El taller consistió en realizar una prueba de paternidad utilizando ADN para determinar cuál de dos madres era la biológica de un hijo. Se extrajo ADN de las muestras, se sometió a electroforesis en gel y se tiñó con bromuro para ver las secuencias de ADN bajo luz ultravioleta. Los resultados mostraron que la madre número 2 era la biológica. Adicionalmente, se aisló ADN de una bacteria mediante la ruptura de su pared y membrana celular.

1. Taller de
biotecnología

2. COMPROBACIÓN DE MATERNIDAD
Hemos realizado un taller sobre el ADN.
La primera parte consistía en hacer unas pruebas con el ADN de 3
personas (2 madres y un hijo) para averiguar cual de ellas era la
madre biológica del hijo.. Sobre la mesa había unos botes que
contenían el ADN de los sujetos.
o Bote M1: ADN Madre 1.
o Bote M2: ADN Madre 2.
o Bote H: ADN Hijo.
o Bote ADN +.
o Bote ADN – .
o Gel .
o Pinzas.
o 5 trozos de papel.
o Papel para limpiar las
pinzas.
MATERIAL

3.  Primero abrimos la bolsa que contenía un gel con forma
cuadrada bañado en un liquido limpiador.
 Colocamos el gel sobre un plástico que tenia unos
pocillos en los que mas tarde introduciríamos los
pequeños trozos de papel impregnados en ADN de cada
sujeto.
 Después de eso comenzamos por el bote M1. Para ello
cogimos con las pinzas uno de los papeles y lo
introdujimos dentro del bote durante 8 segundos hasta
que se impregnó de liquido azul (ADN) y cuando estuvo
lo suficiente oscuro lo introdujimos en el segundo pocillo.
Repetimos la misma acción con los demás botes
(M2,H,ADN+,ADN- ) en sus respectivos pocillos. Entre
medias de cada muestra había que limpiar las pinzas con
el liquido limpiador y las secábamos.
PROCEDIMIENTO

4.  A continuación llevamos los cuadraditos de gel para
hacerles electroforesis en agar:
Se colocaron los cuadraditos
en la maquina de una
manera determinada y
mirando los pocillos al ion
negativo. Se rellenó el hueco
sobrante con un liquido
transparente.
Después se conectó a la corriente
eléctrica (100 V durante 30
minutos ).

5.  Mientras esperábamos que acabara la electroforesis en
agar realizamos la experiencia de AISLAR EL ADN
DE UNA BACTERIA.
• Tubos L1 y L2.
•Tubo E (Conteniendo la bacteria).
• Tubo de seguridad (Conteniendo el tubo A).
• Pipetas A, L1 y L2.
MATERIAL

6.  Abrimos el tubo de seguridad y sacamos el tubo A[1] y a su vez abrimos el
tubo E[2]. Con la pipeta A cogimos el líquido del tubo A, y con cuidado de
que no salpicase lo introdujimos en el bote E [3][4], y bien cerrado lo
removimos. Dándole unos suaves toques con los dedos [5] se formó una
espumilla [6] .
1 2
3
4
5 6
METODOLOGÍA

7.  Después usamos los botes L1 y L2 que contenían
reactivos : L1 servía para romper la pared celular
y después con L2 servía para romper la membrana
celular y dejar suelto el ADN de la bacteria.
 Con la pipeta L1 cogimos el liquido del tubo L1 y lo
echamos en el tubo E y se volvió a remover con los
dedos .

8.  Toda la mezcla del tubo E se metió en un barril
termostático a 37ºC durante 20 minutos para un
baño termostático.

9.  Cuando la electroforesis en agar acabó[1] se usó
bromuro para teñir el ADN y mas tarde verlo con
una luz ultravioleta.
 El bote que contenía el bromuro estaba en un
papel de plata[2] porque tiene que estar a
oscuras ya que si no pierde sus propiedades[3].
Después de introducidas en el bromuro las
muestras hay que dejarlas de15 a 20 minutos a
las oscuridad.[4]. El aparato tiene un campo
eléctrico y el ADN que introducimos en los
pocillos, corre por el gel y se ve. Al tener el ADN
carga negativa corre hacia el positivo y el positivo
hacia el negativo. [5]

10. 1
2 3
4 5

11.  Por último se colocaron todos los geles sobre un
aparato de rayos ultravioletas, para comprobar
quien era la madre, con los rayos ultravioleta
podíamos ver las secuencias de ADN de cada
individuo.
Observándolo comprobamos que !
la madre biológica era la numero
2!

12.  Pasamos de nuevo a acabar la práctica 2ª, cuando
el baño termostático había acabado abrimos el
bote E y con la pipeta L2 cogimos el liquido del
tubo L2 y lo echamos en el tubo E, para finalizar
lo agitamos con los dedos.

13.  Lo volvimos a poner en el baño termostático a
60ºC durante dos minutos para que se rompiera la
membrana y dejara libre el ADN. El alcohol,
recién sacado del congelador, se vertió con cuidado
en el bote E por las paredes y se comenzó a formar
una mucosa:
!el ADN!