Revisión del articulo:
Antimicrobial photodynamic therapy against multidrug-resistant Acinetobacter baumannii clinical isolates mediated by aloe-emodin: An invitro study
Por. Sara Correa Giraldo
Referencias:
https://www.bioted.es/protocolos/INTRODUCCION-ENZ-RESTRICCION.pdf
https://www.youtube.com/watch?v=JSnB2HJnuOY
https://www.youtube.com/watch?v=SmFvPpET-KE
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5346588/
http://www.biologia.edu.ar/microscopia/meb.htm
2. Introduction
Aerobic, non fermentative, Gram-
negative coccobacillus, was
considered a low-category
pathogen in the past, but has now
emerged as a leading cause of
hospital- and community-acquired
infections.
frequent cause of
pneumonia and septicemia
in immunocompromised
patients
commun in patients
who require devices like
ventilators, urinary or
intravenous catheters
4. Materiales y métodos
Cultivo celular: proceso por el cual se
mantienen y multiplican células bajo
condiciones controladas
Utilidad en el estudio: medir los valores
mínimos de concentración inhibitoria y
desarrollo de colonias
5. Materiales y métodos
Restricción con enzimas: Las enzimas de
restricción son nucleasas que cortan
ADN de doble cadena cuando
reconocen un patrón de secuencia
específico. Generan fragmentos de ADN
conocidos como fragmentos de
restricción.
Utilidad en el estudio: hacer la
electroforesis en gel de agarosa y ver las
modificaciones en el material genetico
6. Materiales y métodos
microscopía electrónica: permite
observar la muestra en cortes ultrafinos,
se dirige un haz de electrones hacia el
objeto que se desea aumentar y esto
genera una imagen aumentada.
Utilidad en el estudio: estudiar los
daños en la estructura celular causados
por la terapia fotodinámica
antimicrobiana
7. Materiales y métodos
Viabilidad: monitorear la viabilidad de
las poblaciones bacterianas en función
de la integridad de la membrana de la
célula. Las células con una membrana
comprometida que se consideran
muertas o moribundas se teñirán de
rojo, mientras que las células con una
membrana intacta se teñirán de verde
Utilidad en el estudio: evaluar cuánta
cantidad de Aloe Emodina y radiación
debe usarse para destruir
completamente la membrana de la
bacteria
9. 1-4 primer
aislado
5-8
segundo
aislado
9-12 tercer
aislado
➔ 1-5-9 no tienen tratamiento
➔ 2-6-10 incubadas con AE 100
uM a 37° por 60 min
➔ 3-7-11 irradiados con luz por
20 minutos
➔ 4-8-12 incubados con AE 100
uM durante 60 min e irradiados
por 20 min
10.
11.
12. Discussion
Author Concept
Bertoloni et al. suggested that cytoplasmic membrane was the primary target in the aPDT
process, while DNA might be a secondary target because damaged DNA
was only found at a relatively long irradiation time
Nitzan et al. used TMPyP-mediated aPDT to treat A. baumannii, and found that DNA
breakage was detected only after a long time of illumination while bacterial
cells were no longer viable
Huang et al. recently reported that the genomic DNA of methicillin-resistant
Staphylococcus aureus on the agarose gel became very weak
following 5-aminolevulinic acid (ALA)-mediated aPDT treatment
13. Conclusions
Aloe Emodin showed no significant toxicity and in the isolates it manages to destroy the
membrane of the bacteria and condensation of the ribosomes in the cytoplasm.
the destruction of the membrane will depend on the dose of light energy applied to the
target bacteria
The study suggests that aloe emodin is a promising non-toxic photostabilizer for
photodynamic antimicrobial therapy of surfaces infected with MDR A. baumannii
Notas del editor
Se recogieron 3 aislamientos de MDR A. baumannii
hindIII: 125-23130
1-5-9 no tienen tratamiento
2-6-10 incubadas con AE 100 uM a 37° por 60 min
3-7-11 irradiados con luz por 20 minutos
4-8-12 incubados con AE 100 uM durante 60 min e irradiados por 20 min