4. los otros seis genes, tat, rev,
nef, vif, vpr y vpu, son genes
regulatorios para proteínas que
controlan la habilidad del VIH
para infectar las células, para la
replicación viral y para producir
enfermedad.
El RNA codifica para nueve genes que son: gag, pol
y env, los cuales tienen la información para producir
las proteínas estructurales para las nuevas partículas
virales,
5. La replicación del VIH se lleva a cabo en 8
pasos.
VIH se adhiere a
célula T CD4.
La cual tiene gran
afinidad.
VIH (gp120)+CD4+
Correceptor
7. …Lo que permite al GP41
desplegarse….
…e insertar su extremo
hidrofobico en la membrana
celular….
A continuación, GP41
se repliega sobre si
misma…
…lo que arrastra al
virus hacia la
superficie celular…
Facilitando la fusión de las membranas
8. La capside viral penetra en la célula Hospedora y allí se desensambla las cadenas de
ARN, y las tres enzimas esenciales para la replicación
INTEGRASAPROTEASA
REVERSOTRANSCRIPTASA
Comienza la Transcripción Inversa
del ARN viral a un ADN viral
La Integrasa escinde los extremos 3’ del ADN, y
(Núcleo) lo integra al ADN del Hospedero,
donde es inducido a la transcripción de ADN
viral a ARN mensajero viral, saliendo al Citosol
La Proteasa, escinde las
Proteínas mayores en
menores
16. DINAMICA CELULAR Y VIRAL DE LA INFECCION POR EL HIV
Vida media de células infectadas productivamente 2,2 días
Promedio de vida de un Virión en sangre 0.3 días
Producción total del HIV-1 10.3 x 109 viriones/día
Duración mínima del ciclo replicativo de HIV-1 in vivo 1-2 días
Tiempo generacional promedio del HIV-1 2-6 días
Porcentaje de virus producido por células recientemente
infectadas
99%
20. Test de Laboratorio para el Diagnostico, Pronostico y Seguimiento d
e la Infección por HIV
Detección de Anticuerpos Anti-HIV EIA
Detección de Ag P24
Detección Combinada Ag+Ac EIA
Detección de Ac- anti HIV (Western Blot)
HIV-RNA cuantitativo (Carga Viral)
Detección de HIV-DNA en CMSP
Determinación de Resistencia a antiretrovirales
Determinación de Tropismo Viral
Test NAT para bancos de Sangre
22. CD4 Y CARGA VIRAL
Las manifestaciones clínicas, el recuento de linfocitos T CD4+ y l
a carga viral plasmática (CVP) son los parámetros que se utilizan
para tomar decisiones respecto al inicio y los cambios en el trata
miento antirretroviral de gran actividad
• El recuento de células CD4 ofrece una indicación del estado
de salud de tu sistema inmunitario.
• La medida de la carga viral sirve para determinar la cantidad
de VIH que hay en la sangre.
• Los resultados de estas pruebas servirán para tomar decisione
s importantes -tales como el momento de comenzar el tratam
iento antirretroviral- y para hacer un seguimiento de cómo est
án funcionando los fármacos.
23. UTILIDAD
• LINFOCITOS CD4
• ESTADO INMUNE
• EXPRESA EL DAÑO QUE YA OCURRIO
• UTILIDAD
• CLASIFICACION DE ESTADIOS
• INICIO DE LA PROFILAXIS
• El número de linfocitos T CD4+ es el marcador de laboratorio principal de la funció
n inmune en un paciente infectado por VIH-1. Sirve para valorar el riesgo de progr
esión clínica de la infección y lo más importante, como indicador del inicio del TA
R, en los pacientes asintomáticos
24. UTILIDAD
• CARGA VIRAL
• PREDICE EL DAÑO QUE VA OCURRIRA
• UTILIDAD
• PRONOSTICO DEL PACIENTE
• INICIO Y MONITOREO DEL TRATAMIENTO ARV
• MARCADOR DE PROGRESION Y RIESGO DE MUERTE
• RESPUESTA O FALLA DEL TRATAMIENTO
25.
26. QUE MIDE EL CD4
• porcentaje de CD4 y/o el c
ociente CD4/CD8 ayudan a
evaluar y a controlar la pro
gresión de la infección y d
e la enfermedad
• Las células CD4 constituye
n la principal diana del VIH
, de manera que el número
de CD4 disminuye a medid
a que la enfermedad progr
esa.
27. CD4
• Respecto al tratamiento antirretroviral en adultos infectado
s por el VIH, la cuantificación de los linfocitos T CD4+ deb
e ser cada 3-6 meses y ante un hallazgo que oriente a tom
ar una decisión terapéutica de inicio de TAR, debe repetirs
e en 3-4 semanas antes del inicio.
• Numerosos estudios de cohortes han demostrado que la c
ifra de linfocitos T CD4+ es un factor pronóstico de progre
sión clínica y de mortalidad.
• Además, en el caso que el paciente haya iniciado el TAR, si
rve para ver la eficacia de éste último. Una adecuada respu
esta de un paciente a la terapia está definida como un au
mento del rango de 50-150 linfocitos T CD4+/μL por año.
28. CD4 y TAR
• Aparición en 1996 del TAR
• estudio MACS, inicio del TAR cuando la cifra de linfocitos T CD
4+ era inferior a 200 células/μL.
• TAR se amplió a todos los pacientes con menos de 350 linfocit
os T CD4+/μL.
• TAR, entre 350 y 500 células CD4+/μL, si estos presentaban de
terminadas circunstancias o comorbilidades.
• El debate actual se centra en torno a si es necesario iniciar TAR
con cifras de linfocitos T CD4+ superiores a 500 células/μL.
(Los datos que sustentan este debate provienen de cohortes de pacientes en las que s
e ha evaluado la mortalidad, la progresión a SIDA, la incidencia de enfermedades no d
efinitorias de SIDA, la recuperación inmunológica y la toxicidad del tratamiento en fun
ción de la cifra de linfocitos T CD4+ al inicio del TAR.)
29.
30.
31. COMO SE REALIZA USUALMENTE EL
RECUENTO DE CD4
• Los recuentos de CD4 son realizados
por:
- Citometria de Flujo
- Conteo manual usando microscopi
os especiales (no muy común)
• En todos los métodos, las células a
contar son marcadas con anticuerp
os monoclonales anti CD4 los cual
es se detectan posteriormente por
distintos métodos.
32. VALORES DE CD4
• En sangre periférica:Valor absoluto
• CD3: 65-80% 875-1900/mm3
• CD4: 30-50% 450-1400/mm3
• CD8: 20-40% 200-750/mm3
• CDR: 15-26% 65-475/mm3
• Relación CD4 = 1,5-2,5
CD8
• Número absoluto de linfocitos: 1500-4000/mm3
33.
34. UTILIDADES CD4
• Monitorizar la respuesta terapéutica.
• Uno de los objetivos del TAR es la restauración inmunológica y por lo tanto f
renar la evolución de la enfermedad.
• La forma más habitual de valorarlo es midiendo el incremento de los linfocito
s T CD4+, que aparece ya en las primeras semanas tras el inicio del TAR.
• El aumento de la cifra de linfocitos T CD4+ es lento pero constante en el tie
mpo.
• No existen datos que permitan definir una respuesta inmunológica adecuad.
En general se admite, basándose en los estudios de cinética celular, que dura
nte el primer año debería existir un aumento como mínimo de 50-100 linfocit
os CD4+/Μl.
35. CARGA VIRAL
• El análisis de carga viral mide la cantidad de VIH en la san
gre, es directamente proporcional a la producción viral, se
reporta en copias de VIH por mililitro de sangre.
• INDICACIONES DE LA CARGA VIRAL
La CV es un marcador de replicación del virus, se lo u
tiliza para monitorizar el tratamiento ARV, ayuda a est
imar el riesgo de transmisión, ayuda a predecir la pro
gresión en el curso de la infección por VIH e incluso
ayuda al diagnóstico en ocasiones puntuales
36. CARGA VIRAL Y TAR
• Actualmente se admite que la CVP es un criterio secunda
rio para el inicio del TAR, complementario a la cifra de lin
focitos T CD4+.
• Al igual que estos, la CVP debería ser medida en todos lo
s pacientes infectados de VIH en la primera visita y despu
és cada 3-6 meses.
• Ante un hallazgo que oriente a tomar una decisión terap
éutica de inicio de TAR, 3-4 semanas antes del inicio del
TAR, se recomienda confirmar siempre la CVP con una se
gunda determinación. Debe utilizarse, siempre que sea p
osible una técnica ultrasensible para determinar la CVP, p
ara el control y seguimiento de la eficacia del TAR, cuyo
dintel mínimo de detección sea <50 copias/ml
37. CARGA VIRAL Y TAR
• Se recomienda iniciar TAR de forma inmediata en los pacientes con infecció
n aguda sintomática cuando: la CVP a los tres meses de la infección es supe
rior a 100.000 copias/ml o en el paciente asintomático cuando también sup
era este umbral.
• El objetivo del TAR es conseguir una supresión lo más rápida y duradera po
sible de la replicación viral.
• La CVP desciende rápidamente (1-2 log10/ml) tras iniciar el TAR y el nadir, n
úmero más bajo de linfocitos TCD4+ que se alcanza, comienza a aumentar
a las 48 semanas, lo que se correlaciona con el efecto de la respuesta.
• En pacientes sin tratamiento previo, los niveles indetectables de la CVP por l
as técnicas convencionales (<200/50 copias/ml) suelen alcanzarse tras un pe
ríodo medio de 3-8 semanas de TAR. Algunos pacientes, especialmente aqu
ellos que parten con CVP altas, pueden tardar más de 24 semanas en lograr
niveles inferiores a 50-20/ copias/ml.
38. CARGA VIRAL Y TAR
• Es importante alcanzar una CVP menor de 20-50 co
pias/ml, puesto que se ha comprobado que aunque
siempre sigue existiendo replicación viral en el tejid
o linfático, si la CVP es inferior a esta cifra no se sel
eccionan mutaciones de resistencia.
• De todas formas la persistencia de CVP por encima
de 50 copias/ml, en más de dos determinaciones su
cesivas se debe considerar ya fracaso virológico.
39. CARGA VIRAL Y TAR
• Basándose en datos de cinética viral en pacientes con TAR, los
criterios de respuesta y fracaso virológicos son los siguientes:
• – Respuesta virológica: CVP <50/20 copias/ml a las 16-24 sema
nas. Estos pacientes tienen respuesta virológica a las 4 semana
s (disminución CVP >1 log10/ml), y a los 3-4 meses tienen una
CVP indetectable por las técnicas convencionales.
• – Fracaso virológico: cualquiera de las siguientes situaciones de
fine el fracaso virológico por lo que se debe tomar una decisió
n de cambio del TAR:
• a) CVP detectable a las 24 semanas de iniciado el TAR.
• b) Si tras alcanzar una CVP indetectable (<50 copias/ml), ésta v
uelva a ser detectable en dos determinaciones consecutivas.
40. CARGA VIRAL
Existen diferentes técnicas.
• El método PCR (en inglés, polymerase chai
n reaction)
• El método bDNA (en inglés, branched DNA)
• El metodo NASBA (amplificación basada en l
a secuencia del ácido nucleico).
41. Carga Viral
• Carga viral superior a 100,000 copias/ml
se considera "alta“
• Carga viral inferior a 10,000 copias/ml se
considera "baja“(Personas con VIH sin tra
tamiento).
• Por debajo de 50 (CV indetectable), es el
objetivo de la terapia.
43. PROBLEMAS en el Examen de Carga Viral
• Solo un 2% del VIH en su cuerpo está en la sangre. (
CV no mide la cantidad de VIH en otros tejidos del c
uerpo como los ganglios linfáticos, el bazo o cerebro)
. Cuando los niveles de VIH disminuyen en la sangre,
también lo hacen el tejido linfático y en el semen per
o no al mismo tiempo y en el mismo porcentaje.
• Los resultados pueden ser alterados si hay una infecc
ión o si recibe alguna vacuna (como la de la gripe).
46. Cuando realizar una Indicación de Testeo
de Carga Viral de HIV-1
En el momento del diagnostico y cada 4 meses en los pacientes no tratados
Inmediatamente antes de Iniciar una Terapia antiretroviral
A las 4 semanas de Iniciada la Terapia para Verificar su Eficacia
Una vez obtenida una carga viral indetectable, cada 3-4 meses para el seguimiento de la misma
Ante la aparición de eventos clínicos de importancia o disminución marcada de los CD4+
Para confirmar falla Terapéutica luego de obtener valores detectables en pacientes que habían
logrado bajar sus niveles de viremia por debajo de 50 copias/ml
48. BIBLIOGRAFIA
• Situación de la epidemia de SIDA de 2007. http://data.unai
ds.org/pub/EPISlides/2007.
• ONUSIDA. Informe sobre la epidemia mundial de SIDA 201
5.http://data.unaids.org/pub/GlobalReport/2015/2015_es
.pdf
• Agencia Española de Cooperación Internacional-Ministerio
de Asuntos Exteriores-Ministerio de Sanidad y Consumo (E
spaña). Capacitación en VIH y sida. Módulo 1 Conceptos bá
sicos de epidemiología del VIH/sida. Diciembre de 2000 (te
xto modificado de Brookmayer, R.; Gail, M. H. AIDS Epidemi
ology: A quantitative approach: 11. Oxford University Press
).
• Elección y uso de las pruebas de detección de resistencias del VIH. J.M. Eiros, B.
Hernández, C. Labayru y R. Ortiz de Lejarazu
Servicio de Microbiología, Hospital Universitario, Facultad de Medicina, Valladolid
