Este documento presenta los resultados de un estudio que examinó la expresión del gen MyD88 en el folículo dental y su papel en la osteoclastogénesis y erupción dental. Los hallazgos principales incluyen: 1) MyD88 se expresa en el folículo dental, alcanzando su punto máximo a los 3 días; 2) La IL-1alfa aumenta la expresión de MyD88 en las células del folículo dental; 3) La supresión de MyD88 reduce la expresión de NFKB1, MCP-1 y RANKL inducida por
Expresión in vitro de las interleucinas 2 y 10 de linfocitos de alpacas antíg...Raquel Watanabe
El objetivo del presente estudio fue determinar, mediante la técnica de RT-PCR Tiempo
Real y cuantificación relativa según el método 2-Ct, los niveles relativos de expresión
in vitro de ARN mensajero de IL-2 e IL-10 en leucocitos circulantes de alpacas en
presencia de antígenos clostridiales, empleándose como control endógeno a GAPDH. Se
colectó sangre entera de 10 alpacas adultas. Las muestras fueron centrifugadas para
obtener la fracción leucocitaria en gradiente de Ficoll, colectándose la capa flogística. Se
hizo un pool de leucocitos que fueron purificados con cloruro de amonio. Se centrifugó
y la concentración se ajustó a 500 000 células vivas/ml de medio mínimo esencial (MEM).
Fueron cultivados en placas para cultivo celular de 24 pocillos y enfrentados a suspensiones
de extracto clostridial a las concentraciones de 400, 16, 0.8 y 0.2 μg/ml por 1, 12 y
24 h. Posteriormente, se realizó la RT-qPCR. La cinética de la expresión de IL-2 mostró una
tendencia no significativa inversamente proporcional a la dosis de antígeno clostridial en
los tres tiempos de incubación, a diferencia de IL-10 cuya expresión fue variable, alcanzando
el máximo a las 12 h de incubación (p<0.05) y mostrando un patrón similar al de IL-
2 en la dosis de 16 μg/ml de antígeno clostridial. La expresión de IL-10 superó hasta en 40
veces lo expresado por el calibrador respecto a IL-2, evidenciándose una marcada respuesta
hacia la polarización del subtipo Th2.
Análisis de secuencias de aminoácidos para determinar relaciones evolutivasHogar
Laboratorio de práctica de habilidades científicas. Los estudiantes deberán comparar secuencias de aminoácidos de 2 proteínas presentes en vertebrados, analizarlas, determinar el número de diferencias, ordenarlas y determinar relaciones evolutivas dentre los vertebrados estudiados.
El ADN es una macromolécula que se encuentra en las células de todos los organismos vivos, Contiene toda la información necesaria para que funcionen y se desarrollen correctamente. Esta información está contenida en los genes: secuencias de moléculas que permite la producción de proteínas que cumplen una función específica en la célula. Un transgénico es un organismo al que se ha insertado en su ADN un gen perteneciente a un individuo de otra especie, lo que puede generar una modificación genética de los rasgos existentes o la aparición de una nueva característica.
Expresión in vitro de las interleucinas 2 y 10 de linfocitos de alpacas antíg...Raquel Watanabe
El objetivo del presente estudio fue determinar, mediante la técnica de RT-PCR Tiempo
Real y cuantificación relativa según el método 2-Ct, los niveles relativos de expresión
in vitro de ARN mensajero de IL-2 e IL-10 en leucocitos circulantes de alpacas en
presencia de antígenos clostridiales, empleándose como control endógeno a GAPDH. Se
colectó sangre entera de 10 alpacas adultas. Las muestras fueron centrifugadas para
obtener la fracción leucocitaria en gradiente de Ficoll, colectándose la capa flogística. Se
hizo un pool de leucocitos que fueron purificados con cloruro de amonio. Se centrifugó
y la concentración se ajustó a 500 000 células vivas/ml de medio mínimo esencial (MEM).
Fueron cultivados en placas para cultivo celular de 24 pocillos y enfrentados a suspensiones
de extracto clostridial a las concentraciones de 400, 16, 0.8 y 0.2 μg/ml por 1, 12 y
24 h. Posteriormente, se realizó la RT-qPCR. La cinética de la expresión de IL-2 mostró una
tendencia no significativa inversamente proporcional a la dosis de antígeno clostridial en
los tres tiempos de incubación, a diferencia de IL-10 cuya expresión fue variable, alcanzando
el máximo a las 12 h de incubación (p<0.05) y mostrando un patrón similar al de IL-
2 en la dosis de 16 μg/ml de antígeno clostridial. La expresión de IL-10 superó hasta en 40
veces lo expresado por el calibrador respecto a IL-2, evidenciándose una marcada respuesta
hacia la polarización del subtipo Th2.
Análisis de secuencias de aminoácidos para determinar relaciones evolutivasHogar
Laboratorio de práctica de habilidades científicas. Los estudiantes deberán comparar secuencias de aminoácidos de 2 proteínas presentes en vertebrados, analizarlas, determinar el número de diferencias, ordenarlas y determinar relaciones evolutivas dentre los vertebrados estudiados.
El ADN es una macromolécula que se encuentra en las células de todos los organismos vivos, Contiene toda la información necesaria para que funcionen y se desarrollen correctamente. Esta información está contenida en los genes: secuencias de moléculas que permite la producción de proteínas que cumplen una función específica en la célula. Un transgénico es un organismo al que se ha insertado en su ADN un gen perteneciente a un individuo de otra especie, lo que puede generar una modificación genética de los rasgos existentes o la aparición de una nueva característica.
¿Qué es más importante, la carga genética con la que se nace o la nutrición?
(primera parte), INFO,JULIO1947@GMAIL.COM
El Suero Intra Metabólico, auxiliar en enfermedades patológicas...
Por Ana Cecilia Becerril*
El pescado contiene lisina y cloruro de magnesioDurante mucho tiempo se ha venido sospechando que determinadas patologías tenían su origen en procesos relacionados con el sistema inmunitario. Sin embargo, hasta tiempos muy recientes no ha sido posible definir con exactitud ciertos mecanismos patogénicos, si bien esa definición, en la mayoría de los casos no implicó contemporáneamente el diseño de una terapia eficaz para los mismos.
El llegar a la conclusión científica que el asmático, el artrítico, el alérgico y determinada clase de cirróticos, por poner algunos ejemplos significativos, todos ellos eran víctimas de un proceso de desbordamiento de su capacidad inmunitaria, sólo significó llegar al umbral del problema, observarlo y tener que confesar la impotencia para abordarlo.
Sólo ha sido posible aliviar esas patologías mediante maniobras terapéuticas sintomáticas, dejando el problema de fondo sin resolver. Un ejemplo emblemático de todo ello es sin duda el Síndrome de Inmuno Deficiencia Adquirida (SIDA), patología moderna con gran eco social y científico, el cual ha permitido estudiar en profundidad los mecanismos del sistema inmunológico humano.
Pero como tantas veces ha sucedido en medicina, lo que tiene apariencia de modernidad y novedad, no es más que nueva forma de acercamiento y definición de problemas muy antiguos, cuando no arcaicos.
Los grandes médicos de la antigüedad vislumbraron, sin los grandes medios, diagnósticos de los que hoy disponemos, que muchas patologías degenerativas eran resultantes de un proceso autoinmune. Esto ha llevado a muchos especialistas a volver sus ojos hacia terapias tradicionales, en ocasiones no sólo alternativas a la ciencia oficial sino subversivas de los postulados científicos, buscando en esas fuentes soluciones a problemas de gran envergadura en los órdenes humano, económico y social; ese tipo de patologías son insidiosas para el individuo, cuestan fortunas sus tratamientos y significan una carga social importante. Sin embargo, la experiencia ha demostrado que esas terapias, no han mejorado la situación de los pacientes y no constituyen una verdadera alternativa al arsenal terapéutico de la moderna farmacopea,
Expresión in vitro de las interleucinas 2 y 10 de linfocitos de alpacas en pr...Raquel Watanabe
El objetivo del presente estudio fue determinar, mediante la técnica de RT-PCR Tiempo
Real y cuantificación relativa según el método 2-Ct, los niveles relativos de expresión
in vitro de ARN mensajero de IL-2 e IL-10 en leucocitos circulantes de alpacas en
presencia de antígenos clostridiales, empleándose como control endógeno a GAPDH. Se
colectó sangre entera de 10 alpacas adultas. Las muestras fueron centrifugadas para
obtener la fracción leucocitaria en gradiente de Ficoll, colectándose la capa flogística. Se
hizo un pool de leucocitos que fueron purificados con cloruro de amonio. Se centrifugó
y la concentración se ajustó a 500 000 células vivas/ml de medio mínimo esencial (MEM).
Fueron cultivados en placas para cultivo celular de 24 pocillos y enfrentados a suspensiones
de extracto clostridial a las concentraciones de 400, 16, 0.8 y 0.2 μg/ml por 1, 12 y
24 h. Posteriormente, se realizó la RT-qPCR. La cinética de la expresión de IL-2 mostró una
tendencia no significativa inversamente proporcional a la dosis de antígeno clostridial en
los tres tiempos de incubación, a diferencia de IL-10 cuya expresión fue variable, alcanzando
el máximo a las 12 h de incubación (p<0.05) y mostrando un patrón similar al de IL-
2 en la dosis de 16 μg/ml de antígeno clostridial. La expresión de IL-10 superó hasta en 40
veces lo expresado por el calibrador respecto a IL-2, evidenciándose una marcada respuesta
hacia la polarización del subtipo Th2.
Actualización de los avances científicos en oftalmología relacionados con las enfermedades de la retina.
Charla impartida por la Dra. Inés Contreras a los afiliados de la Fundación Retina Madrid en Clínica Rementería
Instrucciones del procedimiento para la oferta y la gestión conjunta del proceso de admisión a los centros públicos de primer ciclo de educación infantil de Pamplona para el curso 2024-2025.
3. IN VITRO Las células del 5º pasaje PTHrP humano CSF-1 humano tiempo-dependientes del CSF-1 5min 15min 30min 1h 3h 12h 24h 48h
4.
5. Aislamiento de RNA y transcripción reversa/ cadena- reacción de la polimerasa (RT- PCR)
6. RESULTADOS Caída: 3 días en ratas 5 días en ratones folículo dental de las ratas y ratones El gen del OPG se inhibe cuando las células son incubadas en PTHrP (1ng PTHrP) La inhibición en el tiempo se vio después de 30 min de incubación en PTHrP La incubación de las células foliculares con CSF-1 inhibe la expresión del gen OPG (1ng CSF-1) CSF-1 inhibe la expresión del OPG después de 12 h de incubación. MCP-1 e IL-1 α , no inhiben
7. DISCUSION inhibición de la expresión del gen del OPG 3 días en ratas 5 días en ratones máximo numero de osteoclastos alrededor del hueso alveolar del 1er molar mandibular Simonet et al 1997, Yasuda et al. 1998 – 1999: OPG inhibe la formación y activación del osteoclasto
8.
9.
10.
11. El propósito de este estudio fue determinar la expresión de MyD88 in vivo, así como también su posible papel en la osteoclastogenesis y la erupción dental.
12.
13. 2.- Aislamiento del ARN. Usando Tri-Reagent ( Molecular Research center, Cincinnati, OH, USA) El RNA fue tratado con Dnasa I a 37ºC por 1h para remover la contaminacion con DNA posible. El RNA total fue cuantificado a una absorbancia de 260nm usando un espectrofotometro y la pureza del RNA fue confirmada con un radio A260/A280 de 2.0 o mas alto
14. 3.- Microseleccion del DNA El RNA del folículo dental de ratas de 1-11 días fue etiquetado con biotina 16-UTP para generar RNA complementario, usando el Kit TrueLabeling-AMP 2.0. El cRNA fue hibridado a una quimioquina de rata y la Microseleccion del oligo DNA receptor que contiene 113 genes en una hibridación a 60ºC por 18h, seguido de 2 lavados a la misma temperatura. Después de la Hibridación el bloqueo del buffer de 40m fue incubada con estreptavidina conjugada con fosfatasa alcalina por 10m y lavada 4 veces por 5m. La selección fue visualizada con incubación de sustrato quimio luminiscente CDP-Star a temperatura ambiente por 5m. La imagen fue adquirida a los 20m usando FluoChem 8800 Los datos se analizaron con software
15. 4.- Transcripción reversa en tiempo real-Reaccion en cadena de polimerasa Para la transcripción: Usaron 2miligramos de RNA total usando la transcriptasa inversa. Fue presentada a 37ºC por 1h seguido de una incubación de 10m a 70ºC para activar la Transcriptasa Inversa Para la Reacción en cadena: Fue usada para analizar la expresión del MyD88, NF-Kb-1, MCP-1, RANKL en las células DF.
17. 6.- Imnuno Tinción Se usaron las mandíbulas de las ratas en el 5to día postnatal, fijadas al 10% de formalina buffered neutral Descalcificadas, deshidratadas, hincadas en parafina y seccionadas a 5um de grosor.
21. 9.- Análisis estadístico Microseleccion de ADN, ensayos de Quimiotaxis y osteoclastogenesis in vitro Programa SAS El análisis de Varianza ANOVA Expresión del gen cronológicamente Prue ba LSD Los medios fueron separados Nivel P menor o igual a 0,05
![[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],Factor de diferenciación de las osteoprotegerinas y osteoclastos G.E. Wise, S.J. Lumpkin, H. Huang y Q. Zhang Dra. María Clara Rangel. Dr. Juan Carlos Munevar. Biología del Movimiento.](https://image.slidesharecdn.com/erupciondental-101012173547-phpapp01/85/Erupcion-dental-1-320.jpg)
