El documento describe dos métodos cinéticos para la determinación de la ampicilina (AMP) mediante espectrofotometría. El primer método mide la absorbancia después de la oxidación de AMP por permanganato de potasio a los 25 minutos. El segundo método mide la absorbancia a los 60 minutos luego de la adición de 1,4-dicloronitrobenceno en presencia de borato. Ambos métodos se aplicaron con éxito para determinar AMP en polvo y en cápsulas farmacéuticas de forma sensible.

2. Para poder medir la masa de cada sustancia se
ha empleado la unidad de EL MOL.

3. Corresponde a un número determinado de
partículas (átomos, moléculas o iones), que
puede ser medido a través de su masa. El mol
fue determinado como el número de moléculas
H2 existentes en dos gramos de hidrógeno, lo
que da el peculiar número de 6,02 × 1023 al que
se conoce como número de Avogadro.

4. Cada elemento químico posee una masa
molar establecida, que corresponde a la
cantidad de gramos que contienen 6,02 x 1023
partículas de dicho elemento.
1
1,00019
Masa atómica
Número atómico

5. Concepto de MOL aplicado a
elementos
 El número de átomos en 1 mol de cualquier
elemento se llama el número de Avogadro y es igual
a 6.022x1023.
 1 mol de cualquier elemento es una muestra del
elemento con una masa en gramos igual a la masa
atómica de ese elemento.
Ejemplos
 1 mol Na = 22.99 g Na = 6.022x1023 átomos Na
 1 mol Ca = 40.08 g Ca = 6.022x1023 átomos Ca
 1 mol S = 32.07 g S = 6.022x1023 átomos S

6. Concepto de MOL aplicado a compuestos
 El número de moléculas en 1 mol de cualquier compuesto se
llama el número de Avogadro y es igual a 6.022x1023.
 1 mol de cualquier compuesto es una muestra del compuesto
con una masa en gramos igual a la masa molecular de ese
compuesto.
Ejemplos
1 mol H2O
Elemento Número de
moles
Masa atómica Masa total del
elemento.
Oxígeno 1 mol X 16 g/mol 16 g
Hidrógeno 2 mol X 1 g/mol 2 g
Masa Molar del compuesto = 18 g
Número de moléculas = 6,02 x 10 23

7.  1 mol CO2
Elemento Número de
moles
Masa atómica Masa total del
elemento.
Carbono 1 mol X 12 g/mol 12 g
Oxígeno 2 mol X 16 g/mol 32 g
Masa Molar del compuesto = 44 g
Número de moléculas = 6,02 x 10 23

8. 1 mol NH3 =
Elemento Número de
moles
Masa atómica Masa total del
elemento.
Nitrógeno 1 mol X 14g/mol 14 g
Hidrógeno 3 mol X 1 g/mol 3 g
Masa Molar del compuesto = 17 g
Número de moléculas = 6,02 x 10 23

9.  El MOL y Cálculos Químicos

El concepto de mol se puede utilizar para obtener
factores de conversión útiles en cálculos químicos que
envuelvan elementos y compuestos.
Un mol calculado en seis
elementos: cobre (63 g) ,
aluminio (27 g), plomo
(207 g), azufre (32 g) ,
cromo (52 g) y magnesio
(24 g)
Un mol calculado en cuatro
compuestos diferentes: agua
(18 g), NaCl (58 g), aspirina
(180 g) y Cluroro de niquel
(237 g)

10. AmpicilinaAMP, (6 R)
- 6- (a-fenil- D-
glicilamino) ácido
penicilánico
penicilina
semisintética
bencilpenicilina o
penicilina-G
proceso biosintético
Penicillium
notatum y
Penicillium
chrysogenum

11. En el presente trabajo se propone dos
métodos cinéticos para la determinación de la
ampicilina
 Midiendo la absorbancia a 610 nm después
de la oxidación de KMnO
 410 nm con la adicción CDNB en presencia
de borato baffer
Los métodos se aplicaron con éxito para la
determinación de AMP en polvo en granel y
en capsula

12. AMP
NATURALEZA
ACIDA
INHIBE LA
SISTESIS DE
PROTEINAS
PROCEDIMIENTOS
ESPECTROFOTOM
ETRIA
POLAROGRAFICO
INYECCION DE
FLUJO
METODOS DE
HPLC

13. Aparatos Materiales
• Espectrofotómet
ro Shimadzu UV-
visible 1601
• medidor de pH
Elico-Li 120
• Agitador de agua
NSW 133

14. transfer
ir
Inicio
Agregar
Mezclar
Diluir
Reposar
Medir
Graficar
Tomar
Alícuotas 5-30 µg /mL AMP
matraces aforados 50 mL
E1
Con agua
25 min
E2
Absorbancia vs concentración AMP µg /mL -25 min
Fi
n

15. transfer
ir
Inicio
Añadir
Mezclar
Diluir
Reposa
r
Medir
Graficar
Tomar
Alícuotas 50-260µg /mL
AMP
matraces aforados 10 mL
E1
Con agua destilada
60 min
E2
Absorbancia vs concentración AMP µg /mL -60 min
Fi
n

16. E1: 50 mg de AMP en un matraz aforado
con 75 mL de agua destilada.
Mezclar
Inicio
Colocar
Mezclar
Filtrar
Diluir
Analizar
pesar
Contenido de 20 cápsulas AMP
E1
25 mL de filtrado a 100 mL
Procedimientos generales
Fi
n
15-20 min

18. La reacción entre AMP y
KMnO4 en solución
alcalina produce un color
verde como resultado de la
especie manganato.
La intensidad del color
produce aumentos
alcanzando su máximo
después 25 min.
Método de base cinética para la
determinación de AMP a granel
y en preparaciones
farmacéuticas.
La reacción presenta una
sensibilidad analítica alta.
El color permanece
estable durante al
menos 1 h.

20. La absorbancia se estudió en el
rango (1x10-4 a 1x10-3)M de
permanganato de potasio y se
encontró que 7.5x10-4M KMnO4
es la concentración óptima para la
absorbancia de AMP.

21. Se determinó que la absorbancia
máxima del color verde se alcanzó con
1,8 mL del reactivo y permaneció
constante hasta los 2,0 mL.
2 mL de reactivo se utilizó a lo largo de
las investigaciones experimentales.

22. La velocidad de reacción y la
absorbancia aumentan al aumentar la
concentración de KMnO4 en la
formación de (MnO4)2-.
La absorbancia óptima se obtuvo con
0,9 mL de NaOH 0.5M.
Se utilizó 1 mL de NaOH 0.5M durante
todo el ensayo.

23. La reacción de AMP con
CDNB transcurre en medio
alcalino ya temperatura
ambiente. La absorbancia
permanece estable
durante al menos una hora
y media.
Se encontró que 3.5x10-3mol/L CDNB
es la concentración óptima para la
absorbancia de AMP.

24. Influencias del pH
7.
8 El valor máximo de absorbancia se obtuvo a pH 7.8
Después la absorbancia de la reacción, comenzó a
disminuir gradualmente hasta pH 9.5
9.
5
El valormáximo de absorbancia , nos
indica la mayor sensibilidad
espectofotométrica la cual será el valor
a tomar para el análisis de AMP
ópti
mo

25. Gráficos de Calibración
Método A Método B
Amoxicilina pura

26. Estudio Cinético de las
Reacciones
A
B
C
D
E
Método A
KmNO4
A
B
C
D
E
F
F
Concentración de AMP

27. Estudio Cinético de las
Reacciones
A
B
C
D
E
Método A
KmNO4
A
B
C
D
E
F
F
Concentración de AMP

28. Evaluación de los métodos
cinéticos
Método de la
concentración fija Método del tiempo fijo

29.  Valor preseleccionado de
absorbancia
 Tiempo en segundos.
Recta de regresión

30.  Tiempo fijo
preseleccionado
con precisión
 Pendiente aumenta
con el tiempo
 Valores mas
aceptables del tiempo
fijo se aceptaron la
recta de regresión

31.  Reacción
Método A
Método B