Este documento describe un estudio que busca identificar la presencia de la bacteria Escherichia coli en el agua de consumo de pozos en comarcas del municipio de Quezalguaque, Nicaragua. Se recolectaron muestras de agua de 6 pozos entre julio y octubre de 2014. Los resultados preliminares muestran que el 100% de los pozos contenían coliformes totales y fecales, excediendo los límites establecidos. La distancia entre las letrinas y los pozos y la falta de protección de éstos últimos podrían

1. Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua, león
Facultad de Ciencias Medicas
Carrera de Bionalisis clínico
Curso de Investigación III
POROTOCOLO DE INVESTIGACION
Identificación de Bacterias Escherichia coli en
agua de consumo en comarcas del municipio
de Quezalguaque Julio-octubre 2014
Autores: Br. Elvin José Fargas Sánchez.
Tutor: Dr. Daniel Reyes Navarrete. MD, MSc, PhD.

2. Detección de microorganismos indicadores en
agua de pozos
Principales contaminantes podemos mencionar a
diferentes microorganismos como bacterias, virus,
parásitos y algunos coliformes que llegan procedente de
las heces de personas y animales.

3.  Determinar el tipo de microorganismos presentes y su concentración
proporciona herramientas indispensables para conocer la calidad del agua y
para la toma de decisiones en relación al tratamiento de aguas y conservación.
 La Organización Mundial de la Salud (OMS) recomienda utilizar como
indicadores de contaminación en aguas a la E. coli y Enterococcus.
 La E. coli es uno de los indicadores más sensibles del grado de contaminación
en las cercanías de los sitios donde son eliminadas las excretas.
 Los Enterococcus sobreviven más tiempo en agua que los coliformes fecales,
simulando mejor las características de sobrevivencia de otros
microorganismos (ej. Rotavirus), que son el principal agente causante de
gastroenteritis

4. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
 ¿Cuál es la carga bacteriana de E. coli presente en el agua de consumo para pobladores
de las comarcas del municipio de Quezalguaque, en el periodo comprendido entre julio
- octubre?

5. Objetivos
GENERAL
 Determinar la carga bacteriana de E. coli presente en el agua de pozos para consumo
humano en comarcas del municipio de Quezalguaque, en el periodo comprendido
entre Julio – Octubre.
 ESPECÍFICOS
 Conocer la carga bacteriana de coliformes fecales según su número más probable
(NMP), para considerar la potabilidad del agua de pozos, según parámetro
microbiológicos contemplados en las normas CAPRE.
 Identificar el tipo de coliformes aislados y su distribución en la comunidad en
estudio.

6. MATERIALES Y MÉTODOS
TIPO Y AREA DE ESTUDIO
El presente estudio es:

7. MUESTRA DE ESTUDIO
El muestreo se ha realizado en 6 pozos de la comarca de las Mercedes del municipio, de
Quezalguaque este fue muestreado el día martes 23 de septiembre. Las siguientes
muestras serán recolectadas durante los meses de Septiembre a octubre 2014.

8. RECOLECCIÓN
 Para la recolección de las muestras de agua se visitaran las comarcas del municipio de
Quezalguaque; se les solicitara el consentimiento verbal y escrito a los dueños de pozo,
para la recolección de las muestras.
 Debido a la profundidad que presentaran algunos pozos, las muestras serán extraídas
siguiendo la misma forma de obtención de los pobladores, la cual se realiza
manualmente (baldes-mecates) o bomba (eléctrica y de presión) con tubería.
TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS
 Las muestras fueron recogidas en frascos estériles con capacidad de 500 ml, sin
preservantes. Se identificara debidamente, de preferencia fijando una etiqueta rotulada
al recipiente. Las muestras se transportaron al departamento de Microbiología y
Parasitología de la UNAN, León en termo conteniendo refrigerante para brindarle las
condiciones de una temperatura entre 4-8º C.

9. PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO
 Una vez en el laboratorio todas las muestras serán procesadas para la detección de
coliformes totales y fecales utilizando la técnica de tubos múltiples (NMP), que nos
permitirá determinar la carga bacteriana, y realización de cultivos y pruebas
bioquímicas para la identificación de la especie bacteriana presente. Dicho análisis será
realizado en tres pasos:
 Prueba presuntiva:
 Prueba confirmativa:
 Prueba completa:

12. Análisis de Datos
 Se hará una ficha con una serie de preguntas para determinar algunos criterios de
inclusión y solicitar su autorización verbal y escrita para que se pueda llevar a cabo
dicha investigación.
 Para conocer la calidad de agua de cada muestra se compararan los valores obtenidos
con los valores máximos permisibles que estipulan las normas CAPRE . Los datos
obtenidos serán almacenados y procesados con el programa estadístico SPSS versión
17.0, aplicando un análisis descriptivos (valor máximo, mínimo y media) y presentados
en tablas y gráficos en valores absolutos y porcentuales, según objetivos del estudio.

13. RESULTADOS PRELIMINARES
 Un total de 6 muestras de agua de pozo han sido recolectadas aleatoriamente y de acuerdo a la
factibilidad de acceso a las comunidades incluidas en el estudio, para determinar la carga
bacteriana (coliformes totales y fecales) e identificar el agente contaminante presente.
Características de los pozos y utilización
 Para este propósito se realizó una entrevista (llenado de encuesta) al dueño o habitante del lugar
donde se encontraba el pozo. Los principales punto fueron basados en conocer sobre la
profundidad del pozo, consumo del agua, tratamiento posterior a su extracción y número de
personas que se abastecen. Además, se observó in situ las características y/o condiciones de los
pozos (existencia de brocal, tapa, etc.), ubicación de las letrinas en relación al pozo, formas de
obtención del agua y presencia de charcos o basura cerca de la fuente. Resultando lo siguiente:

14. Tabla #1 técnica de extracción del agua
Técnica de Extracción Frecuencia Porcentaje
mecate y balde 4 66.7
bomba electrica 1 16.7
bomba manual 1 16.7
Total 6 100.0
Tabla # 2 Estado en que se encuentra el pozo
Estado del pozo Frecuencia Porcentaje
Brocal y tapa 2 33.3
brocal-sin tapa 4 66.7
Total 6 100.0

15. Tabla # 3 Profundidad de la letrina en varas
profundidad Frecuencia Porcentaje
10 2 33.3
15 2 33.3
20 2 33.3
Total 6 100.0
Tabla # 4 Distancia entre la letrina y el pozo
N 6
Media 25.00
Mediana 20.00
Mínimo 5
Máximo 50
Tabla # 4 uso del pozo
Uso del pozo Frecuencia Porcentaje
si 5 83.3
no 1 16.7
Total 6 100.0

16. Análisis microbiológico y calidad del agua de pozos
 En los resultados microbiológicos se observó que del total de pozos analizados el 100%
(5/5) tuvieron presencia de coliformes totales, donde un 60% (3/5) presentó más de
2400 UFC/100 ml. Un 100% (5/5 de los pozos con presencia de bacterias, mostraron
crecimiento de coliformes fecales. Un total de 3 pozos presentaron entre 21 y 43
UFC/10 ml, (rango 4-43 UFC/10ml). El 100%(5/5) de los pozos, sobrepasan los límites
de UFC/100 ml de agua, establecidos en las normas CAPRE.

20. Tabla # 6 Relación entre la ubicación del pozo respecto al lavandero y su número de ufc de coliformes fecales
numero de ufc de coliformes fecales
0 4 11 21 43 Total
ubicación respecto al
lavandero
1 Recuento 0 0 1 0 0 % dentro de numero de ufc
de coliformes fecales
.0% .0% 100.0% .0% .0% 16.7%
5 Recuento 1 0 0 0 0 % dentro de numero de ufc
de coliformes fecales
100.0% .0% .0% .0% .0% 16.7%
6 Recuento 0 0 0 1 0 % dentro de numero de ufc
de coliformes fecales
.0% .0% .0% 100.0% .0% 16.7%
10 Recuento 0 1 0 0 1 % dentro de numero de ufc
de coliformes fecales
.0% 100.0% .0% .0% 50.0% 33.3%
30 Recuento 0 0 0 0 1 % dentro de numero de ufc
de coliformes fecales
.0% .0% .0% .0% 50.0% 16.7%
Total Recuento 1 1 1 1 2 % dentro de numero de ufc
de coliformes fecales
100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0%

22. Gracias!!