Este documento describe diferentes tipos de cultivos de microorganismos, incluyendo cultivos de sangre, orina, y heces. Explica cómo recolectar y sembrar muestras correctamente, los medios de cultivo adecuados, y cómo interpretar y reportar los resultados. Los cultivos son una herramienta importante para diagnosticar infecciones.

1. DRA. MR NIEVES ESCOBAR CRUZ

2. QUE ES CULTIVO
 Son aquellos que permiten el
crecimiento de una gran
variedad de microorganismos.
En sustancias alimentarias
artificiales es una de las
técnicas mas importantes
usadas en laboratorio

3. MEDIO CULTIVO
 Un medio cultivo se refiere a aquel lugar en el espacio en
el que se reúnen las características necesarias para el
crecimiento y desarrollo
 Las sustancias necesarias para el crecimiento de los
microorganismos pueden ser proporcionadas por un
sistema vivo

4. CLASIFICACION DE MEDIOS
CULTIVOS
DE ACUERDO A SU ESTADO FISICO
SOLIDO: contienen
aproximadamente 1.5% o mas de
agar (el cual les confiere la
característica de solido )se utiliza
principalmente para el crecimiento
y aislamiento de bacterias

5. MEDIOS LIQUIDOS :
contiene agar , se conocen
también como caldos se utilizan
para el crecimiento de inoculos
puros
MEDIOS SEMISÓLIDOS :
aunque en la naturaleza no existen
el estado físico de semisólido , en
bacteriología se usa para definir a
aquellos medios que contienen agar
pero en proporción menos de 1.5%
principalmente para estudios de
movilidad

6.  MEDIO PARA CRECIMIENTO : son los que contienen
nutrientes que permiten el desarrollo de la mayoría de los
microorganismos no exigentes , con su velocidad de
crecimiento normal y sin ofrecer a ninguna ventaja especial
ejemplo agar nutritivo
 MEDIO ENRIQUECIDO : son los medios a los que se
condiciona algunos componentes especiales con lo cual se
busca solo el desarrollo de microorganismos exigentes
 MEDIOS SELECTIVOS: son aquellos a los que se les
incorpora un inhibidor del desarrollo bacteriano con lo cual
busca solo el desarrollo de un tipo especial d bacterias
 MEDIO INDICADORES : son todo aquellos en las cuales
se busca valorar características metabólicas especiales de
cada especie de bacteria
DE ACUERDO A SUS PROPIEDADES SOBRE EL
CRECIMIENTO Y DESARROLLO MICROBIANO

7. METODO DE INOCULACION O DE SIEMBRA
 INOCULO: Carga de microorganismos presentes un sitio y
momento determinado
 MÉTODO POR ESTRIACIÓN O SIEMBRA POR
ESTRÍA EN SUPERFICIE : Toma de muestra

8.  TÉCNICA DE SIEMBRA PARA AISLAMIENTO : Estrías
múltiples
 Con un asa de siembra previamente esterilizada se toma
una muestra del cultivo de microorganismos y se
extiende sobre un área pequeña de la superficie de la
placa con agar nutritivo en forma de estrías muy juntas
pero sin hacer presión para no dañar el agar.
 Se flamea el asa, se enfría y después de rosara la
siembra realizada previamente se extiende de nuevo por
otra zona de la placa haciendo nuevas estrías
 Mediante esta técnica se obtienen colonias aisladas a
partir de una muestra que contenga un elevado numero
de gérmenes

9. TECNICA DE LOS CUATRO
CUADRANTES : Se divide la
placa en cuatro cuadrantes . Se
toma el inoculo y se siembra
consecutivamente en 1-2-3-4 . En
el cuarto cuadrante al menos
obtendríamos colonias aisladas
SIEMBRA POR
AGOTAMIENTO (O EN
SUPERFICIE ):
Se realiza una descarga y se
realiza estría por toda la placa

10. TIPOS DE AGARES

11. HEMOCULTIVO
 Es un examen de laboratorio para
verificar si hay bacteriemia o
fungemia en la sangre.
 BACTERIEMIA Y FUNGEMIA
: es la complicación grave de una
infección donde hay bacterias u
hongos en la sangre

12. HEMOCULTIVO
 Se pueden clasificar según
 El tipo de paciente (neonatal,
pediátrico, adulto),
 El tipo de toma de muestra
(centrales o periféricos); tipo
de microorganismo (bacterias
aerobias, anaerobias, hongos,
fastidiosas o micobacterias)
 Según la metodología de los
distintos sistemas de
identificación.

13. INDICACIONES
• Sospecha de Infecciones del
torrente Sanguíneo ( Bacteriemia o
Fungemia)
• Lactante Febril
• Neutropenia y Fiebre
• Endocarditis
• Sepsis Neonatal
• Neumonía Bacteriana Complicada
• Artritis Séptica/Osteomielitis
• Todo paciente febril con línea
venosa central sin otro foco
infeccioso evidente

14. RECOMENDACIONES
.
• <30kg tomar 1 a 3 ml para frasco aeróbico
pediátrico e inocular . recordar un set dos
botellas y a mayor volumen mayor
positividad
neonatal depende del peso del paciente
• las pautas publicadas recomiendan que el
intervalo entre la recolección de sangre y la
entrada de las botellas de hemocultivo en
un sistema automatizado no deba ser más
largo que 2 o 4 horas

15. UROCULTIVO
 El urocultivo es el cultivo de orina se usa
para diagnosticar infección sintomática del
tracto urinario o infección asintomática
(bacteriuria asintomática)
 La piuria, junto con la bacteriuria, es un
dato muy importante para el diagnóstico
de infección del tracto urinario, ya que
prácticamente está presente en todas las
infecciones urinarias. Una excepción es la
bacteriuria asintomática en la que la piuria
puede estar ausente.

16. AGENTES ETIOLÓGICOS A INVESTIGAR
 - Escherichia coli
 - Klebsiella spp.
 - Enterobacter spp.
 - Serratia spp.
 - Enterococus spp.
 - Proteus spp.
 - Pseudomonas spp.
 - Acinetobacter spp.
 - Candida spp.
 - Staphylococus spp.

17. RECOGIDA DE MUESTRAS
 La correcta recogida y conservación de la orina para
urocultivos es fundamental, para que puedan
obtenerse resultados fiables.
 Los puntos clave son:
 - Mujeres: asepsia y antisepsia de región vulvar y
colocado correcto de la bolsa colectora o en niñas
mas mayores obtención de la orina después de
separar los labios vaginales de manera que el chorro
de orina no toque genitales externos.
 - Hombres: asepsia y antisepsia de región de pene y
colocado correcto de la bolsa colectora o en niños
mas mayores retracción del prepucio de manera que
el chorro de orina salga directamente.

18. Lectura de cultivo en UFC/ml
- Menos de 1.000 ó 10.000 UFC, se informará: “Menos de 1.000 ó 10.000
UFC/ml
De 10.000 a 100.000 UFC.
Un patógeno sin células epiteliales: informar microorganismo, número de
colonias, antibiograma y valorar clínicamente
Dos patógenos: informar microorganismos, número de colonias y
solicitar nueva muestra.
Más de dos patógenos: informar “Cultivo mixto, probable
contaminación”.
> 100.000 ó más UFC:
Uno o dos patógenos: informar identificación más antibiograma
Más de dos especies: informar “cultivo mixto, probable contaminación”.

19. COPROCULTIVO
 La muestra de elección para cultivo de agentes
bacterianos productores de gastroenteritis es una
porción de heces diarreicas.
 A partir del cuarto día de hospitalización no debe
realizarse coprocultivo para determinación de
gérmenes enteropatógenos habituales salvo en
situaciones especiales.
 Las muestras de heces se procesarán para cultivo
dentro de las 4-6 horas siguientes a su emisión.
 adecuado manteniéndose en refrigerador hasta su
siembra.

20.  PUEDEN USARSE :
 Placa de agar sangre, en caso de
disbacteriosis se informará el tipo de
microorganismo. No es
recomendable la realización del
antibiograma y sugerir al clínico el
uso excesivo de antibióticos.
El coprocultivo se realiza mediante la preparación de una emulsión de 1-2 g.
de heces en solución salina fisiológica, a partir de la cual se inoculan los
medios de cultivo.

21. Medios entéricos
 DIFERENCIALES: Usar uno de estos medios para
diferenciar los bacilos entéricos fermentadores de la
lactosa (L+) de los no fermentadores (L-), al tiempo
que se inhibe el crecimiento de flora Gram positiva
aerobia.
a) Mac Conkey.
b) Eosina Azul de Metileno
 MODERADAMENTE SELECTIVOS: Usar al menos
uno de estos medios para inhibir el crecimiento de la
mayoría de las Enterobacterias mientras se permite
el crecimiento de Salmonella spp y Shigella spp.
a) Hektoen.
b) XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato).
 Medios cromogénicos.

22.  Detección de adenovirus y rotavirus. En menores de dos
años con heces líquidas se procederá a la detección de
rotavirus y adenovirus entéricos con métodos adecuados,
especialmente recomendable en los meses invernales.
 CULTIVOS ESPECIALES. Vibrio spp.
a) Medio de enriquecimiento: Agua de Peptona alcalina a
partir de 6 horas, subcultivar en TCBS.
b) Medio selectivo: Salmonella L+. a) Verde brillante. b)
Sulfato de Bismuto

23.  Escherichia coli. Los
procedimientos de aislamiento en
heces de E. Coli, habitualmente
quedan fuera de la práctica
rutinaria de la mayoría de los
laboratorios. Constituye un
excepción la E. Coli O157H7 por
las posibles complicaciones
(síndrome hemolítico urémico),
por lo que para esta cepa, por su
gravedad, podría estar indicada la
utilización de medios especiales
para su detección o la
investigación de toxinas
fundamentalmente en heces
hemorrágicas.

24. RESULTADOS
 CULTIVOS POSITIVOS: Se informará del
aislamiento del agente patógeno y de su
sensibilidad.
 DISBACTERIOSIS: Se informará tipo de
microorganismo predominante.