1. CITOGENÉTICA Y CULTIVO
CELULAR
Departamento Ciencias Básicas
Biología Molecular

2. La citogenética en investigación y
diagnóstico.
• Diagnóstico de patologías
genéticas
• Exposición ambiental
• Cáncer

3. Células con número constante de chr
según la sp.
Las fallas constituyen causas importantes de pérdidas
reproductivas y problemas que incluyen el cáncer

4. Mitosis

5. Clasificación de los cromosomas
p
cen
q
Metacéntrico Submetacéntrico Acrocéntrico

6. Cromosomas humanos

7. Alteraciones cromosomicas
Numéricas:

8. Estructurales:
Tipo cromosoma: Deleciones
Inversiones
Duplicaciones
Traslocaciones
Gap
Anillos
Dicentricos

9. CONSIDERACIONES TECNICAS DE
BANDEO CROMOSOMICO Y CULTIVO
CELULAR.

10. Muestras utilizadas en cariotipo
Pacientes con sospecha de
 Sangre Periferica alteraciones cromosomicas.
 Celulas embrionarias Parejas con problemas de
 Fibroblastos infertilidad.
 Celulas amnioticas Embarazadas en edad
avanzada.
 Medula Osea Pacientes con sospecha
de leucemias

11. Metodología para la obtención de
cromosomas.
46,XY

12. Ideograma

13. Diversas técnicas de bandeo para el
análisis cromosómico.
BG (Giemsa)
Fra (Metrotrexate, Timidina)
BR (Bromodeoxiuridina Hoechst ) BC (BaOH)

14. Tripsina
Es específica ya que se liga al péptido en las posiciones del carboxilo terminal
donde hay Arg o Lys, ambos aminoácidos con grupos R +,fragmentando al
péptido inicial.

15. Colorantes.
Giemsa: Summer et al en 1971
Se basa en la interacción molecular entre eosina y un complejo azur B – ADN. la eosina
liberada colorea el componente extracelular y determinadas extructuras acidófilas (AT)
La intensidad de coloración:
contenido de azur B
relación entre azur B y eosina amarilla.
pH de la solución y de la solución tampón
tiempo de tinción y la fijación.
Wrigth: James Homer Wright
Reactivo compuesto por eosina, azul de metileno y solución de alcohol.
Ampliamente usado en técnicas de alta resolución por producir coloraciones nítidas.

16. Bandeo C
Descrita por Hemil Hertz 1928
Heterocromatina constitutiva:
20% del genoma
Localizada alrededor de constricciones 1 º de todos los cromosomas
constricción 2º de los cromosomas 1,9,16 y Y.
Replicación tardía
En algunos mamíferos se ubica en los telomeros
No poseen DNA altamente repetitivo
No posee genes activos
Poco nivel de histonas acetiladas

17. Importancia bandeo C
Identificación de polimorfismos en los cromosomas, tal como el incremento en el
tamaño en las regiones de heterocromatina (1,9,16 y Y)
Determina inversiones y rearreglos en el cromosoma involucrados.
G11: Especifica para el cromosoma 9
identifica fragmentos céntricos no bandeados, rearreglos, inversiones
pericentricas y translocaciones.

18. Intercambio de Cromatides Hermanas ICH
Representa el intercambio entre productos replicados aparentemente con loci
homólogos.
Requiere de que la célula haya pasado por fase S ya que en G2 es donde se
produce el daño en el DNA.
Se considera como normal un promedio de 5-15 intercambios por metafase

19. Bromodeoxiuridina BrUd
1 división
BrUd Sustitución total de las 2 cromátides
2 división Sustitución bilateral.

20. Bandeo Telomerico o Terminal.
Telómeros:
 son regiones largas de ADN repetido, se acortan progresivamente. Cuando
alcanzan una longitud crítica, la célula ya no se puede multiplicar.
Método 1: Bandeo T por denaturalización térmica (87oC, giemsa, naranja de acridina,
buffer fosfato).
Es útil para evaluar estabilidad de los cromosomas y la división celular.