El documento describe un trabajo práctico sobre el uso y funcionamiento de espectrofotómetros, enfocándose en modelos como Lightwave II, Genesys 10S UV-Vis y Shimadzu UV-Mini 1240. Se presentan objetivos generales y específicos, así como procedimientos detallados para la operación de cada tipo de espectrofotómetro. Además, se destaca la importancia de la espectrofotometría en el análisis cuantitativo de soluciones y la identificación de compuestos químicos.

1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE ASUNCIÓN
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
TRABAJO PRÁCTICO ESPECIAL
Tema: Espectrofotometría – Lightwave II – Genesys 10S UV-VIS –
UV mini 1240
Integrantes:
 Cristian Alejandro Arrúa Galeano
 María Laura Coronel Figueredo
 Rocío Vanessa Enciso Flecha
 Claudia Rosalit Franco Barrios
 Marcia Belén Gamarra Dávalos
 Katerine Alejandra González Jiménez
 Jennifer Dahiana Quiñónez Domínguez
 Cristian David Rojas Florenciano
2017

2. OBJETIVO GENERAL
 Demostrar la forma de uso de los espectrofotómetros Lightwave II,
Genesys 10S UV - VIS, Shimadzu UV - mini 1240.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
 Determinar los cuidados para el manejo de los espectrofotómetros.
 Reconocer los elementos y partes de los espectrofotómetros.
 Interpretar los resultados obtenidos a partir de los espectrofotómetros.
 Colaborar en la demostración del funcionamiento y uso del
espectrofotómetro.

3. INTRODUCCIÓN
La espectrofotometría es un método de análisis muy utilizado, que se basa
en la relación que existe entre la absorción de luz por parte de un compuesto y
su concentración. Esta relación es medida por el espectrofotómetro.
El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación
absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida
de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
El funcionamiento del espectrofotómetro se basa en los componentes
básicos del equipo: la fuente de luz proporciona un haz policromático que es
colimado al atravesar la ranura de entrada. Este haz llega a un sistema de
monocromación, con cuyo selector de longitud de onda, se aísla un haz
monocromático de la longitud de onda deseada. Luego, el rayo de luz
monocromático incide perpendicularmente sobre la pared de la cubeta que
contiene la muestra. Al salir de la muestra, el haz de luz transmitido impacta
sobre el detector, donde la intensidad luminosa se convierte en intensidad
eléctrica mediante un proceso electrónico. Por último, dicha señal setransforma
en una lectura de transmitancia porcentual o absorbancia que aparece en la
pantalla del equipo.
Los espectrofotómetros utilizados son: Genesys 10S UV – VIS, Shimadzu
UV – mini 1240 UV – VIS, Lightwave II.

4. ESPECTROFOTOMETRÍA
El espectrofotómetro se usa en el laboratorio con el fin de
determinar la concentración de una sustancia en una solución, permitiendo así
la realización de análisis cuantitativos. Utiliza las propiedades de la luz y su
interacción con otras sustancias, para determinar la naturaleza de las mismas.
En general, la luz de una lámpara de características especiales es guiada a
través de un dispositivo que selecciona y separa luz de una determinada
longitud de onda y la hace pasar por una muestra. La intensidad de la luz que
sale de la muestra es captada y comparada con la intensidad de la luz que
incidió en la muestra y a partir de esto se calcula la transmitancia de la muestra,
que depende de factores como la concentración de la sustancia.
¿Qué importancia tiene la espectrofotometría como método instrumental?
Esta propiedad de la interacción de la luz con una gran cantidad de
especies químicas nos permitirá identificar y cuantificar analitos. Se puede
concluir Entonces que los espectros de cada elemento son característicos
y es lo que permite su identificación, si se tiene una muestra de espectros que
brillaban intensamente, se pueden identificar los elementos presentes en
la muestra.

5. USO DEL ESPECTROFOTÓMETRO MARCA SHIMADZU
MODELO UV-MINI 1240
PROCEDIMIENTO
1. Conexión del cable de alimentación
1.1 Verificar que el interruptor de encendido de la unidad esté
APAGADO (para que el 0 esté presionado).
1.2 Verificar que la tensión de alimentación se indica en la parte posterior
de la unidad.
1.3 Insertar el cable de alimentación incluido en el conector de
alimentación en el lado izquierdo de la unidad.
1.4 Insertar el cable de alimentación en la toma de corriente.
1.5 Encender el interruptor de alimentación de la unidad.
2. Encendido
2.1 Cuando se enciende, el espectrofotómetro se comprueba y se
inicializa de acuerdo con los elementos que se muestran en la
pantalla. El tiempo requerido para esta inicialización es de
aproximadamente 6 minutos si todos los elementos se completaron
correctamente. Cada elemento es inicializado en orden. Luego,
cuando la inicialización para ese elemento se complete
correctamente, aparecerá "OK". Sin embargo, si se detecta alguna
anomalía, aparecerá "NG".
3. Selección de modo
3.1 En Selección de modo, elegir el modo Fotométrica, se mostrará la
pantalla de configuración del parámetro de medición.
3.2 Establecer longitud de onda: Usar la tecla [GOTO WL] para
configurar la longitud de onda.
3.3 Puesta a cero automática [AUTO ZERO]: Cuando sea necesaria la
corrección en blanco, configure la muestra en blanco y presione la
tecla [AUTO ZERO] antes medición. El valor fotométrico en este
momento se configurará en O ABS (100%).

6. 3.4 [T%/ABS]: Puede cambiar entre el modo % de transmitancia (T%) y
el modo de absorbancia (ABS) cada vez que presiona la tecla [T% /
ABS].
3.5 Control de compartimiento de muestra [SmplCmpt]: Realiza la
configuración del compartimento de muestra. Los elementos de
configuración incluyen los tipos del compartimento de la muestra, el
número de celdas y la condición de funcionamiento del sipper.
3.6 Guardar parámetros [SavParam]: Puede guardar los parámetros de
medición actuales en la memoria interna o en un paquete de datos
(opcional).

7. USO DEL ESPECTROFOTÓMETRO MARCA GENESYS
MODELO 10S UV – VIS
PROCEDIMIENTO
1. Para configurar la longitud de onda
1.1 Presionar “Setnm” o cualquier tecla numérica para configurar la
longitud de onda.
1.2 Introducir la longitud de onda para tomar las medidas y presionar
“Setnm” de nuevo
2. Para configurar el blanco
2.1 Introducir la cubeta con el agua destilada en una de las celdas libres
(si están instaladas las 6 celdas, colocar el blanco en la posición “B”).
2.2 Para introducir los valores de absorbancia y transmitancia para el
blanco, presionar una tecla numérica e introducir el valor deseado
en el campo de entrada.
2.3 Presionar “Measure Blank”
3. Para tomar medidas automáticamente (usando Auto 6 o Auto 3)
3.1 Presionar “Run Sample”
3.2 Colocar el blanco y la(s) muestra(s)
3.3 Presionar “Measure Sample”
4. Para tomar medidas manualmente (usando Manual 6 o Celda simple)
4.1 Presionar “Run Sample”
4.2 Cuando se solicite colocar las muestras y el blanco en las celdas (si
la celda de 6 posiciones está instalada, colocar el blanco en la
posición “B”, y las muestras en las posiciones 1 al 5)
4.3 Presionar “Measure Blank”
4.4 Presionar “Measure Sample” (Cuando la(s) medida(s) de la(s)
muestra(s) aparezca, si la celda de 6 posiciones está instalada,
presionar el botón de la posición de la celda para reposicionar la
celda y medir el resto de las muestras manualmente).

8. USO DEL ESPECTROFOTÓMETRO LIGHTWAVE II
Procedimiento
1. Encender el instrumento a través del teclado después de haberlo
enchufado. El instrumento realizará una serie de verificaciones de
autodiagnóstico.
2. Longitud de onda única - Abs y% T: Esto hace mediciones simples de
absorbancia (A) y % de transmitancia (% T) en las muestras, midiendo la
cantidad de luz que ha pasado a través de una muestra con respecto a una
referencia (puede ser aire).
 Paso 1: Establecer la longitud de onda usando números de teclado o
flechas izquierda y derecha. Presione la tecla de la flecha hacia abajo.
 Paso 2: Seleccionar el modo, Absorbancia o %T, usando las flechas
izquierda y derecha.
 Paso 3: Para ingresar a la pantalla de resultados con los parámetros
seleccionados, presionar OK o Cancele las selecciones y regrese a
Carpeta de aplicaciones presionando Cancelar.
 Paso 4: Insertar la referencia. Presionar la tecla 0A/100%. Esto se usará
para todas las muestras posteriores hasta que se modifiquen.
 Paso 5: Insertar la muestra y presiona OK. Repetir el paso 5 para todas
las muestras.
 Resultados: El resultado en la longitud de onda seleccionada se muestra
en la pantalla. Usar las flechas izquierda y derecha para mover el cursor
ymostrar el valor en la posición del cursor (+/- 15nm desde la longitud de
onda establecida). Presionar Cancelar para regresar a la carpeta de
aplicaciones.

9. BIBLIOGRAFÍA
 http://virtual.ffyb.uba.ar/mod/book/view.php?id=67407&chapterid=1059
 http://www.biochrom.co.uk/download/86
 https://archive-resources.coleparmer.com/Manual_pdfs/83400-00.pdf

10. ANEXOS
Espectrofotómetro marca Shimadzu
modelo UV-mini 1240
Compartimento de muestra -
Espectrofotómetro marca Shimadzu
modelo UV-mini 1240
Espectrofotómetro marca Genesys
modelo 10S UV-VIS
Compartimento de muestra -
Espectrofotómetro marca Genesys
modelo 10S UV-VIS
Espectrofotómetro Lightwave
II
Esquema de un espectrofotómetro

11. Distribución de Tareas
Elaboración de vídeo
 María Laura Coronel Figueredo
 Rocío Vanessa Enciso Flecha
 Jennifer Dahiana Quiñónez Domínguez
 Cristian David Rojas Florenciano
Edición de vídeo
 Cristian Alejandro Arrúa Galeano
 Katerine Alejandra González Jiménez
Elaboración de informe
 Claudia Rosalit Franco Barrios
 Marcia Belén Gamarra Dávalos
Link del vídeo tutorial
 https://www.youtube.com/watch?v=6U3KYIm0l78