES
► Los resultados de este estudio demostraron que el método
propuesto para determinar residuos de pesticidas en
varias hortalizas es rápido simple sensible y utilizable
para volúmenes de solventes pequeños reduciendo el riesgo en
la salud humana y en el medio ambiente.
► Para todos los pesticidas estudiados:
 Buena recuperación y baja detección.
 Descomposición rápida. Sin efectos dañinos
al medio ambiente.
Ventajas del método comparado con otros métodos convencionales:
▪ Uso de bajos volúmenes de disolventes orgánicos en las muestras de
extracción, evitando así el uso de organoclorados.
▪ Tiempo de extracción corto.
▪ Aislamiento no es requerido.

16. RESUMEN Y CONCLUSIONES
Objetivo  método rápido
multidireccional para
analizar 39 pesticidas.
(residuos en vegetales)
Técnica  Cromatografía
de gases con detector
NDP.
Solventes  Acetona,
acetonitrilo y acetato
de etilo.
Ventajas de CG-NDP
 Rápido, simple, sensible
y utilizable para
volúmenes de solventes
pequeños.
 Buena recuperación y
baja detección.
 Uso de volúmenes bajos
de solventes orgánicos
en la muestra de
extracción.
 Tiempo corto de
extracción.
 No requiere aislamiento