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UNIVERSIDAD ESTATAL DE BOLIVAR
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS, RECURSOS NATURALES Y
DEL AMBIENTE
ESCUELA DE ING. AGROINDUSTRIAL
ANTEPROYECTO DE TESIS
TEMA:
ELABORACIÓN DE UN SUB PRODUCTO DE LA INDUSTRIA LÁCTEA(
LACTOSUERO PARA LA OBTENCIÓN DE ALCOHOL) EN EL CANTON
GUARANDA, PROVINCIA BOLIVAR
AUTORAS:
OLGA GOMEZ
CRISTINA MAYORGA
DIRECTOR:
ING MARCELO GARCIA
GUARANDA- ECUADOR
2010
2
I. INTRODUCCIÓN
El lacto suero es un su producto de la quesera y de la caseína que tiene una composición
variable con el tiempo de fabricación del que ha sido, así por ejemplo el suero procedente
de una fábrica de quesos de pasta blanda que Fabrique caseína láctea será más acida y
contendrá menos lactosa peor mas sales minerales que el suelo procedente de una fabrica
que quesos la pasta cocida, en lo que concierne a la materia, grasa, el contenido puede
variar notablemente, pero en cuanto pasa de 2 – 3gr al quesero lo interesa recuperarla por
desnatado. Es una de las mayores reservas de proteínas alimentarias que aún permanecen
fuera de los canales de consumo humano l producción mundial del suero aproximadamente
120 millones de toneladas en 1990 contiene unos 0,7 millones de toneladas, de proteínas de
relativamente alto valor biológico igual el contenido de proteína de casi 2 millones de
toneladas soya. (veisseryre, 1980)
La federación Internacional de lechería no nace distinción ente el objeto ultimo de la
coagulación, que puede ser la elaboración de queso o de la caseína, industrial, la food and
Drug administración de los Estados Unidos, define al suero como la sustancia liquida que s
contiene al separar el coagulo de la leche, crema o leche descremada y la fabricación de
queso, existe 2 tipos de suero.
Suero dulce que es el obtenido en el procedimiento de elaboración de quesos en los cuales
se ha usado principalmente enzimas de tipo cuajo para obtener el coagulo.
Suero ácido que es el proveniente de queso e que el coagulo ha sido formado
funcionalmente por acidificación mediante adición de ácidos orgánicos o inorgánicos
diluidos así como también la fabricación de la caseína, láctica, este suero se considera de
menor calidad que el suero dulce
(versserute 1980)
3
La fermentación es un proceso de transformación de biomoléculas en moléculas más
sencillas a través de oxidación incompleta, generalmente anaeróbico (en ausencia de aire),
y que produce finalmente un compuesto orgánico (que contiene carbono). El tipo de
fermentación depende del producto obtenido, y pueden ser fermentaciones acéticas,
alcohólicas, butíricas, de la glicerina, lácticas o pútridas.
(http://mx.geocities.com/avolaje/Bioenergetica_b1/respanaerobia_b1.html)
Alcohol es la Obtención, por fermentación del azúcar, del almidón, oxidación del metano,
hidrolisis del sulfato de etilo. Para la producción de alcohol han sido utilizadas diferentes
fuentes de carbono como materia prima (materiales biológicos), las cuales deben poder ser
transformadas con facilidad en azúcar fermentable, almidón o celulosa. Su uso práctico
estará determinado por el rendimiento en alcohol, por su costo y el tipo de microorganismo
que se utilice. (Palacio y Almazána and Horii J.TIBS, 1979, Blanco C.G, 1978)
Fermentación alcohólica del suero de leche. Como todos los métodos de fermentación, el
punto principal para conseguir buenos resultados en la fermentación del suero de leche
estriba en seleccionar los agentes de fomentación más idóneos. Suero dulce contiene un 4-5
% de azúcar de leche (lactosa), cuya fermentación se ajusta a la ecuación de Gay Lussac
(c12H22O11+H2O)X=2(C6H12O6)X.
C6H12O6=2C2H5OH+2CO2.
Según ella, se forman, por tanto, 2 mol de alcohol (92) y 2 mol anhídrido carbónico
(88).por consiguiente de 100kg de suero pueden obtener unos 2.5 kg de alcohol (100%).
El suero contiene un cierto número de microorganismos que interfieren e incluso inhiben, la
fermentación alcohólica. Por otra parte, los componentes del suero, como son sustancias de
descomposición de las albuminas, fosfatos etc., cubren sobradamente las necesidades en
sustancias nutritivas del agente fermentativo, de modo que en este caso ya no es necesario
incorporar medio sulfato amónico y fosfatos para que se efectúen la fermentación según
K.R DIETRICH, el problema escriba, la mayoría de las veces, en obtener cultivos de
levadura idóneos para el azúcar de la leche.
4
Para aislar las levaduras que fermentan la lactosa se ha partido del kefir producto que
además de las bacterias lácticas del kéfir,razar de streptococcus lactis y bacterias acéticas,
contiene diversas razas de levaduras. Las levaduras deben hibridarse. Para este fin se
copulan las células haploides resultantes de dos esporas de distintas razas para formar una
célula diploide, levadura hibrida.
La formación de esporas se inicia con una buena nutrición de las capas de levadura. La
levadura de tres días desarrollada en tubitos inclinados, se agita con 1cc de agua estéril, y la
suspensión resultante se dispone sobre la superficie de un bloque de yeso cuya base se
encuentra sumergía en una solución estéril de acido acético de ph 4. Después de mantener
esta siembra durante 1- 2 días a 25 ºc, la mayor parte de células vegetales forma cuatro
ascosporas. Cultivando en el correspondiente medio nutritivo cada ascospora, una vez
aislada se forma de cada espora unas células haploides pequeñas y redondas para destruir
las células vegetales se suspenden las esporas en agua, se calienta a 58ºc durante 2-4
minutos y se vierte el liquido en placas con medio solido se desarrollan pequeñas colonias
rugosas, en las que una vez aisladas, se determinan sus propiedades características,
seleccionándolas adecuadamente. Si se revela una propiedad apetecida, se efectúan los
correspondientes cultivos haploides por selección en serie, para fines de hibridación se
efectúan después de los cruses correspondientes, disponiendo las células haploides en
grandes cantidades de suero aproximadamente 1/2cc, en el que se mantienen a 19ºc durante
12 horas después de efectuar los correspondientes cultivos en placas se reconoce los nuevo
diploides por formar extensas colonias lisas que presentan grandes células elípticas.
Entre los cultivo puros de levadura del azúcar de la leche obtenidos de esta forma se
encuentra familias capaces de fermentar conjuntamente la lactosa, maltosa y sacarosa; estas
levaduras no solamente produce la enzima lactasa, que desdobla la lactasa en los
monosacáridos glucosas y galactosa, sino también maltasa e invertasa, que hidrolizan
respectivamente la maltasa a glucosa y la sacarosa a glucosa y fructosa.
Para obtener las cantidades necesarias de levadura del azúcar de leche para la fermentación
alcohólica del suero, se siembra el cultivo puro en suero estéril contenido en una matraz de
carlsberg, acelerando después la germinación de la levadura en un recipiente de cultivo
puro mediante la adecuada aireación. La levadura del cultivo obtenida de esa forma pasa al
5
suero fresco albuminoideo previamente calentado a28ºc, preferiblemente estéril que se
encuentra en el recipiente de fermentación propiamente dicho. Al cabo de 20 horas de
fermentación, el proceso se ha completado total mente. La lactosa del suero ha
desaparecido por completo. Por el contrario, el alcohol asciende al 2,4 % en volumen. El ph
es 5 aproximadamente. Durante la fermentación apenas se forma espuma, de modo que
cuando se llena el recipiente de fermentación solo hay que dejar un pequeño margen para
prevenir el ascenso del líquido.
En el método de fermentación continuo, según sea las propiedades del suero fresco no
esterilizado, es decir, según el contenido en bacterias inhibidoras de la fermentación, se
bombea una cantidad de suero fermentado, de 1/8 aproximadamente, y se repite esta
fermentación hasta que ya no se evita la proliferación de los microorganismos extraños y la
actividad fermentativa de las levaduras de la lactosa empieza a decaer.
El consumo de vapor para la destilación importa, aproximadamente, 18 kg por cada 100
litrs de suero fermentado.
Por otra parte, K.R. DIETRICH ha logrado fermentar, en un solo proceso, las primeras
materias usuales, farináceas y no farináceas (patatas, cereales, melaza, fruta) y el suero,
utilizando simplemente levaduras lácteas. Así por ejemplo, el suero caliente se añade al
macerado de patatas mezclado con malta hasta que se alcanza la temperatura adecuada para
desdoblar el almidón en azúcar. Más tarde puede añadirse al macerado de patata dulce
suero en cualquier proporción. Operando de esta forma solo se requiere una raza de
levadura, y la producción de alcohol se aumenta en 2.5 litros aproximadamente por cada
100 litros de suero adicional. Compárese también la obtención de acetona y alcohol
butílico.
H. BRUMME también ha expuesto de un modo resumido la fermentación del suero, tanto
para obtener alcohol como levadura. Hay que destacar de un modo especial el método de G.
DEMMLER y la Zellstoffabrik Waldhof, mediante el cual, operando con suero de un
contenido en lactosa del 4,0%, pueden obtenerse 20,5 gr de levadura por litro. También
trata de las investigaciones de G. WILHARM sobre el rendimiento en la obtención de
alcohol de las levaduras que fermentan la lactosa.
6
II. JUSTIFICACIÓN
En la provincia Bolívar existe empresas dedicadas a la labor de procesamiento de productos
lácteos, por este motivo la mayor cantidad de suero es desechado o utilizado como lavaza
para animales
El lacto suero es uno de los materiales más contaminantes que existe en la industria
alimentaria, cada 1000 litros de lacto suero genera a cerca de 35Kg de demanda biológica
de oxigeno (D.B.O.) y cerca 68Kg de demanda química de oxigeno (D.Q.O).esta fuerza
contaminante es equivalente a las aguas negras producidas en un día por 480 personas.
Más aun, no usar lacto suero como alimentos un enorme desperdicio de nutrientes el lacto
suero contiene un poco más del 25 % de la proteína de la leche, cerca del 8% de materia
grasa e cerca del 95% de lactosa
Sin embargo y a pesar de la falta crónica de proteínas en gran parte del mundo, una porción
muy considerable de la producción total de lacto suero se vierte como residuo y otro por
ciento se utiliza alimentación de animales
El Equipo Regional de fomento en lechería de la FAO para América Latina ha señalado que
un adulto de 50kg requiere de los siguientes cantidades de proteína diariamente 23g
caseína o 17gr de proteína de huevo 0 14gr de proteína de suero, consideradas entre las de
mayor valor biológico.
En el ecuador, el suero del queso es un producto residual que tiene poca aplicación y en
ocasiones se desperdicia: esto se demuestra los balances de las empresas en las cuales es
corriente que no figuren los beneficios financieros de este producto.
Esto lo demuestran no solo los balances de las empresas, en las cuales es corriente que no
figuren para nada los beneficios financieros obtenidos de este producto, sino también las
advertencias frecuentes de los servicios de depuración del agua, los cuales encuentran
dificultades considerables para tratar los residuos que contienen una cantidad elevada de
suero.
7
Las industrias lácteas y las queserías caseras producen quesos por coagulación mediante el
cuajo; por lo tanto, se dispone de suero dulce en la mayoría de las industrias.
En realidad se trata de un subproducto integrado por valiosas materias, cuya obtención y
oportuno aprovechamiento no tiene una gran importancia para la economía nacional.
Hasta hace poco tiempo, la utilización industrial del lactosuero planteaba numerosos
problemas por lo que un volumen considerable de este producto iba a parar a los ríos y
desagües.
Actualmente, la lucha contra la polución ambiental prohíbe esta práctica y el vertido del
suero en un curso de agua debe ir precedido necesariamente de una depuración costosa.
En una época en que las necesidades de la alimentación humana y animal son cada vez mas
importantes es preferible el aprovechamiento del lacto suero mediante técnicas apropiadas a
destruirlo con lo que se pierde por completo.
Además, es importante anotar que en país hay gran cantidad de productos elaborados a
partir de la leche
Por este motivo hemos visto la necesidad de dar un valor agregado a este subproducto
lácteo.
8
III. OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL:
 elaborar un sub producto de la industria láctea( lactosuero para la obtención de alcohol)
en el cantón Guaranda, provincia bolívar
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
 Evaluar el azúcar reductor total presente en el lactosuero
 Seleccionar un microorganismo adecuado para la fermentación (levadura)
 Establecer las condiciones de fermentación
 Evaluar el producto final ( análisis físico químicos del mejor tratamiento)
9
IV. HIPÓTESIS.
Con la utilización del lactosuero , podremos obtener alcohol
10
V. REVISIÓN DE LITERATURA
5.1 LECHE
La Leche, es un líquido opaco, blanquecino o amarillento, segregado por las glándulas
mamarias de las hembras de los mamíferos para la alimentación de sus crías. La leche
normal no aparece hasta varios días después del alumbramiento; el líquido viscoso
segregado desde el momento del parto hasta la aparición de la leche normal recibe el
nombre de calostro. La leche está formada por glóbulos de grasa suspendidos en una
solución que contiene el azúcar de la leche (lactosa), proteínas (fundamentalmente caseína)
y sales de calcio, fósforo, cloro, sodio, potasio y azufre. No obstante, es deficiente en hierro
y es inadecuada como fuente de vitamina C. La leche entera está compuesta en un 80 a un
90 % de agua. La leche fresca tiene un olor agradable y sabor dulce. Su densidad relativa
varía entre 1,018 y 1,045, y la de la leche de vaca entre 1,028 y 1,035. Los glóbulos de
grasa tienen una densidad relativa inferior a la de la fase líquida y, por lo tanto, ascienden a
la superficie para formar nata (crema) cuando se deja reposar la leche en un recipiente.
También se llama nata a la lacto albúmina, que es la telilla que aparece en la superficie
cuando se ha hervido la leche.
Para elaborar productos lácteos de buena calidad, es condición fundamental que la materia
prima principal, leche cruda, sea de buena calidad. Es, por tanto, evidente que la industria
debe ejercer un estrecho control de la leche, poniendo especial énfasis en los factores que
tengan mayor influencia en cada caso particular (6).
El concepto de calidad de la leche involucra los siguientes requisitos generales, que son
validos para productos lácteos:
 La cantidad de microorganismo debe ser baja.
 Debe ser sana, es decir, exenta de gérmenes patógenos y provenientes de vacas sanas.
 Debe tener composición normal.
 Debe ser fresca (tener una acidez normal).
11
 Debe ser pura, es decir libre de materias extrañas y libres de restos de remedios, por
ejemplo: antibióticos, pesticidas, detergentes y desinfectantes.
 Debe tener una apariencia agradable y un olor y sabor fresco y puro.
Debe ser enfriada o procesada tan rápidamente como sea posible después del ordeño.
Para asegurarse que la leche tenga todas sus características, que significan buena calidad,
hay que analizar la leche que llega a la planta y que se va a procesar. Estos análisis
normalmente influyen en el precio que recibe el producto por su leche; Para aplicar este
control y evaluar así la calidad de la leche, es necesario establecer un criterio técnico
basado en métodos seguros, precisos, rápidos y fáciles.
Las primeras pruebas son pruebas rápidas de plataforma, que sirve para decidir la
aceptación o rechazo de la leche. También pueden indicar si es necesario hacer análisis de
laboratorio mas exactos. Por ejemplo, si con el lactodensímetro se descubre leche con
viscosidad anormal, puede ser conveniente efectuar análisis para determinar la materia seca
y/o crioscopia. Así mismo, si la prueba de alcohol es positiva, se puede medir el pH y/o
acidez titulable. En el momento de la recepción no solamente hay que analizar la calidad de
la leche, sino que también hay que hacer una verificación del volumen o cantidad de leche
(6).
5.1.1 Características de la Leche
Antes de hablar de las características de la leche, es necesario encontrar una definición de la
misma. La leche es un líquido que se segrega en las glándulas mamarias de hembras sanas,
poco después del calostro, cuando nace la cría; es un líquido de composición compleja,
blanco y opaco, de sabor ligeramente dulce y de pH casi neutro.
La función primordial de la leche es la de alimentar a las crías durante el período crítico
posterior al nacimiento, cuando el desarrollo es rápido y no puede sustituirse por otro
alimento.
La leche es un líquido que mantiene en suspensión glóbulos de grasa, y proteínas y está
constituido por lactosa, sales minerales y algunos otros elementos (14).
12
5.1.2 Componentes de la leche
Es aventurado hablar del contenido cuantitativo de los constituyentes de la leche, debido a
que éste no es muy constante; pero si puede decirse que la leche es una mezcla de
sustancias como lactosa, otros carbohidratos en menor concentración, lípidos, proteínas,
sales minerales, vitaminas, etc., que coexisten en emulsión, suspensión y solución (14).
5.1.2.1 Carbohidratos
Los carbohidratos se encuentran libres en solución en la fase acuosa de la leche y unidos
principalmente a las proteínas; entre ellos están la lactosa, polisacáridos, glucosaminas, etc.
Con excepción de la lactosa, la proporción de carbohidratos es siempre menor en le leche
que en el calostro (14).
5.1.2.2 Lactosa
La lactosa es un carbohidrato que se encuentra libre en solución y es el componente más
abundante, simple y constante en la leche. La lactosa es el factor limitante en la producción
de leche, es decir, que la cantidad de leche que se produce depende de la síntesis de la
lactosa. Desde el punto de vista biológico, la lactosa se distingue de los demás azúcares por
su estabilidad en el tracto digestivo del hombre y de algunos animales maduros.
La lactosa es el componente más lábil ante la acción de los microorganismos; diversas
bacterias la transforman en ácido láctico y otros ácidos orgánicos. En la leche de vaca, el
contenido de lactosa varía entre 48 y 50g/lt; debido a la regulación osmótica, el contenido
de lactosa en la leche es proporcionalmente inverso al contenido de sales.
La lactosa es un disacárido de galactosa y glucosa unida por enlaces β 1-4, en la leche
existen isómeros α y β que se distinguen por sus propiedades físicas. La lactosa también se
encuentra en forma cristalina como monohidrato.
La lactosa es poco soluble en agua (aproximadamente, diez veces menos que la sacarosa) y
cristaliza muy rápido. La β - lactosa es la más soluble (7.3 a 17g en 100ml de agua) y
aumenta con la temperatura; tiene un débil sabor dulce y su poder edulcorante es seis veces
menor que el de la sacarosa. La hidrólisis de la lactosa aumenta su solubilidad y su poder
edulcorante, así como el rendimiento quesero, debido a que la acidificación es más rápida.
13
El sabor de la leche cocida (hervida) se debe a la caramelización de la lactosa y a las
reacciones de Millard que se llevan a cabo entre los grupos carboxilo libres de la lactosa y
los grupos amino libres de las proteínas, durante el calentamiento. El calentamiento
también provoca la formación de glucosa, hidroximetilfurfural, ácido fórmico, ácido
levúlico, etc., a partir de la lactosa.
La lactosa constituye la parte esencial del extracto seco de los sueros lácticos; en las
diversas transformaciones de la leche, la lactosa siempre se encuentra en la parte acuosa
(14).
5.1.2.3 Oligosacáridos
Estos carbohidratos tienen un gran interés biológico a pesar de que se encuentran en
cantidades muy pequeñas en la leche. La leche humana es la que contiene mayor cantidad
de estos carbohidratos, los cuales están constituidos por dos a seis moléculas de
carbohidratos y se clasifican en tres tipos:
1. Oligosacáridos no nitrogenados que contienen glucosa, galactosa, metilpentosa, mucosa,
etc.
2. Oligosacáridos que contienen azúcares nitrogenados, como la N-acetilglucosamina.
3. Oligosacáridos que contienen ácido neuramínico o lactamínico, que en su forma
acetilada con el nitrógeno o el oxígeno, recibe el nombre de ácido siálico (14).
5.2 SUERO
El suero, es el residuo liquido de la producción de queso y caseína, es una de las mayores
reservas de proteínas alimentarías que aun permanecen fuera de los canales de consumo
humano. La producción mundial de suero, aproximadamente unos 120 millones de
toneladas en 1990, contiene unos 0.7 millones de toneladas de proteínas de relativamente
alto valor biológico, igual al contenido de proteínas de casi 2 millones de toneladas de soja
(5).
14
También el suero es el líquido más o menos turbio, ácido y poco viscoso, de color amarillo-
verdoso, resultante del escurrido de la cuajada, y que prácticamente carece casi en absoluto
de grasa y albuminoides, su principal riqueza es la cantidad algo importante de lactosa y
trazas de albúmina y de grasa (15).
Se establece que el suero es un subproducto de la elaboración del queso, de la caseína. Las
características del suero varían un tanto con la leche que se emplea y con el método de
coagulación. El suero contiene la mayor parte de los componentes insolubles de la leche de
la que deriva. Es rico en lactosa e incluye más o menos la mitad de las cenizas y hasta una
cuarta parte de las proteínas de la leche.
Sin embargo, y a pesar de la falta crónica de proteínas en gran parte del mundo, una
proporción muy considerable de la producción total de lactosuero se vierte como residuo y
otro por ciento se utiliza en la alimentación de animales.
El suero representa el 80 a 90 % del volumen que entra en el proceso y contiene alrededor
del 50 % de los nutrientes de la leche original; proteínas solubles, lactosa, vitaminas y sales
minerales. Aunque el suero contiene nutrientes valiosos, solo recientemente se han
desarrollado nuevos procesos comerciales para la fabricación de productos de alta calidad a
partir de dicho suero.
El Equipo Regional de Fomento y Capacitación en Lechería de la FAO para América
Latina han señalado que un adulto de 70 Kg. requiere las siguientes cantidades de proteínas
diariamente: 23 gr. de caseína, o 17 gr. de proteína de huevo o 14 gr. de proteína del suero,
consideradas entre las de mayor valor biológico.
Existen dos tipos de suero: suero dulce que es el obtenido en el procedimiento de
elaboración de quesos en los cuales se ha usado principalmente enzimas de tipo cuajo, para
obtener el coagulo y, suero ácido que es el proveniente de quesos en que el coagulo ha sido
formado fundamentalmente por acidificación mediante adición de ácidos orgánicos o
inorgánicos diluidos, así como también de la fabricación de la caseína láctica, este suero se
considera de menor calidad que el suero dulce (5).
15
5.2.1 COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL SUERO
La composición del suero depende del tipo de leche y de los procesos empleados en la
elaboración del queso. Siendo además, estos últimos muy variados, de acuerdo al tipo de
queso y según el procedimiento especifico que emplea cada planta. Sin embargo, la
composición del suero, en cuanto a macro constituyentes es relativamente poco variable.
Como se observa en la tabla Nº 01
Cuadro No 1 Composición Química del Suero
Agua 93%
Sólidos totales 7%
Lactosa 4.9 –5.1%
Materia grasa 0.3%
Cenizas o sustancias minerales 0.6%
Proteína total 0.9%
Proteína Coagulada térmicamente 0.5%
Proteína nitrogenadas no coaguladas 0.4%
Fuente: III-B- FAO –Elaboración de Queso. 1985
Cuadro No 2 Composición del Suero Dulce y el Suero Ácido (%)
COMPONENTES DULCE (CUAJO) ACIDO
Humedad 93-94% 94-95%
Grasa 0.2 -0.7% 0-0.4%
Proteína 0.8 – 1.0% 0.8 – 1.0%
Lactosa 4.5 – 5.0% 4.5 – 5.0%
Cenizas 0.5-0.7% 0.70%
Sales minerales 0.05% 0.4
Fuente: MADRID, A. Curso de Industrias Lácteas, 1999.
16
Entre los ingredientes menores del suero se destacan:
Calcio 51 mg/100gr
Fosforo 53 mg/100gr
Hierro 1.0 mg/100gr
Vitamina A 10 U.I.mg/100gr
Tiamina 0.03 mg/100gr
Rivoflavina 0.14 mg/100gr
Niacina 0.10 mg/100gr
La composición de la fracción proteica del suero se puede ver en la tabla Nº 03, donde se
compara con la misma fracción de la leche. Se puede ver el enriquecimiento en ∞ -
lactalbumina y β – lactoglobulina, en proteína no caseinicas que ha sufrido el suero.
Cuadro No 3 Composición Porcentual Aproximada: Proteínas de la Leche y del
Suero.
LECHE SUERO
∞s – Caseína 50 -
К – Caseína 11 -
Β – Caseína 20 -
γ – Caseína 5 -
∞ - Lactalbumina 3.5 - 4.5 20-44
Β – Lactoglobulina 7.5 – 10 .0 44 – 52
Sero albúminas 1 5 – 7
Inmunoglobulinas 2.03 – 3.0 12 -16
Proteosa – peptonas 4.00 – 4.5 19
Fuente: FAO –Elaboración de Queso. 1985
17
Por otra parte, el suero contiene la mayoría de los componentes identificados en la leche,
aunque el nivel de grasa es mínimo, los contenidos de lactosa, sales, ácidos orgánicos y
vitaminas son interesantes, lo mismo que las proteínas. Estas últimas, además de su valor
nutritivo y calórico (13 -15 % de las calorías del suero) tienen propiedades específicas tales
como: la lactoferrina es transportadora de hierro, las inmunoglobulinas son portadoras de
anticuerpos, y la lactolina se supone que juega un rol biológico importante por estar
presente en el calostro en niveles 4 a 10 veces superiores a la leche.
Finalmente, la lactosa confiere por su bajo poder edulcorante (27 veces inferior a la
sacarosa) sabores característicos a los productos lácteos y suministra energía durante la
lactancia. Los problemas de intolerancia provocados por la ausencia de la enzima intestinal
específica (lactasa) se superan por procesos industriales.
El Suero, normalmente es sometido a una centrifugación para recuperar la grasa que aun
contiene, quedando con solo el 0.03 – 0.05 %, esto determina que la presencia de vitaminas
liposolubles (A, D y E) sea muy baja.
El suero da origen a una gran variedad de productos según como se haya modificado su
composición original; estos constituyen una gama de ingredientes para la industria
alimentaria principalmente. El suero debe procesarse lo antes posible después de su
recolección ya que su composición y temperatura es un buen medio de crecimiento
bacteriano (5).
5.2.1.1 Proteínas del Lactosuero Lácteo
Reciben este nombre el conjunto de sustancias nitrogenadas que no precipitan cuando el pH
de la leche se lleva a un pH de 4,6 que corresponde al punto isoeléctrico de la caseína bruta.
Por esto se la denomina también proteínas solubles. Se encuentran en el suero que se separa
del coágulo obtenido por la adición del cuajo. Representa aproximadamente el 20% del
total de las proteínas de la leche (17).
Los diversos métodos de fraccionamiento permiten distinguir cuatro grandes fracciones:
- albúminas
- globulinas
- fracción proteasa- pectosa
- proteínas menores
18
5.2.1.2 Albúminas
Cuantitativamente es la fracción más importante, pues representa el 75% de las proteínas
del suero lácteo y el 15% del total de las proteínas de la leche. Comprende
fundamentalmente tres constituyentes:
α- lactoalbúmina
β- lactoglobulina
Seroalbúmina
α- lactoalbúmina es una proteína de peso molecular 16.300. Muy soluble en agua a pH 6,
pero mucho menos soluble en la zona de pH 4 - 4,6. Representa cerca del 25% de la
fracción albúminas.
El papel biológico de la α- lactoalbúmina ha sido descubierto recientemente. La proteína
interviene en la biosíntesis de la lactosa, de la cual se sabe que está bajo el control de tres
enzimas, una de ellas sintetiza dos subunidades proteicas A y B. La proteína B no es otra
que la
α- lactoalbúmina. Mientras que los bovinos pertenecientes a la especie Bos taurus no
presentan variantes genéticas de la a-lactoalbúmina (tipo A), ciertos bovinos de la especie
Bos indicus presentan una variante (tipo B) (17).
5.2.1.3 Globulinas
Mientras que la fracción albúminas permanece soluble en una disolución semisaturada de
sulfato amónico, la fracción globulina precipita. Representa el 10 al 12% de las proteínas
solubles.
Se sabe desde hace tiempo que pueden separarse mediante diálisis, dos subfracciones: una,
la euglobulina, es insoluble en agua pura en su punto isoeléctrico y la otra, la
pseudoglobulina, es soluble en las mismas condiciones. La gran heterogeneidad de estas
subfracciones ha sido demostrada por numerosos autores, principalmente mediante técnicas
electroforéticas. Las globulinas de la leche presentan una actividad inmunológica
importante. Por esto se las llama a menudo inmunoglobulinas. Son proteínas de peso
19
molecular muy elevado, superior a 150.000, cuya actividad inmunológica puede
caracterizarse haciéndolas reaccionar con los antígenos apropiados.
Se ha determinado por este método la presencia de aglutininas que provocan la aglutinación
de ciertas bacterias y que de esta manera desempeñan un papel importante entre las
sustancias inhibidoras del desarrollo de los gérmenes en la leche cruda.
Ha sido puesto en evidencia igualmente el papel de la euglobulina presente en la superficie
de los glóbulos grasos en el fenómeno de la formación espontánea de la crema (17).
5.2.1.4 Proteasa – Peptonas
Es la fracción de las proteínas de la leche que no precipitan por calentamiento a 95°C
durante 30 minutos seguida de acidificación a pH 4,6. Representa aproximadamente el 10%
de las proteínas del suero lácteo. Es muy heterogénea y no está aún perfectamente definida.
Engloba fundamentalmente 4 componentes denominados componentes 3, 5, 8 rápido y 8
lento. El componente 3 se encuentra exclusivamente en el suero lácteo. Es rico en hexosas
(7%), hexosaminas (6%) y ácido siálico (3%), pero pobre en fósforo (0,5%). Las tres
restantes, menos ricas en glúcidos y ácido siálico pero más ricas en fósforo, se encuentran
tanto en el suero lácteo como en las micelas (17).
5.2.1.5 Proteínas Menores
Agrupa un cierto número de proteínas que se encuentran en la leche en pequeña cantidad y
son difíciles de clasificar. Entre ellas destaca la transferrina o proteína roja, la lactolina y
las proteínas de la membrana del glóbulo graso. En conjunto representan menos de 5% de
las proteínas del suero lácteo.
Lactotransferrina.- Está constituida por una proteína con una única cadena polipeptídica de
peso molecular 86.000. Contiene glúcidos (7%), hierro (0,1%) y cistina (5%). Se encuentra
absorbida sobre el precipitado de la caseína isoeléctrica.
Puede fijar reversiblemente hierro adquiriendo una coloración rosa que se desarrolla
dependiendo de la cantidad de hierro conjugado. La fijación de hierro por la transferrina es
fuertemente dependiente del pH y de la presencia de iones carbónicos.
20
Lactolina.- Como la proteína anterior, se encuentra absorbida sobre el precipitado de
caseína isoeléctrica. Es pobre en fósforo y glúcidos, no contiene metales y su peso
molecular es 43.000. El calostro es diez veces más rico en lactolina que la leche.
Proteínas de la membrana del glóbulo graso.- Pueden aislarse a partir de la mazada
obtenida por batido de una crema lavada. Su complejidad refleja el carácter heterogéneo de
la composición proteica de la membrana del glóbulo graso. La presencia de glúcidos (3 a
4%) y fósforo (0,6-0,7%) las convierten en glicoproteínas fosforadas parcialmente solubles
en ácido tricloroacético al 12% (17).
5.3 CONTAMINACIÓN AMBIENTAL POR EL SUERO.
El suero crea un problema de contaminación grave, ya que en muchas queserías lo arrojan
sin tratamiento alguno, dado lo difícil que es rentabilizar su aprovechamiento. La descarga
de suero a los cursos de agua origina un elevado consumo de oxigeno disuelto en ella,
empobreciéndola y turbando la vida animal y vegetal. Dicho consumo se debe a la
oxidación de la materia orgánica y se mide fundamentalmente a través de la determinación
de la Demanda Biológica de Oxigeno en 5 días.
Según la FAO; un litro de suero requiere alrededor de 40 gr. de oxigeno, valor muy similar
a la demanda generada por 0.75 habitantes de la ciudad en un día (54 gr. de oxigeno). La
DBO5 del suero se origina en la proteína. (10 gr. de oxigeno) y en la lactosa (30 gr. de
oxigeno).
En la cuadro Nº 05 se observa los valores para diversos procesamientos, siendo notorios el
paralelismo entre carbono orgánico y DBO5. (5)
Cuadro No 4 Carga Contaminante de sueros (g/litros).
Tipos sueros Agua S.T. M.G Prot. Lactosa Sales DBO5 DQO COT
Suero dulce 938 62 0.5 7.5 47 7 42 65 27
Suero dulce
desproteinizado
938 54.5 0.5 - 47 7 31 48 20
Suero dulce
deslactosado
938 15 0.5 7.5 - 7 11 17 7
Suero acido 954 56 0.5 7.5 40 8 35 60 25
21
Suero ácido
desproteinizado
954 48.5 0.5 - 40 8 24 41 17
Suero ácido
deslactosado
954 16 0.5 7.5 - 8 11 18 7
Suero ácido
deslactosado y
desproteinizado
938/953 8 0.5 - - 7 / 8 0.5 0.8 0.7
Fuente: FAO –Elaboración de Queso.1985.
S.T. = Sólidos Totales.
M.G. = Materia Grasa.
Prot. = Proteína.
DBO5 = Demanda Biológica de Oxigeno (5 días).
DQO = Demanda Química de Oxigeno.
COT = Carbono Orgánico Total.
5.4 APROVECHAMIENTO DEL SUERO
Tradicionalmente, el suero no había sido considerado como una fuente rica de nutrientes
para la alimentación humana a causa de su bajo contenido de proteínas y a sus altos niveles
de lactosa y minerales. Sin embargo, desde hace algún tiempo se han intensificado los
esfuerzos para utilizarlo, ya que las tendencias de producción señalan un rápido aumento en
su disposición a nivel mundial.
En la actualidad, los sólidos de suero a utilizar en nutrición humana son producidos en una
amplia variedad de formas, tales como, suero en polvo, suero condensado, suero
parcialmente delactosado, suero parcialmente desmineralizado y la combinación de los dos
últimos, como asimismo, concentrados de proteínas de suero. Por otra parte, ha habido un
incremento en la tendencia ha usarlos en alimentación humana debido a una mayor
comprensión de las características de los componentes del suero tanto desde el punto de
vista nutricional-fisiológico como funcionales.
22
No solo la leche y los productos lácteos, sino que también los componentes básicos son
utilizados ampliamente como ingredientes funcionales en diversas ramas de la industria
alimentaria, por tres razones fundamentales:
1. Ellos proveen un enriquecimiento nutricional.
2. Confieren ciertas características reológicas y físicas a los productos terminados (textura,
consistencia, capacidad de batido).
3. Contribuyen a que el producto tenga buena aceptabilidad por el consumidor
(mejoramiento palatabilidad, color).
Los principales componentes de la leche y productos lácteos, en este caso el suero en
cualquiera de sus formas, poseen un amplio rango de propiedades nutricionales y
funcionales que los capacitan para ser empleados en una amplia gama de formulaciones
alimentarias.
Dentro de las posibilidades de utilización de suero quizás la elaboración de bebidas a partir
de el, es la que ha desarrollado mayor cantidad de productos, fundamentalmente bajo tres
formas básicas: bebidas fermentadas, bebidas no alcohólicas y bebidas alcohólicas (16).
El suero es considerado, en general, como un subproducto molesto de difícil
aprovechamiento. Los productos que tradicionalmente se han obtenido a partir del suero
han sido
1. Suero en polvo, a base de concentrar los sólidos por evaporación y secado.
2. Suero en polvo desmineralizado, donde se eliminan previamente las sales minerales por
intercambio iónico o por electrodiálisis.
3. Lactosa, obtenida por concentración, cristalización y separación.
4. Concentrados proteínicos, obtenidos por ultra filtración del suero.
23
En la actualidad, se están haciendo otros aprovechamientos, tales como la producción de
alcohol, vitamina B12 (el suero es muy rico en esta vitamina), jarabes de glucosa y
galactosa, lactosil, urea, amoniaco, lactatos, etc. (10).
5.5 SACAROSA O AZUCAR
Sacarosa, azúcar de fórmula C12H22O11 que pertenece a un grupo de hidratos de carbono
llamados disacáridos. Es el azúcar normal de mesa, extraída de la remolacha azucarera o la
caña de azúcar. Es soluble en agua y ligeramente soluble en alcohol y éter. Cristaliza en
agujas largas y delgadas y es dextrógira, es decir, desvía el plano de polarización de la luz
hacia la derecha. Por hidrólisis rinde una mezcla de glucosa y fructosa, que son levógiras,
pues desvían el plano de polarización hacia la izquierda. Por ello, esta mezcla se llama
azúcar inversa, y se denomina inversión el fenómeno por el cual se forma.
La sacarosa es el azúcar de uso doméstico e industrial y es el azúcar más común en el reino
vegetal. La sacarosa se encuentra en todas las partes de la planta de la caña de azúcar, pero
abunda más en el tallo, donde se encuentra en las vacuolas de almacenamiento de la célula
(parénquima). La sacarosa es menos abundante en las regiones que se encuentran en
crecimiento activo, especialmente las porciones blandas del extremo del tallo y las hojas
enrolladas (9).
Los azúcares monosacáridos, glucosa y fructosa, se condensan para formar sacarosa y agua.
Por lo tanto, la sacarosa tiene la fórmula empírica C12H22O11 y un peso molecular de
342.3. Los cristales de sacarosa son prismas monoclínicos que tienen una densidad de
1.588; una solución al 26% (p/p) tiene una densidad de 1.18175 a 20°C. Su punto de fusión
es de 188°C (370°F) y se descompone al fundirse. El índice de refracción es de 1.3740 para
una solución a 26%(p/p). La sacarosa es soluble tanto en agua como en etanol; las
soluciones saturadas a 20°C (68°F) contienen 67.09 y 0.9% por peso, respectivamente. La
sacarosa es ligeramente soluble en metanol e insoluble en éter o cloroformo.
Cuando se hidroliza, ya sea mediante un ácido o una invertasa, la sacarosa produce
cantidades equimolares de glucosa y fructosa, y la mezcla se conoce como invertida. Sin
embargo estos azúcares no se presentan siempre en cantidades iguales (9).
24
En el intestino humano, la inversión tiene lugar gracias a la intervención de las enzimas
invertasa y sacarasa. Cuando se calienta a temperaturas superiores a 180 ºC, la sacarosa se
transforma en una sustancia amorfa, de color ámbar y consistencia espesa, parecida al
jarabe, llamada caramelo. Azúcar, término aplicado a cualquier compuesto químico del
grupo de los hidratos de carbono que se disuelve en agua con facilidad; son incoloros,
inodoros y normalmente cristalizables. Todos tienen un sabor más o menos dulce. En
general, a todos los monosacáridos, disacáridos y trisacáridos se les denomina azúcares
para distinguirlos de los polisacáridos como el almidón, la celulosa y el glucógeno. Los
azúcares, que están ampliamente distribuidos en la naturaleza, son producidos por las
plantas durante el proceso de fotosíntesis y se encuentran también en muchos tejidos
animales. La ribosa, un azúcar monosacárido que contiene cinco átomos de carbono en su
molécula, es un componente del núcleo de todas las células animales.
Los azúcares con cinco carbonos se conocen como pentosas. Las triosas (azúcares con tres
carbonos), las tetrosas (azúcares con cuatro carbonos), las heptosas (azúcares con siete
carbonos), las octosas (azúcares con ocho carbonos) y las nonosas (azúcares con nueve
carbonos) también se encuentran en la naturaleza (1).
5.6 FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA
La fermentación alcohólica (denominada también como fermentación del etanol o incluso
fermentación etílica) es un proceso biológico de fermentación en plena ausencia de aire
(oxígeno - O2), originado por la actividad de algunos microorganismos que procesan los
hidratos de carbono (por regla general azúcares: como pueden ser por ejemplo la glucosa, la
fructosa, la sacarosa, el almidón, etc.) para obtener como productos finales: un alcohol en
forma de etanol (cuya fórmula química es: CH3-CH2-OH), dióxido de carbono (CO2) en
forma de gas y unas moléculas de ATP que consumen los propios microorganismos en su
metabolismo celular energético anaeróbico. El etanol resultante se emplea en la elaboración
de algunas bebidas alcohólicas, tales como el vino, la cerveza, la sidra, el cava, etc.1
Aunque en la actualidad se empieza a sintetizar también etanol mediante la fermentación a
nivel industrial a gran escala para ser empleado como biocombustible.
25
La fermentación alcohólica tiene como finalidad biológica proporcionar energía anaeróbica
a los microorganismos unicelulares (levaduras) en ausencia de oxígeno para ello disocian
las moléculas de glucosa y obtienen la energía necesaria para sobrevivir, produciendo el
alcohol y CO2 como desechos consecuencia de la fermentación. Las levaduras y bacterias
causantes de este fenómeno son microorganismos muy habituales en las frutas y cereales y
contribuyen en gran medida al sabor de los productos fermentados (véase Evaluación
sensorial).Una de las principales características de estos microorganismos es que viven en
ambientes completamente carentes de oxígeno (O2), máxime durante la reacción química,
por esta razón se dice que la fermentación alcohólica es un proceso anaeróbico. (19)
5.7 MÉTODOS DE FERMENTACIÓN
La fermentación es una de las biotecnologías aplicadas más antiguas, que se ha utilizado
para conservar alimentos durante más de seis mil años. Es una técnica de conservación de
alimentos barata y fácil, y muy adecuada donde otros métodos son inaccesibles o no
existen, como las conservas y la congelación. La fermentación es un proceso que ocupa
mucha mano de obra y requiere una infraestructura mínima y poca energía, además de que
se integra bien en la vida de las aldeas de las zonas rurales de muchos países en desarrollo,
ya que contribuye significativamente a la seguridad alimenticia al aumentar la variedad de
materias primas que se pueden utilizar para producir alimentos.
La fermentación mejora el contenido nutritivo de los alimentos por la biosíntesis de las
vitaminas, los aminoácidos esenciales y las proteínas, al volver más digeribles las proteínas
y las fibras, proporcionar más micronutrientes y degradar los factores antinutritivos.
La producción de alimentos fermentados también es importante para sumar valor a las
materias primas agrícolas, y así proporciona ingresos y crear empleos.
El proceso tradicional de fermentación suele ser una actividad espontánea, sin asepsia
(desinfección), producto de la acción conjunta de una variedad de microorganismos. En un
biorreactor -que puede ser ollas de barro o de metal, una cesta o una simple cavidad en la
tierra forrada de hojas-, las variedades mejor adaptadas y con el máximo coeficiente de
26
crecimiento, predominan en condiciones controladas. En consecuencia, mejorar todo lo
posible el control de esos métodos y de la flora microbiana asociada a la fermentación
representa uno de los principales retos para mejorar las tecnologías de fermentación de los
alimentos. También hace falta crear sistemas de control de calidad adecuados, por ejemplo
utilizando materias primas de gran calidad, normas de higiene apropiadas en el sitio de
elaboración, y un envase adecuado.
Si se mejorara el control del proceso creando biorreactores más apropiados, en particular
los que sirven para fermentar materias primas sólidas, mejoraría la calidad y la cantidad de
alimentos fermentados disponibles en los países en desarrollo. La selección y producción
de variedades de microbios más productivos, y el control y manipulación de las condiciones
de cultivo, también podrían aumentar la eficacia de los procesos de fermentación.(19)
5.8. INFLUENCIA DE FACTORES EXTERNOS EN LAS LEVADURAS
(Saccharomyces cereviviae)
La actividad vital de las levaduras se ve influenciada por factores externos, los más
importantes son los siguiente:
5.8.1. AGUA Se precisa determinada cantidad de agua, una mezcla de agua pesada en
proporción de 1.200 no ejerce influencia sobre las levaduras, una concentración superior si
perjudica sus capacidades fermentativas y reproductoras. Muchos preparados de levaduras
se pueden conservar vivos por largo tiempo al estado relativamente seco. De acuerdo esto
dependen las preparaciones de levaduras viva seca generalmente esto se lleva a cabo entre
capas de papel filtro y a temperatura relativamente bajas (la levadura seca tiene un 10 a
12% de agua) también se puede hacer desecación sobre algodón higroscópico, en los cales
se puede conservar levadura viva por tiempo relativamente largos, cuando se quiere
ablandar nuevamente las células es importante no agregar al agua con rapidez sino en
etapas para evitar su rotura (8)
5.8.2. OXIGENO.- Las levaduras son anaerobias facultativas y en algunos casos pueden
ser anaeróbicas completas, la presencia de oxigeno favorece notablemente su desarrollo (8)
27
5.8.3. TEMPERATURA: Su óptima de crecimiento es 25ºC para levadura de fermentación
baja y de 27 a 30ºC para levadura de fermentación alta. La temperatura determina la
actividad de las distintas enzimas de la levadura la actividad de las distintas enzimas de la
levadura y las especies reaccionan diferentes al respecto, la refrigeración moderada rebaja
diferentes su actividad final pero pueden tolerar sin morir temperaturas muy bajas, su
temperatura letal se encuentra alrededor de los 50 a 60ºC (8)
LUZ—Una iluminación débil no les produce inhibición en su proceso reproductor, pero si,
la luz difusa o la eléctrica la cual les causara bajar su densidad. La luz ultravioleta o los
rayos x pueden producir mutaciones en las células de levadura.
5.8.4. FERMENTACION
Desde el punto de vista Bioquímico se da el nombre de fermentación a la clase general de
cambios o descomposiciones químicas producidas en los substratos orgánicos mediante la
actividad de los microorganismos vivos, se aplico en principio, este vocablo al desarrollo
de burbujas de bióxido de carbono durante la preparación de vinos y otras bebidas.
En una fermentación alcohólicas actica, el dióxido de carbono se libra en forma de burbujas
de gas que en la etapa violenta de la reacción puede causas una asignación o un movimiento
marcado, que es suficiente para dar la impresión de un líquido hirviendo durante muchos
siglos se dio este significado a la palabra. Después que Gay Lussac estudio el proceso de
cambio el significado de la palabra, entendiéndose pro fermentación la escisión del azúcar e
alcohol y dióxido de carbono al aumentar los conocimientos, a raíz de las investigaciones
de Pasteur, sobre la causa de estos cambios en la naturaleza de la materia en fermentación,
se asocio la palabra a los microorganismos y aún después a las enzimas, que actúan en ella,
Durante mucho tiempo la fermentación estuvo especialmente asociada con los hidratos de
carbono, pero parece ser más lógica una concepción más amplia de esta reacciones
biológica.
28
Los productos terminales de la fermentación alcohólicas son alcohol y bióxido de carbono
en cantidades equimoleculares.
C6H12 O6 ----------------------------2CQ2 + 2CH5CH2 OH
Glucose Dioxido Alcohol
De carbono Etileno
A primera vista parece sencilla la química del proceso pero ha debido transcurrir casi medio
siglo desde que se conoció su naturaleza enzimática hasta lograr un conocimiento de los
diversos tiempos de las reacciones químicas.(19)
5.9. FACTORES INTERNOS QUE INFLUYEN EN LA FERMENTACIÓN
El estado de materia prima condiciona el proceso de la fabricación de alcohol etílico. En
todos los procesos, el
Éxito de la fermentación depende de varis factores: del empleo de la concentración optima
del azúcar, del pH, temperatura, de la adición de sustancias nutritivas al mosto a fermentar
(Si este parece de algún constituyente esencial para la levadura, del tipo de levadura, de su
tolerancia al alcohol para producir grandes cantidades de alcohol, de la condiciones de
anaerobiosis del proceso y de la inmediata destilación del mosto fermentado.
5.9.1. Concentración de Azúcar
Aunque las levaduras pueden llegar a fermentar mostos con elevada proporción de azúcar,
las concentraciones de éste más satisfactorias están entre el 10 y 21 por ciento. Cuando en
la obtención del alcohol a partir de melazas de caña de azúcar se empelan concentraciones
más altas, el alcohol producido actúa adversamente sobre la levadura inhibiendo su trabajo,
29
puede quedar azúcar sin transformar. En muchas materias primas es necesario una
concentración previa al comienzo del proceso de fermentación (8)
5.9.2. Sustancias nutritivas
Es muy corriente que muchos residuos agrícolas poseen las sustancias nutritivas necesarias
para la fermentación por levaduras pero antes de establecer un proceso industrial de
producción de etanol hay que tener la seguridad de que el medio es adecuado para el
correcto desarrollo de levaduras, siendo las deficiencias en nitrógeno, en fósforo o en
magnesio las mas habituales un buen medio a fermentar contendría. (8)
Azúcar 10-12-p.100
SO4 (NH4)2 1 gramos/litro
PO4 HK2 1 gramos/litro
SO4Mg 0.5 gramos/litro
Y péquelas cantidades de Na, Fe, Ca ácidos grasos
5.9.3. ph
Las levaduras tienen un ph óptimo de desarrollo alrededor de 5. Sin embargo la
fermentación de productos naturales es satisfactorio de 4 a 5,. Este ph favorece a las
levaduras y es lo suficiente bajo para inhibir el desarrollo de muchos tipos de bacterias. El
control del ph entre 4 a 4.5 junto con la inoculación de una gran cantidad (2 al 4 p. 100) de
la levadura inicial puede llegar a sustituir la esterilización de la materia prima, proceso que
resulta a veces costoso e impracticable por necesitar consumo de mucha energía. Para
ajustar el ph a los niveles exigidos se emplea acido sulfúrico o bien acido láctico.(8)
30
5.9.4.Oxigeno
Aunque la producción de alcohol es un proceso anaeróbico que no necesita oxigeno, este es
necesario en los primeros momentos para facilitar la reproducción de las células de
levadura en condiciones optimas. Después de la inoculación la fermentación se inicia
rápidamente desprendiéndose gran cantidad de CO2 que desplaza al oxigeno y se
establecen pronto las condiciones anaeróbicas adecuadas para el proceso.(8)
5.9.5. Temperatura
La inoculación de la levadura se debe efectuar entre 20 a 25ºC y al iniciarse el proceso de
fermentación la temperatura aumenta. La optima esta entere 28 a 38ºCF por lo que como el
proceso es exotérmico los fermentadores deben refrigerarse para evitar que la temperatura
se eleven. A temperatura por encima de los 32-33º se produce una inhibición del proceso de
temperaturas altas favorecen el desarrollo de bacterias contaminantes.(8)
5.10.6- Tiempo necesario para la fermentación.
El tiempo de fermentación depende de muchos factores, como son: el tiempo de levaduras,
su adaptación al medio, su tolerancia a la concentración de alcohol, las sustancias
nutritivas, etc. U n tiempo entre 48y 72 horas suele ser suficiente para completar el proceso
de fermentación. Es conveniente que las levaduras utilizadas en el proceso estén
previamente aclimatadas al tipo de materia prima utilizada, lo cual se consigue mediante
siembra en pases sucesivos en el mismo substrato. (8)
31
VI. MATERIALES Y METODOS
6.1. MATERIAL EXPERIMENTAL.
Para el presente trabajo se empleara el lactosuero dulce, además se usarán tres
concentraciones de de levadura y tres concentraciones de azúcar,
6.2 MATERIAL DE CAMPO
 Libreta de apuntes
 Cámara fotográfica digital
 Marcadores.
 Etiquetas.
6.3 MATERIALES DE OFICINA
 Calculadora
 Computadora
 Flash memory
 Impresora
 Papel de impresión
 Libretas
 Esferos
 Escritorio
 Sillas
6.4 EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE LA PLANTA
 Descremadora
 Balanza analítica
 Termómetro
 Brixómetro
32
 Lactodensímetro
6.5 MATERIAL DE LA PLANTA
 Baldez
 Recipientes plásticos
 Fundas de empaque
 Materiales de limpieza (jabón, detergente, escobas)
6.6 ADITIVOS
 Levadura
 Azúcar
6.7 MATERIAL DE LABORATORIO
 Mechero Búnzen
 Estufa o Incubadora Marca Mermeck
 Contador de colonias
 Pipetas de 10 ml. – 1 ml
 Probeta plástica 500 ml
 Placas 3M
6.8 Reactivos
 Agua Destilada
 Alcohol comercial 80 %
 Hidróxido de Sodio 0.1 N
 Fenolftaleína
 Azul de metileno
 Agua esterilizada
33
6.2 METODOS
6.2.1 UBICACIÓN DEL EXPERIMENTO
El presente trabajo de investigación se realizara en la Planta de frutas y hortalizas
particularmente en el equipo de destilación de la Facultad de Ciencias Agropecuarias,
Recursos Naturales y del Ambiente, ubicado en el sector de Av Ernesto Cheguevara y Av.
Gabriel Secaira; en la Escuela de Ingeniería Agroindustrial de la Universidad Estatal de
Bolívar.
6.2.2 SITUACIÓN GEOGRAFICA Y CLIMÁTICA DE LA LOCALIDA
PARAMETRO VALOR
Cantón Guaranda
Provincia Bolívar
Universidad Estatal de Bolívar
Dirección Av. Ernesto Che Guevara s/n y
Av. Gabriel Secaira
Lugar experimental Planta de lácteos
Latitud 01°34'15"
Longitud 79°0'02"
Temperatura mínima 8°C
Temperatura media anual 13°C
Temperatura máxima 18°C
Humedad 75%
Fuente:Universidad Estatal de Bolívar. Laguacoto II (2003). Estación Meteorológica.
34
FACTORES EN ESTUDIO.
FACTOR CODIGO NIVELES
Porcentajes de Azúcar A a0= 21|°BRIX
a1=22°BRIX
a2 =23°BRIX
Porcentajes de levadura B b0=1%
b1= 2%
b2=3%
3.2.2. CARACTERÍSTICAS DEL EXPERIMENTO.
Factores de estudio = 2
Tratamientos= 9
Repeticiones= 3
Unidades experimentales= 27
Tamaño de muestra para laboratorio 5lts.
3.2.3 TRATAMIENTOS.
El experimento se desarrollará bajo un diseño de bloques al azar con arreglo factorial AXB
con tres repeticiones.
35
DESCRIPCIÓN DEL DISEÑO
Nro.
Tratamiento
Código DESCRIPCION O DETALLE
A
Porcentajes
AZUCAR
B
Porcentajes de
LEVADURA
1 a0b0
2 a0b1
3 a0b2
4 a1b0
5 a1b1
6 a1b2
7 a2b0
8 a2b1
9 a 2b2
3.2.4 TIPO DE DISEÑO EXPERIMENTAL.
El experimento se desarrollará bajo un diseño de bloques al azar con arreglo factorial AXB
con tres repeticiones, para lo cual se utilizará el siguiente modelo matemático.
Yijk = μ + Ai + Bj + (AB)ij + Σijk; Donde:
Yijk = Enésima respuesta experimental obtenido en el enésimo tratamiento
μ = promedio global para todos los tratamientos
Ai = efecto del factor A
Bj =efecto del factor B
36
(AB) ij =Efecto de la interacción AxB
Σijk = Efecto del error experimental
3.2.5. ANÁLISIS ESTADÍSTICO.
Para comparación si hay diferencias entre TRATAMIENTOS se aplicará el análisis de
varianza (ADEVA)
Cuadro No. 5
FUENTE DE VARIACION GRADOS DE LIBERTAD
Tratamientos n -1
A n - 1
B n - 1
AB (n-1)(n-1)
Error (n-1)(t-1)
Total (axbxn) -1
 Esquema de Análisis de Varianza.
 Para factores en estudio A x B prueba de tukey al 5%,
 para promedios de tratamientos (A-18 ) prueba de tukey al 5%
 Análisis económico en la relación beneficio / costo
3.3. MEDICIONES EXPERIMENTALES
Las mediciones experimentales se realizaran en el Laboratorio.
3.3.1. ACIDEZ.- según la norma INEN 341
3.3.2. METANOL .- según la norma INEN 347
3.3.3. CENIZAS -Según la Norma INEN 348
3.3.4. ALCOHOLES SUPERIORES.- SEGÚN LA NORMA INEN 345
3.4 DIAGRAMA DE FLUJO
OBTENCIÓN DE ALCOHOL A PARTIR DE LA FERMENTACIÓN DE LACTO
SUERO DULCE.
37
RECEPCIÓN
FILTRADO
FERMENTACIÓN
DESTILACIÓN
EMBOTELLADO
DESCREMADO
Corrección del mosto
38
VII.- BIBLIOGRAFÍA
1. ACERO BLANCO, A (2004). Microsoft Encarta Diccionario Enciclopédico.
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químicos especializados. Editorial Limusa; Primera Edición; Impreso en México. Pág.
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10. MADRID, V. (1999). Curso de Industrias Alimentarias. Tercera Edición. Pág. 223,
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11. MUÑOZ, V. (2000). Tecnología de Productos Lácteos. Primera Edición; Argentina,
Pág. 110, 111, 112.
39
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Tomo # 04. Pág. 185, 186, 187, 188.
14. SANTOS, A. (1987). Leche y sus Derivados. Trillas. (Reimpreso 2000) Pág. 27, 33, 34, 35,
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transformación de la leche, Segunda edición española, Traducción de la tercera edición
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18. WILIAN G . WALTER. Microbiología general . segunda edición. Trad.por Fernando
colchero. Editorial continental. Mexico.1965
19. . http://es.wikipedia.org/wiki/Fermentaci%C3%B3n_l%C3%A1ctica
20. (http://mx.geocities.com/avolaje/Bioenergetica_b1/respanaerobia_b1.html)
40
ANEXOS
ANEXO N°-1
UBICACIÓN DEL EXPERIMENTO.
41
Edificio 2
ANEXO N°.- 2.
PRESUPUESTO
DESCRIPCIÓN VALOR
Documentos informativos y bibliografía $670,oo dólares
Materiales de escritorio $160,oo dólares
UEB
42
Transporte $300,oo dólares
Alimentación y alojamiento $700,oo dólares
Comunicación $100,oo dólares
Internet $100,oo dólares
Impresión de documentos $340,oo dólares
Análisis de laboratorio de la materia prima $400,oo dólares
Análisis de laboratorio producto terminado $800,oo dólares
Análisis y tabulación de datos $450,oo dólares
Materias primas $350,oo dólares
Reactivos $450,oo dólares
Transcripciones $350,oo dólares
Gastos adicionales $570,oo dólares
TOTAL $5740,oo dólares
ANEXO N°.- 3.
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
2009
2010
ACTIVIDADES 11 12 1 2 3 4 5 6I 7 8
Elaboración del anteproyecto x
Presentación del anteproyecto x
Aprobación del anteproyecto x
Defensa del anteproyecto X
Inicio de la Investigación X X
Toma de datos X X
Análisis e interpretación X X
Elaboración del primer borrador x
43
Predefensa x
Defensa de tesis x
GLOSARIO
Acidez de la leche. El grado de acidez de la leche favorece la acción coagulante del cuajo,
siendo importante esta circunstancia en la elaboración de queso.
Acidez titulable. Es la acidez de la leche, expresada convencionalmente como contenido
de ácido láctico, y determinada mediante procedimientos normalizados.
Acido láctico. Acido graso procedente de la fermentación de la lactosa. Interviene
activamente en la formación de la cuajada al elevar la acidez de la leche.
Cenizas de la leche. Es el producto resultante de la incineración de los sólidos totales de la
leche.
Caseína. Materia orgánica coagula bajo el efecto del cuajo, aparece en una proporción del
6% en la leche de oveja y 4% en la leche de cabra y vaca.
Contenido de grasa de la leche. Es la cantidad expresada en porcentaje de masa, de
sustancias, principalmente grasas, extraídas de la leche mediante procedimientos
normalizados
Dornic. Porcentaje de ácido láctico que contiene la solución.
Densidad relativa. Es la relación entre la densidad de una sustancia y la densidad del agua
destilada, consideradas ambas a una temperatura determinada.
Fermentación. Reacción química que se produce en la leche y durante el cual se desprende
gas.
44
Lactosa. Es un hidrato de carbono que se encuentra en la leche es el nombre que recibe el
azúcar de la leche. El color amarillento de la leche esterilizada se debe a que la lactosa ha
caramelizado la leche al ser sometida a altas temperaturas.
Muestra. Es el conjunto de unidades de muestreo que se usa como información de la
calidad de un lote.
pH. Grado de acidez o alcalinidad de cualquier sustancia.

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Anteproyecto olguita 1

  • 1. 1 UNIVERSIDAD ESTATAL DE BOLIVAR FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS, RECURSOS NATURALES Y DEL AMBIENTE ESCUELA DE ING. AGROINDUSTRIAL ANTEPROYECTO DE TESIS TEMA: ELABORACIÓN DE UN SUB PRODUCTO DE LA INDUSTRIA LÁCTEA( LACTOSUERO PARA LA OBTENCIÓN DE ALCOHOL) EN EL CANTON GUARANDA, PROVINCIA BOLIVAR AUTORAS: OLGA GOMEZ CRISTINA MAYORGA DIRECTOR: ING MARCELO GARCIA GUARANDA- ECUADOR 2010
  • 2. 2 I. INTRODUCCIÓN El lacto suero es un su producto de la quesera y de la caseína que tiene una composición variable con el tiempo de fabricación del que ha sido, así por ejemplo el suero procedente de una fábrica de quesos de pasta blanda que Fabrique caseína láctea será más acida y contendrá menos lactosa peor mas sales minerales que el suelo procedente de una fabrica que quesos la pasta cocida, en lo que concierne a la materia, grasa, el contenido puede variar notablemente, pero en cuanto pasa de 2 – 3gr al quesero lo interesa recuperarla por desnatado. Es una de las mayores reservas de proteínas alimentarias que aún permanecen fuera de los canales de consumo humano l producción mundial del suero aproximadamente 120 millones de toneladas en 1990 contiene unos 0,7 millones de toneladas, de proteínas de relativamente alto valor biológico igual el contenido de proteína de casi 2 millones de toneladas soya. (veisseryre, 1980) La federación Internacional de lechería no nace distinción ente el objeto ultimo de la coagulación, que puede ser la elaboración de queso o de la caseína, industrial, la food and Drug administración de los Estados Unidos, define al suero como la sustancia liquida que s contiene al separar el coagulo de la leche, crema o leche descremada y la fabricación de queso, existe 2 tipos de suero. Suero dulce que es el obtenido en el procedimiento de elaboración de quesos en los cuales se ha usado principalmente enzimas de tipo cuajo para obtener el coagulo. Suero ácido que es el proveniente de queso e que el coagulo ha sido formado funcionalmente por acidificación mediante adición de ácidos orgánicos o inorgánicos diluidos así como también la fabricación de la caseína, láctica, este suero se considera de menor calidad que el suero dulce (versserute 1980)
  • 3. 3 La fermentación es un proceso de transformación de biomoléculas en moléculas más sencillas a través de oxidación incompleta, generalmente anaeróbico (en ausencia de aire), y que produce finalmente un compuesto orgánico (que contiene carbono). El tipo de fermentación depende del producto obtenido, y pueden ser fermentaciones acéticas, alcohólicas, butíricas, de la glicerina, lácticas o pútridas. (http://mx.geocities.com/avolaje/Bioenergetica_b1/respanaerobia_b1.html) Alcohol es la Obtención, por fermentación del azúcar, del almidón, oxidación del metano, hidrolisis del sulfato de etilo. Para la producción de alcohol han sido utilizadas diferentes fuentes de carbono como materia prima (materiales biológicos), las cuales deben poder ser transformadas con facilidad en azúcar fermentable, almidón o celulosa. Su uso práctico estará determinado por el rendimiento en alcohol, por su costo y el tipo de microorganismo que se utilice. (Palacio y Almazána and Horii J.TIBS, 1979, Blanco C.G, 1978) Fermentación alcohólica del suero de leche. Como todos los métodos de fermentación, el punto principal para conseguir buenos resultados en la fermentación del suero de leche estriba en seleccionar los agentes de fomentación más idóneos. Suero dulce contiene un 4-5 % de azúcar de leche (lactosa), cuya fermentación se ajusta a la ecuación de Gay Lussac (c12H22O11+H2O)X=2(C6H12O6)X. C6H12O6=2C2H5OH+2CO2. Según ella, se forman, por tanto, 2 mol de alcohol (92) y 2 mol anhídrido carbónico (88).por consiguiente de 100kg de suero pueden obtener unos 2.5 kg de alcohol (100%). El suero contiene un cierto número de microorganismos que interfieren e incluso inhiben, la fermentación alcohólica. Por otra parte, los componentes del suero, como son sustancias de descomposición de las albuminas, fosfatos etc., cubren sobradamente las necesidades en sustancias nutritivas del agente fermentativo, de modo que en este caso ya no es necesario incorporar medio sulfato amónico y fosfatos para que se efectúen la fermentación según K.R DIETRICH, el problema escriba, la mayoría de las veces, en obtener cultivos de levadura idóneos para el azúcar de la leche.
  • 4. 4 Para aislar las levaduras que fermentan la lactosa se ha partido del kefir producto que además de las bacterias lácticas del kéfir,razar de streptococcus lactis y bacterias acéticas, contiene diversas razas de levaduras. Las levaduras deben hibridarse. Para este fin se copulan las células haploides resultantes de dos esporas de distintas razas para formar una célula diploide, levadura hibrida. La formación de esporas se inicia con una buena nutrición de las capas de levadura. La levadura de tres días desarrollada en tubitos inclinados, se agita con 1cc de agua estéril, y la suspensión resultante se dispone sobre la superficie de un bloque de yeso cuya base se encuentra sumergía en una solución estéril de acido acético de ph 4. Después de mantener esta siembra durante 1- 2 días a 25 ºc, la mayor parte de células vegetales forma cuatro ascosporas. Cultivando en el correspondiente medio nutritivo cada ascospora, una vez aislada se forma de cada espora unas células haploides pequeñas y redondas para destruir las células vegetales se suspenden las esporas en agua, se calienta a 58ºc durante 2-4 minutos y se vierte el liquido en placas con medio solido se desarrollan pequeñas colonias rugosas, en las que una vez aisladas, se determinan sus propiedades características, seleccionándolas adecuadamente. Si se revela una propiedad apetecida, se efectúan los correspondientes cultivos haploides por selección en serie, para fines de hibridación se efectúan después de los cruses correspondientes, disponiendo las células haploides en grandes cantidades de suero aproximadamente 1/2cc, en el que se mantienen a 19ºc durante 12 horas después de efectuar los correspondientes cultivos en placas se reconoce los nuevo diploides por formar extensas colonias lisas que presentan grandes células elípticas. Entre los cultivo puros de levadura del azúcar de la leche obtenidos de esta forma se encuentra familias capaces de fermentar conjuntamente la lactosa, maltosa y sacarosa; estas levaduras no solamente produce la enzima lactasa, que desdobla la lactasa en los monosacáridos glucosas y galactosa, sino también maltasa e invertasa, que hidrolizan respectivamente la maltasa a glucosa y la sacarosa a glucosa y fructosa. Para obtener las cantidades necesarias de levadura del azúcar de leche para la fermentación alcohólica del suero, se siembra el cultivo puro en suero estéril contenido en una matraz de carlsberg, acelerando después la germinación de la levadura en un recipiente de cultivo puro mediante la adecuada aireación. La levadura del cultivo obtenida de esa forma pasa al
  • 5. 5 suero fresco albuminoideo previamente calentado a28ºc, preferiblemente estéril que se encuentra en el recipiente de fermentación propiamente dicho. Al cabo de 20 horas de fermentación, el proceso se ha completado total mente. La lactosa del suero ha desaparecido por completo. Por el contrario, el alcohol asciende al 2,4 % en volumen. El ph es 5 aproximadamente. Durante la fermentación apenas se forma espuma, de modo que cuando se llena el recipiente de fermentación solo hay que dejar un pequeño margen para prevenir el ascenso del líquido. En el método de fermentación continuo, según sea las propiedades del suero fresco no esterilizado, es decir, según el contenido en bacterias inhibidoras de la fermentación, se bombea una cantidad de suero fermentado, de 1/8 aproximadamente, y se repite esta fermentación hasta que ya no se evita la proliferación de los microorganismos extraños y la actividad fermentativa de las levaduras de la lactosa empieza a decaer. El consumo de vapor para la destilación importa, aproximadamente, 18 kg por cada 100 litrs de suero fermentado. Por otra parte, K.R. DIETRICH ha logrado fermentar, en un solo proceso, las primeras materias usuales, farináceas y no farináceas (patatas, cereales, melaza, fruta) y el suero, utilizando simplemente levaduras lácteas. Así por ejemplo, el suero caliente se añade al macerado de patatas mezclado con malta hasta que se alcanza la temperatura adecuada para desdoblar el almidón en azúcar. Más tarde puede añadirse al macerado de patata dulce suero en cualquier proporción. Operando de esta forma solo se requiere una raza de levadura, y la producción de alcohol se aumenta en 2.5 litros aproximadamente por cada 100 litros de suero adicional. Compárese también la obtención de acetona y alcohol butílico. H. BRUMME también ha expuesto de un modo resumido la fermentación del suero, tanto para obtener alcohol como levadura. Hay que destacar de un modo especial el método de G. DEMMLER y la Zellstoffabrik Waldhof, mediante el cual, operando con suero de un contenido en lactosa del 4,0%, pueden obtenerse 20,5 gr de levadura por litro. También trata de las investigaciones de G. WILHARM sobre el rendimiento en la obtención de alcohol de las levaduras que fermentan la lactosa.
  • 6. 6 II. JUSTIFICACIÓN En la provincia Bolívar existe empresas dedicadas a la labor de procesamiento de productos lácteos, por este motivo la mayor cantidad de suero es desechado o utilizado como lavaza para animales El lacto suero es uno de los materiales más contaminantes que existe en la industria alimentaria, cada 1000 litros de lacto suero genera a cerca de 35Kg de demanda biológica de oxigeno (D.B.O.) y cerca 68Kg de demanda química de oxigeno (D.Q.O).esta fuerza contaminante es equivalente a las aguas negras producidas en un día por 480 personas. Más aun, no usar lacto suero como alimentos un enorme desperdicio de nutrientes el lacto suero contiene un poco más del 25 % de la proteína de la leche, cerca del 8% de materia grasa e cerca del 95% de lactosa Sin embargo y a pesar de la falta crónica de proteínas en gran parte del mundo, una porción muy considerable de la producción total de lacto suero se vierte como residuo y otro por ciento se utiliza alimentación de animales El Equipo Regional de fomento en lechería de la FAO para América Latina ha señalado que un adulto de 50kg requiere de los siguientes cantidades de proteína diariamente 23g caseína o 17gr de proteína de huevo 0 14gr de proteína de suero, consideradas entre las de mayor valor biológico. En el ecuador, el suero del queso es un producto residual que tiene poca aplicación y en ocasiones se desperdicia: esto se demuestra los balances de las empresas en las cuales es corriente que no figuren los beneficios financieros de este producto. Esto lo demuestran no solo los balances de las empresas, en las cuales es corriente que no figuren para nada los beneficios financieros obtenidos de este producto, sino también las advertencias frecuentes de los servicios de depuración del agua, los cuales encuentran dificultades considerables para tratar los residuos que contienen una cantidad elevada de suero.
  • 7. 7 Las industrias lácteas y las queserías caseras producen quesos por coagulación mediante el cuajo; por lo tanto, se dispone de suero dulce en la mayoría de las industrias. En realidad se trata de un subproducto integrado por valiosas materias, cuya obtención y oportuno aprovechamiento no tiene una gran importancia para la economía nacional. Hasta hace poco tiempo, la utilización industrial del lactosuero planteaba numerosos problemas por lo que un volumen considerable de este producto iba a parar a los ríos y desagües. Actualmente, la lucha contra la polución ambiental prohíbe esta práctica y el vertido del suero en un curso de agua debe ir precedido necesariamente de una depuración costosa. En una época en que las necesidades de la alimentación humana y animal son cada vez mas importantes es preferible el aprovechamiento del lacto suero mediante técnicas apropiadas a destruirlo con lo que se pierde por completo. Además, es importante anotar que en país hay gran cantidad de productos elaborados a partir de la leche Por este motivo hemos visto la necesidad de dar un valor agregado a este subproducto lácteo.
  • 8. 8 III. OBJETIVOS OBJETIVO GENERAL:  elaborar un sub producto de la industria láctea( lactosuero para la obtención de alcohol) en el cantón Guaranda, provincia bolívar OBJETIVOS ESPECÍFICOS:  Evaluar el azúcar reductor total presente en el lactosuero  Seleccionar un microorganismo adecuado para la fermentación (levadura)  Establecer las condiciones de fermentación  Evaluar el producto final ( análisis físico químicos del mejor tratamiento)
  • 9. 9 IV. HIPÓTESIS. Con la utilización del lactosuero , podremos obtener alcohol
  • 10. 10 V. REVISIÓN DE LITERATURA 5.1 LECHE La Leche, es un líquido opaco, blanquecino o amarillento, segregado por las glándulas mamarias de las hembras de los mamíferos para la alimentación de sus crías. La leche normal no aparece hasta varios días después del alumbramiento; el líquido viscoso segregado desde el momento del parto hasta la aparición de la leche normal recibe el nombre de calostro. La leche está formada por glóbulos de grasa suspendidos en una solución que contiene el azúcar de la leche (lactosa), proteínas (fundamentalmente caseína) y sales de calcio, fósforo, cloro, sodio, potasio y azufre. No obstante, es deficiente en hierro y es inadecuada como fuente de vitamina C. La leche entera está compuesta en un 80 a un 90 % de agua. La leche fresca tiene un olor agradable y sabor dulce. Su densidad relativa varía entre 1,018 y 1,045, y la de la leche de vaca entre 1,028 y 1,035. Los glóbulos de grasa tienen una densidad relativa inferior a la de la fase líquida y, por lo tanto, ascienden a la superficie para formar nata (crema) cuando se deja reposar la leche en un recipiente. También se llama nata a la lacto albúmina, que es la telilla que aparece en la superficie cuando se ha hervido la leche. Para elaborar productos lácteos de buena calidad, es condición fundamental que la materia prima principal, leche cruda, sea de buena calidad. Es, por tanto, evidente que la industria debe ejercer un estrecho control de la leche, poniendo especial énfasis en los factores que tengan mayor influencia en cada caso particular (6). El concepto de calidad de la leche involucra los siguientes requisitos generales, que son validos para productos lácteos:  La cantidad de microorganismo debe ser baja.  Debe ser sana, es decir, exenta de gérmenes patógenos y provenientes de vacas sanas.  Debe tener composición normal.  Debe ser fresca (tener una acidez normal).
  • 11. 11  Debe ser pura, es decir libre de materias extrañas y libres de restos de remedios, por ejemplo: antibióticos, pesticidas, detergentes y desinfectantes.  Debe tener una apariencia agradable y un olor y sabor fresco y puro. Debe ser enfriada o procesada tan rápidamente como sea posible después del ordeño. Para asegurarse que la leche tenga todas sus características, que significan buena calidad, hay que analizar la leche que llega a la planta y que se va a procesar. Estos análisis normalmente influyen en el precio que recibe el producto por su leche; Para aplicar este control y evaluar así la calidad de la leche, es necesario establecer un criterio técnico basado en métodos seguros, precisos, rápidos y fáciles. Las primeras pruebas son pruebas rápidas de plataforma, que sirve para decidir la aceptación o rechazo de la leche. También pueden indicar si es necesario hacer análisis de laboratorio mas exactos. Por ejemplo, si con el lactodensímetro se descubre leche con viscosidad anormal, puede ser conveniente efectuar análisis para determinar la materia seca y/o crioscopia. Así mismo, si la prueba de alcohol es positiva, se puede medir el pH y/o acidez titulable. En el momento de la recepción no solamente hay que analizar la calidad de la leche, sino que también hay que hacer una verificación del volumen o cantidad de leche (6). 5.1.1 Características de la Leche Antes de hablar de las características de la leche, es necesario encontrar una definición de la misma. La leche es un líquido que se segrega en las glándulas mamarias de hembras sanas, poco después del calostro, cuando nace la cría; es un líquido de composición compleja, blanco y opaco, de sabor ligeramente dulce y de pH casi neutro. La función primordial de la leche es la de alimentar a las crías durante el período crítico posterior al nacimiento, cuando el desarrollo es rápido y no puede sustituirse por otro alimento. La leche es un líquido que mantiene en suspensión glóbulos de grasa, y proteínas y está constituido por lactosa, sales minerales y algunos otros elementos (14).
  • 12. 12 5.1.2 Componentes de la leche Es aventurado hablar del contenido cuantitativo de los constituyentes de la leche, debido a que éste no es muy constante; pero si puede decirse que la leche es una mezcla de sustancias como lactosa, otros carbohidratos en menor concentración, lípidos, proteínas, sales minerales, vitaminas, etc., que coexisten en emulsión, suspensión y solución (14). 5.1.2.1 Carbohidratos Los carbohidratos se encuentran libres en solución en la fase acuosa de la leche y unidos principalmente a las proteínas; entre ellos están la lactosa, polisacáridos, glucosaminas, etc. Con excepción de la lactosa, la proporción de carbohidratos es siempre menor en le leche que en el calostro (14). 5.1.2.2 Lactosa La lactosa es un carbohidrato que se encuentra libre en solución y es el componente más abundante, simple y constante en la leche. La lactosa es el factor limitante en la producción de leche, es decir, que la cantidad de leche que se produce depende de la síntesis de la lactosa. Desde el punto de vista biológico, la lactosa se distingue de los demás azúcares por su estabilidad en el tracto digestivo del hombre y de algunos animales maduros. La lactosa es el componente más lábil ante la acción de los microorganismos; diversas bacterias la transforman en ácido láctico y otros ácidos orgánicos. En la leche de vaca, el contenido de lactosa varía entre 48 y 50g/lt; debido a la regulación osmótica, el contenido de lactosa en la leche es proporcionalmente inverso al contenido de sales. La lactosa es un disacárido de galactosa y glucosa unida por enlaces β 1-4, en la leche existen isómeros α y β que se distinguen por sus propiedades físicas. La lactosa también se encuentra en forma cristalina como monohidrato. La lactosa es poco soluble en agua (aproximadamente, diez veces menos que la sacarosa) y cristaliza muy rápido. La β - lactosa es la más soluble (7.3 a 17g en 100ml de agua) y aumenta con la temperatura; tiene un débil sabor dulce y su poder edulcorante es seis veces menor que el de la sacarosa. La hidrólisis de la lactosa aumenta su solubilidad y su poder edulcorante, así como el rendimiento quesero, debido a que la acidificación es más rápida.
  • 13. 13 El sabor de la leche cocida (hervida) se debe a la caramelización de la lactosa y a las reacciones de Millard que se llevan a cabo entre los grupos carboxilo libres de la lactosa y los grupos amino libres de las proteínas, durante el calentamiento. El calentamiento también provoca la formación de glucosa, hidroximetilfurfural, ácido fórmico, ácido levúlico, etc., a partir de la lactosa. La lactosa constituye la parte esencial del extracto seco de los sueros lácticos; en las diversas transformaciones de la leche, la lactosa siempre se encuentra en la parte acuosa (14). 5.1.2.3 Oligosacáridos Estos carbohidratos tienen un gran interés biológico a pesar de que se encuentran en cantidades muy pequeñas en la leche. La leche humana es la que contiene mayor cantidad de estos carbohidratos, los cuales están constituidos por dos a seis moléculas de carbohidratos y se clasifican en tres tipos: 1. Oligosacáridos no nitrogenados que contienen glucosa, galactosa, metilpentosa, mucosa, etc. 2. Oligosacáridos que contienen azúcares nitrogenados, como la N-acetilglucosamina. 3. Oligosacáridos que contienen ácido neuramínico o lactamínico, que en su forma acetilada con el nitrógeno o el oxígeno, recibe el nombre de ácido siálico (14). 5.2 SUERO El suero, es el residuo liquido de la producción de queso y caseína, es una de las mayores reservas de proteínas alimentarías que aun permanecen fuera de los canales de consumo humano. La producción mundial de suero, aproximadamente unos 120 millones de toneladas en 1990, contiene unos 0.7 millones de toneladas de proteínas de relativamente alto valor biológico, igual al contenido de proteínas de casi 2 millones de toneladas de soja (5).
  • 14. 14 También el suero es el líquido más o menos turbio, ácido y poco viscoso, de color amarillo- verdoso, resultante del escurrido de la cuajada, y que prácticamente carece casi en absoluto de grasa y albuminoides, su principal riqueza es la cantidad algo importante de lactosa y trazas de albúmina y de grasa (15). Se establece que el suero es un subproducto de la elaboración del queso, de la caseína. Las características del suero varían un tanto con la leche que se emplea y con el método de coagulación. El suero contiene la mayor parte de los componentes insolubles de la leche de la que deriva. Es rico en lactosa e incluye más o menos la mitad de las cenizas y hasta una cuarta parte de las proteínas de la leche. Sin embargo, y a pesar de la falta crónica de proteínas en gran parte del mundo, una proporción muy considerable de la producción total de lactosuero se vierte como residuo y otro por ciento se utiliza en la alimentación de animales. El suero representa el 80 a 90 % del volumen que entra en el proceso y contiene alrededor del 50 % de los nutrientes de la leche original; proteínas solubles, lactosa, vitaminas y sales minerales. Aunque el suero contiene nutrientes valiosos, solo recientemente se han desarrollado nuevos procesos comerciales para la fabricación de productos de alta calidad a partir de dicho suero. El Equipo Regional de Fomento y Capacitación en Lechería de la FAO para América Latina han señalado que un adulto de 70 Kg. requiere las siguientes cantidades de proteínas diariamente: 23 gr. de caseína, o 17 gr. de proteína de huevo o 14 gr. de proteína del suero, consideradas entre las de mayor valor biológico. Existen dos tipos de suero: suero dulce que es el obtenido en el procedimiento de elaboración de quesos en los cuales se ha usado principalmente enzimas de tipo cuajo, para obtener el coagulo y, suero ácido que es el proveniente de quesos en que el coagulo ha sido formado fundamentalmente por acidificación mediante adición de ácidos orgánicos o inorgánicos diluidos, así como también de la fabricación de la caseína láctica, este suero se considera de menor calidad que el suero dulce (5).
  • 15. 15 5.2.1 COMPOSICIÓN QUÍMICA DEL SUERO La composición del suero depende del tipo de leche y de los procesos empleados en la elaboración del queso. Siendo además, estos últimos muy variados, de acuerdo al tipo de queso y según el procedimiento especifico que emplea cada planta. Sin embargo, la composición del suero, en cuanto a macro constituyentes es relativamente poco variable. Como se observa en la tabla Nº 01 Cuadro No 1 Composición Química del Suero Agua 93% Sólidos totales 7% Lactosa 4.9 –5.1% Materia grasa 0.3% Cenizas o sustancias minerales 0.6% Proteína total 0.9% Proteína Coagulada térmicamente 0.5% Proteína nitrogenadas no coaguladas 0.4% Fuente: III-B- FAO –Elaboración de Queso. 1985 Cuadro No 2 Composición del Suero Dulce y el Suero Ácido (%) COMPONENTES DULCE (CUAJO) ACIDO Humedad 93-94% 94-95% Grasa 0.2 -0.7% 0-0.4% Proteína 0.8 – 1.0% 0.8 – 1.0% Lactosa 4.5 – 5.0% 4.5 – 5.0% Cenizas 0.5-0.7% 0.70% Sales minerales 0.05% 0.4 Fuente: MADRID, A. Curso de Industrias Lácteas, 1999.
  • 16. 16 Entre los ingredientes menores del suero se destacan: Calcio 51 mg/100gr Fosforo 53 mg/100gr Hierro 1.0 mg/100gr Vitamina A 10 U.I.mg/100gr Tiamina 0.03 mg/100gr Rivoflavina 0.14 mg/100gr Niacina 0.10 mg/100gr La composición de la fracción proteica del suero se puede ver en la tabla Nº 03, donde se compara con la misma fracción de la leche. Se puede ver el enriquecimiento en ∞ - lactalbumina y β – lactoglobulina, en proteína no caseinicas que ha sufrido el suero. Cuadro No 3 Composición Porcentual Aproximada: Proteínas de la Leche y del Suero. LECHE SUERO ∞s – Caseína 50 - К – Caseína 11 - Β – Caseína 20 - γ – Caseína 5 - ∞ - Lactalbumina 3.5 - 4.5 20-44 Β – Lactoglobulina 7.5 – 10 .0 44 – 52 Sero albúminas 1 5 – 7 Inmunoglobulinas 2.03 – 3.0 12 -16 Proteosa – peptonas 4.00 – 4.5 19 Fuente: FAO –Elaboración de Queso. 1985
  • 17. 17 Por otra parte, el suero contiene la mayoría de los componentes identificados en la leche, aunque el nivel de grasa es mínimo, los contenidos de lactosa, sales, ácidos orgánicos y vitaminas son interesantes, lo mismo que las proteínas. Estas últimas, además de su valor nutritivo y calórico (13 -15 % de las calorías del suero) tienen propiedades específicas tales como: la lactoferrina es transportadora de hierro, las inmunoglobulinas son portadoras de anticuerpos, y la lactolina se supone que juega un rol biológico importante por estar presente en el calostro en niveles 4 a 10 veces superiores a la leche. Finalmente, la lactosa confiere por su bajo poder edulcorante (27 veces inferior a la sacarosa) sabores característicos a los productos lácteos y suministra energía durante la lactancia. Los problemas de intolerancia provocados por la ausencia de la enzima intestinal específica (lactasa) se superan por procesos industriales. El Suero, normalmente es sometido a una centrifugación para recuperar la grasa que aun contiene, quedando con solo el 0.03 – 0.05 %, esto determina que la presencia de vitaminas liposolubles (A, D y E) sea muy baja. El suero da origen a una gran variedad de productos según como se haya modificado su composición original; estos constituyen una gama de ingredientes para la industria alimentaria principalmente. El suero debe procesarse lo antes posible después de su recolección ya que su composición y temperatura es un buen medio de crecimiento bacteriano (5). 5.2.1.1 Proteínas del Lactosuero Lácteo Reciben este nombre el conjunto de sustancias nitrogenadas que no precipitan cuando el pH de la leche se lleva a un pH de 4,6 que corresponde al punto isoeléctrico de la caseína bruta. Por esto se la denomina también proteínas solubles. Se encuentran en el suero que se separa del coágulo obtenido por la adición del cuajo. Representa aproximadamente el 20% del total de las proteínas de la leche (17). Los diversos métodos de fraccionamiento permiten distinguir cuatro grandes fracciones: - albúminas - globulinas - fracción proteasa- pectosa - proteínas menores
  • 18. 18 5.2.1.2 Albúminas Cuantitativamente es la fracción más importante, pues representa el 75% de las proteínas del suero lácteo y el 15% del total de las proteínas de la leche. Comprende fundamentalmente tres constituyentes: α- lactoalbúmina β- lactoglobulina Seroalbúmina α- lactoalbúmina es una proteína de peso molecular 16.300. Muy soluble en agua a pH 6, pero mucho menos soluble en la zona de pH 4 - 4,6. Representa cerca del 25% de la fracción albúminas. El papel biológico de la α- lactoalbúmina ha sido descubierto recientemente. La proteína interviene en la biosíntesis de la lactosa, de la cual se sabe que está bajo el control de tres enzimas, una de ellas sintetiza dos subunidades proteicas A y B. La proteína B no es otra que la α- lactoalbúmina. Mientras que los bovinos pertenecientes a la especie Bos taurus no presentan variantes genéticas de la a-lactoalbúmina (tipo A), ciertos bovinos de la especie Bos indicus presentan una variante (tipo B) (17). 5.2.1.3 Globulinas Mientras que la fracción albúminas permanece soluble en una disolución semisaturada de sulfato amónico, la fracción globulina precipita. Representa el 10 al 12% de las proteínas solubles. Se sabe desde hace tiempo que pueden separarse mediante diálisis, dos subfracciones: una, la euglobulina, es insoluble en agua pura en su punto isoeléctrico y la otra, la pseudoglobulina, es soluble en las mismas condiciones. La gran heterogeneidad de estas subfracciones ha sido demostrada por numerosos autores, principalmente mediante técnicas electroforéticas. Las globulinas de la leche presentan una actividad inmunológica importante. Por esto se las llama a menudo inmunoglobulinas. Son proteínas de peso
  • 19. 19 molecular muy elevado, superior a 150.000, cuya actividad inmunológica puede caracterizarse haciéndolas reaccionar con los antígenos apropiados. Se ha determinado por este método la presencia de aglutininas que provocan la aglutinación de ciertas bacterias y que de esta manera desempeñan un papel importante entre las sustancias inhibidoras del desarrollo de los gérmenes en la leche cruda. Ha sido puesto en evidencia igualmente el papel de la euglobulina presente en la superficie de los glóbulos grasos en el fenómeno de la formación espontánea de la crema (17). 5.2.1.4 Proteasa – Peptonas Es la fracción de las proteínas de la leche que no precipitan por calentamiento a 95°C durante 30 minutos seguida de acidificación a pH 4,6. Representa aproximadamente el 10% de las proteínas del suero lácteo. Es muy heterogénea y no está aún perfectamente definida. Engloba fundamentalmente 4 componentes denominados componentes 3, 5, 8 rápido y 8 lento. El componente 3 se encuentra exclusivamente en el suero lácteo. Es rico en hexosas (7%), hexosaminas (6%) y ácido siálico (3%), pero pobre en fósforo (0,5%). Las tres restantes, menos ricas en glúcidos y ácido siálico pero más ricas en fósforo, se encuentran tanto en el suero lácteo como en las micelas (17). 5.2.1.5 Proteínas Menores Agrupa un cierto número de proteínas que se encuentran en la leche en pequeña cantidad y son difíciles de clasificar. Entre ellas destaca la transferrina o proteína roja, la lactolina y las proteínas de la membrana del glóbulo graso. En conjunto representan menos de 5% de las proteínas del suero lácteo. Lactotransferrina.- Está constituida por una proteína con una única cadena polipeptídica de peso molecular 86.000. Contiene glúcidos (7%), hierro (0,1%) y cistina (5%). Se encuentra absorbida sobre el precipitado de la caseína isoeléctrica. Puede fijar reversiblemente hierro adquiriendo una coloración rosa que se desarrolla dependiendo de la cantidad de hierro conjugado. La fijación de hierro por la transferrina es fuertemente dependiente del pH y de la presencia de iones carbónicos.
  • 20. 20 Lactolina.- Como la proteína anterior, se encuentra absorbida sobre el precipitado de caseína isoeléctrica. Es pobre en fósforo y glúcidos, no contiene metales y su peso molecular es 43.000. El calostro es diez veces más rico en lactolina que la leche. Proteínas de la membrana del glóbulo graso.- Pueden aislarse a partir de la mazada obtenida por batido de una crema lavada. Su complejidad refleja el carácter heterogéneo de la composición proteica de la membrana del glóbulo graso. La presencia de glúcidos (3 a 4%) y fósforo (0,6-0,7%) las convierten en glicoproteínas fosforadas parcialmente solubles en ácido tricloroacético al 12% (17). 5.3 CONTAMINACIÓN AMBIENTAL POR EL SUERO. El suero crea un problema de contaminación grave, ya que en muchas queserías lo arrojan sin tratamiento alguno, dado lo difícil que es rentabilizar su aprovechamiento. La descarga de suero a los cursos de agua origina un elevado consumo de oxigeno disuelto en ella, empobreciéndola y turbando la vida animal y vegetal. Dicho consumo se debe a la oxidación de la materia orgánica y se mide fundamentalmente a través de la determinación de la Demanda Biológica de Oxigeno en 5 días. Según la FAO; un litro de suero requiere alrededor de 40 gr. de oxigeno, valor muy similar a la demanda generada por 0.75 habitantes de la ciudad en un día (54 gr. de oxigeno). La DBO5 del suero se origina en la proteína. (10 gr. de oxigeno) y en la lactosa (30 gr. de oxigeno). En la cuadro Nº 05 se observa los valores para diversos procesamientos, siendo notorios el paralelismo entre carbono orgánico y DBO5. (5) Cuadro No 4 Carga Contaminante de sueros (g/litros). Tipos sueros Agua S.T. M.G Prot. Lactosa Sales DBO5 DQO COT Suero dulce 938 62 0.5 7.5 47 7 42 65 27 Suero dulce desproteinizado 938 54.5 0.5 - 47 7 31 48 20 Suero dulce deslactosado 938 15 0.5 7.5 - 7 11 17 7 Suero acido 954 56 0.5 7.5 40 8 35 60 25
  • 21. 21 Suero ácido desproteinizado 954 48.5 0.5 - 40 8 24 41 17 Suero ácido deslactosado 954 16 0.5 7.5 - 8 11 18 7 Suero ácido deslactosado y desproteinizado 938/953 8 0.5 - - 7 / 8 0.5 0.8 0.7 Fuente: FAO –Elaboración de Queso.1985. S.T. = Sólidos Totales. M.G. = Materia Grasa. Prot. = Proteína. DBO5 = Demanda Biológica de Oxigeno (5 días). DQO = Demanda Química de Oxigeno. COT = Carbono Orgánico Total. 5.4 APROVECHAMIENTO DEL SUERO Tradicionalmente, el suero no había sido considerado como una fuente rica de nutrientes para la alimentación humana a causa de su bajo contenido de proteínas y a sus altos niveles de lactosa y minerales. Sin embargo, desde hace algún tiempo se han intensificado los esfuerzos para utilizarlo, ya que las tendencias de producción señalan un rápido aumento en su disposición a nivel mundial. En la actualidad, los sólidos de suero a utilizar en nutrición humana son producidos en una amplia variedad de formas, tales como, suero en polvo, suero condensado, suero parcialmente delactosado, suero parcialmente desmineralizado y la combinación de los dos últimos, como asimismo, concentrados de proteínas de suero. Por otra parte, ha habido un incremento en la tendencia ha usarlos en alimentación humana debido a una mayor comprensión de las características de los componentes del suero tanto desde el punto de vista nutricional-fisiológico como funcionales.
  • 22. 22 No solo la leche y los productos lácteos, sino que también los componentes básicos son utilizados ampliamente como ingredientes funcionales en diversas ramas de la industria alimentaria, por tres razones fundamentales: 1. Ellos proveen un enriquecimiento nutricional. 2. Confieren ciertas características reológicas y físicas a los productos terminados (textura, consistencia, capacidad de batido). 3. Contribuyen a que el producto tenga buena aceptabilidad por el consumidor (mejoramiento palatabilidad, color). Los principales componentes de la leche y productos lácteos, en este caso el suero en cualquiera de sus formas, poseen un amplio rango de propiedades nutricionales y funcionales que los capacitan para ser empleados en una amplia gama de formulaciones alimentarias. Dentro de las posibilidades de utilización de suero quizás la elaboración de bebidas a partir de el, es la que ha desarrollado mayor cantidad de productos, fundamentalmente bajo tres formas básicas: bebidas fermentadas, bebidas no alcohólicas y bebidas alcohólicas (16). El suero es considerado, en general, como un subproducto molesto de difícil aprovechamiento. Los productos que tradicionalmente se han obtenido a partir del suero han sido 1. Suero en polvo, a base de concentrar los sólidos por evaporación y secado. 2. Suero en polvo desmineralizado, donde se eliminan previamente las sales minerales por intercambio iónico o por electrodiálisis. 3. Lactosa, obtenida por concentración, cristalización y separación. 4. Concentrados proteínicos, obtenidos por ultra filtración del suero.
  • 23. 23 En la actualidad, se están haciendo otros aprovechamientos, tales como la producción de alcohol, vitamina B12 (el suero es muy rico en esta vitamina), jarabes de glucosa y galactosa, lactosil, urea, amoniaco, lactatos, etc. (10). 5.5 SACAROSA O AZUCAR Sacarosa, azúcar de fórmula C12H22O11 que pertenece a un grupo de hidratos de carbono llamados disacáridos. Es el azúcar normal de mesa, extraída de la remolacha azucarera o la caña de azúcar. Es soluble en agua y ligeramente soluble en alcohol y éter. Cristaliza en agujas largas y delgadas y es dextrógira, es decir, desvía el plano de polarización de la luz hacia la derecha. Por hidrólisis rinde una mezcla de glucosa y fructosa, que son levógiras, pues desvían el plano de polarización hacia la izquierda. Por ello, esta mezcla se llama azúcar inversa, y se denomina inversión el fenómeno por el cual se forma. La sacarosa es el azúcar de uso doméstico e industrial y es el azúcar más común en el reino vegetal. La sacarosa se encuentra en todas las partes de la planta de la caña de azúcar, pero abunda más en el tallo, donde se encuentra en las vacuolas de almacenamiento de la célula (parénquima). La sacarosa es menos abundante en las regiones que se encuentran en crecimiento activo, especialmente las porciones blandas del extremo del tallo y las hojas enrolladas (9). Los azúcares monosacáridos, glucosa y fructosa, se condensan para formar sacarosa y agua. Por lo tanto, la sacarosa tiene la fórmula empírica C12H22O11 y un peso molecular de 342.3. Los cristales de sacarosa son prismas monoclínicos que tienen una densidad de 1.588; una solución al 26% (p/p) tiene una densidad de 1.18175 a 20°C. Su punto de fusión es de 188°C (370°F) y se descompone al fundirse. El índice de refracción es de 1.3740 para una solución a 26%(p/p). La sacarosa es soluble tanto en agua como en etanol; las soluciones saturadas a 20°C (68°F) contienen 67.09 y 0.9% por peso, respectivamente. La sacarosa es ligeramente soluble en metanol e insoluble en éter o cloroformo. Cuando se hidroliza, ya sea mediante un ácido o una invertasa, la sacarosa produce cantidades equimolares de glucosa y fructosa, y la mezcla se conoce como invertida. Sin embargo estos azúcares no se presentan siempre en cantidades iguales (9).
  • 24. 24 En el intestino humano, la inversión tiene lugar gracias a la intervención de las enzimas invertasa y sacarasa. Cuando se calienta a temperaturas superiores a 180 ºC, la sacarosa se transforma en una sustancia amorfa, de color ámbar y consistencia espesa, parecida al jarabe, llamada caramelo. Azúcar, término aplicado a cualquier compuesto químico del grupo de los hidratos de carbono que se disuelve en agua con facilidad; son incoloros, inodoros y normalmente cristalizables. Todos tienen un sabor más o menos dulce. En general, a todos los monosacáridos, disacáridos y trisacáridos se les denomina azúcares para distinguirlos de los polisacáridos como el almidón, la celulosa y el glucógeno. Los azúcares, que están ampliamente distribuidos en la naturaleza, son producidos por las plantas durante el proceso de fotosíntesis y se encuentran también en muchos tejidos animales. La ribosa, un azúcar monosacárido que contiene cinco átomos de carbono en su molécula, es un componente del núcleo de todas las células animales. Los azúcares con cinco carbonos se conocen como pentosas. Las triosas (azúcares con tres carbonos), las tetrosas (azúcares con cuatro carbonos), las heptosas (azúcares con siete carbonos), las octosas (azúcares con ocho carbonos) y las nonosas (azúcares con nueve carbonos) también se encuentran en la naturaleza (1). 5.6 FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA La fermentación alcohólica (denominada también como fermentación del etanol o incluso fermentación etílica) es un proceso biológico de fermentación en plena ausencia de aire (oxígeno - O2), originado por la actividad de algunos microorganismos que procesan los hidratos de carbono (por regla general azúcares: como pueden ser por ejemplo la glucosa, la fructosa, la sacarosa, el almidón, etc.) para obtener como productos finales: un alcohol en forma de etanol (cuya fórmula química es: CH3-CH2-OH), dióxido de carbono (CO2) en forma de gas y unas moléculas de ATP que consumen los propios microorganismos en su metabolismo celular energético anaeróbico. El etanol resultante se emplea en la elaboración de algunas bebidas alcohólicas, tales como el vino, la cerveza, la sidra, el cava, etc.1 Aunque en la actualidad se empieza a sintetizar también etanol mediante la fermentación a nivel industrial a gran escala para ser empleado como biocombustible.
  • 25. 25 La fermentación alcohólica tiene como finalidad biológica proporcionar energía anaeróbica a los microorganismos unicelulares (levaduras) en ausencia de oxígeno para ello disocian las moléculas de glucosa y obtienen la energía necesaria para sobrevivir, produciendo el alcohol y CO2 como desechos consecuencia de la fermentación. Las levaduras y bacterias causantes de este fenómeno son microorganismos muy habituales en las frutas y cereales y contribuyen en gran medida al sabor de los productos fermentados (véase Evaluación sensorial).Una de las principales características de estos microorganismos es que viven en ambientes completamente carentes de oxígeno (O2), máxime durante la reacción química, por esta razón se dice que la fermentación alcohólica es un proceso anaeróbico. (19) 5.7 MÉTODOS DE FERMENTACIÓN La fermentación es una de las biotecnologías aplicadas más antiguas, que se ha utilizado para conservar alimentos durante más de seis mil años. Es una técnica de conservación de alimentos barata y fácil, y muy adecuada donde otros métodos son inaccesibles o no existen, como las conservas y la congelación. La fermentación es un proceso que ocupa mucha mano de obra y requiere una infraestructura mínima y poca energía, además de que se integra bien en la vida de las aldeas de las zonas rurales de muchos países en desarrollo, ya que contribuye significativamente a la seguridad alimenticia al aumentar la variedad de materias primas que se pueden utilizar para producir alimentos. La fermentación mejora el contenido nutritivo de los alimentos por la biosíntesis de las vitaminas, los aminoácidos esenciales y las proteínas, al volver más digeribles las proteínas y las fibras, proporcionar más micronutrientes y degradar los factores antinutritivos. La producción de alimentos fermentados también es importante para sumar valor a las materias primas agrícolas, y así proporciona ingresos y crear empleos. El proceso tradicional de fermentación suele ser una actividad espontánea, sin asepsia (desinfección), producto de la acción conjunta de una variedad de microorganismos. En un biorreactor -que puede ser ollas de barro o de metal, una cesta o una simple cavidad en la tierra forrada de hojas-, las variedades mejor adaptadas y con el máximo coeficiente de
  • 26. 26 crecimiento, predominan en condiciones controladas. En consecuencia, mejorar todo lo posible el control de esos métodos y de la flora microbiana asociada a la fermentación representa uno de los principales retos para mejorar las tecnologías de fermentación de los alimentos. También hace falta crear sistemas de control de calidad adecuados, por ejemplo utilizando materias primas de gran calidad, normas de higiene apropiadas en el sitio de elaboración, y un envase adecuado. Si se mejorara el control del proceso creando biorreactores más apropiados, en particular los que sirven para fermentar materias primas sólidas, mejoraría la calidad y la cantidad de alimentos fermentados disponibles en los países en desarrollo. La selección y producción de variedades de microbios más productivos, y el control y manipulación de las condiciones de cultivo, también podrían aumentar la eficacia de los procesos de fermentación.(19) 5.8. INFLUENCIA DE FACTORES EXTERNOS EN LAS LEVADURAS (Saccharomyces cereviviae) La actividad vital de las levaduras se ve influenciada por factores externos, los más importantes son los siguiente: 5.8.1. AGUA Se precisa determinada cantidad de agua, una mezcla de agua pesada en proporción de 1.200 no ejerce influencia sobre las levaduras, una concentración superior si perjudica sus capacidades fermentativas y reproductoras. Muchos preparados de levaduras se pueden conservar vivos por largo tiempo al estado relativamente seco. De acuerdo esto dependen las preparaciones de levaduras viva seca generalmente esto se lleva a cabo entre capas de papel filtro y a temperatura relativamente bajas (la levadura seca tiene un 10 a 12% de agua) también se puede hacer desecación sobre algodón higroscópico, en los cales se puede conservar levadura viva por tiempo relativamente largos, cuando se quiere ablandar nuevamente las células es importante no agregar al agua con rapidez sino en etapas para evitar su rotura (8) 5.8.2. OXIGENO.- Las levaduras son anaerobias facultativas y en algunos casos pueden ser anaeróbicas completas, la presencia de oxigeno favorece notablemente su desarrollo (8)
  • 27. 27 5.8.3. TEMPERATURA: Su óptima de crecimiento es 25ºC para levadura de fermentación baja y de 27 a 30ºC para levadura de fermentación alta. La temperatura determina la actividad de las distintas enzimas de la levadura la actividad de las distintas enzimas de la levadura y las especies reaccionan diferentes al respecto, la refrigeración moderada rebaja diferentes su actividad final pero pueden tolerar sin morir temperaturas muy bajas, su temperatura letal se encuentra alrededor de los 50 a 60ºC (8) LUZ—Una iluminación débil no les produce inhibición en su proceso reproductor, pero si, la luz difusa o la eléctrica la cual les causara bajar su densidad. La luz ultravioleta o los rayos x pueden producir mutaciones en las células de levadura. 5.8.4. FERMENTACION Desde el punto de vista Bioquímico se da el nombre de fermentación a la clase general de cambios o descomposiciones químicas producidas en los substratos orgánicos mediante la actividad de los microorganismos vivos, se aplico en principio, este vocablo al desarrollo de burbujas de bióxido de carbono durante la preparación de vinos y otras bebidas. En una fermentación alcohólicas actica, el dióxido de carbono se libra en forma de burbujas de gas que en la etapa violenta de la reacción puede causas una asignación o un movimiento marcado, que es suficiente para dar la impresión de un líquido hirviendo durante muchos siglos se dio este significado a la palabra. Después que Gay Lussac estudio el proceso de cambio el significado de la palabra, entendiéndose pro fermentación la escisión del azúcar e alcohol y dióxido de carbono al aumentar los conocimientos, a raíz de las investigaciones de Pasteur, sobre la causa de estos cambios en la naturaleza de la materia en fermentación, se asocio la palabra a los microorganismos y aún después a las enzimas, que actúan en ella, Durante mucho tiempo la fermentación estuvo especialmente asociada con los hidratos de carbono, pero parece ser más lógica una concepción más amplia de esta reacciones biológica.
  • 28. 28 Los productos terminales de la fermentación alcohólicas son alcohol y bióxido de carbono en cantidades equimoleculares. C6H12 O6 ----------------------------2CQ2 + 2CH5CH2 OH Glucose Dioxido Alcohol De carbono Etileno A primera vista parece sencilla la química del proceso pero ha debido transcurrir casi medio siglo desde que se conoció su naturaleza enzimática hasta lograr un conocimiento de los diversos tiempos de las reacciones químicas.(19) 5.9. FACTORES INTERNOS QUE INFLUYEN EN LA FERMENTACIÓN El estado de materia prima condiciona el proceso de la fabricación de alcohol etílico. En todos los procesos, el Éxito de la fermentación depende de varis factores: del empleo de la concentración optima del azúcar, del pH, temperatura, de la adición de sustancias nutritivas al mosto a fermentar (Si este parece de algún constituyente esencial para la levadura, del tipo de levadura, de su tolerancia al alcohol para producir grandes cantidades de alcohol, de la condiciones de anaerobiosis del proceso y de la inmediata destilación del mosto fermentado. 5.9.1. Concentración de Azúcar Aunque las levaduras pueden llegar a fermentar mostos con elevada proporción de azúcar, las concentraciones de éste más satisfactorias están entre el 10 y 21 por ciento. Cuando en la obtención del alcohol a partir de melazas de caña de azúcar se empelan concentraciones más altas, el alcohol producido actúa adversamente sobre la levadura inhibiendo su trabajo,
  • 29. 29 puede quedar azúcar sin transformar. En muchas materias primas es necesario una concentración previa al comienzo del proceso de fermentación (8) 5.9.2. Sustancias nutritivas Es muy corriente que muchos residuos agrícolas poseen las sustancias nutritivas necesarias para la fermentación por levaduras pero antes de establecer un proceso industrial de producción de etanol hay que tener la seguridad de que el medio es adecuado para el correcto desarrollo de levaduras, siendo las deficiencias en nitrógeno, en fósforo o en magnesio las mas habituales un buen medio a fermentar contendría. (8) Azúcar 10-12-p.100 SO4 (NH4)2 1 gramos/litro PO4 HK2 1 gramos/litro SO4Mg 0.5 gramos/litro Y péquelas cantidades de Na, Fe, Ca ácidos grasos 5.9.3. ph Las levaduras tienen un ph óptimo de desarrollo alrededor de 5. Sin embargo la fermentación de productos naturales es satisfactorio de 4 a 5,. Este ph favorece a las levaduras y es lo suficiente bajo para inhibir el desarrollo de muchos tipos de bacterias. El control del ph entre 4 a 4.5 junto con la inoculación de una gran cantidad (2 al 4 p. 100) de la levadura inicial puede llegar a sustituir la esterilización de la materia prima, proceso que resulta a veces costoso e impracticable por necesitar consumo de mucha energía. Para ajustar el ph a los niveles exigidos se emplea acido sulfúrico o bien acido láctico.(8)
  • 30. 30 5.9.4.Oxigeno Aunque la producción de alcohol es un proceso anaeróbico que no necesita oxigeno, este es necesario en los primeros momentos para facilitar la reproducción de las células de levadura en condiciones optimas. Después de la inoculación la fermentación se inicia rápidamente desprendiéndose gran cantidad de CO2 que desplaza al oxigeno y se establecen pronto las condiciones anaeróbicas adecuadas para el proceso.(8) 5.9.5. Temperatura La inoculación de la levadura se debe efectuar entre 20 a 25ºC y al iniciarse el proceso de fermentación la temperatura aumenta. La optima esta entere 28 a 38ºCF por lo que como el proceso es exotérmico los fermentadores deben refrigerarse para evitar que la temperatura se eleven. A temperatura por encima de los 32-33º se produce una inhibición del proceso de temperaturas altas favorecen el desarrollo de bacterias contaminantes.(8) 5.10.6- Tiempo necesario para la fermentación. El tiempo de fermentación depende de muchos factores, como son: el tiempo de levaduras, su adaptación al medio, su tolerancia a la concentración de alcohol, las sustancias nutritivas, etc. U n tiempo entre 48y 72 horas suele ser suficiente para completar el proceso de fermentación. Es conveniente que las levaduras utilizadas en el proceso estén previamente aclimatadas al tipo de materia prima utilizada, lo cual se consigue mediante siembra en pases sucesivos en el mismo substrato. (8)
  • 31. 31 VI. MATERIALES Y METODOS 6.1. MATERIAL EXPERIMENTAL. Para el presente trabajo se empleara el lactosuero dulce, además se usarán tres concentraciones de de levadura y tres concentraciones de azúcar, 6.2 MATERIAL DE CAMPO  Libreta de apuntes  Cámara fotográfica digital  Marcadores.  Etiquetas. 6.3 MATERIALES DE OFICINA  Calculadora  Computadora  Flash memory  Impresora  Papel de impresión  Libretas  Esferos  Escritorio  Sillas 6.4 EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE LA PLANTA  Descremadora  Balanza analítica  Termómetro  Brixómetro
  • 32. 32  Lactodensímetro 6.5 MATERIAL DE LA PLANTA  Baldez  Recipientes plásticos  Fundas de empaque  Materiales de limpieza (jabón, detergente, escobas) 6.6 ADITIVOS  Levadura  Azúcar 6.7 MATERIAL DE LABORATORIO  Mechero Búnzen  Estufa o Incubadora Marca Mermeck  Contador de colonias  Pipetas de 10 ml. – 1 ml  Probeta plástica 500 ml  Placas 3M 6.8 Reactivos  Agua Destilada  Alcohol comercial 80 %  Hidróxido de Sodio 0.1 N  Fenolftaleína  Azul de metileno  Agua esterilizada
  • 33. 33 6.2 METODOS 6.2.1 UBICACIÓN DEL EXPERIMENTO El presente trabajo de investigación se realizara en la Planta de frutas y hortalizas particularmente en el equipo de destilación de la Facultad de Ciencias Agropecuarias, Recursos Naturales y del Ambiente, ubicado en el sector de Av Ernesto Cheguevara y Av. Gabriel Secaira; en la Escuela de Ingeniería Agroindustrial de la Universidad Estatal de Bolívar. 6.2.2 SITUACIÓN GEOGRAFICA Y CLIMÁTICA DE LA LOCALIDA PARAMETRO VALOR Cantón Guaranda Provincia Bolívar Universidad Estatal de Bolívar Dirección Av. Ernesto Che Guevara s/n y Av. Gabriel Secaira Lugar experimental Planta de lácteos Latitud 01°34'15" Longitud 79°0'02" Temperatura mínima 8°C Temperatura media anual 13°C Temperatura máxima 18°C Humedad 75% Fuente:Universidad Estatal de Bolívar. Laguacoto II (2003). Estación Meteorológica.
  • 34. 34 FACTORES EN ESTUDIO. FACTOR CODIGO NIVELES Porcentajes de Azúcar A a0= 21|°BRIX a1=22°BRIX a2 =23°BRIX Porcentajes de levadura B b0=1% b1= 2% b2=3% 3.2.2. CARACTERÍSTICAS DEL EXPERIMENTO. Factores de estudio = 2 Tratamientos= 9 Repeticiones= 3 Unidades experimentales= 27 Tamaño de muestra para laboratorio 5lts. 3.2.3 TRATAMIENTOS. El experimento se desarrollará bajo un diseño de bloques al azar con arreglo factorial AXB con tres repeticiones.
  • 35. 35 DESCRIPCIÓN DEL DISEÑO Nro. Tratamiento Código DESCRIPCION O DETALLE A Porcentajes AZUCAR B Porcentajes de LEVADURA 1 a0b0 2 a0b1 3 a0b2 4 a1b0 5 a1b1 6 a1b2 7 a2b0 8 a2b1 9 a 2b2 3.2.4 TIPO DE DISEÑO EXPERIMENTAL. El experimento se desarrollará bajo un diseño de bloques al azar con arreglo factorial AXB con tres repeticiones, para lo cual se utilizará el siguiente modelo matemático. Yijk = μ + Ai + Bj + (AB)ij + Σijk; Donde: Yijk = Enésima respuesta experimental obtenido en el enésimo tratamiento μ = promedio global para todos los tratamientos Ai = efecto del factor A Bj =efecto del factor B
  • 36. 36 (AB) ij =Efecto de la interacción AxB Σijk = Efecto del error experimental 3.2.5. ANÁLISIS ESTADÍSTICO. Para comparación si hay diferencias entre TRATAMIENTOS se aplicará el análisis de varianza (ADEVA) Cuadro No. 5 FUENTE DE VARIACION GRADOS DE LIBERTAD Tratamientos n -1 A n - 1 B n - 1 AB (n-1)(n-1) Error (n-1)(t-1) Total (axbxn) -1  Esquema de Análisis de Varianza.  Para factores en estudio A x B prueba de tukey al 5%,  para promedios de tratamientos (A-18 ) prueba de tukey al 5%  Análisis económico en la relación beneficio / costo 3.3. MEDICIONES EXPERIMENTALES Las mediciones experimentales se realizaran en el Laboratorio. 3.3.1. ACIDEZ.- según la norma INEN 341 3.3.2. METANOL .- según la norma INEN 347 3.3.3. CENIZAS -Según la Norma INEN 348 3.3.4. ALCOHOLES SUPERIORES.- SEGÚN LA NORMA INEN 345 3.4 DIAGRAMA DE FLUJO OBTENCIÓN DE ALCOHOL A PARTIR DE LA FERMENTACIÓN DE LACTO SUERO DULCE.
  • 38. 38 VII.- BIBLIOGRAFÍA 1. ACERO BLANCO, A (2004). Microsoft Encarta Diccionario Enciclopédico. 2. BRUMME, H.:Z. Lebensmittelind. 1951, H.6 y 7, pág. 217 y 14 y siguientes. 3. DEMMLER, G.: Molkenverhefung nach dem walddhofverfahren. Milchwiss. 1950, H.1 4. DIETRICH, K. R.: Molkerei-ztg. 1949, Nº 48; - Z. Spiritusind.1944, Nº 18/22; Z, Alkohol- Ind. 1949, Nº 12/13. 5. FAO, (1985). Manual Correspondiente a la Elaboracion de Quesos. Food Agricultural Organizations. Pág. 81, 82, 83, 84, 85. 6. FAO/OMS, (2000). Manual de Elaboracion de Productos Lacteos. Food Agricultural Organizations. Pág. 150, 156, 200. 7. . Instituto Nacional Ecuatoriano de Normalización (INEN), (1984). Normas INEN # 708 / 702-021, Quito Ecuador. 8. INVESTIGACIONES DE CERVECERÍA NACIONAL. Las levaduras. Quito ecuador. 1993 9. . JAMES, C.P. (1991). Manual de azúcar de caña, para fabricantes de azúcar de caña y químicos especializados. Editorial Limusa; Primera Edición; Impreso en México. Pág. 205, 220 10. MADRID, V. (1999). Curso de Industrias Alimentarias. Tercera Edición. Pág. 223, 224, 225. 11. MUÑOZ, V. (2000). Tecnología de Productos Lácteos. Primera Edición; Argentina, Pág. 110, 111, 112.
  • 39. 39 12. ORGANIZACIÓN MUNDIAL PARA LA AGRICULTURA Y LA ALIMENTACIÓN, (1981). Manual de leche fluida. Módulo 4 Santiago de Chile Pág. 55 – 110. 13. . OSPINA, J. ALDANA, H. (1995). Diccionario Enciclopédico Terranova. España, Tomo # 04. Pág. 185, 186, 187, 188. 14. SANTOS, A. (1987). Leche y sus Derivados. Trillas. (Reimpreso 2000) Pág. 27, 33, 34, 35, 36. 15. SOROA, J. (2002) “Haga el suero mas lucrativo”. España. 16. TETRA PAK, Enciclopedia Virtual (2002). Manual de Industrias de Lácteas, Pág. 101, 102, 103, 104. 17. VEISSERYRE, R. (1986). Lactología Técnica. Composición recogida, tratamiento y transformación de la leche, Segunda edición española, Traducción de la tercera edición francesa, Versión española de JESUS VENTANAS BARROSO, Editorial Acribia. Zaragoza, España. Pág. 28, 29, 30, 31, 32 18. WILIAN G . WALTER. Microbiología general . segunda edición. Trad.por Fernando colchero. Editorial continental. Mexico.1965 19. . http://es.wikipedia.org/wiki/Fermentaci%C3%B3n_l%C3%A1ctica 20. (http://mx.geocities.com/avolaje/Bioenergetica_b1/respanaerobia_b1.html)
  • 41. 41 Edificio 2 ANEXO N°.- 2. PRESUPUESTO DESCRIPCIÓN VALOR Documentos informativos y bibliografía $670,oo dólares Materiales de escritorio $160,oo dólares UEB
  • 42. 42 Transporte $300,oo dólares Alimentación y alojamiento $700,oo dólares Comunicación $100,oo dólares Internet $100,oo dólares Impresión de documentos $340,oo dólares Análisis de laboratorio de la materia prima $400,oo dólares Análisis de laboratorio producto terminado $800,oo dólares Análisis y tabulación de datos $450,oo dólares Materias primas $350,oo dólares Reactivos $450,oo dólares Transcripciones $350,oo dólares Gastos adicionales $570,oo dólares TOTAL $5740,oo dólares ANEXO N°.- 3. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES 2009 2010 ACTIVIDADES 11 12 1 2 3 4 5 6I 7 8 Elaboración del anteproyecto x Presentación del anteproyecto x Aprobación del anteproyecto x Defensa del anteproyecto X Inicio de la Investigación X X Toma de datos X X Análisis e interpretación X X Elaboración del primer borrador x
  • 43. 43 Predefensa x Defensa de tesis x GLOSARIO Acidez de la leche. El grado de acidez de la leche favorece la acción coagulante del cuajo, siendo importante esta circunstancia en la elaboración de queso. Acidez titulable. Es la acidez de la leche, expresada convencionalmente como contenido de ácido láctico, y determinada mediante procedimientos normalizados. Acido láctico. Acido graso procedente de la fermentación de la lactosa. Interviene activamente en la formación de la cuajada al elevar la acidez de la leche. Cenizas de la leche. Es el producto resultante de la incineración de los sólidos totales de la leche. Caseína. Materia orgánica coagula bajo el efecto del cuajo, aparece en una proporción del 6% en la leche de oveja y 4% en la leche de cabra y vaca. Contenido de grasa de la leche. Es la cantidad expresada en porcentaje de masa, de sustancias, principalmente grasas, extraídas de la leche mediante procedimientos normalizados Dornic. Porcentaje de ácido láctico que contiene la solución. Densidad relativa. Es la relación entre la densidad de una sustancia y la densidad del agua destilada, consideradas ambas a una temperatura determinada. Fermentación. Reacción química que se produce en la leche y durante el cual se desprende gas.
  • 44. 44 Lactosa. Es un hidrato de carbono que se encuentra en la leche es el nombre que recibe el azúcar de la leche. El color amarillento de la leche esterilizada se debe a que la lactosa ha caramelizado la leche al ser sometida a altas temperaturas. Muestra. Es el conjunto de unidades de muestreo que se usa como información de la calidad de un lote. pH. Grado de acidez o alcalinidad de cualquier sustancia.