Este documento describe los métodos convencionales para determinar la presencia de Escherichia coli (E. coli) y bacterias coliformes en alimentos y agua. Explica que E. coli se utiliza como un indicador de contaminación fecal reciente, aunque otros grupos como coliformes totales y coliformes fecales también se usan como indicadores. Describe los métodos de número más probable (NMP) que implican la inoculación de muestras en caldos de cultivo y la detección de fermentación de la lactosa para identificar estas bacterias. También
Este documento presenta un experimento de argentometría para estandarizar una solución de nitrato de plata mediante la titulación con cloruro de sodio usando cromato de potasio como indicador. Se describe el fundamento, materiales, procedimiento y cálculos para determinar la normalidad de la solución de nitrato de plata. El resumen concluye que la argentometría es útil para valorar cloruros y que es importante preparar soluciones volumétricas de manera precisa.
Este documento describe los métodos de Volhard y Mohr para determinar la concentración de cloruros en una muestra acuosa. El método de Volhard involucra hervir la muestra con una solución de plata y titular con tiocianato de amonio. El método de Mohr implica filtrar la muestra calentada, agregar un indicador y titular con nitrato de plata. Al aplicar estos métodos a una muestra de harina de pescado, se concluyó que contenía un 0.75% de cloruro de sodio, por deba
Este documento presenta un análisis energético de una caldera con el objetivo de determinar la energía útil y las pérdidas de energía presentes. Explica los conceptos teóricos sobre balances térmicos de calderas y describe los pasos metodológicos para calcular la energía absorbida por el agua, las pérdidas de energía como gases de escape, calentamiento de la humedad del aire, y combustión incompleta, y la eficiencia térmica de la caldera usando métodos directo e indirecto. El autor solicita tab
El documento presenta 7 problemas de gravimetría. Cada problema describe una reacción química donde se forma un precipitado que puede ser pesado para determinar la composición de la muestra original. Se calculan porcentajes de diversos elementos como hierro, cloro y sulfatos en diferentes muestras.
PRACTICA #9. DETERMINACION DE LA DUREZA TOTAL Y LA DUREZA DE CALCIOMarc Morals
Este documento presenta los procedimientos para determinar la dureza total y la dureza de calcio en muestras de agua. La dureza total, debida al calcio y magnesio, se determina mediante una titulación directa con EDTA usando eriocromo negro T como indicador. La dureza de calcio se determina de forma directa usando una alícuota de la muestra titulada previamente con la solución de EDTA y murexida como indicador. El objetivo es establecer la presencia de sales de calcio y
Este documento presenta un experimento de argentometría para estandarizar una solución de nitrato de plata mediante la titulación con cloruro de sodio usando cromato de potasio como indicador. Se describe el fundamento, materiales, procedimiento y cálculos para determinar la normalidad de la solución de nitrato de plata. El resumen concluye que la argentometría es útil para valorar cloruros y que es importante preparar soluciones volumétricas de manera precisa.
Este documento describe los métodos de Volhard y Mohr para determinar la concentración de cloruros en una muestra acuosa. El método de Volhard involucra hervir la muestra con una solución de plata y titular con tiocianato de amonio. El método de Mohr implica filtrar la muestra calentada, agregar un indicador y titular con nitrato de plata. Al aplicar estos métodos a una muestra de harina de pescado, se concluyó que contenía un 0.75% de cloruro de sodio, por deba
Este documento presenta un análisis energético de una caldera con el objetivo de determinar la energía útil y las pérdidas de energía presentes. Explica los conceptos teóricos sobre balances térmicos de calderas y describe los pasos metodológicos para calcular la energía absorbida por el agua, las pérdidas de energía como gases de escape, calentamiento de la humedad del aire, y combustión incompleta, y la eficiencia térmica de la caldera usando métodos directo e indirecto. El autor solicita tab
El documento presenta 7 problemas de gravimetría. Cada problema describe una reacción química donde se forma un precipitado que puede ser pesado para determinar la composición de la muestra original. Se calculan porcentajes de diversos elementos como hierro, cloro y sulfatos en diferentes muestras.
PRACTICA #9. DETERMINACION DE LA DUREZA TOTAL Y LA DUREZA DE CALCIOMarc Morals
Este documento presenta los procedimientos para determinar la dureza total y la dureza de calcio en muestras de agua. La dureza total, debida al calcio y magnesio, se determina mediante una titulación directa con EDTA usando eriocromo negro T como indicador. La dureza de calcio se determina de forma directa usando una alícuota de la muestra titulada previamente con la solución de EDTA y murexida como indicador. El objetivo es establecer la presencia de sales de calcio y
Este documento describe un procedimiento para analizar la presencia de bacterias coliformes totales y fecales en muestras de agua de consumo humano utilizando la técnica del Número Más Probable (NMP). El procedimiento implica una prueba presuntiva para detectar coliformes seguida de pruebas confirmatorias específicas para coliformes totales y fecales que permiten calcular el NMP de cada grupo bacteriano en la muestra de agua.
Complexometria parte ii determinación de la durezaneededme
Este documento presenta un estudio sobre la determinación de la dureza total, cálcica y magnésica de una muestra de agua de una piscina pública a través de titulaciones complejométricas utilizando EDTA. Los resultados mostraron que la muestra tenía una dureza total promedio de 35,1 ppm, una dureza cálcica promedio de 25,5 ppm y una dureza magnésica promedio de 10,583 ppm. El análisis estadístico de los datos confirmó que la muestra era considerada un agua d
Este documento describe un método para determinar el cobre en muestras líquidas de lixiviación mediante volumetría. El cobre se reduce a Cu+ por yoduro de potasio y el yodo liberado se titula con una solución de tiosulfato de sodio. El cálculo del contenido de cobre se basa en el volumen de tiosulfato utilizado en la titulación. El método también describe cómo preparar la solución de tiosulfato normalizada y las soluciones estándar de cobre necesarias para la calibración.
La práctica determinó los puntos de fusión de sustancias estándar y problema usando dos métodos. El método de Fisher-Johohns fue más preciso que el método de tubo de Thiele. Algunas sustancias estándar fueron impuras debido a variaciones grandes en sus puntos de fusión. La sustancia A se determinó como una mezcla de Naftaleno y Vainillina. La sustancia B fue identificada como ácido adípico y la C como ácido cítrico.
La determinación de la dureza total del agua mide la concentración de calcio y magnesio mediante valoración con EDTA. Se añade indicador negro de eriocromo T y la disolución de EDTA se titula hasta que cambia el color del indicador de rojo a azul. El volumen de EDTA consumido permite calcular la concentración de calcio y magnesio expresada como mg/L de CaCO3, grados franceses y grados alemanes.
Este documento describe el proceso de sedimentación floculenta. La sedimentación floculenta ocurre cuando la velocidad de sedimentación de las partículas aumenta a medida que descienden hacia el fondo del tanque debido a la aglomeración de las partículas. El documento explica que la sedimentación floculenta es un proceso complejo que no se puede modelar matemáticamente, por lo que se debe recurrir a métodos experimentales. También presenta un ejemplo numérico de cómo dimensionar un tanque de sedimentación para tratar aguas residuales basado en
Este informe de laboratorio describe los procedimientos para determinar la alcalinidad, hierro y sulfatos en muestras de agua de un río y agua potable de laboratorio. La alcalinidad se determina mediante la valoración de las muestras con ácido sulfúrico y el uso de indicadores. La presencia de hierro y sulfatos puede afectar el sabor, color y calidad del agua, por lo que es importante medirlos. Los resultados ayudarán a evaluar la calidad de las muestras de agua.
El documento describe una práctica de laboratorio en la que se determinaron los puntos de equivalencia de tres muestras (ácido clorhídrico fuerte, ácido acético débil y una mezcla de ambos) mediante titulaciones conductimétricas con hidróxido de sodio. Se midió la conductancia de cada muestra al adicionar volúmenes de NaOH y se graficaron los resultados, identificando los puntos de equivalencia. Adicionalmente, se calcularon las concentraciones de HCl y CH3COOH en las muestras
Practica 6. analisis de una columna de absorcion de co2nidia_chavez
Este documento describe un experimento para estudiar la absorción de CO2 en una columna utilizando una solución de NaOH como solvente. El objetivo es determinar la eficiencia de absorción midiendo el pH a intervalos de 1 minuto mientras se hace pasar CO2 a través de la columna. Los resultados muestran una disminución del pH a medida que aumenta la cantidad de CO2 absorbido, indicando que se absorbe efectivamente el CO2 y causa la acidificación de la solución.
La guía describe métodos de separación por extracción con solventes. Explica que la extracción con solventes usa un solvente para separar compuestos de una fase homogénea basándose en su distribución entre fases no miscibles. Describe el extractor Soxhlet y rotavapor que permiten extracciones sólido-líquido y líquido-líquido a temperaturas elevadas para recuperar el solvente. El procedimiento incluye extracciones Soxhlet de aceites de muestras vegetales y extracciones líquido-líquido de yodo entre ag
La dureza del agua está determinada por el contenido de sales de calcio y magnesio como carbonatos, bicarbonatos, cloruros y sulfatos. Existen dos tipos de dureza: temporal, determinada por carbonatos y bicarbonatos y que puede eliminarse por ebullición; y permanente, determinada por otras sales y no eliminable por ebullición. El método describe determinar la dureza total mediante titulación con EDTA de las muestras de agua, expresando los resultados como mg/L de carbonato de calcio equivalente.
Este documento describe el modelado matemático de un reactor químico batch. Explica que un reactor batch mantiene una composición uniforme en todo momento sin flujos de entrada o salida. Detalla las ecuaciones que gobiernan el sistema basadas en la conservación de la masa, energía y cantidad de movimiento, y cómo formular un modelo matemático para resolverlo y analizar los resultados. El objetivo es comprender el comportamiento del reactor para mejorar su diseño y operación de manera segura.
Guia nº3 reactores continuos en estado estacionariofabrizio arratia
1. El documento presenta diversos problemas relacionados con reactores químicos continuos, incluyendo conceptos como tiempo espacial y medio de residencia, modelos de flujo, cálculos cinéticos y de diseño de reactores.
2. Se pide determinar la composición de una alimentación para lograr un 80% de conversión en un reactor de mezcla ideal, basándose en datos experimentales de una reacción.
3. Se solicita calcular parámetros como tiempo espacial, medio de residencia, flujo volumétrico y constante de vel
Este documento presenta información sobre la difusividad másica de gases y líquidos. Explica conceptos como difusividad, difusividad de gases y líquidos, y describe equipos como la celda de Arnold que se usan para medir difusividad experimentalmente. También incluye ecuaciones y tablas de valores de difusividad para varios sistemas gaseosos y líquidos. El objetivo es determinar difusividad másica experimentalmente y compararlos con valores teóricos.
El documento describe un estudio en el que se construyeron curvas de calibración relacionando la concentración de permanganato de potasio con la absorbancia medida por espectrofotometría. Cuatro analistas realizaron las mediciones obteniendo coeficientes de correlación entre 0.976-0.9878, indicando alta linealidad del método. El estudio concluyó que el método empleado mostró linealidad y exactitud al haber coeficientes de correlación cercanos a cero.
En términos generales biotecnología se puede definir como el uso de organismos vivos o de compuestos obtenidos de organismos vivos para obtener productos de valor para el hombre.
Se han determinado cuantitativamente sulfatos en agua mediante una técnica instrumental adecuada y calibrando por el método de adiciones estándar (adición de patrones). Para ello se preparó en un conjunto de matraces A, B, C, D, E y F la serie de disoluciones siguiente:
image
Todas las disoluciones obtenidas se homogeneizan y se aforan a 50 mL.
Representar los valores de absorbancia frente al volumen de las disoluciones patrón. Comprobar que la linealidad de los datos se verifica para todo el intervalo estudiado.
Encontrar la ecuación matemática a la que se ajustan los datos obtenidos, así como los parámetros de los mínimos cuadrados.
Determinar la concentración de la muestra problema sabiendo que la concentración de la disolución patrón es de 100,0 ppm.
El documento describe un experimento para determinar la temperatura de burbuja de una mezcla ternaria de etanol, agua y ácido acético experimentalmente y analíticamente usando simuladores como ChemCad 6. También analiza cómo los modelos termodinámicos y la variación de presión afectan los diagramas de equilibrio y las condiciones óptimas de operación para separar componentes en un flash isotérmico o adiabático. Explica conceptos clave como fases, componentes, grados de libertad y equilibrio liquido-vapor
El documento describe un proceso de cristalización fraccionada para recuperar Na2S2O3 a partir de una solución acuosa. Se realiza un balance de materia del sistema considerando Na2S2O3, H2O e impurezas como componentes. Se determina que el sistema tiene 9 grados de libertad y se resuelven las 9 ecuaciones resultantes. Finalmente, se calcula que el 66,95% del Na2S2O3 de entrada se recupera en los cristales de Na2S2O3.5H2O secos.
Josefina Mena-Abraham CurriculumVitae at Grupo Tecnología Alternativa SCSIRDOS
El documento describe el período de 1978 a 1983 como el periodo de formación del Grupo de Tecnología Alternativa (GTA) como un grupo interdisciplinario y como una organización no gubernamental, durante el cual desarrollaron su metodología de acción y bases de economía social antes de registrarse como una sociedad civil sin fines de lucro en 1983. El documento también describe varios proyectos exitosos del GTA para implementar sistemas de reciclaje de desechos orgánicos que mejoraron la salud pública y generaron ingresos en comunidades
El laboratorio realiza selección asistida por marcadores moleculares para genes de resistencia a enfermedades, análisis de pureza y contaminación genética, y caracterización genética y molecular de germoplasma. Utilizan marcadores moleculares ligados a genes de interés para seleccionar características sin necesidad de análisis fenotípico, lo que reduce tiempo y costos. Realizan PCR en tiempo real con sondas Taqman para amplificar y cuantificar ADN de forma eficiente.
Este documento describe un procedimiento para analizar la presencia de bacterias coliformes totales y fecales en muestras de agua de consumo humano utilizando la técnica del Número Más Probable (NMP). El procedimiento implica una prueba presuntiva para detectar coliformes seguida de pruebas confirmatorias específicas para coliformes totales y fecales que permiten calcular el NMP de cada grupo bacteriano en la muestra de agua.
Complexometria parte ii determinación de la durezaneededme
Este documento presenta un estudio sobre la determinación de la dureza total, cálcica y magnésica de una muestra de agua de una piscina pública a través de titulaciones complejométricas utilizando EDTA. Los resultados mostraron que la muestra tenía una dureza total promedio de 35,1 ppm, una dureza cálcica promedio de 25,5 ppm y una dureza magnésica promedio de 10,583 ppm. El análisis estadístico de los datos confirmó que la muestra era considerada un agua d
Este documento describe un método para determinar el cobre en muestras líquidas de lixiviación mediante volumetría. El cobre se reduce a Cu+ por yoduro de potasio y el yodo liberado se titula con una solución de tiosulfato de sodio. El cálculo del contenido de cobre se basa en el volumen de tiosulfato utilizado en la titulación. El método también describe cómo preparar la solución de tiosulfato normalizada y las soluciones estándar de cobre necesarias para la calibración.
La práctica determinó los puntos de fusión de sustancias estándar y problema usando dos métodos. El método de Fisher-Johohns fue más preciso que el método de tubo de Thiele. Algunas sustancias estándar fueron impuras debido a variaciones grandes en sus puntos de fusión. La sustancia A se determinó como una mezcla de Naftaleno y Vainillina. La sustancia B fue identificada como ácido adípico y la C como ácido cítrico.
La determinación de la dureza total del agua mide la concentración de calcio y magnesio mediante valoración con EDTA. Se añade indicador negro de eriocromo T y la disolución de EDTA se titula hasta que cambia el color del indicador de rojo a azul. El volumen de EDTA consumido permite calcular la concentración de calcio y magnesio expresada como mg/L de CaCO3, grados franceses y grados alemanes.
Este documento describe el proceso de sedimentación floculenta. La sedimentación floculenta ocurre cuando la velocidad de sedimentación de las partículas aumenta a medida que descienden hacia el fondo del tanque debido a la aglomeración de las partículas. El documento explica que la sedimentación floculenta es un proceso complejo que no se puede modelar matemáticamente, por lo que se debe recurrir a métodos experimentales. También presenta un ejemplo numérico de cómo dimensionar un tanque de sedimentación para tratar aguas residuales basado en
Este informe de laboratorio describe los procedimientos para determinar la alcalinidad, hierro y sulfatos en muestras de agua de un río y agua potable de laboratorio. La alcalinidad se determina mediante la valoración de las muestras con ácido sulfúrico y el uso de indicadores. La presencia de hierro y sulfatos puede afectar el sabor, color y calidad del agua, por lo que es importante medirlos. Los resultados ayudarán a evaluar la calidad de las muestras de agua.
El documento describe una práctica de laboratorio en la que se determinaron los puntos de equivalencia de tres muestras (ácido clorhídrico fuerte, ácido acético débil y una mezcla de ambos) mediante titulaciones conductimétricas con hidróxido de sodio. Se midió la conductancia de cada muestra al adicionar volúmenes de NaOH y se graficaron los resultados, identificando los puntos de equivalencia. Adicionalmente, se calcularon las concentraciones de HCl y CH3COOH en las muestras
Practica 6. analisis de una columna de absorcion de co2nidia_chavez
Este documento describe un experimento para estudiar la absorción de CO2 en una columna utilizando una solución de NaOH como solvente. El objetivo es determinar la eficiencia de absorción midiendo el pH a intervalos de 1 minuto mientras se hace pasar CO2 a través de la columna. Los resultados muestran una disminución del pH a medida que aumenta la cantidad de CO2 absorbido, indicando que se absorbe efectivamente el CO2 y causa la acidificación de la solución.
La guía describe métodos de separación por extracción con solventes. Explica que la extracción con solventes usa un solvente para separar compuestos de una fase homogénea basándose en su distribución entre fases no miscibles. Describe el extractor Soxhlet y rotavapor que permiten extracciones sólido-líquido y líquido-líquido a temperaturas elevadas para recuperar el solvente. El procedimiento incluye extracciones Soxhlet de aceites de muestras vegetales y extracciones líquido-líquido de yodo entre ag
La dureza del agua está determinada por el contenido de sales de calcio y magnesio como carbonatos, bicarbonatos, cloruros y sulfatos. Existen dos tipos de dureza: temporal, determinada por carbonatos y bicarbonatos y que puede eliminarse por ebullición; y permanente, determinada por otras sales y no eliminable por ebullición. El método describe determinar la dureza total mediante titulación con EDTA de las muestras de agua, expresando los resultados como mg/L de carbonato de calcio equivalente.
Este documento describe el modelado matemático de un reactor químico batch. Explica que un reactor batch mantiene una composición uniforme en todo momento sin flujos de entrada o salida. Detalla las ecuaciones que gobiernan el sistema basadas en la conservación de la masa, energía y cantidad de movimiento, y cómo formular un modelo matemático para resolverlo y analizar los resultados. El objetivo es comprender el comportamiento del reactor para mejorar su diseño y operación de manera segura.
Guia nº3 reactores continuos en estado estacionariofabrizio arratia
1. El documento presenta diversos problemas relacionados con reactores químicos continuos, incluyendo conceptos como tiempo espacial y medio de residencia, modelos de flujo, cálculos cinéticos y de diseño de reactores.
2. Se pide determinar la composición de una alimentación para lograr un 80% de conversión en un reactor de mezcla ideal, basándose en datos experimentales de una reacción.
3. Se solicita calcular parámetros como tiempo espacial, medio de residencia, flujo volumétrico y constante de vel
Este documento presenta información sobre la difusividad másica de gases y líquidos. Explica conceptos como difusividad, difusividad de gases y líquidos, y describe equipos como la celda de Arnold que se usan para medir difusividad experimentalmente. También incluye ecuaciones y tablas de valores de difusividad para varios sistemas gaseosos y líquidos. El objetivo es determinar difusividad másica experimentalmente y compararlos con valores teóricos.
El documento describe un estudio en el que se construyeron curvas de calibración relacionando la concentración de permanganato de potasio con la absorbancia medida por espectrofotometría. Cuatro analistas realizaron las mediciones obteniendo coeficientes de correlación entre 0.976-0.9878, indicando alta linealidad del método. El estudio concluyó que el método empleado mostró linealidad y exactitud al haber coeficientes de correlación cercanos a cero.
En términos generales biotecnología se puede definir como el uso de organismos vivos o de compuestos obtenidos de organismos vivos para obtener productos de valor para el hombre.
Se han determinado cuantitativamente sulfatos en agua mediante una técnica instrumental adecuada y calibrando por el método de adiciones estándar (adición de patrones). Para ello se preparó en un conjunto de matraces A, B, C, D, E y F la serie de disoluciones siguiente:
image
Todas las disoluciones obtenidas se homogeneizan y se aforan a 50 mL.
Representar los valores de absorbancia frente al volumen de las disoluciones patrón. Comprobar que la linealidad de los datos se verifica para todo el intervalo estudiado.
Encontrar la ecuación matemática a la que se ajustan los datos obtenidos, así como los parámetros de los mínimos cuadrados.
Determinar la concentración de la muestra problema sabiendo que la concentración de la disolución patrón es de 100,0 ppm.
El documento describe un experimento para determinar la temperatura de burbuja de una mezcla ternaria de etanol, agua y ácido acético experimentalmente y analíticamente usando simuladores como ChemCad 6. También analiza cómo los modelos termodinámicos y la variación de presión afectan los diagramas de equilibrio y las condiciones óptimas de operación para separar componentes en un flash isotérmico o adiabático. Explica conceptos clave como fases, componentes, grados de libertad y equilibrio liquido-vapor
El documento describe un proceso de cristalización fraccionada para recuperar Na2S2O3 a partir de una solución acuosa. Se realiza un balance de materia del sistema considerando Na2S2O3, H2O e impurezas como componentes. Se determina que el sistema tiene 9 grados de libertad y se resuelven las 9 ecuaciones resultantes. Finalmente, se calcula que el 66,95% del Na2S2O3 de entrada se recupera en los cristales de Na2S2O3.5H2O secos.
Josefina Mena-Abraham CurriculumVitae at Grupo Tecnología Alternativa SCSIRDOS
El documento describe el período de 1978 a 1983 como el periodo de formación del Grupo de Tecnología Alternativa (GTA) como un grupo interdisciplinario y como una organización no gubernamental, durante el cual desarrollaron su metodología de acción y bases de economía social antes de registrarse como una sociedad civil sin fines de lucro en 1983. El documento también describe varios proyectos exitosos del GTA para implementar sistemas de reciclaje de desechos orgánicos que mejoraron la salud pública y generaron ingresos en comunidades
El laboratorio realiza selección asistida por marcadores moleculares para genes de resistencia a enfermedades, análisis de pureza y contaminación genética, y caracterización genética y molecular de germoplasma. Utilizan marcadores moleculares ligados a genes de interés para seleccionar características sin necesidad de análisis fenotípico, lo que reduce tiempo y costos. Realizan PCR en tiempo real con sondas Taqman para amplificar y cuantificar ADN de forma eficiente.
Este documento describe un experimento de bioinformática que involucra el análisis de una secuencia de ADN de la bacteria Lactobacillus sakei utilizando la herramienta BLAST. Se seleccionó una parte de la secuencia de L. sakei y se cargó en BLAST para identificar de qué organismo proviene y obtener información relevante sobre cómo fue obtenida y para qué propósito. Los resultados muestran que la secuencia corresponde efectivamente a L. sakei y proporcionan detalles sobre su diversidad genética y uso de cebadores de PCR.
Este estudio evaluó el efecto del herbicida Paraquat sobre el crecimiento de la microalga Scenedesmus quadricauda mediante un bioensayo de toxicidad. Se determinó que el Paraquat inhibe el 50% del crecimiento de S. quadricauda a una concentración de 6,3 mg/L. También se observó una inhibición total del crecimiento a partir de 25,6 mg/L. La concentración más alta sin efecto observable fue de 1,6 mg/L. El estudio concluye que S. quadricauda es sensible al Paraquat y puede
El presente Protocolo tiene como objetivo establecer procedimientos utilizados en la ejecución
del Programa Nacional de Vigilancia de la Calidad de los Recursos Hídricos de la Autoridad
Sanitaria – DIGESA para evaluar la calidad sanitaria. Asimismo, servirá de Instrumento Oficial
de trabajo para el usuario en general.
Este documento presenta los resultados de 5 experimentos realizados por un equipo de estudiantes para analizar procesos de medición. En el experimento 4, midieron la masa de 50 canicas individualmente y calcularon estadísticas como la desviación estándar y la media. En el experimento 5, lanzaron 2 dados 50 veces y analizaron la distribución de resultados mediante un histograma y cálculo de probabilidades. Calculan la media de cada equipo y la media general. En la discusión analizan los resultados y en las conclusiones resumen los objetivos alcanz
Este documento presenta una guía para el muestreo de suelos contaminados. Explica los tipos de muestreo como identificación, detalle, nivel de fondo y comprobación. También cubre consideraciones para la planificación del muestreo, técnicas de muestreo, manejo de muestras, seguridad y determinación de puntos de muestreo. El objetivo es proveer lineamientos para la recolección de muestras de suelo de manera sistemática y representativa para evaluar la contaminación.
Garnett Component Sales is a manufacturer's representative agency that specializes in selling custom engineered mechanical components. They have a team of sales representatives covering several southeastern states. The document provides information about Garnett and several of the manufacturers they represent, including JMC Tool & Machine, Fischer Special Manufacturing, and Pressteck, which specialize in custom machining, multi-spindle custom machining, and deep drawn components, respectively.
TORMENTAS SOLARES Y EL COMETA ELENIN para el OTOÑO 2011Fundacion Soliris
El documento habla sobre las tormentas solares previstas para 2011-2013 y consejos para prepararse. Resume que habrá una gran actividad solar con manchas solares muy grandes y erupciones solares poderosas. Esto podría causar apagones eléctricos a nivel mundial debido a eyecciones de masa coronal. Se recomienda almacenar alimentos no perecederos, agua, combustible y prepararse para vivir sin electricidad por varios años.
Este documento presenta varias estrategias didácticas para enseñar fracciones, incluyendo usar fracciones para expresar resultados de repartos entre un número de personas, obtener fracciones mediante particiones de objetos enteros como hojas de papel, y determinar partes de colecciones usando fracciones para indicar qué fracción de un kilo corresponde a ciertas cantidades de objetos.
La retinopatía diabética es una complicación ocular de la diabetes causada por el deterioro de los vasos sanguíneos de la retina. Existen dos etapas principales: la no proliferativa y la proliferativa más avanzada. A medida que progresa, puede causar pérdida de visión debido a la formación anormal de vasos sanguíneos y tejido fibroso. El diagnóstico y seguimiento incluyen exámenes oftalmológicos regulares, y el tratamiento con láser puede prevenir daños adicionales
Este documento analiza tres sectores emergentes en España con oportunidades de negocio: 1) la conciliación de la vida laboral y familiar a través de consultorías y servicios de apoyo a empresas, 2) la biotecnología especialmente en alimentos y medicinas, y 3) los servicios asociados a la telefonía móvil para familias. Expertos opinan que estos sectores están creciendo y ofrecen oportunidades para pequeñas empresas españolas.
Este documento muestra las características de la aplicación, hasta el momento, así como un pequeño sustento teórico sobre las aplicaciones similares a esta en el mundo.
Muestra los objetivos, beneficios y funciones de la aplicación.
The document is a curriculum vitae that summarizes the career and qualifications of Mubeen Malik. It outlines his objective to enhance his architectural skills while meeting expectations. It details over 12 years of experience as an architect on various project types. His experience includes conceptual design, working drawings, quality assurance procedures, and implementing building codes. Recent roles include serving as a senior architect at Edge Consultants in Jeddah, where he leads project design and coordinates with consultants. He holds a Bachelor's degree in Architecture and additional qualifications.
El documento habla sobre cómo transformar nuestra historia de vida a través de cambiar nuestras emociones y creencias limitantes, lo que puede afectar nuestro ADN. Explica que la ciencia ha encontrado evidencia de que es posible desarrollar nuevas cadenas de ADN mediante la meditación, la cual nos permite conectarnos con la energía ilimitada de Dios y sanar emociones del pasado. También menciona que nuestro código genético no es fijo y que a través de la auto-sanación podemos reiniciar nuest
This document provides information about the upcoming three day youth training camp being organized by the Visakhapatnam Vivekananda Yuva Mahamandal from November 29th to December 1st, 2013 at the TTD Kalyana Mandapam in Visakhapatnam, Andhra Pradesh, India. It outlines the schedule of events including speeches from religious leaders and cultural programs on each day. It also lists the names and contact information of the organizing committee members and their roles and responsibilities in managing different aspects of the event such as reception, venue arrangement, food arrangement, souvenirs, publications, press and publicity, competitions and more.
Este documento es la autobiografía de John Esteban Bejarano Velásquez desde su nacimiento hasta sus 13 años. Resume los eventos clave de su vida como su bautizo a los 5 meses, sus primeros 3 años de vida, el nacimiento de su hermana Laura María, y sus aspiraciones para graduarse de la universidad, tener una carrera exitosa y una gran familia en el futuro.
The document discusses the benefits of exercise for mental health. It states that regular physical activity can help reduce anxiety and depression and improve mood and cognitive functioning. Exercise causes chemical changes in the brain that may help boost feelings of calmness and well-being.
El documento describe los objetivos y metodología para realizar análisis físico-químicos y bacteriológicos de muestras de agua, evaluando los resultados frente a los estándares de calidad para agua potable. Los objetivos específicos incluyen determinar materiales residuales, pH, alcalinidad, dureza y cloro residual. También describe métodos para el recuento de bacterias, incluyendo coliformes totales, y exámenes para detectar organismos patógenos como Salmonella y Shigella.
Este documento presenta un resumen de cinco experimentos realizados para analizar la presencia de bacterias coliformes y otros microorganismos en muestras de agua. Los experimentos incluyeron pruebas para detectar aerobios totales, coliformes totales, número más probable de coliformes, estreptococos fecales y filtración de membranas. Los resultados de todos los experimentos fueron negativos, lo que indica que el agua analizada no contenía dichos microorganismos y cumplía con los estándares de calidad del agua potable.
1) El análisis microbiológico del agua determina los microorganismos presentes y es importante para evaluar la calidad del agua y detectar posibles patógenos.
2) Los factores que afectan la flora bacteriana del agua incluyen la acidez, materia orgánica, oxígeno disuelto, sales, temperatura, y turbidez.
3) Los análisis comunes incluyen determinar bacterias coliformes totales y fecales, enterococos fecales, y Clostridium perfringens, usando métodos
Este documento proporciona guías para realizar análisis microbiológicos de alimentos y agua. Incluye información sobre pruebas para detectar coliformes totales y fecales en agua y leche, así como sobre métodos de muestreo, diluciones y recuentos microbiológicos. Describe pruebas como el número más probable y métodos basados en la formación de colonias para cuantificar microorganismos viables totales en muestras líquidas u homogeneizadas. El objetivo es conocer los procedimientos estandarizados para evalu
Giuliano david bozzo moncada nº 3 coliformesGiulianoBo45
El documento describe el grupo de bacterias conocidas como coliformes. Estas bacterias se caracterizan por ser aerobias o anaerobias facultativas, bacilos Gram negativos que fermentan la lactosa produciendo ácido láctico y gas. Incluyen géneros como Escherichia, Klebsiella, Enterobacter y Citrobacter. Tradicionalmente se usan como indicadores de contaminación fecal en el agua, aunque no todos los coliformes son de origen fecal.
Determinación de microorganismos aerobios mesófilos..
Determinación de Coliformes Totales y Fecales
Determinación de Estreptococos Fecales
Determinación de Clostridios Sulfito Reductores
El documento resume los procedimientos para realizar un análisis microbiológico completo del agua, incluyendo la determinación de microorganismos aerobios mesófilos, coliformes totales y fecales, estreptococos fecales, y clostridios sulfito-reductores. Describe los métodos para cada prueba, así como los resultados obtenidos al analizar un agua problema proveniente de un manantial, donde se encontró una contaminación microbiológica superior a 20 ufc/mL de coliformes.
El documento presenta información sobre el análisis microbiológico del agua. Explica que este análisis determina los microorganismos presentes en una muestra de agua y se centra en identificar microorganismos patógenos que pueden transmitir enfermedades. Describe los métodos para analizar bacterias coliformes, E. coli, enterococos y otros microbios, los cuales incluyen procedimientos de filtración e incubación. Además, discute factores que afectan la flora bacteriana del agua y el procedimiento para la toma de
El documento proporciona información sobre el análisis microbiológico del agua. Explica que este análisis determina los microorganismos presentes en una muestra de agua y se centra en microorganismos patógenos que pueden transmitir enfermedades. Describe métodos para analizar bacterias coliformes, E. coli, enterococos, Clostridium perfringens y recuentos de bacterias aerobias. También cubre factores que afectan la flora bacteriana, toma de muestras y criterios sanitarios para agua pot
Este documento proporciona instrucciones para el uso del medio de cultivo BD LBS Agar, el cual es semi-selectivo y se utiliza para el aislamiento y recuento de lactobacilos a partir de muestras intestinales, vaginales y de alimentos. Explica que los lactobacilos son organismos predominantes de la flora normal y que su disminución se ha asociado con trastornos como la diarrea crónica y la vaginitis. Además, describe la composición del medio, el procedimiento para analizar muestras, y la
Se puede definir el análisis microbiológico como el conjunto de operaciones
encaminadas a determinar los microorganismos presentes en una muestra
problema de AGUA.
Este documento presenta un análisis microbiológico del agua. Incluye la justificación de analizar microorganismos en el agua para determinar su potabilidad, así como el marco teórico sobre límites permisibles de bacterias y métodos para determinar bacterias coliformes, aerobias mesófilas y patógenas como Salmonella y Shigella.
6595039 microbiologia-de-alimentos-practica-nº-09-recuento-e-identificacion-d...maria vera chavez
Este documento presenta los resultados de un estudio para contar e identificar Staphylococcus aureus en muestras de queso fresco artesanal. Se realizó el recuento de colonias de S. aureus usando agar Baird Parker y se confirmó la identificación con pruebas de coagulasa y termonucleasa. El recuento mostró 47.2 x 10-4 unidades formadoras de colonias por gramo en la muestra de queso. Aunque la prueba de termonucleasa fue negativa, se concluyó que la cepa aislada era S
Discusión Practica 5 ORGANISMOS COLIFORMES TOTALES Y FECALES Eq5.pptxGarciaUrsulaErickOma
El documento describe un experimento para determinar la presencia de coliformes totales y fecales en una muestra de agua de fresa. Se realizó la metodología del número más probable usando caldos selectivos y tablas de resultados. La prueba presuntiva mostró un posible coliforme en la dilución 10-3, pero se requiere la prueba confirmatoria para determinar los coliformes totales y fecales presentes.
Este documento describe varias pruebas bioquímicas utilizadas para identificar bacterias, incluyendo la prueba de la catalasa, el citrato, la fenilalanina desaminasa, el indol, la lactosa, el manitol-movilidad-nitratos, la oxidasa, y el rojo de metilo/Voges-Proskauer. Cada prueba determina la presencia o ausencia de una enzima o la capacidad de fermentar un sustrato específico, lo que permite diferenciar entre géneros y especies bacterianas
El documento habla sobre bacterias, virus y otros microorganismos que pueden encontrarse en el agua. Explica que los colibacilos son indicadores útiles de contaminación y que aunque no son patógenos, la presencia de Escherichia coli (E. coli) indica contaminación fecal. También describe brevemente virus como los responsables de epidemias de hepatitis y otros patógenos como protozoos y algas que pueden encontrarse en el agua.
El documento describe los aspectos microbiológicos de la calidad del agua. Explica que la presencia de bacterias indicadoras como los coliformes totales y fecales indican contaminación y que el agua no es apta para consumo. También detalla los métodos para analizar muestras de agua y detectar este tipo de bacterias, incluyendo el recuento de unidades formadoras de colonias y el número más probable.
Este documento describe los procedimientos y resultados de pruebas bioquímicas realizadas para determinar las actividades metabólicas de varios microorganismos. Se evaluó la degradación de almidón, glucosa, gelatina, urea y lípidos por medio de pruebas de hidrólisis y fermentación. Los resultados mostraron que Bacillus subtilis hidrolizó el almidón, E. coli fermentó la glucosa, Pseudomonas fluorescens licuó la gelatina y Proteus vulgaris hidrolizó la urea. Estas prue
Este documento presenta los resultados de un análisis biológico del agua realizado por una estudiante para determinar la presencia de coliformes totales y coliformes fecales. Describe brevemente lo que son los coliformes y explica que el objetivo fue determinar las abundancias de estos microorganismos en una muestra de agua usando el método establecido en la Norma Oficial Mexicana NOM-113-SSA1-1994. Los resultados se presentan en una tabla y se discuten y comparan con otros resultados, concluyendo que los resultados
1. BAM: La enumeración de Escherichiacoli y las bacterias coliformes
09 2002
Manual Analítico Bacteriológico
Capítulo 4
La enumeración de Escherichiacoli y las bacterias coliformes
Autores:Peter Feng , Stephen D. Weagant (retirado), Michael A. Grant (diciembre), William Burkhardt
Historial de revisiones:
Febrero de 2013 - Método de análisis de los mariscos revisado para ser coherente con el examen
APHA del agua de mar y mariscos, 4 ª ed.
Febrero de 2013 - métodos de filtro de membrana añadido al análisis de agua.
Contenido del capítulo
Método convencional para determinar Coliformes y E.coli
Método LST-MUG para la detección de E.coli en refrigerada o congelada Alimentos
Exclusivo de Moluscos Bivalvos
Agua embotellada
El examen de los mariscos y carne de mariscos
Análisis para E.coli en jugos cítricos
Otros métodos para que enumera los coliformes y E.coli
Referencias
Escherichiacoli, originalmente conocidos como Bacteriumcoli comuna, fue identificado en 1885 por el
pediatra alemán, Theodor Escherich ( 14 , 29 ). E.coli se distribuye ampliamente en el intestino de los
seres humanos y animales de sangre caliente y es el anaerobio facultativo predominante en el intestino y
parte de la flora intestinal esenciales que mantiene la fisiología del huésped sano ( 9 , 29 ). E.coli es un
miembro de la familia Enterobacteriaceae ( 15 ), que incluye muchos géneros, incluyendo patógenos
conocidos, tales como Salmonella, Shigella y Yersinia. Aunque la mayoría de cepas de E.coli no se
consideran patógenos, pueden ser patógenos oportunistas que causan infecciones en huéspedes
inmunocomprometidos. También hay cepas patógenas de E.coli que cuando se ingiere, causa
enfermedades gastrointestinales en humanos sanos (ver. Cap 4A).
En 1892, Shardinger propuso el uso de E.coli como un indicador de la contaminación fecal. Esto se basó
en la premisa de que la E.coli es abundante en las heces humanas y animales, y que no suelen
encontrarse en otros nichos. Además, dado que E.coli pueden ser detectadas fácilmente por su capacidad
para fermentar la glucosa (más tarde cambiado a la lactosa), que era más fácil de aislar de patógenos
gastrointestinales conocidos. Por lo tanto, la presencia de E.coli en los alimentos o el agua llegó a ser
aceptada como indicativo de contaminación fecal reciente y la posible presencia de patógenos francas.
2. Aunque el concepto de la utilización de E.coli como un indicador indirecto de riesgo para la salud se
sonido, era complicado en la práctica, debido a la presencia de otras bacterias entéricas como
Citrobacter, Klebsiella y Enterobacter que también puede fermentar la lactosa y son similares a E.coli
en características fenotípicas, de manera que no se distinguen fácilmente. Como resultado, el término
"coliformes" fue acuñado para describir este grupo de bacterias entéricas. Coliformes no es una
clasificación taxonómica sino más bien una definición de trabajo utilizado para describir un grupo de
bacterias Gram-negativas, anaeróbicas facultativas en forma de varilla que fermenta la lactosa para
producir ácido y gas dentro de 48 horas a 35 ° C. En 1914, el Servicio de Salud Pública de los EE.UU.
aprobó el recuento de coliformes como un estándar más conveniente de importancia sanitaria.
Aunque coliformes eran fáciles de detectar, su asociación con la contaminación fecal es cuestionable
debido a que algunos coliformes se encuentran naturalmente en muestras ambientales ( 6 ). Esto condujo
a la introducción de los coliformes fecales como indicador de la contaminación. Los coliformes fecales,
primero se define sobre la base de las obras de Eijkman ( 12 ) es un subconjunto de coliformes totales
que crece y fermenta la lactosa a temperatura de incubación elevada, por lo tanto, también se refirió a los
coliformestermotolerantes como. Análisis de coliformes fecales se realizan a 45,5 ° C durante el análisis
de alimentos, excepto para los análisis de agua, crustáceos y mariscos agua de la cosecha, que utilizan
44,5 ° C ( 1 , 3 , 30 ). El grupo de coliformes fecales se compone principalmente de E.coli, pero algunos
otros entéricos tales como Klebsiella también pueden fermentar la lactosa a estas temperaturas y por lo
tanto, ser considerados como los coliformes fecales. La inclusión de Klebsiellaspp en la definición de
trabajo de coliformes fecales disminuyó la correlación de este grupo con la contaminación fecal. Como
resultado, E.coli ha resurgido como un indicador, en parte facilitado por la introducción de nuevos
métodos que pueden identificar rápidamente E.coli.
Actualmente, todos los 3 grupos se utilizan como indicadores pero en diferentes aplicaciones. La
detección de coliformes se utiliza como un indicador de la calidad sanitaria de agua o como un indicador
general de condiciones sanitarias en el entorno de procesamiento de alimentos. Los coliformes fecales
siguen siendo el indicador estándar de elección para la cría de moluscos y mariscos aguas de
recolección; y E.coli se utiliza para indicar la contaminación fecal reciente o procesamiento
antihigiénico. Casi todos los métodos utilizados para detectar E.coli,coliformes totales o coliformes
fecales son métodos de enumeración que se basan en la fermentación de la lactosa ( 4 ). El método del
número más probable (MPN) es un ensayo de múltiples pasos estadístico que consiste en fases
presuntivos, confirmadas y completadas. En el ensayo, diluciones seriadas de una muestra se inoculan
en caldo de cultivo. Los analistas anotan el número de positivos gas (fermentación de la lactosa) tubos,
de los cuales se llevan a cabo las otras 2 fases del ensayo, y luego usa las combinaciones de resultados
positivos para consultar una tabla estadística ( Apéndice 2 ), para estimar el número de organismos
presente. Típicamente sólo los primeros 2 fases se llevan a cabo en coliformes y análisis de coliformes
fecales, mientras que todas las 3 fases se realizan para E.coli. La prueba NMP 3-tubo se utiliza para
probar la mayoría de los alimentos. Análisis de agua de mar mediante una serie de dilución múltiple no
debe utilizar menos de 3 tubos por dilución (se recomiendan 5 tubos); en ciertos casos una sola serie de
dilución usando no menos de 12 tubos también puede ser aceptable. (Para más detalles, véase:. FDA
Programa Nacional de Saneamiento Mariscos, Manual de Operaciones de 2009 Revisión DHHS / PHS /
FDA, Washington DC.).. Del mismo modo, el análisis de los moluscos bivalvos se debe realizar
mediante una serie NMP dilución múltiple que no menos de 5 - se deben utilizar tubos por dilución,
véase la sección IV. También hay un método NPF 10 de tubo que se utiliza para probar el agua
3. embotellada o las muestras que no se espera que sean altamente contaminada ( 3 ). Análisis de jugo de
cítricos para E.coli se realiza como un método de ausencia / presencia, véase la sección V.
Además, no es un sólido método de chapado medio para coliformes que utiliza Agar Violeta Rojo Bilis,
que contiene indicador de pH rojo neutro, de modo que los resultados de fermentación de la lactosa en la
formación de colonias de color rosa. También hay pruebas de filtración de membrana para coliformes y
coliformes fecales que miden la formación de aldehído debido a la fermentación de la lactosa. Este
capítulo también incluye variaciones de las pruebas anteriores que utilizan sustratos fluorogénicos para
detectar E.coli ( 18 ), pruebas especiales para el análisis de los mariscos, una breve consideración de las
pruebas de agua embotellada y un método para el ensayo de grandes volúmenes de jugos de cítricos para
la presencia de E.coli en conjunción con la norma HACCP Juice.
I. Método convencional de coliformes, coliformes fecales y E.coli
A. Equipo y materiales
1. Cubiertos baño de agua, con sistema de circulación para mantener la temperatura de 45,5
± 0,2 ° C.
Nota: La temperatura de los baños de agua para el programa de los mariscos es 44,5 °
C ± 0,2 ° C. El nivel del agua debe estar por encima del medio en tubos sumergidos.
2. De tipo inmersión termómetro, 1-55 ° C, a unos 55 cm de largo, con 0,1 ° C
subdivisiones, certificada por el Instituto Nacional de Estándares y Tecnología (NIST), o
equivalente
3. Incubadora, 35 ± 1,0 ° C
Nota: La temperatura de la incubadora para el programa de los mariscos es de 35 ° C
± 0,5 ° C
4. Equilibrio con capacidad> 2 kg y sensibilidad de 0,1 g
5. Blender y vaso de la licuadora (véase el Capítulo 1)
6. Pipetas graduadas estériles, 1,0 y 10,0 ml
7. Utensilios estériles para la manipulación de muestras (véase el Capítulo 1)
8. Botellas de dilución de vidrio borosilicato, con tapones de rosca de polietileno equipado
con revestimientos de teflón. Botellas de dilución preparada comercialmente que
contienen tampón de fosfato estéril de Butterfield también se pueden utilizar.
9. Quebec contador de colonias, o equivalente, con lente de aumento
10. Luz de onda larga UV [~ 365 nm], que no exceda 6 W.
11. pH-metro
B. Medios y Reactivos
1. Brilliant bilis lactosa verde (BGLB) de caldo, 2% ( M25 )
2. Lauriltriptosa (LST) de caldo ( M76 )
3. Caldo lactosa ( M74 )
4. Caldo EC ( M49 )
4. 5. Azul de metileno-eosina de Levine (L-EMB) agar ( M80 )
6. Triptona (triptófano) caldo ( M164 )
7. Caldo MR-VP ( M104 )
8. Caldo citrato de Koser ( M72 )
9. Agar para recuento en placa (PCA) (métodos estándar) ( M124 )
10. Agua tamponada con fosfato de Butterfield ( R11 ) o diluyente equivalente
(Nota:.... Esta misma fórmula se conoce como Buffered agua de dilución en la
Asociación Americana de Salud Pública 1970 Procedimientos recomendados para el
Análisis de agua de mar y mariscos, 4 ª ed APHA, Washington, DC, p14-15)
11. Reactivo de Kovacs ( R38 )
12. Voges-Proskauer (VP) reactivos ( R89 )
13. Reactivos de tinción de Gram ( R32 )
14. Indicador rojo de metilo ( R44 )
15. Violet agar bilis-rojo (VRBA) ( M174 )
16. Agar VRBA-MUG ( M175 )
17. Medio EC-MUG ( M50 )
18. Lauriltriptosa MUG (LST-MUG) caldo ( M77 )
19. Peptona Diluyente, 0,5% ( R97 )
C. NMP - prueba presuntiva de coliformes, coliformes fecales y E.coli
Pesar 50 g de alimento en la jarra de la licuadora de alta velocidad estéril (véase el capítulo 1 y
los actuales programas de cumplimiento de la FDA para obtener instrucciones sobre el tamaño
de la muestra y de composición) Las muestras congeladas pueden suavizarse mediante el
almacenamiento de <18 horas a 2-5 º C, pero no descongelar. Añadir 450 ml de agua tamponada
con fosfato de Butterfield y mezclar durante 2 min. Si <50 g de muestra están disponibles, pesar
porción que es equivalente a la mitad de la muestra y añadir un volumen suficiente de diluyente
estéril para hacer una dilución 1:10. El volumen total en el vaso de la licuadora debe cubrir
completamente las cuchillas.
Preparar diluciones decimales con diluyente fosfato estéril de Butterfield o equivalente. Número
de diluciones para estar preparados depende de la densidad de coliformes anticipada. Agite todas
las suspensiones de 25 veces en 30 cm de arco o mezcla de vórtice durante 7 s. Uso de al menos
3 diluciones consecutivas, inocular 1 ml de alícuotas de cada dilución en 3 tubos LST para un
análisis NPF 3 tubo (otro análisis puede requerir el uso de 5 tubos para cada dilución; ver IV).
Caldo lactosa también se puede utilizar. Para una mayor precisión, utilice un 1 ml o 5 ml pipeta
para la inoculación. No utilice pipetas para entregar <10% de su volumen total; por ejemplo. una
pipeta de 10 ml para entregar 0,5 ml. Mantenga la pipeta en ángulo de modo que su borde
inferior se apoya contra el tubo. No más de 15 min debe transcurrir desde el tiempo de la muestra
se mezcla hasta que todas las diluciones se inocularon en los medios de comunicación
apropiados.
Incubar los tubos LST a 35 ° C ± 0,5 ° C. Examinar los tubos y reacciones récord a 24 ± 2 h de
gas, es decir, el desplazamiento de medio en el frasco de fermentación o efervescencia cuando
los tubos se agitan suavemente. Vuelva a incubar los tubos de gas-negativo durante 24
5. hyexaminar y registrar las reacciones de nuevo a los 48 ± 3 h. Realice la prueba confirmada en
todos los tubos presuntivos positivos (gas).
D. Confirmado prueba para coliformes - MPN
De cada tubo LST o caldo de lactosa gaseado, la transferencia de un asa de siembra de la
suspensión a un tubo de caldo de BGLB, evitando película si está presente. (Un palillo aplicador
de madera estéril puede también ser utilizado para estas transferencias). Incubar los tubos BGLB
a 35 ° C ± 0,5 ° C y examinar la producción de gas a 48 ± 3 h. Calcular el número más probable
(NMP) (véase el Apéndice 2 ) de coliformes basado en la proporción de confirmados
gaseamiento tubos LST para 3 diluciones consecutivos.
E. Confirmado prueba para coliformes fecales y E. - MPNcoli
De cada LST gasificación o tubo de caldo de lactosa a partir de la prueba de presunción,
transferir un asa de siembra de cada suspensión a un tubo de caldo de CE (un palillo aplicador de
madera estéril también puede ser utilizado para estas transferencias). Incubar los tubos de la CE
24 ± 2 horas a 45,5 ° C y examinar la producción de gas. Si es negativo, reincubate y examinar
de nuevo a las 48 ± 2 h. Usar los resultados de esta prueba para calcular NPF de coliformes
fecales. Para continuar con E. análisis coli, proceda a la Sección F de abajo. El método NPF
caldo de CE puede ser utilizado para el agua de mar y mariscos, ya que se ajusta a los
procedimientos recomendados ( 1 ). (Precaución: ver nota abajo).
NOTA: análisis de coliformes fecales se realizan a 45,5 ± 0,2 ° C para todos los alimentos,
excepto para las pruebas de agua y en los mariscos y crustáceos análisis de agua de la cosecha,
que utiliza una temperatura de incubación de 44,5 ± 0,2 ° C ( 1 ).
F. Contestó la prueba para E. - MPNcoli.
Para realizar la prueba completa para E.coli, agite suavemente cada tubo CE gaseamiento,
eliminar un asa de siembra de caldo y la racha de aislamiento en una placa de agar L-EMB e
incubar durante 18-24 horas a 35 ° C ± 0,5 ° C. Examinar las placas para sospechar E. colonias
de E. coli, es decir, oscuro centradas y plana, con o sin brillo metálico. Traslado hasta 5 colonias
sospechosas de cada placa L-EMB a sesgos de PCA, los incuban durante 18-24 horas a 35 ° C ±
0,5 ° C y utilizar para realizar más pruebas.
NOTA: La identificación de cualquier 1 de las 5 colonias como E.coli es suficiente para
considerar que el tubo de la CE como positivos; por lo tanto, pueden necesitar ser probado no
todos los 5 aislamientos.
Lleve a cabo la tinción de Gram. Todas las culturas que aparecen como bacilos Gram-negativos,
cortos deben ser probados para las reacciones IMViC a continuación y también volvieron a
inocular nuevamente dentro de LST para confirmar la producción de gas.
6. Producción de indol. Inocular tubo de caldo triptona e incubar 24 ± 2 horas a 35 ° C ± 0,5 ° C.
Prueba de indol añadiendo ,2-,3 ml de reactivo de Kovacs. Aparición de característico color rojo
en la capa superior es prueba positiva.
Voges-Proskauer (VP) reactiva compuestos. Inocular tubo de caldo MR-VP e incubar 48 ± 2
horas a 35 ° C ± 0,5 ° C. Transferir 1 ml de 13 × 100 mm tubo. Añadir 0,6 ml de solución de α-
naftol y 0,2 ml KOH al 40% y agitar. Añadir unos pocos cristales de creatina. Agitar y dejar
reposar 2 horas. La prueba es positiva si el color rosa eosina desarrolla.
Metil-compuestos rojos reactivos. Después de la prueba VP, incubar tubo MR-VP adicional de
48 ± 2 horas a 35 ° C ± 0,5 ° C. Añadir 5 gotas de solución de rojo de metilo a cada tubo.
Característico color rojo es positivo. El amarillo es la reacción negativa.
Citrato. Ligeramente inocular tubo de caldo citrato de Koser; evitar turbidez detectable. Incubar
durante 96 horas a 35 ° C ± 0,5 ° C. Desarrollo de turbidez es distinta reacción positiva.
Gas de la lactosa. Inocular un tubo de LST e incubar 48 ± 2 horas a 35 ° C ± 0,5 ° C. La
producción de gas (el desplazamiento de medio de vial interno) o la efervescencia tras una suave
agitación es reacción positiva.
Interpretación: Todas las culturas que (a) la lactosa fermento con la producción de gas dentro
de 48 horas a 35 ° C, (b) aparecen como barras nonsporeforming Gram-negativas y (c) dan
patrones IMViC de + + - (biotipo 1) o - + - (biotipo 2) son considerados como E.coli. Calcular la
MPN (véase el apéndice 2) de E.coli basado en la proporción de tubos de la CE en 3 diluciones
sucesivas que contienen E.coli.
NOTA: Como alternativa, en lugar de realizar la prueba IMViC, utilizar API20E o el ensayo
bioquímico VITEK automatizado para identificar el organismo como E.coli. Utilice el
crecimiento de los cultivos inclinados de PCA y llevar a cabo estos ensayos como se describe por
el fabricante.
G. Método medio sólido - Coliformes
Preparar violeta de agar bilis rojo (VRBA) de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Enfriar a 48 ° C antes de su uso. Preparar, homogeneizar y decimalmente diluir la muestra como
se describe en la sección I. C por encima de manera que se obtengan las colonias aisladas cuando
se siembran. Transferir dos alícuotas de 1 ml de cada dilución a placas petri, y utilizar cualquiera
de los dos siguientes métodos emplear siembra, dependiendo de si las células dañadas o
estresadas son sospechosos de estar presente (1).
Verter 10 ml VRBA atemperada a 48 ° C en placas, placas de remolino para mezclar, y dejar que
se solidifique. Para evitar el crecimiento de la superficie y la difusión de las colonias,
superposición con 5 ml VRBA, y dejar que se solidifique. Si la reanimación es necesario, vierta
una capa basal de 8-10 ml de agar de soja tríptico atemperada a 48 ° C. Placas del remolino para
mezclar, e incubar a temperatura ambiente durante 2 ± 0,5 h. Luego superponer con 8-10 ml de
derretida y enfriada VRBA y dejar solidificar.
7. Invertir las placas e incubar 18-24 solidificadas horas a 35 ° C. Incubar productos lácteos a 32 °
C (2). Examinar las placas bajo lupa y con iluminación. Recuento de las colonias rojo-púrpura
que son 0,5 mm o más de diámetro y rodeado por zonas de los ácidos biliares precipitadas. Las
placas deben tener 25 a 250 colonias. Para confirmar que las colonias son coliformes, recoger al
menos 10 colonias representativas y transferir cada uno a un tubo de caldo BGLB. Incubar los
tubos a 35 ° C. Examine a las 24 y 48 h para la producción de gas.
NOTA: Si el tubo de gas BGLB positivo muestra una película, lleve a cabo la tinción de Gram
para asegurar que la producción de gas no se debió a bacilos Gram-positivos, la lactosa fermenta.
Determinar el número de compañeros homogeneizados Alimentación obstruye fácilmente los
filtros, por lo tanto, MF son los más adecuados para el análisis de muestras de agua; Sin
embargo, MF se puede utilizar en el análisis de los alimentos líquidos que no contienen altos
niveles de partículas como el agua embotellada (véase la Sección III para la aplicación de MF).
liforms por gramo de multiplicar el número de colonias sospechosas por ciento confirmados en
BGLB por el factor de dilución.
Alternativamente, E. colonias de E. coli se pueden distinguir entre las colonias de coliformes en
VRBA mediante la adición de 100 g de 4-metil-umbeliferil-β-D-glucurónido (MUG) por ml en
la superposición VRBA. Después de la incubación, observar la fluorescencia azulada alrededor
de las colonias bajo luz UV de onda larga. (Ver sección LST-MUG II para la teoría y la
aplicabilidad.)
H. Membrana de filtración (MF) Método - coliformes: véase la Sección III.El agua
embotellada.
Homogeneizados de alimentos se atascan fácilmente filtros, por lo tanto, MF son los más
adecuados para el análisis de muestras de agua; Sin embargo, MF puede ser utilizado en el
análisis de alimentos líquidos que no contienen altos niveles de partículas, tales como agua
embotellada (véase la Sección III para la aplicación de MF).
II. Método LST-MUG para la detección de E.coli en refrigerada o congelada Alimentos Exclusivo
de Moluscos Bivalvos
El ensayo LST-MUG se basa en la actividad enzimática de la β-glucuronidasa (GUD), que escinde el
sustrato 4metilumbeliferil β-D-glucurónido (MUG), para liberar 4 metilumbeliferona (MU). Cuando se
expone a la onda larga (365 nm) de luz UV, MU exhibe una fluorescencia azulada que se visualiza
fácilmente en el medio o alrededor de las colonias. Más del 95% de E.coli produce GUD, incluyendo
(no productoras de gas) cepas anaerogenic. Una excepción es enterohemorrágicaE.coli (EHEC) del
serotipo O157: H7, que es negativo consistente GUD ( 11 , 17 ). La falta de fenotipo GUD en O157: H7
se utiliza a menudo para diferenciar este serotipo de otras E.coli, aunque las variantes positivas GUD de
O157: H7 no existe ( 24 , 26 ). La producción de GUD por otros miembros de la familia
Enterobacteriaceae es poco frecuente, a excepción de algunos shigellae (44 -58%) y Salmonella (20-
29%) ( 18 , 27 ). Sin embargo, la detección inadvertida de estos patógenos mediante ensayos basados-
GUD no se considera un inconveniente desde la perspectiva de la salud pública. Expresión de la
actividad GUD se ve afectado por la represión de catabolitos ( 8 ) de modo en ocasiones, algunos
8. E.colison GUD-negativo, a pesar de que llevan el UID Un gen (gus A) que codifica para la enzima ( 19
). En la mayoría de los análisis, sin embargo, alrededor del 96% de E.coli cepas aisladas son-GUD
positivos sin necesidad de inducción enzimática ( 27 ).
TAZA puede incorporarse en casi cualquier medio para su uso en la detección de E.coli. Sin embargo,
algunos medios de comunicación tales como EMB, que contienen componentes fluorescentes, no son
adecuados, ya que enmascarar la fluorescencia de MU. Cuando TAZA se incorpora en el medio de LST,
coliformes se pueden enumerar sobre la base de la producción de gas a partir de lactosa y E.coli son
presuntamente identifican por fluorescencia en el medio bajo luz UV de onda larga, por lo que es capaz
de proporcionar una identificación presuntiva de E.coli en 24 horas ( 18 , 28 ). El método LST-MUG
describe a continuación ha sido adoptado como acción final oficial de la AOAC para el análisis de E.coli
en los alimentos refrigerados o congelados, con exclusión de los mariscos ( 28 ). Consulte Sec. IV.4. D.
Para las precauciones en el uso de MUG en las pruebas de los mariscos. Para obtener información sobre
contactos de ensayo MUG, Dr.Peter Feng FDA, CFSAN, College Park, MD, 20740; 240-402-1650.
PRECAUCIÓN: para observar la fluorescencia, examine tubos LST-MUG inoculadas bajo onda larga
(365 nm) de luz UV en la oscuridad. Una lámpara de UV de mano 6 vatios es adecuada y segura.
Cuando se utiliza una fuente de UV más potente, como una lámpara fluorescente de 15 vatios, usar
anteojos o gafas protectoras. Además, antes de su uso en ensayos de taza, examinar todos los tubos de
vidrio para la autofluorescencia. El óxido de cerio, que a veces se añade al vaso como medida de control
de calidad, será fluorescente bajo la luz ultravioleta e interferir con la prueba de MUG ( 25 ). El uso de
cepas de control positivo y negativo para la reacción MUG es esencial.
A. El equipo y los muestra en la sección IA supra y además,
1. Nuevos tubos de vidrio borosilicato, desechables (100 × 16 mm)
2. Nuevo, de vidrio borosilicato desechable Durham viales (50 × 9 mm) para la recolección
de gas
3. Lámpara UV de onda larga, que no exceda de 6 vatios
B. Medios y reactivos: ver sección IB
C. Presunta prueba LST-MUG para E.coli.
Preparar las muestras de alimentos y realizar la prueba de la MPN presuntiva como se describe en la
sección IC anterior, excepto el uso de tubos LST-MUG lugar de LST. Asegúrese de inocular un tubo de
LST-MUG con una conocida E. GUD-positivo coli aíslan como control positivo (ATCC 25922).
Además, inocular otro tubo con un cultivo de Enterobacteraerogenes (ATCC 13048) de cultivo de
Enterobacteraerogenes (ATCC 13048) o una cepa de Klebsiellapneumoniae como control negativo, para
facilitar la diferenciación de tubos de muestra que muestran sólo el crecimiento de aquellos que muestra
el crecimiento y la fluorescencia . Incubar los tubos de 24 a 48 ± 2 horas a 35 ° C. Examine cada tubo
para el crecimiento (turbidez, gas) y luego examinar los tubos en la oscuridad bajo la lámpara UV de
onda larga (365 nm). A fluorescencia azulada es una prueba presuntiva positiva para E.coli. Los estudios
realizados por Moberg et al. ( 28 ) muestran que un 24 h de lectura de fluorescencia es un indicador
preciso de E.coli y puede identificar 83-95% de la E. tubos coli-positivos. Después de 48 h de
incubación, 96-100% de E. tubos coli-positivos pueden ser identificados ( 28 ). Realice una prueba
confirmada en todos los tubos presuntamente positivos rayando una asada de la suspensión de cada tubo
fluorescente de agar L-EMB e incubar 24 ± 2 horas a 35 ° C. Seguir los protocolos descritos en I. F, por
9. encima, para prueba Completado por E.coli. Calcular NMP de E.coli basado en la combinación de tubos
fluorescentes confirmados en 3 diluciones sucesivas.
III. Examen del agua embotellada
El consumo de agua embotellada está aumentando rápidamente en todo el mundo. Sólo en los EE.UU.,
más de 3,6 millones de galones de agua embotellada se consumieron en 1998 (Asociación Internacional
de Agua Embotellada, Alexandria, VA). A diferencia del agua potable, que está regulado por los
EE.UU. EPA, el agua embotellada está clasificada legalmente como alimentos en los EE.UU. y está
regulado por la FDA (Federal Register 1995 21 CFR Parte 103 y otros bebidas:.... Agua embotellada;
regla final 60 ( 218) 57.076 a 57.130). FDA define el agua embotellada como "el agua que se destina al
consumo humano y que se sella en botellas u otros recipientes, sin ingredientes añadidos, excepto que
puede contener agentes antimicrobianos inocuos e idóneos" y, dentro de las limitaciones, algunos
agregado fluoruro. El agua embotellada puede ser utilizado como una bebida por sí mismo o como
ingrediente en otras bebidas. Estas normas no se aplican a los refrescos o bebidas similares. Además de
"agua embotellada" o "agua potable", en el 21 CFR Parte 103 FDA también define varios tipos de agua
embotellada que cumplan con ciertos criterios. Estas identidades son "agua artesiano o pozo artesiano",
"aguas subterráneas", el agua mineral "," agua purificada o desmineralizada "," agua con gas en botella
"," agua de manantial "y" pozo de agua ". Además" agua estéril "se define como el agua que cumple con
los requisitos de acuerdo con la "Prueba de esterilidad" de la Farmacopea de Estados Unidos.
Los organismos coliformes no son necesariamente patógenos y rara vez se encuentran en el agua
embotellada, sin embargo, sirven como un indicador de insalubridad o una posible contaminación. Las
encuestas han demostrado que los coliformes son indicadores útiles de la calidad del agua embotellada,
pero algunos países también monitorear las poblaciones microbianas adicionales como indicadores de la
calidad del agua de la botella ( 10 , 33 ). En virtud de la norma de calidad del agua embotellada actual, la
FDA ha establecido un requisito de la calidad microbiológica que se basa en los niveles de detección de
coliformes. Estos niveles se pueden obtener por filtración de membrana (MF) o por 10-tubo de análisis
de NMP de diez unidades de análisis 10-mL. Para obtener información sobre los métodos de agua
embotellada en contacto con el Dr.Peter Feng , FDA, CFSAN, College Park, MD, 20740; 240-402-1650.
A. Equipos y Materiales.
1. Incubadora a 35 ° ± 0,5 ° C.
2. Unidades de filtración de membrana (base del filtro y embudos): vidrio, plástico o acero
inoxidable; envuelto en papel de aluminio o papel y esterilizada.
3. Cámara de esterilización ultravioleta para la esterilización de la base del filtro y embudos
(opcional).
4. Colector de filtro o frasco de vacío para sujetar embudos filtrantes.
5. La fuente de vacío (vacío línea, bomba eléctrica de vacío o aspirador de agua).
6. Los filtros de membrana; estéril, blanca, cuadrícula, de 47 mm de diámetro, 0,45 m de
tamaño de poro (o equivalente, según lo especificado por el fabricante) para el recuento
de bacterias.
7. Placas de Petri, estéril, de plástico, 50 × 12 mm, con tapas bien ajustadas.
8. Pinzas diseñadas para transferir las membranas y sin daños.
B. Los medios de cultivo.
1. Lauril sulfato triptosa (LST) de caldo ( M-76 ).
10. 2. Brilliant caldo lactosa bilis verde (BGLB) ( M-25 ).
3. M-Endo Medio (BD # 274930) ( M-196 ).
4. LES-Endo Agar (BD # 273620) ( M-197 ).
C. Ten tubo NMP prueba de coliformes - Presunta y procedimientos confirmados.
Para el examen de rutina de agua embotellada, tomar 100 ml de muestra e inocular 10 tubos de
2X LST (10 ml de medio) con 10 ml de muestra sin diluir cada una. Incubar los tubos a 35 ° C.
Examinar los tubos a 24 ± 2 h para el crecimiento y la formación de gas como se evidencia por el
desplazamiento del medio en el frasco de la fermentación o la efervescencia cuando los tubos se
agitan suavemente. Si es negativo a las 24 h, tubos reincubate para un adicional de 24 h y
examinar de nuevo para el gas. Realizar una prueba confirmada en todos presuntamente positivo
(gaseado) tubos como sigue: agitar suavemente cada tubo LST positiva y, usando un 3.0 - 3.5
mm asa estéril, transferir una o más asas llenas de suspensión a un tubo de caldo de BGLB. Palos
aplicador de madera estéril también puede ser usado para la transferencia mediante la inserción
de por lo menos 2,5 cm en el caldo de cultivo. Incubar los tubos BGLB durante 48 ± 2 horas a 35
° C. Examine para la producción de gas y registro. Calcular NMP utilizando 10 tubos NMP
Tabla (9221.III), p. 9-52, Métodos Estándar para el Análisis de Aguas y Aguas Residuales ( 3 ).
NOTA: si se encuentra que una muestra contiene coliformes (en cualquier nivel) seguir el
procedimiento descrito en la sección. SI anteriormente para determinar si es E.coli. No se
permite el agua embotellada para contener E.coli.
D. Método de filtro de membrana para coliformes.
Filtrar 100 ml de muestra de ensayo y transferir el filtro a medio M-Endo ( M-196 ) o LES Endo
Agar ( M-197 ) y se incuba a 35 ° C ± 0,5 ° C durante 22-24 h. Recuento de las colonias que son
de color rosa a rojo oscuro con un brillo metálico superficie verde. El brillo puede variar de
Pinpoint para completar la cobertura de la colonia. Se recomienda el uso de una energía baja, de
tipo microscopio de disección para examinar los filtros.
Confirmación - Si hay de 5 a 10 brillo colonias sobre el filtro, confirma en su totalidad mediante
la inoculación de crecimiento de cada colonia con brillo en los tubos de LST y se incuba a 35 ° C
± 0,5 ° C durante 48 h. Si el número de colonias con brillo supera 10, seleccionará al azar y
confirmar 10 colonias que son representativos de todas las colonias con brillo. Cualquier tubos
LST positivos de gas deben ser subcultivaron a BGLB y se incubaron a 35 ° C ± 0,5 ° C durante
48 h. La producción de gas en BGLB dentro de 48 h es una prueba de coliformes confirmados.
Informe traduce como el número de colonias de coliformes por 100 ml. NOTA: El método
estándar, 1998, 20a ed, p. 9-60 (3), permite la inoculación simultánea de LST y BGLB durante la
verificación. Sin embargo, BGLB es algo inhibitoria por lo que el método descrito anteriormente,
donde las muestras se subcultivaron de LST en BGLB es considerado como un ensayo de
verificación más sensible y, por lo tanto, recomendable.
NOTA: si se encuentra que una muestra contiene coliformes (en cualquier nivel) seguir el
procedimiento descrito en la sección. SI anteriormente para determinar si es E.coli. No se
permite el agua embotellada para contener E.coli.
11. IV. El examen de los mariscos y carne de mariscos
El procedimiento oficial de la FDA para el análisis bacteriológico de los moluscos bivalvos, nacionales e
importados se completa y adecuada se describe en los procedimientos recomendados por la APHA para
el Análisis de agua de mar y mariscos, 4 ª ed. 1970 (1). Los métodos, incluyendo el 5 tubos
convencionales MPN para coliformes, coliformes fecales y recuento en placa estándar total para las
bacterias (véase la Parte III, del APHA Procedimientos recomendados sobre el examen de agua de mar y
mariscos, cuarta ed. 1970 ( 1 ), se describen a continuación para el examen de la cáscara de valores, las
carnes frescas sin concha, mariscos congelados-frescos desconchados y mariscos congelados en su
concha. Estos procedimientos no se aplican al examen de los crustáceos (cangrejos, langostas y
camarones) o carne de mariscos procesados, tales como empanadas, , productos precocinados y
procesados térmicamente sin concha (véase la sección IC de este capítulo). Además, hay muchos
métodos que se utilizan para las pruebas para la cosecha de mariscos y el agua del medio ambiente para
los coliformes fecales. Un ejemplo, el agar MTEC ( M-198 ) es un medio de filtro de membrana
adecuado para el recuento de coliformes fecales en las aguas de estuario marina y. Brevemente, después
de la filtración de 100 ml de agua, los embudos de filtro deben enjuagarse dos veces con aprox. 20 ml de
PBS. El filtro se transfiere a continuación sobre MTEC agar y se incubaron durante 22-24 horas a 44,5 °
C en Ethyfoam. Todos, de color verde amarillo amarillo o amarillo-marrón colonias se cuentan como los
coliformes fecales. Sólo se cuentan las placas que tienen menos de 80 colonias. Sin embargo, el análisis
de las aguas ambientales no se cubrirá en detalle aquí, ya que los análisis de agua y ambientales son
realizados por la EPA de los EE.UU. ( 3 ) y la calidad de las aguas de captura de mariscos son
principalmente las responsabilidades de las autoridades de control de mariscos de cada Estado ( 20 ).
A. Preparación de la muestra
El uso de 10-12 mariscos, obtener 200 g de licor de mariscos y carne. Mezcla 2 min, con 200 ml
de fosfato estéril de agua de dilución tamponada o 0,5% de agua de peptona ( R97 ) para
producir una dilución 1:02 de la muestra. El análisis de la muestra de suelo debe comenzar
dentro de 2 minutos después de la mezcla. Hacer diluciones seriadas en el 0,5% de agua de
peptona estéril o tampón fosfato agua de dilución estéril.
B. NMP - Presunta y prueba confirmada de Coliformes
Utilice Lactosa Caldo ( M74 ) o lauriltriptosa caldo ( M76 ), en concentración natural en el
volumen de 10 ml. Para el análisis de NMP de 5 tubos, inocular los tubos 5 en cada dilución de
la siguiente manera:
Para cada uno de los 5 tubos, añadir 2 ml de homogenado mezclado (equivalente a 1 g de
mariscos).
Para cada uno de los 5 tubos, añadir 1 ml de la dilución 1:10 del homogeneizado (0,1 g
mariscos).
Para cada uno de los 5 tubos, añadir 1 ml de la dilución 1:100 de homogeneizado (0,01 g
mariscos).
12. Para cada uno de los 5 tubos, añadir 1 ml de la dilución 1:1000 de homogeneizado (0,001 g
mariscos).
Diluciones adicionales pueden ser necesarias para evitar resultados indeterminados. Incubar los
tubos a 35 ° C ± 0,5 ° C y siga las instrucciones en la sección 1.C y realizar pruebas Confirmado
como en 1.D anteriormente en "Método convencional de coliformes, coliformes fecales y E.
coli". Calcular NPF como se describe en la sección 1.D anteriormente, excepto que el análisis de
los mariscos especifica que la densidad de coliformes puede expresar como NMP por 100 g de
muestra en lugar de por g.
C. NMP - Presunta y prueba confirmada de coliformes fecales en los mariscos
Realice la prueba de presunción que se describe en la sección II. Para confirmar tubos positivos,
transferir un asa de tubos LST positivos de gas para el caldo EC y se incuba en un baño de agua,
cubierto al 44,5 ° ± 0,2 ° C durante 24 ± 2 horas. La producción de gas en la CE es una prueba
confirmada positiva para coliformes fecales. Calcular el NMP por 100 g de coliformes fecales
como se describe anteriormente para coliformes.
D. NMP - Método EC-MUG para determinar E.coli en carne de mariscos
El ensayo MUG de β-glucuronidasa (GUD) se ha descrito anteriormente para la detección de
E.coli en alimentos refrigerados y congelados también se puede utilizar para la prueba para
E.coli en carne de moluscos; pero con ligeras modificaciones. Esto es debido al hecho de que los
alimentos tales como carne de moluscos contienen actividad GUD naturales ( 32 ). Como
resultado, homogeneizado ostra inoculado directamente en tubos LST-MUG en la fase
presuntiva de la prueba de la MPN puede provocar falsas reacciones positivas de fluorescencia.
Por lo tanto, en el análisis de E.coli en carne de moluscos, se añade el reactivo MUG al medio
EC y se utiliza en la fase de confirmación del ensayo. Los tubos CE-taza, se incubaron a 44,5 ° C
± 0,2 ° C, se pueden utilizar en la fase de confirmación de un ensayo convencional NPF 5-tubo
para determinar los niveles de coliformes fecales en carne de moluscos, a continuación, mediante
el examen de tubos para fluorescencia bajo UV de onda larga, una E.coli NPF también se puede
conseguir fácilmente ( 32 ).
Vea la sección 1.A y 1.B anterior para los materiales y reactivos necesarios. Utilice preparado
comercialmente deshidratada EC-MUG, o preparar el medio añadiendo TAZA de caldo EC (0,05
g / L) ( M50 ). Varias fuentes de compuesto TAZA son adecuados: MarcorDevelopment Corp.,
Carlstadt, NJ; Biosynth International, Itasca, IL; Sigma Chemical Co., St. Louis, MO y Hach
Química, Loveland, CO Dispense 5 ml en nuevos tubos de vidrio borosilicato desechable (100 ×
16 mm) que contiene, nuevo vidrio borosilicato desechable Durham viales (50 × 9 mm) para la
recolección de gas . Esterilizar tubos de caldo EC-MUG a 121 ° C durante 15 minutos;
almacenar hasta 1 semana a temperatura ambiente o hasta un mes en condiciones de
refrigeración.
Lleve a cabo el 5 tubos NMP presuntivo y confirmada Prueba para Coliformes Fecales en
mariscos como se ha descrito anteriormente en la Sección 3, a excepción de utilizar tubos de EC-
MUG lugar de la CE para la prueba confirmada. Determinación de la fluorescencia en caldo CE-
13. MUG requiere el uso de tubos de control 3, uno inoculado con E.coli como control positivo; uno
con Enterobacteraerogenes (ATCC 13048) o K.pneumoniae como control negativo; y un tubo
sin inocular como EC-MUG medio de control por lotes. Inocular los controles positivos y
negativos en el momento en que se realizó la prueba confirmada e incubar los tubos a 44,5 ° C ±
0,2 ° C durante 24 h.
Leer la fluorescencia como se describe anteriormente en el ensayo LST-MUG. Tenga en cuenta
que algunos (<10%) E.coli son anaerogenic (gas-negativa), sino que debe ser MUG-positivos.
Incluir todos los tubos positivos de fluorescencia en el E. cálculos coli MPN. Determinar E.coli
MPN/100g de las mesas en el BAM (Apéndice 2) usando la combinación de tubos positivos de
fluorescencia en cada dilución.
NOTA: Si el análisis es determinar el cumplimiento con lo establecido E.coli límites, será
necesario para confirmar la presencia de E.coli en tubos positivos taza.
V. Análisis para E.coli en jugos cítricos
Análisis para E.coli se ha implementado para identificar jugos potencialmente contaminados o para la
verificación de la eficacia del sistema HACCP durante el procesamiento de jugos no pasteurizados (21
CFR Parte 120, vol. 66, No. 13, 19 de enero de 2001). El método estándar comúnmente utilizado para la
prueba para E.coli es la MPN sin embargo, no parece adecuado para las pruebas de jugo debido a la
acidez (pH 3,6 a 4,3) de jugos, que puede interferir con la prueba, además de que sólo permite para el
ensayo de 3,33 ml de muestra. A diferencia de la mayor parte E. coli métodos, que son ensayos de
enumeración, el siguiente método es una simple prueba de presencia / ausencia que puede examinar
volumen de 10 ml de jugos ( 34 , 35 ). Este ensayo, designado como Método modificado ColiComplete
(CC), es una modificación del método de la AOAC Oficial 992.30, que utiliza taza para la detección de
E. coli (véase la sección sobre el método LST-MUG para más detalles).
A. Equipo y materiales
1. Cubiertos baño de agua, con sistema de circulación para mantener la temperatura de 44,5
± 0,2 ° C.
El nivel del agua debe estar por encima del medio en tubos sumergidos.
2. Incubadora, 35 ± 0,5 ° C
3. Luz de onda larga UV [~ 365 nm], que no exceda 6 W.
B. Medios y reactivos:
1. Universal Preenrichment Caldo (UPEB) ( M188 ) o se puede comprar a partir de BD (#
223510)
2. Medio EC ( M49 )
3. ColiComplete discos (CC) (# 10800) - BioControl, Bellevue, WA
C. Preparación de la muestra, el enriquecimiento y el análisis
Realizar el ensayo por duplicado. Asépticamente, inocular porción de 10 ml de jugo en 90 ml de
UPEB e incubar a 35 ° C ± 0,5 ° C durante 24 h. Después del enriquecimiento, mezclar y
transferir 1 ml de cada caldo de enriquecimiento UPEB en 9 ml de caldo EC contiene un disco de
CC. Incubar los tubos de caldo de CE / cc a 45,5 ± 0,2 ° C en un baño de agua circulante for24 ±
2 h. Incluya un tubo inoculado con una TAZA (+) E. coli cepa como control positivo y otro con
14. K. pneumoniae o Enterobacteraerogenes (ATCC 13048) como control negativo. Examinar los
tubos en la oscuridad y bajo la luz ultravioleta de onda larga. La presencia de fluorescencia azul
en cualquiera de los tubos es indicativo de que E. coli está presente en la muestra. Nota: Los
discos de CC también contienen X-gal, que cuando se escinde por β-galactosidasa se produce un
color azul en o alrededor del disco. Esta reacción es análoga a la medición de la producción de
ácido / de gas de la fermentación de la lactosa, por lo tanto, la presencia del color azul es
indicativa de coliformes.
VI. Otros métodos para que enumera los coliformes y E. coli
Hay muchos otros métodos para la enumeración de coliformes y E. coli , incluyendo varias que utiliza
reactivos fluorogénicos como MUG u otros sustratos cromogénicos para la detección e identificación de
coliformes y presunto E. coli en los alimentos. Muchas de estas pruebas, como la película seca
rehidratablePetrifilm, la rejilla hidrofóbica de la membrana de filtro / método (HGMF / MUG) (MUG 13
), disco ColiComplete ( 16 ), Colilert (AOAC 991.15), han sido evaluadas por los estudios en
colaboración y adoptado de acción en primera o última como oficial por la AOAC. También hay muchas
modificaciones de los ensayos de filtración de membrana que se han desarrollado para la prueba de
coliformes, coliformes fecales y E. coli y algunos de éstos pueden ser útiles en la prueba de alimentos
tales como leche y bebidas, sino que se utilizan sobre todo para el agua, aguas ambientales, y el análisis
de las aguas de captura mariscos ( 5 , 7 , 20 , 22 , 23 , 31 ).
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