Presentación artículo académico: Antibacterial activity and mechanism of a laccase-catalyzed chitosan–gallic T acid derivative against Escherichia coli and Staphylococcus aureus, a cargo de estudiante de medicina.

1. Presented by:
Stefany Vásquez Betancur
III
Medicine
Pontificia Bolivariana University

2. Introduction
Bacteria
Escherichia coli
➔ Gram negative
➔ Bacillus
➔ Facultatively anaerobic
➔ Found in lower intestine of warm-
blooded organisms (normal flora)
➔ Causes food poisoning
➔ Produces vit K
Staphylococcus aureus
➔ Gram positive
➔ Coccus- staphylococcus
➔ Facultative anaerobic
➔ Positive catalase and nitrate
reductor
➔ Found in skin, upper respiratory
tract and microbiota
➔ Causes food poisoning, respiratory
and skin infeccions

3. CIntroduction
Antibacterial
Gallic acid
➔ Meaning
Destructive to or inhibiting
the growth of bacteria.
➔ Characteristics
-Derived of gallic acid
-Mucopolysaccharide
- biodegradability
and biocompatibility.
➔ Properties
-Renewable resource
-Poor stability at high
temperatures
-Easy degraded
➔ Facts
irreversible changes in
membrane
➔ Pseudomonas
aeruginosa
➔ S. aureus
➔ Listeria
monocytogenes
➔ Functions
-Antioxidant
-Anticancer
-Antibacterial
-Food preservation
Laccase-catalyzed chitosan–gallic

4. General objetive
➔ Determinate the Antibacterial activity and
mechanism of a laccase-catalyzed chitosan–gallic T
acid derivative against Escherichia coli and
Staphylococcus aureus.

5. Materiales y métodos
Ensayo de MTT
➔ La citotoxicidad de la célula de CTS-GA
Fundamento
Se basa en la reducción metabólica del bromuro (MTT)
realizada por la succinato DH en azul de formazan.
● Ayuda a determinar la funcionalidad mitocondrial de las
células tratadas.
¿Para qué?
● Determinar citotoxicidad.
● Medir supervivencia y proliferación celular de E. coli y S.
aureus.
La cantidad de células vivas es
proporcional a la cantidad de formazán
producido.

6. Materiales y métodos
Fundamento
Es la concentración más baja de un antibiótico que inhibe el
crecimiento de una determinada cepa bacteriana.
.
¿Para qué?
Ayuda a determinar qué clase de antibiótico es más eficaz y a
partir de esto, tomar conducir a la elección adecuada de éste.
Ensayo en MIC
➔ Concentración mínima
inhibitoria

7. Materiales y métodos
Difusión en disco
Fundamento
Medio de cultivo Muller-Hinton. Se valora la interacción de un
microorganismo con un agente antibacteriano.
¿Para qué?
Al medir la respuesta con el agente antibacteriano se conocerá
si tendrá respuesta con E. coli y S. aureus.

8. Materiales y métodos
Electroforesis en gel de agarosa-
Fragmentación del DNA
Fundamento
Separación de fragmentos de ADN, según su tamaño y carga.
Aplicación de corriente en un gel de agarosa.
.
¿Para qué?
Identificar el efecto de E. coli y S. aureus.

9. Results
Observación con microscopio
electrónico de barrido SEM
Cambios morfológicos en 24h, exposición de
las bacterias CTS–GA
Observación de
microscopia óptica de
trasmisión (TEM)

10. Results
➔ A mayor concentración, no
hay bacterias.
➔ Green: bacterias vivas y
muertas
➔ Yellow: daño en las
membranas celulares
➔ Red: células muertas
Tinción con AO y PI fluorecencia
Microscopia de escaneo laser confocal

11. Results
Efectos del CTS–GA en citotoxicidad de células
fibroblásticas
➔ En base a los
resultados del MTT
➔ CTS–GA: quitosan
injertado en acido
gálico
➔ CTS: quitosan

12. Results
➔ Cuadro 1: bandas claras y
brillantes por el ADN que no fue
tratado.
➔ Cuadro 2: desaparición de
bandas que fueron tratadas con
CTS–GA
➔ Destrucción por parte de los
bacterianos
Fragmentación del ADN

13. Discusión
Author What he say? It was fullfiged or not?
Ramos, et all. This conclusion may be rationalized
by the characteristic differences in
the outer membrane between Gram-
positive and Gram-negative
bacteria.
Yes
Nazzaro, et all, (2011)
Simultaneously, CTS–GA entered
the bacterial cell through the
impaired cell membrane. This
compound then inhibited the
synthesis of DNA and eventually led
to apoptosis
Yes
Rabea, et all (2003) Reported that the antibacterial
mechanism of CTS and its
derivatives was dominated by the
interaction between positively
charged CTS groups and negatively
charged molecules on the microbial
membrane.
Yes

14. Conclusions
1. This study can helps in public health, as a way of primary
prevention and promotion of health. Usefull to teach to the
vulnerable communities the use of this antibacterials, taking
control of contagious disease diffusion.
1. It can motivate cientifics to find new discoveries of antibacterial
mechanisms that could be more efficient and innovating from
inusual biocomponents like plants.

15. Mapa conceptual