Diferentes tecnicas histologicas descritas en el libro de Rooss

1. TECNICAS HISTOLOGICAS
Dra. Carmen Danela Roque Alcaraz

2. METODOS HISTOLOGICOS

3. METODOS HISTOLOGICOS
• Son las técnicas encaminadas a preparar el tejido para su observación microscópica.
• Procedimientos vitales  Flujo sanguíneo
• Procedimientos supravitales  Cultivo de tejido y manipulación celular
• Procedimientos postvitales  Inanimados

4. PROCESO HISTOLÓGICO

5. FIJACION
• Preservar las características morfológicas y moleculares del tejido
• Evitar procesos degradativos  Autolisis, Putrefaccion
• Métodos de fijación
• Físicos: Congelacion y calor
• Químicos: Inmersion y perfusión
• Fijadores: Alcohol etílico, Acido acético, Glutaraldehído, Formaldehido (Formalina)

6. INCLUSION
• Endurecer la muestra para cortarla
• Paso previo: lavar y deshidratar (xenol)
• Aclarado = Solventes organicos (xileno) para extraer exceso de alcohol
• Parafina y resina

8. CORTE
• Micrótomo para parafina: 5 – 20 µm
• Vibratomo: 30 – cientos de µm de grosor
• Micrótomo de congelación: 30 – 100 µm
• Criostato: 10 a 40 µm
• Ultra micrótomo: nanómetros
• Ultracriotomo: nanómetros

9. • Colorantes ácidos y básicos
• Enlace electrostático
• Acidofilia y basofilia
• Eosina  acido  Citoplasma  Rosado
• Hematoxilina  Base  ADN yARN  Azul
• Tincion general: Hematoxilina - Eosina
TINCION

10. HEMATOXILINA
• Uso: Tincion General
• Color: Azul
• Resultado: Nucleo, regiones acidas del
citoplasma, acidos nucleicos, RER

11. EOSINA
• Uso: Tincion General
• Color: Rosado
• Resultado: Regiones básicas del citoplasma, fibras
colágenas, fibras elásticas, eritrocitos
anaranjado/rojo

12. HEMATOXILINA – EOSINA = TINCIÓN
GENERAL

13. TÉCNICAS AVANZADAS
• Histoquímica
• Proporciona información sobre la presencia y localización de macromoléculas
intracelulares y extracelulares
• Se utiliza el reactivo de PAS  Magenta
• Localización de carbohidratos
• Inmunohistoquimica
• Se utilizan anticuerpos, marcado con fluoresceína
• Gran especialidad alta afinidad
• Método directo e indirecto
• Enfermedades autoinmunes y oncológicas

16. HISTOQUÍMICA CON LECITINAS
• Proteinas capaces de unirse a compuestos glúcidos
• Requiere un marcador
• Localizacion de carbohidratos
• RADIOAUTOGRAFIA
• Se utilizan isotopos radioactivos en macromoléculas
• Información directa respecto al sitio dentro de la celula donde se sintetiza un producto
especifico
• Medible en el tiempo

19. EVALUACIÓN
• Cual es el objetivo de la histología?
• Cuales son los tejidos fundamentales?
• Para que sirve la fijación?
• Porque se den teñir los tejidos?