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ESCUELA DE BIOANALISIS
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1.- TOMA DE MUESTRA1.- TOMA DE MUESTRA
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2.- FIJACIÓN2.- FIJACIÓN
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*Físicos : Calor, frío, desecación.
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(Detener procesos vitales y conservar estructura.)
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3.- DESHIDRATACIÓN3.- DESHIDRATACIÓN
4.- ACLARAMIENTO4.- ACLARAMIENTO
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5.- INCLUSIÓN5.- INCLUSIÓN
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7.- CORTE7.- CORTE
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Micrótomo (cortes de 6 a 10 μ) → Agua a 45º
ALBUMINA DE MAYER: Clara
de huevo y glicerina a partes
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Coloración de células
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PROCESO
COLORACION HEMATOXILINA - EOSINA
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.
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= SAL (Azul)
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TÉCNICA DE COLORACIÓN
HEMATOXILINA-EOSINA (H-E)
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• Observación al Microscopio Óptico.
Otros Términos:
• ORTOCROMASIA: La estructura se
colorea igual al colorante (Coloración
Hematoxilina Eosina)
• METACROMASIA: La estructura se
colorea diferente al colorante. (Azul de
Metileno: es azul y tiñe Rojo)
9.- MONTAJE. Bálsamo de Cánada9.- MONTAJE. Bálsamo de Cánada
TOMA DE MUESTRA FIJACIÓN DESHIDRATACIÓN
90% 100%
Lavar con
agua destilada
Alcohol
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ACLARAMIENTO o
IMPREGNACIÓN INCLUSIÓN
(Parafina Líquida 60ºC)
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COLORACIÓN OBSERVACIÓN
ESTUDIO DE TEJIDOS FIJADOSESTUDIO DE TEJIDOS FIJADOS
• Xilol
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MM
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ÓÓ
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PARTE OPTICAPARTE OPTICA
• CONDENSADOR
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Celula. mat histologico

  • 1. UNIDAD II: CELULA Y METODOS HISTOLOGICOS UNIVERSIDAD DE LOS ANDES FACULTAD DE FARMACIA Y BIOANALISIS ESCUELA DE BIOANALISIS CATEDRA DE CIENCIAS MORFOLOGICAS DRA. CARLU ARIAS DE PEREZ
  • 2. Diferencias entre las células procariotas y eucariotas CELULAS PROCARIOTASCELULAS PROCARIOTAS CELULAS EUCARIOTASCELULAS EUCARIOTAS OrganismosOrganismos representadosrepresentados Bacterias y Cianobacterias Hongos, Plantas Tamaño celularTamaño celular Pequeño. Generalmente entre 1 y 10 micras Grande, generalmente entre 1 y 100 micrómetros Metabolismo yMetabolismo y fotosíntesisfotosíntesis Anaeróbico y aeróbico Aeróbico con excepciones MotilidadMotilidad Inmóviles o Flagelos formados por flagelina Normalmente con movimiento, cilios o flagelos formados por microtúbulos Paredes celularesParedes celulares Presente, constituida por mureína, de azúcares y péptidos característicos. Presente en vegetales Ausente en animales. ReproducciónReproducción Por división o fisión binaria Mitosis o Meiosis OrganizaciónOrganización celularcelular Principalmente unicelular Principalmente pluricelular con células diferenciadas. Membrana NuclearMembrana Nuclear Ausente Presente NucleolosNucleolos Ausente Presente MitocondriasMitocondrias Ausentes. Los procesos bioquímicos equivalentes tienen lugar en la membrana citoplasmática. Presentes. CloroplastosCloroplastos Ausentes. Los procesos bioquímicos equivalentes tienen lugar en la membrana citoplasmática. Presentes en células vegetales. OrganelasOrganelas citoplasmáicascitoplasmáicas Ausentes. Solo poseen ribosomas.
  • 5. ESTRUCTURA CELULAR BÁSICAESTRUCTURA CELULAR BÁSICA MembranaMembrana plasmáticaplasmática CitoplasmaCitoplasma NúcleoNúcleo
  • 6.
  • 7.
  • 10. FORMAS DEL NÚCLEO Y LA CÉLULA CUBICA Glándula Tiroides Túbulos renales PRISMÁTICA Intestino delgado y grueso POLIEDRICA Hígado ESTRELLADA Asta anterior de Médula Espinal CILINDRICA Músculo estriado esquelético y cardíaco
  • 11. FORMAS DEL NÚCLEO Y LAFORMAS DEL NÚCLEO Y LA CÉLULACÉLULA PIRAMIDAL Acinos glandulares Páncreas PLANA DE FRENTE ESFÉRICA Övulos femeninos FUSIFORME Músculo Liso PLANA TRANVERSAL Endotelios vasculares
  • 12. MÉTODOS DE ESTUDIOMÉTODOS DE ESTUDIO HISTOLÓGICOHISTOLÓGICO VivosVivos Estudio de células y tejidosEstudio de células y tejidos FijadosFijados
  • 13. ESTUDIO DE CÉLULAS YESTUDIO DE CÉLULAS Y TEJIDOS VIVOSTEJIDOS VIVOS Dentro del Organismo Fuera del Organismo Método de observación directa • Examen al estado fresco •Cultivo de tejidos •Coloraciones vitales: - Supravitales - Intravitales
  • 14. PROCEDIMIENTO PARA LAPROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACIÓN DELPREPARACIÓN DEL MATERIAL HISTOLÓGICOMATERIAL HISTOLÓGICO Técnica: Inclusión en parafinaTécnica: Inclusión en parafina ESTUDIO DE CÉLULAS Y TEJIDOSESTUDIO DE CÉLULAS Y TEJIDOS FIJADOSFIJADOS
  • 15. 3.- ORGANOS LOS ORGANOS ESTAN FORMADOS POR DIFERENTES TIPOS DE TEJIDOS TRAQUEATRAQUEA TEJIDO EPITELIAL CARTILAGO TEJIDO GLANDULAR TEJIDO MUSCULAR
  • 16. 1.- TOMA DE MUESTRA1.- TOMA DE MUESTRA • Sobredosis de Anestesia • Inhalación de éter • Perfusión del fijador • Traumatismo craneal
  • 17.
  • 18.
  • 19. 2.- FIJACIÓN2.- FIJACIÓN Fijadores: *Físicos : Calor, frío, desecación. *Químicos: Simples: Formol 10%, Alcohol Compuestos: mezclas (Detener procesos vitales y conservar estructura.)
  • 20. Concentraciones crecientes de Alcohol: 70- 90 - 100% 3.- DESHIDRATACIÓN3.- DESHIDRATACIÓN
  • 21. 4.- ACLARAMIENTO4.- ACLARAMIENTO Con un solvente de la parafina. Ej: Xilol, Benzol.
  • 22. Parafina derretida a 60º. 5.- INCLUSIÓN5.- INCLUSIÓN
  • 23. FormaciónFormación del bloquedel bloque Proceso de Inclusión BARRAS DE LEUCKART
  • 25. Micrótomo (cortes de 6 a 10 μ) → Agua a 45º
  • 26. ALBUMINA DE MAYER: Clara de huevo y glicerina a partes iguales Colocar en estufa a 37º por 12 horas
  • 28. Coloración de células •Físico → Óptica •Químico: Ácido + Base = SAL (Color) PROCESO COLORACION HEMATOXILINA - EOSINA
  • 29. Coloración de células . Hematoxilina + Núcleo . (Base) (Acido) Eosina + Proteínas (Acido) (Base) = SAL (Azul) = SAL (Rosada) Basofilia: Afinidad por estructuras básicas. Acidofilia: Afinidad de las estructuras ácidas.
  • 30. TÉCNICA DE COLORACIÓN HEMATOXILINA-EOSINA (H-E) • Xilol para desparafinar (2 minutos) • Alcohol para sacar el Xilol (2 minutos) • Agua destilada para hidratar (2 minutos) • Hematoxilina de Mayer para colorear núcleos (5, 10 o 20 min.) • Agua corriente para sacar el exceso de Hematoxilina • Lavado rápido en agua destilada para eliminar el agua corriente • Eosina para colorear citoplasmas (de 30 segundos a 1 minuto) • Agua destilada para sacar el exceso de Eosina • Alcohol para deshidratar (2 minutos) • Xilol para aclarar (2 minutos) • Montaje • Observación al Microscopio Óptico.
  • 31. Otros Términos: • ORTOCROMASIA: La estructura se colorea igual al colorante (Coloración Hematoxilina Eosina) • METACROMASIA: La estructura se colorea diferente al colorante. (Azul de Metileno: es azul y tiñe Rojo)
  • 32. 9.- MONTAJE. Bálsamo de Cánada9.- MONTAJE. Bálsamo de Cánada
  • 33. TOMA DE MUESTRA FIJACIÓN DESHIDRATACIÓN 90% 100% Lavar con agua destilada Alcohol 70% ACLARAMIENTO o IMPREGNACIÓN INCLUSIÓN (Parafina Líquida 60ºC) Xilol Barras de Leuckart Bloque ESTUDIO DE TEJIDOS FIJADOSESTUDIO DE TEJIDOS FIJADOS
  • 34. Micrótomo CORTE Agua tibia Pincel Portaobjeto (Albúmina de Mayer) 12 h a 37ºC COLORACIÓN OBSERVACIÓN ESTUDIO DE TEJIDOS FIJADOSESTUDIO DE TEJIDOS FIJADOS • Xilol • Alcohol • Agua destilada • Hematoxilina • Agua corriente • Eosina • Agua destilada • Alcohol • Xilol • Montaje
  • 36. PARTE OPTICAPARTE OPTICA • CONDENSADOR • Lentes convergentes. • OBJETIVO • Lentes plano convexas. • Imagen: Aumentada-Real-Invertida • OCULAR • Lentes convergentes. • Imagen: Aumentada-Virtual-Derecha al objetivo
  • 37. Microscopio electrónico de Transmisión Microscopio electrónico de Barrido
  • 38.
  • 39. Riñón Piel Imágenes vistas al microscopio ópticoImágenes vistas al microscopio óptico
  • 41.
  • 42. Fotografía de la superficie de un macrófago, obtenida por microscopía electrónica de barrido.