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HEMATOLOGIA
T.M. DANIEL A. SUAREZ AGUILAR
danielsuarez2005@gmail.com
HEMOGRAMA
ANALISIS
CUALITATIVO
MORFOLOGIA
CUANTITATIVO
CANTIDAD
El hemograma se define como el análisis cuantitativo y cualitativo de los componentes celulares de la sangre periférica.
COMPONENTES SANGRE PERIFERICA
SANGRE
CONECTIVO
ESPECIALIZADO
TEJIDO
CONFORMADO
MATRIZ – 55%
PLASMA
CELULAS – 45 %
HEMATIES
PLAQUETAS
LEUCOCITOS
44%
01%
TEJIDO
TRANSPORTE
• GASES
• NUTRIENTES
• SUSTANCIAS
DESECHO
REGULADORA
• TEMPERATURA
• PH
• EQUILIBRIO
HIDRICO
• EQUILIBRIO
ELECTROLITICO
HEMOSTASIA
• COAGULACION
• FIBRINOLISIS
PROTECTORA
• CELULAS
• SUSTANCIAS
FUNCION
TRANSPORTE
danielsuarez2005@gmail.com
PLAQUETAS
VASCULATURA
HUMORAL
CELULAR
TISULAR
HEMOSTASIA
SECUNDARIA
HEMOSTASIA
PRIMARIA PROTEÍNAS
PLASMÁTICAS
INHIBIDORES
NATURALES
FIBRINÓLISIS
HEMOSTASIA
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HEMOSTASIA
danielsuarez2005@gmail.com
REGULADORA
danielsuarez2005@gmail.com
DEFENZA
DEFENZA
PLASMA
PROTEINAS
PLASMATICAS
ALBUMINA
Transporta Lipidos,Hormonas
esteroideas;contribucion principal de la
concentracion osmotica plasma
60%
GLOBULINAS
Transporta Iones,Lipidos,Hormonas
;funcion inmunitaria
35%
FIBRINOGENO
Comnponente Esencial Coagulacion
04%
PROTEINAS
REGULADORAS
Enzimas,Hormonas,Proteinas
Coagulacion
01%
COMPOSICION
PLASMA
AGUA
Transporta moléculas organica e
inorgánicas células,elementos
celular y calor
92%
PROTEINAS
PLASMATICAS 7%
OTROS SOLUTOS 1%
OTROS SOLUTOS
ELETROLITOS
Composicion ionica del Liquido extracelular normal
0.9%
NUTRIENTES
ORGANICOS
Se usan para la Produccion de
ATP,crecimiento,Mantenimiento Celulas
GLUCOSA 0.6%
0.7%
LIPIDOS 0.1%
DESECHOS ORGANICOS
Urea,Acido Urico Creatinina Bilirrubina, etc.
0.2%
ELECTROLITOS
NUTRIENTES/DESECHOS
ORGANICOS
ELECTROFORESIS PROTEINAS
Ánodo
(+)
Pre-
Albúmina Albúmina Alfa-1 Alfa-2
Beta
B-1 B-2
Gamma
Cátodo
( - )
Punto de
aplicación
Componente Concentración Concentración
Prot. Totales 6.0 a 8.0 g/dL 100.0 %
Pre-Albúmina .016 a .040 g/dL 16.0 a 40.0 mg/dL
Albúmina 3.2 – 5.2 g/dL 52 – 65 %
Globulinas Alfa-1 0.1 – 0.3 g/dL 2 – 5 %
Globulinas Alfa-2 0.4 – 1.0 g/dL 7 – 13 %
Globulinas Beta 0.5 – 1.1 g/dL 8 – 14 %
Globulinas Gamma 0.8 – 1.8 g/dL 12 – 23 %
DISTRIBUCION AGUA CORPORAL
HEMATOPOYESIS
T.M. DANIEL A. SUAREZ AGUILAR
danielsuarez2005@gmail.com
T.M. DANIEL A. SUAREZ AGUILAR
danielsuarez2005@gmail.com
HEMATOLOGIA Y
CITOLOGIA
SANGUINEA
T.M. DANIEL A. SUAREZ
AGUILAR
danielsuarez2005@gmail.com
FASES HEMATOPOYESIS
danielsuarez2005@gmail.com
PROCESOS HEMATOPOYESIS
MADURACION
DIFERENCIACION
PROLIFERACION
MORFOLOGIA
MITOSIS
FUNCION
ENDOMITOSIS/PLOIDIA
HEMATOPOYESIS
ENDOMITOSIS/PLOIDIA
HEMATOPOYESIS
25
ERITROPOYESIS
LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL
DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
ERITROPOYESIS
Rafael Sirera
CAMBIOS CELL
NUCLEARES CITOPLASMATICOS
TAMAÑO: Disminución COLOR: Basofilo Acidofilo
CROMATINA: Condensación HEMOGLOBINOGENESIS
Inicia : PE
Intensifica : EP
Culmina: reticulocito
COMPARTIMIENTOS FUNCIONALES
CELL
PROGENITORA
CELL
PRECURSORA
CELL
CIRCULANTE
CULTIVO MEDULA OSEA SP
GEMM BFU CFU PE EB EP EO R R
3 – 5 dias
1-2 dias 24 hr
GR GR
Morfológicamente Indiferenciada
Morfológicamente
Diferenciada
Stem cell
Hemocytoblast
Proerythro-
blast
Early
erythroblast
Late
erythroblast Normoblast
Phase 1
Ribosome
synthesis
Phase 2
Hemoglobin
accumulation
Phase 3
Ejection of
nucleus
Reticulo-
cyte
Erythro-
cyte
Committed
cell
Developmental pathway
PROLIFERACION GR
• 250 000 000 000 / 24 horas
• 10 416 000 000 / 1 hora.
• 173 000 000 eritrocitos / minuto.
• 2 883 000 eritrocitos / segundo.
danielsuarez2005@gmail.com
29
CÉLULAS DE LA SERIE ERITROPOYÉTICA
CÉLULA
TAMAÑO
(µM)
NÚCLEO* Y
MITOSIS
NUCLÉOLO
OS
CITOPLASMA*
MICROFOTOGRAFIA
ELECTRÓNICA.
Proeritroblasto
14 - 19
Redondeado, color
burdeos; fina red
de cromatina;
mitosis.
3 - 5
Gris-azul,
agregados en
periferia.
RER poco desarrollado;
numerosos polisomas,
escasas mitocondrias;
ferritina.
Eritroblasto basófilo
12 - 17 Igual al anterior. 1 a 2?
Coloración rosada
poco intensa.
Semejante al ant.
Presencia de
hemoglobina.
Eritroblasto
policromatófilo
12 - 15
Redondeado;
tinción intensa; red
de cromatina muy
gruesa, mitosis.
Ninguno
Rosa amarillento
sobre un trasfondo
azulado.
Similar al ant. > cantidad
de hem
Eritroblasto
Ortocromatófilo
8 - 12
Pequeño,
redondo, denso;
excéntrico o en
proceso de
expulsión.
Ausencia de
mitosis.
Ninguno
Rosa en un
trasfondo azulado
poco intenso
Escasas mitocondrias y
polisomas, abundante hem
Reticulocito
7 - 8 Ninguno Ninguno
Semejante a
eritrocitos maduros
Grupos de ribosomas; cél
rellena de hem
Eritrocito
7.5 Ninguno Ninguno Citoplasma rosado Únicamente hem
PROERITROBLASTO
T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
30
TAMAÑO 14-22
NU
CL
EO
FORMA Redonda / Lig. Ovalado
R- N/C Muy alta
5:1
8:1
COLOR Rojo Purpura
CROMATINA
Fina y delicada
Pequeños grupos
Paracromatina Escasa
NUCLEOLO
1-2 prominentes
Color Azulado
C
I
TO
PL
AS
MA
COLOR
Azul Intenso
Basofilo
CONTENIDO
Aparato Golgi
Mitocondrias
Halo perinuclear
ligeramente azul
1
ERITROBLASTO BASOFILO
Danielsuarez2005@hot
mail.com
T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
31
TAMAÑO 12 - 18
N
U
C
L
E
O
FORMA Redonda Central
R- N/C Alta
4:1
6:1
COLOR
Purpura intercaldo con
areas claras
CROMATINA
Gruesa y algo
Condensado
NUCLEOLO 0 - 1
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR
Azul Intenso
Hiperbasofilo
CONTENIDO
Aparato Golgi produce
área cerca núcleo
ligeramente azul.
Muchas Mitocondrias
ERITROBLASTO
POLICROMATICO
Danielsuarez2005@hot
mail.com
T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
32
TAMAÑO 10 - 14
N
U
C
L
E
O
FORMA
Redonda
Central/Excentrico
R- N/C
Baja
(25%)
1:1
4:1
COLOR Purpura Rojo
CROMATINA
Gruesa y Condensado
Paracromatina definida
apariencia “Tablero
damas”
NUCLEOLO Ninguna
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR
Rosa azulado
Gris azulado
Acidofilo
CONTENIDO
Halo peri nuclear
visible
Incremento Hb
Disminución RNA
ERITROBLASTO
ORTOCROMATICO
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T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
33
TAMAÑO 8 - 11
N
U
C
L
E
O
FORMA
Redonda Central/Excentrico
Fragmentado - Extruido
R- N/C Muy Baja
1:4
1:2
COLOR Purpura azul
CROMATINA
Condensado y Homogenea
(Picnotico)
NUCLEOLO Ninguna
C
I
T
O
PL
AS
M
A
COLOR
Rosado
Rosado naranja con indicios
de azul
Muy Acidofilo
CONTENIDO Produccion Hb incrementado
RETICULOCITO
Danielsuarez2005@hot
mail.com
T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
34
TAMAÑO 8 - 9
NU
CL
EO
FORMA
Ninguna
R- N/C
COLOR
CROMATINA
NUCLEOLO
C
I
TO
PL
AS
MA
COLOR
Rosado con un tinte azulado
+-Basofilo
CONTENIDO
Remanentes Ap. Golgi y
mitocondrias
Residual de RNA
Produccion Hb incrementado
ERITROCITO
35
TAMAÑO 7 – 7.5
NU
CL
EO
FORMA
Ninguna
R- N/C
COLOR
CROMATINA
NUCLEOLO
C
I
TO
PL
AS
MA
COLOR
Rosado
Central Palido 1/3 de la Cell
Acidofilo
CONTENIDO NO mitocondrias
HEMATIES
danielsuarez2005@gmail.com
PRUEBAS
LABORATORIO
• RECUENTO HEMATIES
• HEMOGLOBINA
• HEMATOCRITO
• CONSTANTES CORPUSCULARES
T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
37
LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL
DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
RECUENTO HEMATIES
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FUNDAMENTO
El recuento de HEMATIES consiste en CONTAR el número de ellos
en 1 mm3 de SANGRE, realizando DILUCIÓN de la sangre con una
SOLUCIÓN ISOTÓNICA (mantiene la morfología de los eritrocitos).
La técnica se basa en diluir la sangre con líquido ISOTONICO ( HAYEM)
en porciones exactas.
El líquido de Hayem es una solución compuesta por sales, las cuales
hacen que la solución obtenga el grado de isotónica permitiendo que los
eritrocitos se mantengan completos.
HAYEM
NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V
VOLUMEN TOTAL
ML
Tº
CONSERVACI
ÓN
Hayem
Cloruro mercúrico 0.25%
200 ml T°A
Sulfato de sodio 2.5%
Cloruro de sodio 0.5%
Agua destilada 200 ml
Preparación Mezclar y conservar
CONTROLES
CONTROL VALOR REFERENCIA VOLUMEN
TEMPERATURA
CONSERVACIÓN
ESTABILIDAD
BAJO 106/uL 2.44 ± 0.18 3 ml 4°C 1 mes
NORMAL 106/uL 4.68 ± 0.24 3 ml 4°C 1 mes
ALTO 106/uL 5.88 ± 0.30 3 ml 4°C 1 mes
MATERIALES
PROCEDIMIENTO 1
DILUCION 1/200
1. DILUYENTE
Colocar en un tubo de
ensayo de 12 x 75,
995 ul de la solución
HAYEM.
2. MUESTRA
Añadir al mismo tubo de
ensayo 5 ul de
SANGRE total y
homogenizar. (Dilucion
1/200)
3. REPOSAR 1 minuto
a temperatura ambiente.
danielsuarez2005@gmail.com
PROCEDIMIENTO 2
CARGADO CAMARA NEUBAUER
1. HOMOGENIZAR
previamente antes de
dispensar a la cámara de
neubauer.
2. COLOCAR la lámina
cubreobjetos sobre la
CÁMARA DE
NEUBAUER,
3. CARGAR
aproximadamente con 10
ul del preparado y
4. REPOSAR por 2
minutos.
PROCEDIMIENTO 3
LECTURA MICROSCOPIO
1. LECTURA
Proceder a su respectiva
lectura con el OBJETIVO
de 40X.
2. ENFOCAR El campo de
observación en las
cuadriculas R1, R2, R3,
R4, y R5 de la cámara de
Neubauer.
R1 R2
R3
R4
R5
PROCEDIMIENTO 4
SUPERIOR IZQUIERDO : R1
40X
R1
PROCEDIMIENTO 4
SUPERIOR DERECHO : R2
40X
R2
PROCEDIMIENTO 4
INFERIOR DERECHO : R3
40X
R3
PROCEDIMIENTO 4
INFERIOR IZQUIERDO : R4
40X
R4
PROCEDIMIENTO 4
CENTRAL : R5
40X
R5
PROCEDIMIENTO 4
REGLAS CONTEO
40X
2. Si la superficie es mayor o igual al 50% de la célula esta dentro de la
línea limítrofes del cuadrante se cuenta
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
1. Contar los eritrocitos en un área de 0,2 mm2 utilizando las cuadriculas R1, R2,
R3, R4 y R5, aplicando las regla del SI y del NO. donde basta que toque la línea
para considerarlo o no dependiendo la línea que toca
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c1
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
40X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c2
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
40X
danielsuarez2005@gmail.com
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c3
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
40X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c4
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
40X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO
40X
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
CALCULOS - FORMULA
RGR =
N
X 10 X 200 X 400
80
GR/mm3
16 X 5 16 X 25
CALCULOS - FORMULA
RGR =
N
X 10 X 200 X 400
80
GR/mm3
CALCULOS - FORMULA
RGR =
N
X 10 X 200 X 400
80
GR/mm3
MP/D PROPORCIÓN (1/N) VOLUMEN/ uL
SANGRE TOTAL 1
1/200
5
HAYEM 199 995
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VALORES REFERENCIALES
HEMOGLOBINA
danielsuarez2005@Gmail.com
FUNDAMENTO
Los eritrocitos son lisados por acción de un AGENTE TENSIOACTIVO
presente en el reactivo, liberando su contenido de hemoglobina en la solución.
La HEMOGLOBINA liberada es OXIDADA a
METAHEMOGLOBINA por el FERRICIANURO, siendo esta última
convertida en CIANOMETAHEMOGLOBINA por la presencia de
CIANURO. La absorbancia de la cianometahemoglobina es medida a
540 nm, siendo la intensidad de color obtenida, directamente proporcional
a la concentración de hemoglobina en la muestra.
FUNDAMENTO
[Fe(ΙΙΙ)(CN)6]3-
HbFe (ΙΙ) HbFe (ΙΙΙ)
[Fe(ΙΙΙ)(CN)6]4-
KCN
KCN
HEMOGLOBINA METAHEMOGLOBINA
FERRICIANURO
CIANURO
CIANOMETAHEMOGLOBINA
DRABKIN
NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V
VOLUME
N TOTAL
ML
Tº
CONSERVA
CIÓN
Reactivo Drabkin
(CONCENTRADO)
Bicarbonato de sodio 1.00 gr
1000
ml
T°A
Cianuro de potasio 0.05 gr
Ferricianuro de potasio 0.20 gr
Agua destilada 1000 ml
Preparación
Mezclar todo y guardar en frasco oscuro protegido de la
luz. Estable un mes.
NOMBRE
PROPORC
IÓN
(1/N) VOLUMEN/ML
TEMPERATU
RA
CONSERVACI
ÓN
ESTABILIDAD
R1 DRABKIN 1
1/10
10 ml.
2 - 8 ºC. 1 HORA
R2 AGUA
DESTILADA
9 90 ml
Preparación
Agregar a una probeta o fiola de 100 ml , 10 ml del Reactivo
de Drabkin y luego completar con agua destilada hasta la
marca de 100
SOLUCION TRABAJO
SOLUCION MADRE
ESTANDAR HEMOGLOBINA
15 – 18 g/dL
ESTANDAR
PROCESO
ESTANDAR
LECTURA
danielsuarez2005@gmail.com
CONTROLES
CONTROL VALOR REFERENCIA VOLUMEN
TEMPERATURA
CONSERVACIÓN
ESTABILIDAD
BAJO g/dL 6.1 ± 0.4 3 ml 4°C 1 mes
NORMAL g/dL 13.8 ± 0.6 3 ml 4°C 1 mes
ALTO g/dL 19.2 ± 0.8 3 ml 4°C 1 mes
MATERIALES
PROCEDIMIENTO 1
Drabkin+Muestra/Estandar
1. REACTIVO
Agregar en cada tubo de ensayo
de 12x75 , respectivo 1500 ul del
reactivo DRABKIN diluido 1/10.
2. MUESTRA/ESTANDAR
Luego añadir al mismo tubo, 6 ul
de sangre total y homogenizar por
inversión
PROCEDIMIENTO 2
LECTURA
3.REPOSAR
5 Minutos a
temperatura ambiente.
4.LECTURA
Luego del reposo
proceder a su
respectiva lectura en el
ESPECTROFOTÓMETRO
MANUAL (Anotar las
absorbancias y realizar
el cálculo respectivo )o
SEMIAUTOMATIZADO
(Anotar el Resultado) a
540 nm.
CALCULOS - FORMULA
HB =
Lectura D
X S
Lectura S
g/dL
CALCULOS - ejemplo
g/dL
FORMULA
Factor = 18/Absorbancia Standar
Hb (g/dL)=Factor x Absorbancia desconocida
CALCULOS
Factor = 18/0.564 = 31.91
Hb (g/dL) = 31.91 x 0.410 = 13.08
VALORES REFERENCIALES
HEMATOCRITO
danielsuarez2005@Gmail.com
danielsuarez2005@gmail.com
FUNDAMENTO
Es la RELACIÓN que
existe entre el VOLUMEN
que ocupa toda la
MASA CELULAR
HEMÁTICA y el
VOLUMEN TOTAL
DE SANGRE. Se
expresa como un tanto
por ciento del volumen
total.
FUNDAMENTO
CAPILARES
Caracteristicas:
•Longitud: 75 mm +/- 0.5 mm
•Diámetro interno: 1.15 +/- 0.05 mm
•Diametro externo: 1.55 +/- 0.05 mm
•Espesor: 0.40 mm
•Aforo o volumen 75 ul
•Material del capilar: Borosilicato
•Aditivo: no contiene
CAPILARES
Caracteristicas:
•Código en la parte superior del capilar de
color rojo.
•Longitud: 75 mm +/- 0.05 mm
•Diametro interno: 1.15 +/- 0.05 mm
•Diámetro externo: 1.55 +/- 0.05 mm
•Espesor: 0.40 mm
•Aforo o volumen 75 ul
•Material del capilar: Borosilicato
•Aditivo: Heparina de sodio (Revestimiento
interno con heparina sódica (Na-Heparin) 4
U.I. de Heparina
SELLADOR
Caracteristicas:
•Cera especial Segillum.
•Capa homogénea que garantiza
un cierre totalmente uniforme del
tubo capilar.
•2 x 24 posiciones numeradas.
•Fácilita el cierre y transporte de
las muestras
PROCEDIMIENTO 1
Llenado Capilar
1. Homogenizar la
sangre total 8 veces
por inversión
suavemente.
2. Llenar el capilar azul
del tubo con EDTA
(Sangre venosa)
danielsuarez2005@gmail.com
PROCEDIMIENTO 2
Llenado Capilar
1. Limpiar con papel
toalla los bordes sin
tocar la punta.
2. Sellar con plastilina el
extremo en contacto
con la sangre, con la
plastilina
PROCEDIMIENTO 3
Sellado Capilar
1. Y para mayor seguridad
taponar con parafina.
2. Colocar los tubos capilar en
las ranuras del cabezal de
la centrífuga, el extremo del
tubo que se ha taponado
con plastilina y parafina
deberá apuntar hacia fuera,
lejos del centro. Verificar
que el número de la ranura
corresponda al número de
la muestra.
PROCEDIMIENTO 3
Centrifugado Capilar
1. Asegurar con la Tapa evitando
mover los capilares
2. Centrifugar a 10 000 rpm. por
cinco minutos
3. Al finalizar la centrifugación cada
uno de los tubos tendrá en su
interior tres capas:
– En la parte superior, una
columna de plasma (P).
– A la mitad, una capa delgada
de glóbulos blancos (GB/Pq).
– En la parte inferior y hasta el
fondo, una columna de glóbulos
rojos (GR).
LECTURA
TABLA/REGLA
a) CON LA TABLA
Luego de este procedimiento realizaremos la
lectura en el CRITOCAPS, colocando la base
de la columna de glóbulos rojos en la escala 0 y
el plasma en la escala 100.
El hematocrito es la base y el tope de la
columna de glóbulos rojos como podemos
observar en el siguiente esquema.
b) CON LA REGLA
Con una regla medir el volumen total,
empezando desde la base de la columna de
glóbulos rojos hasta el tope del plasma. (L1)
como nos muestra el esquema.
Luego medir la base y el tope de la columna de
glóbulos rojos. (L2) como nos muestra el
esquema.
CALCULOS - FORMULA
HTO =
CH
X 100
ST
%
CALCULOS REGLA
CH
25 mm
ST
54 mm
VALOR OBTENIDO
46%
CALCULOS - FORMULA
%
LECTURA TABLA
CALCULOS - ejemplo
g/dL
FORMULA
Factor = 18/Absorbancia Standar
Hb (g/dL)=Factor x Absorbancia desconocida
CALCULOS
Factor = 18/0.564 = 31.91
Hb (g/dL) = 31.91 x 0.410 = 13.08
VALORES REFERENCIALES
CONSTANTES CORPUSCULARES
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VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO
FORMULA
V.C.M. =
HTO
X 10
GR/mm3
fL
• Se mide en femtolitros.
• Se utiliza principalmente para valorar anemias.
• Microciticas o Macrociticas
• La Muestra después de 4 horas / Tº Ambiente
aumenta el VCM
• La Muestra es estable por 48 horas / 4ºC
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VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO
VALORES REFERENCIALES
fL
HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIO
FORMULA
H.C.M. =
HB
X 10
GR/mm3
uL
• Se expresa en picogramos
• Hipocrómica o normocrómica
• Se eleva falsamente por
Hiperlipidemias, Paraproteinas,
Crioaglutininas
VALORES REFERENCIALES
HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIO
VALORES REFERENCIALES
uL
CONCENTRACION HEMOGLOBINA
CORPUSCULAR MEDIO
FORMULA
C.H.C.M. =
HB
X 100
HTO
%
• Indica la cantidad de hemoglobina contenida
en 100 ml de glóbulos rojos.
• Necesario Clasificar Anemia según Wintrobe
• El grado de disminución se relaciona con la
cantidad de células Hipocromicas
%
CLASIFICACION MORFOLOGICA
DE ACUERDO WINTROBE
CONCENTRACION HEMOGLOBINA
CORPUSCULAR MEDIO
CLASIFICACION WINTROBE
+
RELACION DE LA HIPOCROMIA DEL EXTENDIDO
SANGRE PERIFERICA Y LA CHCM
CONCENTRACION HEMOGLOBINA
CORPUSCULAR MEDIO
HIPOCROMIA SP/CHCM
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OTROS INDICES CELL
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ANCHO DISTRIBUCIÓN
ERITROCITOS - RDW
Expresa el grado de variación en el volumen eritrocitario.
Complementa el VCM
Clasifica en homogenea/heterogenea
Valor normal: 11.5-14.5%
RDW : 11.5-15.1 %
CRITERIO CLASIFICACION MORFOLOGICAS ANEMIAS SEGÚN
BESSMAN
ANCHO DISTRIBUCIÓN
ERITROCITOS RDW
DESVIACION
IZQUIERDA
HISTOGRAMA ERITROCITOS
DESVIACION
DERECHA
• VCM disminuido
• Microcitosis
• Esquistocitos
• Macroplaquetas
• VCM aumentado
• Macrocitosis
• Macrovalocitos
• Crioaglutininas
RECUENTO RETICULOCITOS
RET
• Fluorocromo que se une al ARN de los reticulocitos,
• Evalúa actividad eritropoyetica de la M.O.
• Constituyen entre 1% y 2% de todos eritrocitos
circulantes
• Aumento de reticulocitos se consideran que la anemia
es regenerativas
• Disminución de reticulocitos la anemia es
arregenerativa
• Las muestras hemolíticas disminuyen el recuento de
reticulocitos
danielsuarez2005@gmail.com
FRACCION RETICULOCITOS
INMADUROS VIR
• VlR: 3% a
15,9%
• Indicador del
aumento de la
eritropoyesis,
• útil después de
la quimioterapia,
• Evalua la
actIvidad M.O
• Falsas
elevaciones en
leucemias
HEMOGLOBINA RETICULOCITARIA
CHr
• Corresponde al grado de hemoglobinización de los reticulocitos
circulantes.
• VlR: 24,1 pg a 35,8 pg
• Indica una inadecuada disponibilidad de Hierro para una optima
Eritropoyesis
• útil para evaluar depósitos de hierro en los pacientes con
enfermedad renal que reciben eritropoyetina.
• Detección de doping por eritropoyetina
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T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
103
HEMATIES
LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL
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GLOBULOS ROJOS
También llamados eritrocitos, son "células" sanguíneas.
FUNCIÓN: Transportan el oxigeno desde los pulmones hacia los diferentes
tejidos del organismo.
VALORES ALTOS:
Problemas respiratorios.
Personas fumadoras
Deshidratación
VALORES BAJOS:
Anemia
Hemorragia
Enfermedad de la médula
ósea.
VALORES NORMALES:
Glóbulos rojos hombre: 4,5-5 millones/mm3
Glóbulos rojos mujer: 4-4,5 millones/mm3
«HEMATÍES O ERITROCITOS»
DEL TAMAÑO DE LA COLORACIÓN DE LA FORMA
• Anisocitosis
Diferentes
tamaños.
• Microcitosis
Menor tamaño.
• Macrocitosis
Mayor tamaño.
• Megalocitosis
Grandes y
ovalados.
• Hipocromía
C.H.C.M.
disminuida  30%
• Hipercromía
Esferocito,Hb
concentrada
• Poiquilocitosis
Distintas formas
• Ovalocitosis
Forma ovalada
• Eliptocitosis
Forma elíptica
• Esferocitosis
Forma esférica
• Esquizocitosis
Fragmentos de
G.R.
HEMATOCRITO
El hematocrito es el porcentaje del volumen total de la sangre compuesta por
glóbulos rojos.
VALORES ALTOS DE
HEMATOCRITO
Policitemia
Cardiopatía
congénita.
Deshidratación
Hipoxia
Fibrosis pulmonar
VALORES BAJOS DE
HEMATOCRITO
Anemia
Leucemia .
Desnutrición.
Sobre hidratación
Destrucción de los
glóbulos rojos.
VALORES NORMALES:
Hematocrito hombre:42-52%
Hematocrito mujer: 37-48%
HEMOGLOBINA
Es una proteína encargada de llevar el oxígeno y que da el color rojo a la
sangre.
CUALITATIVAS:
Defectos genéticos
Alteraciones de la
combinación
CUANTITATIVAS:
Anemia
Poliglobulia.
VALORES NORMALES:
Hemoglobina hombre: 13-18 g/dL
Hemoglobina mujer:12-16 g/dL
CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA CORPUSCULAR
MEDIA (C.H.C.M)
Es el índice que
valora la
concentración de
hemoglobina que
lleva cada hematíe;
es decir relaciona la
cantidad de
hemoglobina que
lleva el hematíe
con su volumen.
POR EJEMPLO:
Cuando la concentración
de hemoglobina
disminuye aparecen las
anemias.
VALORES
NORMALES:
33-37 pq
EL VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO
(V.C.M)
Es el valor que refleja el
tamaño de los hematíes.
ALTERACIONES
VCM alto indica
que los glóbulos
rojos son
grandes.
Déficit de
vitamina B12 o
de ácido fólico,
Patologías del
hígado,
Consumo
elevado de
alcohol
VCM bajo indica
que los glóbulos
rojos son
pequeños.
Talasemia
Déficit de hierro
VALORES
NORMALES
86-98 micromm3
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HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA (H.C.M)
Indica la cantidad de hemoglobina que hay
en cada glóbulo rojo. En cierto modo nos
está diciendo lo 'rojos' que son los hematíes.
ALTERACIONES
HCM
Está aumentado .
Déficit de vitamina
B12,
Déficit de ácido
fólico
HCM
Está disminuido .
Talasemia
Déficit de hierro
VALORES
NORMALES:
27-32 pg
LEUCOPOYESIS
LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL
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LEUCOPOYESIS
GRANULOPOYESIS
CELL
PROGENITORA
CELL
PRECURSORA
CELL
CIRCULANTE
CELULA MEDULA OSEA SP
NEUTROFILO MB PM M mM B S
GRANULOS 1º 0 E A E M 0 0 0
GRANULOS 2º 0 0 AZ-RS RS-VI
EOSINOFILO MB PM M mM B S
GRANULOS 1º 0 E A E M 0 0 0
GRANULOS 2º 0 0 RJ-NJ NJ-RJ
BASOFILO MB PM M mM B S
GRANULOS 1º 0 E A E M 0 0 0
GRANULOS 2º 0 0 AP AN AZ-NG
GRANULOPOYESIS
MIELOBLASTO PROMIELOCITO MIELOCITO METAMIELOCITO BANDA SEGMENTADO
MB PM M mM B S
MIELOBLASTO
115
TAMAÑO 15 - 20
N
U
C
L
E
O
FORMA
Redonda / Lig.
Ovalado
R- N/C Muy alta 4:1
COLOR Purpura Rojizo
CROMATINA Delicada y dispersa
NUCLEOLO 2-3
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR
Azul Intenso o pàido
Mas claro adyacente
al nucleo
Basofilo
CONTENIDO
No gránulos o
vacuolas
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PROMIELOCITO
116
TAMAÑO 20 - 25
N
U
C
L
E
O
FORMA
Redonda / Ovalado
Central - Excentrico
R- N/C alta 2:1
COLOR Purpura
CROMATINA
Relativamente Fina
poniendose cada vez
mas gruesa
NUCLEOLO
2-3 variando de visibles
a indistinguibles
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR
Azul
Mas claro adyacente al
nucleo
Basofilo
CONTENIDO
Pocos o muchos
granulos primarios color
azul oscuro o azul
rojiso
MIELOCITO NEUTROFILO
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T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
117
TAMAÑO 20 - 25
N
U
C
L
E
O
FORMA
Redonda / Ovalado
Aplanado o Endido en
un lado
R- N/C Baja
3:1
3:2
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA Presenta mas tosca
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:0.3 um
Numero Variable de
granulos inespecificos
Aparecer Pequeños
granulos especificos
rosado o rojizo
junto a el núcleo luego
en todo el citoplasma
MIELOCITO EOSINOFILO
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ANGEL
118
TAMAÑO 20 - 25
N
U
C
L
E
O
FORMA
Redonda / Ovalado
Aplanado o Endido en
un lado
R- N/C Baja
3:1
3:2
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA Presenta mas tosca
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.2-1.0 um
Numerosos grandes
Marron Naranja
Azul naranja
MIELOCITO BASOFILO
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ANGEL
119
TAMAÑO 20 - 25
N
U
C
L
E
O
FORMA
Redonda / Ovalado
Aplanado o Endido en
un lado
R- N/C Baja
3:1
3:2
COLOR Morado
CROMATINA Presenta mas tosca
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.5-1.5 um
Pocos granulos
grandes
Purpura azulano
Negro azulado
METAMIELOCITO NEUTROFILO
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ANGEL
120
TAMAÑO 10 - 15
N
U
C
L
E
O
FORMA
Ariñonado Tipico y
Ligeramnete Endido
R- N/C Baja
7:3
1:1
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA Gruesa y azul negruzco
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.3 um
Rosado o Azul rojizo
METAMIELOCITO EOSINOFILO
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ANGEL
121
TAMAÑO 10 - 15
N
U
C
L
E
O
FORMA
Ariñonado Tipico y
Ligeramnete Endido
R- N/C Baja
7:3
1:1
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA Gruesa y azul negruzco
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.2-1.0 um
Naranja brillantes
Rojisos
METAMIELOCITO BASOFILO
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ANGEL
122
TAMAÑO 10 - 15
N
U
C
L
E
O
FORMA
Ariñonado Tipico y
Ligeramnete Endido
R- N/C Baja
7:3
1:1
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA Gruesa y azul negruzco
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.5-1.5 um
AZUL OSCURO
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BANDA NEUTROFILO
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ANGEL
123
TAMAÑO 9 - 12
N
U
C
L
E
O
FORMA
Notablemente
indentado
R- N/C Baja
1:2
1:1
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA Gruesa y azul negruzco
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.3 um
Rosado o Azul rojizo
BANDA EOSINOFILO
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ANGEL
124
TAMAÑO 9 - 12
N
U
C
L
E
O
FORMA
Notablemente
indentado
R- N/C Baja
1:2
1:1
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA Gruesa y azul negruzco
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.2-1.0 um
Naranja brillantes
Rojisos
BANDA BASOFILO
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T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
125
TAMAÑO 9 - 12
N
U
C
L
E
O
FORMA
Notablemente
indentado
R- N/C Baja
1:2
1:1
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA Gruesa y azul negruzco
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.5-1.5 um
AZUL OSCURO
NEUTROFILO SEGMENTADO
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T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
126
TAMAÑO 9 - 12
N
U
C
L
E
O
FORMA
3 – 5 Lobulos unidos
filamento cromatina
R- N/C Baja
1:3
1:5
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA
Completamente
condensada
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.3 um
Uniformente
distribuidos
Rosado o Violeta
rosado
EOSINOFILO SEGMENTADO
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ANGEL
127
TAMAÑO 9 - 12
N
U
C
L
E
O
FORMA
2 –3 Lobulos unidos
filamento cromatina
R- N/C Baja
1:3
1:5
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA
Completamente
condensada
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.2-1.0 um
Naranja brillantes
Rojisos
BASOFILO SEGMENTADO
Danielsuarez2005@hot
mail.com
T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL
ANGEL
128
TAMAÑO 9 - 12
N
U
C
L
E
O
FORMA
2 Lobulos unidos
filamento cromatina
Cubierto granulos
R- N/C Baja
1:3
1:5
COLOR Purpura oscuro
CROMATINA
Completamente
condensada
NUCLEOLO Ninguno
C
I
T
O
P
L
A
S
M
A
COLOR Azul Rosado
CONTENIDO
Granulos:
0.5-1.5 um
AZUL OSCURO
MONOCITOPOYESIS
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LINFOPOYESIS
PRUEBAS
LABORATORIO
LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL
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• RECUENTO LEUCOCITOS
• FORMULA DIFERENCIAL
RECUENTO LEUCOCITOS
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FUNDAMENTO
El recuento de LEUCOCITOS consiste en CONTAR el número de
ellos en 1 mm3 de SANGRE, realizando DILUCIÓN de la sangre con
una SOLUCIÓN HIPOTONICA (mantiene la morfología de los
Leucocitos).
La técnica se basa en diluir la sangre con líquido HIPOTONOCA ( TURK)
en porciones exactas.
El ÁCIDO ACÉTICO produce lisis de los eritrocitos sin alterar a los
leucocitos. El VIOLETA DE GENCIANA tiñe el núcleo de los
leucocitos para que estos puedan observarse mejor. El violeta de genciana
puede ser sustituido por azul de metileno.
TURCK
NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V
VOLUMEN
TOTAL
ML
Tº
CONSERVAC
IÓN
TURCK
Acido glacial acético 2,0 ml
100 ml T°A
Violeta de genciana 1,0 ml
Agua destilada 100 ml
Preparación Mezclar los reactivos y guardar en frasco ámbar.
CONTROLES
CONTROL VALOR REFERENCIA VOLUMEN
TEMPERATURA
CONSERVACIÓN
ESTABILIDAD
BAJO 103/uL 2.0 ± 0.5 3 ml 4°C 1 mes
NORMAL 103/uL 7.7 ± 1.0 3 ml 4°C 1 mes
ALTO 103/uL 20.4 ± 2.5 3 ml 4°C 1 mes
MATERIALES
PROCEDIMIENTO 1
DILUCION 1/20
1. DILUYENTE
Colocar en un tubo de
ensayo de 12 x 75,
190 ul de la solución
TURCK.
2. MUESTRA
Añadir al mismo tubo de
ensayo 10 ul de
SANGRE total y
homogenizar. (Dilucion
1/20)
3. REPOSAR 1 minuto
a temperatura ambiente.
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PROCEDIMIENTO 2
CARGADO CAMARA NEUBAUER
1. HOMOGENIZAR
previamente antes de
dispensar a la cámara de
neubauer.
2. COLOCAR la lámina
cubreobjetos sobre la
CÁMARA DE
NEUBAUER,
3. CARGAR
aproximadamente con 10
ul del preparado y
4. REPOSAR por 3 - 5
minutos.
PROCEDIMIENTO 3
LECTURA MICROSCOPIO
1. LECTURA
Proceder a su respectiva
lectura con el OBJETIVO
de 10X.
2. ENFOCAR El campo de
observación en las
cuadriculas L1,L2.L3 Y
L4 de la cámara de
Neubauer.
L1 L2
L3
L4
PROCEDIMIENTO 4
SUPERIOR IZQUIERDO : L1
10X
L1
PROCEDIMIENTO 4
SUPERIOR DERECHO : L2
L2
10X
PROCEDIMIENTO 4
INFERIOR DERECHO : L3
L3
10X
PROCEDIMIENTO 4
INFERIOR IZQUIERDO : R4
L4
10X
PROCEDIMIENTO 4
REGLAS CONTEO
10X
2. Si la superficie es mayor o igual al 50% de la célula esta dentro de la
línea limítrofes del cuadrante se cuenta
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
1. Contar los LEUCOCITOS en un área de 0,25 mm2 utilizando las cuadriculas
L1,L2,L3,L4, aplicando las regla del SI y del NO. donde basta que toque la línea
para considerarlo o no dependiendo la línea que toca
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PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c1
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
10X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c2
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
10X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c3
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
10X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c4
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
10X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
10X
CALCULOS - FORMULA
RGB =
N
X 10 X 20
4
GB/mm3
CALCULOS - FORMULA
RGB =
N
X 10 X 20
4
GB/mm3
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CALCULOS - FORMULA
MP/D PROPORCIÓN (1/N) VOLUMEN/ uL
SANGRE TOTAL 1
1/20
10
HAYEM 19 190
RGB =
N
X 10 X 20
4
GB/mm3
VALORES REFERENCIALES
FORMULA DIFERENCIAL
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FUNDAMENTO
Formula Diferencial
La fórmula leucocitaria nos da información sobre el
PORCENTAJE de cada tipo de LEUCOCITOS, cuyos
VALORES RELATIVOS en base a su MORFOLOGÍA y
CARACTERÍSTICAS TINTORIALES.
A partir de estos valores y de la cuenta total de glóbulos
blancos podremos calcular los VALORES
ABSOLUTOS de cada línea celular en sangre
periférica, y así compararlos con los valores normales
de cada una de ellas.
FUNDAMENTO
Coloracion Wright
FIJACION COLORACION
EOSINATO-AZUL DE
METILENO
EOSINATO-AZUL DE
METILENO
AGUA DESTILADA
METANOL EOSINA B EOSINA Y AZUL METILENO
CELULAS ESTRUCTURAS BASICAS
ESTRUCTURAS
ACIDAS
Deshidrata las Celulas
Agrupamientos básicos de las
moléculas de hemoglobina y a
las proteínas básicas
Los agrupamientos de
ácidos nucleicos, las
proteínas de los núcleos
celulares y el citoplasma
inmaduro reactivo
WRIGHT
NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V
VOLUMEN
TOTAL
ML
Tº CONSERVACIÓN
COLORANTE
WRIGHT
Eosinato azul de
metileno
0.3 g
100ml T°A
Metanol 97,0 ml
Glycerol 3.0,0 ml
Preparación
Colorante de Wright: para 100 mL se requiere de colorante de
Wright (0.3g), metanol (97.0 mL) y glicerol (3.0 mL). Disolver en
un mortero el colorante con el glicerol. Una vez disuelto se
adiciona el metanol trasvasándolo a un frasco oscuro. Agitar.
Filtrar antes de usar.
Solución amortiguadora tamponada: en un litro de agua destilada
se agregan 3.76 g de hidrofosfato disódico (Na2HPO4* 2H20) y
2.10g de fosfato de potasio dihidrogenado (KH2PO4). Mezclar
todos los reactivos y guardar en frasco de vidrio en lugar fresco.
Ajustar el pH a 7.2.
CONTROLES
MATERIALES
PROCEDIMIENTO 1
FROTIS
1. Colocar una gota de
sangre total en un borde
de la lámina.
2. Luego con una lámina
extensora en posición de 45°
dispensar la sangre hacia los
bordes y extender.
PROCEDIMIENTO 1
FROTIS
1. Una vez realizado el
extendido correctamente,
esperar que seque a
temperatura ambiente.
2. Luego de haber secado el
frotis sanguíneo, proceder a
la fijación y coloración.
PROCEDIMIENTO 1
FIJACION/COLORACION
1. Colocar un puente de
soporte y el frotis sanguíneo
a fijar, sobre el lavadero.
2. Agregar 5 gotas del
colorante WRIGHT o la
cantidad necesaria para
cubrir el frotis por el tiempo
de 30’’ - 1’ actuando como
fijador.
PROCEDIMIENTO 1
FIJACION/COLORACION
1. Pasado el tiempo
determinado proceder a la
coloración.
Añadir 5 gotas o la cantidad
necesaria de agua
tamponada.
2. Luego soplar en forma
circular hasta formar un brillo
metálico sobre la superficie
de la coloración y reposar por
el tiempo de 5’ - 10’.
PROCEDIMIENTO 1
LAVADO
1. Pasado determinado
tiempo enjuagar la lámina
coloreada con un chorro de
agua débil desde la
cabeza, el agua debe
desplazarse hacia a la
cola.
PROCEDIMIENTO 1
SECADO LECTURA
1. Luego secar a temperatura
ambiente
2. Una vez seca la lámina
coloreada llevar al microscopio
para proceder a su lectura
entre el cuerpo y la cola con
objetivo de 100X (inmersión)
LECTURA
Coloracion Wright
LECTURA
Coloracion Wright
LEUCOCITOS
LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL
DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
«LEUCOCITOS»
GLOBULOS BLANCOS
Estas células son unidades móviles que forman parte del sistema inmunológico
que el cuerpo usa para combatir infecciones. Los glóbulos blancos viajan por
el torrente sanguíneo a las áreas de infección y destruyen las bacterias que la
están causando.
LEUCOCITOSIS
Infecciones
bacterianas
piógenas
Inflamaciones
Neoplasias
Quemaduras
Infarto del
miocardio
LEUCOPENIA
Aplasia medular
TBC
Fiebre tifoidea
Sida y Hepatitis
Enfermedades virales
VALORES NORMALES:
4.000 o 5.000 a 10.000 mm3
NEUTRÓFILOS
Son un tipo granulocitos. Se encargan de atacar a las sustancias
extrañas (básicamente bacterias, que entran en nuestro organismo.
SU FUNCIÓN ES: Fagocitar y destruir a bacterias y participar en el
inicio del proceso inflamatorio.
NEUTROFILIA
Infecciones
bacterianas agudas.
Comienzo de
infecciones virales
Quemaduras
Drogas (Prednisona
40mg)
NEUTROPENIA
Anemia perniciosa o
aplástica: Por
deficiencia de la
vitamina B12
Pueden darse por
menor producción o
maduración, ó por
mayor destrucción o
secuestro.
VALORES NORMALES:
*Neutrófilos segmentados 55-65%
*Neutrófilos en cayado(inmaduros) 0-5%
LINFOCITOS
Son células de tipo granulocitos de alta jerarquía en el sistema inmunitario
principalmente encargadas de la inmunidad especifica o adquirida.
SU FUNCION ES: Fagocitar o "comerse" a diferentes microorganismos o restos
celulares.
LINFOCITOSIS
Inflamaciones
Varicela
Parotiditis
Hepatitis
TBC
LINFOPENIA
Anemias aplásicas
Terapias esteroidales
Quimioterapias
Sida
Enfermedades virales
VALORES NORMALES:
23-35%
MONOCITOS
Son células de tipo granulocitos de mayor tamaño en la
sangre. Estos son activados tanto en procesos virales como
bacterianos.
SU FUNCION ES: La producción de anticuerpos y de la
destrucción de células anormales.
MONOCITOSIS
TBC caseosa
Leucemia
Infecciones virales
Infecciones
protozoaricas
VALORES NORMALES:
4-8%
EOSINÓFILOS
Un eosinófilo es un leucocito de tipo granulocito pequeño
derivado de la médula ósea.
Los eosinofilos son los leucocitos responsables por el combate
de parásitos y por el mecanismo de la alergias.
EOSINOFILIA:
Infecciones
parasitarias.
Reacciones alergicas.
Triquinosis (parasitosis
tisular)
EOSINOPENIA:
Infecciones
bacterianas
Infecciones virales.
Stress treumatico,
fisico, emotivo.
Tratamiento con
adrenalina,
ACHT,Insulina e
histamina.
VALORES NORMALES:
0,5 -4%
BASOFILOS
Son de tipo granulocitos, y menos común de los leucocitos
en la sangre.
FUNCIÓN: Intervienen en las reacciones de hipersensibilidad.
BASOFILIA
Leucemia
Sinusitis crónica
Coexiste con
eosinofilia en alérgias
VALORES NORMALES:
0-2%
TROMBOPOYESIS
LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL
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TROMBOPOYESIS
MEGACARIOBLASTO PROMEGACARIOCITO
MEGACARIOCITO
GRANULAR
MEGACARIOCITO
LIBERADOR PLAQUETAS
MB PM MG MLP
PLAQUETA
•Zona PERIFÉRICA
• Zona ESTRUCTURAL
• Zona ORGANELOS
•Sistema Membranas
Adhesión y Agregación
Estructura y Soporte
Secreción y
Almacenamiento
ESTRUCTURA DE LA PLAQUETA
Gránulos
Cuerpos densos Gránulos alfa Gránulos lisosómicos
•Mediadores de
función de plaquetas
•Hemostasia
•ADP
•ATP
•Fosfatos
•Calcio
•Serotonina
F. von willebrand
Factor V
Fibrinogeno
Antiplasmina a
Plasminógeno
Enzimas hidroliticas
Mitocondrias Glucógeno
F. 4 plaquetario
F. Crecimiento
plaquetario
Tromboglobulina b
Albúmina
Trombospondina
Fibronectina
Proteínas
Hemostásicas No Hemostásicas
Específicas No Específicas
ZONA DE ORGANELOS
Anucleadas
2 a 3 um
150.000 a 450.0000/ml
Vida media 8 -10 días
RECUENTO PLAQUETAS
danielsuarez2005@Gmail.com
FUNDAMENTO
El recuento de PLAQUETAS consiste en CONTAR el número de ellos
en 1 mm3 de SANGRE, realizando DILUCIÓN de la sangre con una
SOLUCIÓN HIPOTONICA (DESTRUYE la morfología de los
eritrocitos).
La técnica se basa en diluir la sangre con líquido HIPOTONICO (
OXALATO AMONIO 1%) lisa el resto de las células sanguíneas
(leucocitos y hematíes) para permitir el recuento de plaquetas en el
hemocitómetro.
OXALATO AMONIO 1%
NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V
VOLUMEN
TOTAL
ML
Tº
CONSERVA
CIÓN
OXALATO DE
AMONIO 1%
Oxalato de amonio 1 g
100ml 15-30ºC
Agua destilada 100 ml
PREPARACIÓN Mesclar el oxalato de amonio con el agua destilada.
CONTROLES
CONTROL
VALOR
REFERENCIA
VOLUMEN
TEMPERATURA
CONSERVACIÓN
ESTABILIDAD
BAJO 103/uL 68 ± 20 3 ml 4°C 1 mes
NORMAL 103
/uL 268 ± 40 3 ml 4°C 1 mes
ALTO 103
/uL 553 ± 60 3 ml 4°C 1 mes
MATERIALES
PROCEDIMIENTO 1
DILUCION 1/20
1. DILUYENTE
Colocar en un tubo de
ensayo de 12 x 75,
190 ul de la solución
HAYEM.
2. MUESTRA
Añadir al mismo tubo de
ensayo 10ul de
SANGRE total y
homogenizar. (Dilucion
1/20)
3. REPOSAR 15
minuto a temperatura
ambiente.
PROCEDIMIENTO 2
CARGADO CAMARA NEUBAUER
1. HOMOGENIZAR
previamente antes de
dispensar a la cámara de
neubauer.
2. COLOCAR la lámina
cubreobjetos sobre la
CÁMARA DE
NEUBAUER,
3. CARGAR
aproximadamente con 10
ul del preparado y
4. REPOSAR por 2
minutos.
PROCEDIMIENTO 3
LECTURA MICROSCOPIO
1. LECTURA
Proceder a su respectiva
lectura con el OBJETIVO
de 40X.
2. ENFOCAR El campo de
observación en las
cuadriculas R1, R2, R3,
R4, y R5 de la cámara de
Neubauer.
R1 R2
R3
R4
R5
PROCEDIMIENTO 4
SUPERIOR IZQUIERDO : R1
40X
R1
PROCEDIMIENTO 4
SUPERIOR DERECHO : R2
40X
R2
PROCEDIMIENTO 4
INFERIOR DERECHO : R3
40X
R3
PROCEDIMIENTO 4
INFERIOR IZQUIERDO : R4
40X
R4
PROCEDIMIENTO 4
CENTRAL : R5
40X
R5
PROCEDIMIENTO 4
REGLAS CONTEO
40X
2. Si la superficie es mayor o igual al 50% de la célula esta dentro de la
línea limítrofes del cuadrante se cuenta
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
1. Contar los eritrocitos en un área de 0,2 mm2 utilizando las cuadriculas R1, R2,
R3, R4 y R5, aplicando las regla del SI y del NO. donde basta que toque la línea
para considerarlo o no dependiendo la línea que toca
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c1
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
40X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c2
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
40X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c3
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
40X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO c4
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
40X
PROCEDIMIENTO 4
EJEMPLO
40X
1 2 3 4
8 7 6 5
9 10 11 12
16 15 14 13
CALCULOS - FORMULA
RPq =
N
X 10 X 20 X 400
80
Pq/mm3
16 X 5 16 X 25
CALCULOS - FORMULA
RGR =
N
X 10 X 20 X 400
80
GR/mm3
CALCULOS - FORMULA
RGR =
N
X 10 X 20 X 400
80
GR/mm3
MP/D PROPORCIÓN (1/N) VOLUMEN/ uL
SANGRE TOTAL 1
1/20
10
OXALATO AMONIO
1% 19 190
VALORES REFERENCIALES
GRUPO ETAREO MUJER VARON
UNIDAD
REFERENCIA
Recién nacido 192 000 – 213 000 mm3 193 000 – 215 000 mm3
Niño 280 000 – 323 000 mm3 290 000 – 320 000 mm3
Adulto 150 000 – 400 000 mm3 150 000 – 400 000 mm3
Anciano 150 000 – 400 000 mm3 150 000 – 400 000 mm3
PLAQUETAS
LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL
DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
PLAQUETAS
Son las células responsables por el inicio del proceso de coagulación.
TROMBOCITOSIS
Anemia por déficit de
hierro
Síndrome nefrótico
TROMBOCITOPENIA
Destrucción aumentada
Metástasis de cáncer
Drogas
Autoinmunidad
VALORES NORMALES:
150.000 a 450.000 microlitro
“Trombocitos”
HEMATOLOGIA
T.M. DANIEL A. SUAREZ AGUILAR
danielsuarez2005@gmail.com
Lámina PERIFERICA
HEMATOLOGIA
INTRODUCCIÓN
El estudio e interpretación del frotis de
sangre periférica, representa la
extensión morfológica del estado de
los elementos celulares de la sangre
(hematíes, leucocitos plaquetas).
Puede considerarse el paso más
importante en la identificación del
mecanismo responsable de una
anemia, talasemias u otras patologías.
A) OBJETIVO: Proveer información para el diagnóstico
Proveer datos para la selección de exámenes pertinentes, para
establecer un diagnóstico.
Evaluar la serie blanca, roja y plaquetaria.
B) ALCANCE: El estudio e interpretación del frotis de sangre
periférica como parte del hemograma representa la extensión
morfológica del estado de los elementos celulares de la sangre.
C) MUESTRA: Sangre total
MARCO TEÓRICO
El frotis de sangre periférica obtenido por punción capilar y coloreada
con Wrigth o Giemsa, suministra un medio para estudiar la sangre y
determinar las variaciones y anormalidades de estructura forma y
tamaño de los eritrocitos; su contenido de hemoglobina y sus
propiedades de coloración.
Permite además observar agrupaciones de plaquetas y los glóbulos
blancos, cada uno con su morfología característica.
1. Definición
ALTERACIONES
ERITROCITARIAS
FORMA
TAMAÑO
CONTENIDO
AGRUPACION
INCLUSIO
NES
2.1. ALTERACION ERITROCITARIAS:
A) FORMA
2. Alteraciones
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
ESQUISOCITOS-
ESQUISTOCITOS
También llamados
esquistocitos, son células
fragmentadas con una
sobrevida corta de los
eritrocitos sobre todo por una
destrucción acelerada.
-Púrpura trombocitopenia
trombotica
-Coagulación intravascular
diseminada
-Exposición o toxinas
-Síndrome hemolítico urémico
-Uremia
-Carcinoma
- Prótesis intravasculares
-Quemaduras y otras condiciones.
TEARDROP-
DACRIOCITOS
Se ignora el mecanismo de su
formación.
Su morfología es como lágrima
o raqueta.
-Anemia ferropénica o
megaloblastica.
-Milelofibrosis
-Trasplante hematopoyético
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
ELIPTOCITOS U
OVALOCITOS
Se encuentran deformados
teniendo forma elíptica
(eliptocitos) u ovalada
(ovalocitos) en vez de
bicóncava.
-Eliptocitos hereditaria.
Existen tres tipos:
-Común
-Eliptocitosis esferocítica
-Eliptocitosis estomatocítica
-Anemia megaloblastica.
-Talasemias
-Anemias ferropénicas
ESFEROCITOS
Eritrocitos de forma esférica
cuyo diámetro es menor que lo
normal y que aparecen
hipercrómicos por su forma.
-Esférocitos hereditaria
-EHRN(enfermedad hemolítica del
recién nacido)
-Adultos: anemias hemolíticas
autoinmunes e isoinmunes.
-Ictericia hemolítica
-Fostesplectomia
-Quemadura
DREPANOCITOS
Células en forma de hoz, ya sea
en forma espontánea o inducida
son muy característicos de la
anemia por presencia de
hemoglobina S o anemia de
células falciformes.
-Mayoría de anemias
-Hemoglobinopatía (rara)
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
ESTOMATOCITOS
Células que adoptan una
configuración de boca de pez,
se ven en personas con grupos
Rh "nuil" que usualmente tienen
un grado moderado de anemia.
-Cirrosis hepática
-Estomatosis hereditaria
-Cirrosis alcohólica
-Autoanticuerpos
EQUINOCITOS-
CELULAS BUR
Células cuya superficie externa
(membrana) ha sido socavada
dándole a la misma un aspecto
festoneado característico. Se
ignora la etiopatogenia.
-Déficit de piruvatoquinaza
-Uremia
-Enfermedades renales
-Carcinoma gástrico
-Anemia hemolítica
ACANTOCITOS-
CÉLULAS SPUR
Células con proyecciones en su
superficie (membrana) en forma
de puntas irregulares.
No deben confundirse con
crenocitos, éstos últimos
aparecen por defectos técnicos
al preparar las láminas o
recoger la muestra.
- Se encuentran
en la a-betalipo proteinemia.
-Hepatopatías
-post-esplectomia
B) COLOR
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
NORMO-CROMIA Coloración normal de hematíes. -Personas sanas.
HIPOCROMIA
Indica disminución del contenido
de hemoglobina de los eritrocitos.
Cuando se asocia con
macrocitosis
y/o ovalocitosis a menudo se
debe a deficiencia combinada de
hierro y factores de maduración
(usualmente ácido fólico).
-Anemia ferropénica
-Envenenamiento con
plomo
-talasemias.
-Anemia sideroblástica
-Por transfusión reciente
de un paciente con
anemia hipocrómica.
HIPERCROMIA Coloración superior a lo normal -Esferositosis
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
ANISOCROMIA Coexistencia de eritrocitos
normocromicos e hipercromicos.
-Anemia sideropenicas
(en tto)
-Después de transfusión
POLICROMATOFILA
.
Término que denota la presencia
de eritrocitos incompletamente
hemoglobinizados (jóvenes), el
aumento de estas células en la
sangre periférica indica actividad
eritropoyética, hemorragia
reciente.
-Respuesta al tratamiento
con hierro o ácido fólico o
respuesta compensadora
en la anemia por
deficiencia de hierro o
ácido fólico.
- Anemias regenerativas.
C) AGRUPACIÓN
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
FENÓMENO DE
ROULEAUX
Indica el agrupamiento de los
eritrocitos en forma de monedas
apiladas; a veces es un artefacto
que se produce en la preparación de
los frotis.
-Hiperproteinemia e
hiperviscosidad
-Mieloma múltiple
Macroglobulinemia
-Estados inflamatorios
crónicos.
-Cuerpo del frotis
AGLUTINACIÓN
Nótense las acumulaciones
irregulares de eritrocitos agregados.
-Cuerpo del frotis
D) INCLUSIONES
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
CUERPOS DE
HOWELL-JOLLY
Representan remanentes de
DNA resultantes de cariorrexis
en los precursores del eritrocito
maduro.
-Después de
esplenectomía
-Anemia de células
Falciformes
-En talasemias
-Anemia perniciosa
-Anemias hemolíticas severas.
-Hipoesplenismo
ANILLOS DE CABOT
Línea muy fina en forma de anillo
de color rosado o azulado.
-Carecen de especificidad,
aunque su presencia traduce
trastorno profundo de
eritropoyesis.
PUNTEADO BASOFILICO
Indica remanentes de RNA en
los eritrocitos (reticulocitos), este
hallazgo es importante en
pacientes con intoxicación.
-Intoxicación con plomo
-talasemias
-Anemias hemolíticas
–Anemia perniciosa severa.
CUERPOS DE
PAPPENHEIMER.
Son gránulos que contiene
hierro (llamados también
gránulos sideróticos).
-Pacientes con hipoesplenismo
-Anemia por exceso de hierro
-Anemias hemolíticas de varias
etiologías.
CUERPOS DE HEINZ.
Representan precipitados de
hemoglobina en el interior de
los eritrocitos. No se encuentran
con la coloración usual y para
demostrarlos es necesario usar
coloraciones especiales.
-En anemias hemolíticas
causadas por deficiencia
de Glucosa 6 fosfato
deshidrogenasa
-Talasemias
-Drogas (fenacetina)
SIDEROCITOS
Hematíes en sangre con
gránulos verdes
Tinción con azul de Prusia de
perls
Hierro no hemoglobínico
Normalmente es el 0.3 % de los
hematíes.
-Anemias sideroacresticas
-Talasemias
-Esplenectomía
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
NORMOCITOS.
Hematíes de tamaño
igual entre ellos.
-Personas sanas.
MICROCITOS.
Consiste en la existencia
de unos hematíes con un
diámetro longitudinal
inferior a 7 µm y un
volumen inferior a 80
µm³, se encuentran en
anemia por déficit de
hierro
(probablemente la causa
más común en nuestro
medio)
-Talasemias
-Anemias sideroblásticas
-Intoxicación con plomo
-Anemia de las
enfermedades crónicas.
E) TAMAÑO
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
MACROCITOS.
Consiste en la existencia de
unos hematíes con un
diámetro longitudinal superior
a 8 µm y un volumen superior
a 100 µm³, a menudo indican
deficiencia de ácido fólico o
vitamina B12, condiciones en
las cuales con frecuencia se
acompaña de ovalocitosis.
-Puede encontrarse
macrocitosis sin ovalocitosis
en pacientes con
hipotiroidismo
-Enfermedades hepáticas
-La presencia de ligera
macrocitosis en el recién
nacido es un hallazgo normal.
ANISOCITOSIS.
Indica variación del tamaño
de los eritrocitos.
-También puede ser un
cambio mínimo o una
alteración muy evidente con
presencia de células
características de una
determinada entidad.
2.2. ALTERACION LEUCOCITARIAS:
A) CITOPLASMÁTICO
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
GRANULACIONES
TOXICAS
Las llamadas granulaciones
tóxicas no son más que
lisosomas agrandados y
activos de los leucocitos
polimorfonucleares que por
su mayor afinidad por los
colorantes básicos
aparecen como gránulos
negruzcos purpúricos en
estas células.
-Se observan en las
personas con estados
infecciosos agudos, sobre
todo bacterianos.
CUERPOS DE
DOHLE
Los cuerpos de Dohle, cuyo
origen no es muy bien
definido.
-Aparecen en las células
de pacientes con
infecciones agudas
-Quemaduras y con
tratamiento con
medicamentos tóxicos,
incluyendo algunos
antibióticos.
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
ANOMALÍA DE CHEDIAK-
HIGASHI.
Morfológicamente los leucocitos, en
particular los neutrófilos, presentan
granulaciones gigantes. Los
pacientes son muy susceptibles a las
infecciones por un defecto de los
neutrófilos para destruir las bacterias
y muchos mueren en la primera
década.
-Neuropatías
-Neutropenia
-Infecciones recurrentes
-Trombocitopenia
-Hepatoespíen o megalia.
ANOMALÍA DE ALDER-
REILLY
Este es un defecto autosómico
recesivo que se caracteriza por la
presencia de gránulos grandes en los
neutrófilos y otros leucocitos. Y es
parte de un defecto metabólico de los
polisacáridos.
- Se asocia con defectos
hereditarios
como el gargolismo
DESGRANULACION
Neutrófilo sin granulación
aparece azulado y agranular.
-Indicativo de hemopatía grave.
-Leucemias agudas mieloides.
-Síndromes mielodisplasicos.
VACUOLIZACION DE LOS
LEUCOCITOS.
Se ve en personas tratadas
con distintos medicamentos.
Que ejercen un efecto tóxico
sobre los leucocitos.
-Este hallazgo es indicativo de
edema intracelular.
ANOMALÍA DE MAY
HEGGLIN
Es un defecto autosómico
dominante caracterizado por la
presencia de plaquetas
gigantes, cuerpos de Dohle en
los neutrófilos, basófilos,
eosinófilos y monocitos, con o
sin trombocitopenia.
-Leucopenia leve
-Pacientes presentan buena
salud en la mayoría de los
casos.
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
B) NUCLEAR
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
HIPERSEGMENTACION
Polinucleares con 4 o más
segmentos.
-Anemias megaloblasticas.
ANOMALÍA DE PELGER -HUET
En este trastorno benigno, la
mayoría de los granulocitos es
bilobulada. Con frecuencia, el
núcleo presenta una
configuración de lentes o
“pince-nez”.
-Anomalía congénita
-Seudopelger en:
-Anm aplasica
-Anm perniciosa
-Síndromes mielodisplasicos y
mieloproliferativos crónicos
- Leucemias mieloblasticas
LINFOCITOS ATÍPICOS
Son linfocitos transformados
por estimulación antigénica. La
presencia de un número
significativo de linfocitos
atípicos en la circulación, por
ejemplo, más de 20% es
indicativa de una infección viral
aguda.
-Mononucleosis infecciosa
-Hepatitis viral
-Enfermedad de inclusión
citomegálica
SÍNDROME DE SÉZARY
Linfocitos con frecuentes
núcleos convolucionados
(células de Sezary)
-En un paciente con
micosis fungoide
avanzada.
NUCLEOS EN ANILLO
Hiposegmentacion nuclear
con gran agujero central.
-Síndrome
mieloproliferativos crónicos
-Leucemias agudas
-Alcoholismo crónico
-Momonucleosis
PLEOCARIOCITO
Hipersegmentacion nuclear
con gigantismo celular.
-Anemias megaloblasticas
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
2.3. ALTERACION PLAQUETARIA :
A) FORMA
NOMBRE DESCRIPCION IMAGEN
TROMBOCITOS
IRREGULARES
Son fragmentos citoplasmáticos
pequeños, irregulares y carentes de
núcleo, de 2-3 µm de
diámetro, derivados de la fragmentación
de sus células precursoras.
B) ARTEFACTOS PLAQUETARIOS
NOMBRE DESCRIPCION IMAGEN
SUPERPOSICIÓN
Se debe al depósito de una plaqueta sobre un eritrocito.
Puede hacer pensar en la presencia de una inclusión
intraeritrocitaria. Se diferencia de la inclusión en que, en
la superposición, se observan las características
morfológicas propias de una plaqueta y, además, se
aprecia un halo alrededor de ella.
AGREGACION PLAQUETARIA
Presencia de plaquetas agregadas en el frotis de sangre
periférica debido a trastornos en los procesos de
agregación o adhesión plaquetaria o por dificultad en la
toma de muestra (presencia de coágulos).
SATELITISMO
Consiste en la adhesión de plaquetas a los neutrófilos.
Puede dar lugar a la observación de neutrófilos rodeados
por un gran número de trombocitos. Las causas de este
fenómeno son desconocidas.
NOMBRE DESCRIPCION IMAGEN
ANISOCITOSIS PLAQUETARIA
Presencia de plaquetas de diferente tamaño
pueden ser grande mayor de 5µ o gigantes
semejante al tamaño de un linfocito.
MICROTROMBOCITOS
Consiste en la observación, en la sangre
periférica, de plaquetas pequeñas- las
microplaquetas con trombocitos viejos.
C) TAMAÑO
NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
MEGATROMBOCITOS
No es valorable si los
megatrombocitos representan
menos del 3% de toda la
población plaquetaria. La
megatrombocitosis suele
indicar la presencia sanguínea
de plaquetas inmaduras.
-Síndrome de
Bernard-Soulier
HIPOGRANULACIÓN
TROMBOCITARIA
Consiste en la observación, en
la sangre periférica, de
plaquetas con un citoplasma
grisáceo y pobre en gránulos.
-Púrpura
trombocitopénica
idiopática
-trombocitemia esencial.
1. FASE PREANALÍTICA:
A) MUESTRA
MARCO EXPERIMENTAL
TIPO VOLUMEN/CANTIDAD ADITIVO
TEMPERATURA
CONSERVACIÓN
ESTABILIDAD
SANGRE TOTAL Sangre capilar EDTA 17° Normal
B) MATERIALES
TIPO MATERIAL CARACTERISTICA
BIOSEGURIDAD
Guantes
-Látex
-Family doctor
Mandilón
-Tela
-Blanco
Mascarilla
-Algodón
-Blanco
Gorro
-Algodón
-Blanco
TIPO MATERIAL CARACTERISTICA
EXTRACCION
Lancetas
-Sterilance medic
-Estériles
Algodón
-Sterilab laboratorio
-25g
Alcohol 70°
1.1. CONDICIONES PREANALÍTICAS:
INDICACIONES CRITERIOS RECHAZO
Lamina rotulada. No recibir si la lámina no está rotulada.
La lámina debe tener las tres partes de un extendido
sanguíneo.
Si la lámina no tiene el extendido completo.
La lámina debe estar bien coloreada. Verificar la coloración de la lámina.
2. FASE ANALÍTICA:
A. FUNDAMENTO DEL METODO:
A.1. METODO DE COLORACION WRIGTH:
B. REACTIVOS: (COLORANTES Y SOLUCIONES)
B.1. REACTIVO PROVISTO:
B.1.1 LISTO PARA SU USO
NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V
VOLUMEN
TOTAL
ML
Tº
CONSERVACIÓN
TINCIÓN DE WRIGHT
colorante de Wright 0.3g
100 ml 5-25ºC
metanol 97.0 ml
glicerol 3.0 ml
PREPARACIÓN
Disolver en un mortero el colorante con el glicerol. Una vez disuelto se adiciona el
metanol trasvasándolo a un frasco oscuro. Agitar. Filtrar antes de usar.
B.2. REACTIVO NO PROVISTO:
B.2.1) SOLUCIONES Y DILUYENTES
NOMBRE CONCENTRACIÓN P/V
VOLUMEN
TOTAL
ML
Tº
CONSERVACIÓN
Solución amortiguadora
tamponada
Agua destilada 1L
1000ml
TºA
(20-22ºc)
hidrofosfato disódico (Na2HPO4*
2H20)
3.76 g
fosfato de potasio dihidrogenado
(KH2PO4) 2.10g
Preparación
Mezclar todos los reactivos y guardar en frasco de vidrio en lugar fresco. Ajustar el
pH a 7.2.
C. MATERIALES
C.1. PIPETAS AUTOMATICAS Y/O VOLUMETRICAS
C.2. MATERIAL DE VIDRIO
C.3. MATERIALES DIVERSOS
MARCA VOLUMEN MIN VOLUMEN MAX TIPO
ACCUMAX 5 µl 50 µl Automática
MATERIAL MARCA DIANMETRO
Lamina porta objeto Neolab 25.4x76.2mm(1*x3*)
1mm-1.2mm THICK
MATERIAL MARCA
Lanceta Sterilance medical
D. EQUIPOS
D.1. MICROSCOPIO
MARCA/MODELO TIPO OBJETIVOS CARACTERÍSTICAS
Microscopio (binocular)
Olympus
Mod. CX31
Los objetivos Plan
C Acromáticos
campo visual (4x,
10x, 40x, 100x
(aceite))
 Los objetivos Plan C Acromáticos con campo visual; (4x, 10x, 40x, 100x
aceite)
 Oculares de F.N. 20
 El revólver porta objetivo orientado hacia adentro cuádruple mejora el acceso
y facilita el cambio rápido del portaobjeto
 Condensador, centrable y enfocable para la iluminación Köhler
 Un bombillo halógeno de 6V/30W provee iluminación amplia para cualquier
observación
 El estativo diseñado ergonómicamente tiene los tornillos micro y
macrométricos ubicados en una posición baja y mangos en el frente y la parte
posterior para el transporte; tope de campo integrado
E. PROCEDIMIENTO
E.1. ETAPA 1: TOMA DE MUESTRA.
DESCRIPCION IMAGEN
1. Marcar una lámina porta objeto con el número
correspondiente del usuario.
1. Limpiar el dedo del usuario con alcohol de 70º dejar
secar.
1. Pinchar el dedo del usuario con una lanceta. Desechar
la primera gota de sangre.
DESCRIPCION IMAGEN
1. Colocar una gota de sangre en la lámina (portaobjetos),
realizar el extendido con ayuda de otra lamina,
colocando uno de los extremos de este portaobjetos en
contacto con la gota de sangre.
1. Realizar el extendido a lo largo de la lámina, dejar
extender con capilaridad la sangre a lo largo del borde
del portaobjetos y con una inclinación de 30 a 40º.
1. El extendido debe tener cabeza, cuerpo y cola.
E.2. ETAPA 2: COLORACION DE LA LAMINA
DESCRIPCION IMAGEN
1. Colocar las láminas sobre el soporte de coloración
hacia arriba
1. Cubrir la totalidad de la lámina con colorante de Wright
durante 2 minutos.
1. Cubrir con agua destilada y soplar suavemente todo el
extendido. Dejar 2 minutos.
DESCRIPCION IMAGEN
1. Lavar la lámina con agua de la llave, escurrir.
1. Eliminar el exceso decolorante por el revés con una
toalla desechable.
1. Colocar la lámina sobre la bandeja y dejar secar a
temperatura ambiente.
E.3. ETAPA 3: LECTURA DEL EXTENDIDO
DESCRIPCION IMAGEN
1. Colocar el extendido en el microscopio.
1. Agregar una gota de aceite de inmersión
1. Observar en objetivo de 100X
DESCRIPCION IMAGEN
1. Seleccionar la parte óptima para la lectura donde
los eritrocitos apenas se toquen.
1. Evaluar la serie roja, serie blanca y serie
plaquetaria.
1. Anotar lo observado en el respectivo registro.
1. Transcribir los resultados en el formato respectivo.
F. LECTURA E INTERPRETACION (ERITROCITOS)
F.1. EN FORMA
Forma
Anormal
Normal Ligera (+) Moderada (++)
Marcada
(+++)
Esferocito 0 1 - 5 6 - 15 Más de 15
Acantocitos 0 1 - 5 6 - 15 Más de 15
Drepanocitos 0 1 – 5 6 - 15 Más de 15
Rouleaux 0 1 - 5 6 - 15 Más de 15
Dacriocitos 0 2 - 5 6 - 15 Más de 15
Codocitos 0 - 1 2 - 5 6 - 15 Más de 15
Esquistocitos 0 - 1 2 - 5 6 - 15 Más de 15
Ovalocitos 0 - 1 2 - 5 6 - 15 Más de 15
Eliptocitos 0 - 1 2 - 5 6 - 15 Más de 15
Estomatocitos 0 – 1 2 - 5 6 - 15 Más de 15
F.2. EN COLOR
F.3. INCLUSIONES
Color
anormal
Normal Ligera Moderado Severa
Hipocromía
0-5
+
6 - 15
++
16 - 30
+++
Mayor de 30
Hipercromía
0-5
+
6 - 15
++
16 - 30
+++
Mayor de 30
Anisocromia
0-5
+
6 - 15
++
16 - 30
+++
Mayor de 30
Policromatofila
0 – 0.5
0 – 2%
+
1.6 – 2.5
2 – 4%
++
2.6 – 3.5
4 – 6%
+++
Más de 3.6
Más de 6%
Normal Ligera (+) Moderada (++)
Severa
(+++)
Howell– Jolly
Ninguno 1 – 2 3 – 5 Más de 6
Cuerpos paperheimer
Anillos cabot
Punteado basófilo
Tamaño
Anormal Normal Ligera
Anisocitosis
Moderado
Anisocitosis
Severa
Anisocitosis
Microcitos.
Macrocitos. 0 - 5
+
6 – 15
++
15 - 30
+++
Mayor de 30
F.4. TAMAÑO
G. LECTURA E INTERPRETACION
(LEUCOCITARIO)
Recuento de Leucocitos/mm3 X 100 = Recuento corregidos blancos
100 + número de células nucleadas no leucocitarias
H. LECTURA E INTERPRETACION (PLAQUETARIO)
Observar morfología y cantidad de las plaquetas en el extendido de sangre periférico.
Acá se observa si las plaquetas están pequeñas o grandes o si hay cúmulos de
plaquetas
2. FASE POST ANALÍTICA:
A. REPORTE
Reportar si hay:
– Anisocitosis
– Poquilocitosis
– Policromatofilia
– Inclusiones eritrocitarias
– Hipocromía.
- Chequear la presencia del fenómeno de Rouleaux (glóbulos rojos pegados en
cadena).
A.1 SERIE ROJA
A.2 SERIE BLANCA
Reportar si los leucocitos están aumentados o disminuidos y se encuentra inclusiones
leucocitarias en los neutrófilo, o si se observan blastos.
A.3. SERIE PLAQUETARIA
Número de plaquetas está aumentado o disminuido, mirar forma y tamaño de las plaquetas.
- Buscar cúmulos de plaquetas en el extendido, ya que dichos cúmulos sería resultado
erróneo recuento disminuido.
A.4. OTROS
- Buscar parásitos sanguíneos como filarias.
- Buscar células grandes como blastos.
GRACIAS…

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Hemograma daniel suarez aguilar 2021

  • 1. HEMATOLOGIA T.M. DANIEL A. SUAREZ AGUILAR danielsuarez2005@gmail.com
  • 2. HEMOGRAMA ANALISIS CUALITATIVO MORFOLOGIA CUANTITATIVO CANTIDAD El hemograma se define como el análisis cuantitativo y cualitativo de los componentes celulares de la sangre periférica. COMPONENTES SANGRE PERIFERICA
  • 4. CONFORMADO MATRIZ – 55% PLASMA CELULAS – 45 % HEMATIES PLAQUETAS LEUCOCITOS 44% 01% TEJIDO
  • 5. TRANSPORTE • GASES • NUTRIENTES • SUSTANCIAS DESECHO REGULADORA • TEMPERATURA • PH • EQUILIBRIO HIDRICO • EQUILIBRIO ELECTROLITICO HEMOSTASIA • COAGULACION • FIBRINOLISIS PROTECTORA • CELULAS • SUSTANCIAS FUNCION
  • 12. PLASMA PROTEINAS PLASMATICAS ALBUMINA Transporta Lipidos,Hormonas esteroideas;contribucion principal de la concentracion osmotica plasma 60% GLOBULINAS Transporta Iones,Lipidos,Hormonas ;funcion inmunitaria 35% FIBRINOGENO Comnponente Esencial Coagulacion 04% PROTEINAS REGULADORAS Enzimas,Hormonas,Proteinas Coagulacion 01% COMPOSICION PLASMA AGUA Transporta moléculas organica e inorgánicas células,elementos celular y calor 92% PROTEINAS PLASMATICAS 7% OTROS SOLUTOS 1% OTROS SOLUTOS ELETROLITOS Composicion ionica del Liquido extracelular normal 0.9% NUTRIENTES ORGANICOS Se usan para la Produccion de ATP,crecimiento,Mantenimiento Celulas GLUCOSA 0.6% 0.7% LIPIDOS 0.1% DESECHOS ORGANICOS Urea,Acido Urico Creatinina Bilirrubina, etc. 0.2%
  • 15. ELECTROFORESIS PROTEINAS Ánodo (+) Pre- Albúmina Albúmina Alfa-1 Alfa-2 Beta B-1 B-2 Gamma Cátodo ( - ) Punto de aplicación Componente Concentración Concentración Prot. Totales 6.0 a 8.0 g/dL 100.0 % Pre-Albúmina .016 a .040 g/dL 16.0 a 40.0 mg/dL Albúmina 3.2 – 5.2 g/dL 52 – 65 % Globulinas Alfa-1 0.1 – 0.3 g/dL 2 – 5 % Globulinas Alfa-2 0.4 – 1.0 g/dL 7 – 13 % Globulinas Beta 0.5 – 1.1 g/dL 8 – 14 % Globulinas Gamma 0.8 – 1.8 g/dL 12 – 23 %
  • 17. HEMATOPOYESIS T.M. DANIEL A. SUAREZ AGUILAR danielsuarez2005@gmail.com
  • 18. T.M. DANIEL A. SUAREZ AGUILAR danielsuarez2005@gmail.com
  • 19. HEMATOLOGIA Y CITOLOGIA SANGUINEA T.M. DANIEL A. SUAREZ AGUILAR danielsuarez2005@gmail.com
  • 25. 25 ERITROPOYESIS LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
  • 26. ERITROPOYESIS Rafael Sirera CAMBIOS CELL NUCLEARES CITOPLASMATICOS TAMAÑO: Disminución COLOR: Basofilo Acidofilo CROMATINA: Condensación HEMOGLOBINOGENESIS Inicia : PE Intensifica : EP Culmina: reticulocito
  • 27. COMPARTIMIENTOS FUNCIONALES CELL PROGENITORA CELL PRECURSORA CELL CIRCULANTE CULTIVO MEDULA OSEA SP GEMM BFU CFU PE EB EP EO R R 3 – 5 dias 1-2 dias 24 hr GR GR Morfológicamente Indiferenciada Morfológicamente Diferenciada Stem cell Hemocytoblast Proerythro- blast Early erythroblast Late erythroblast Normoblast Phase 1 Ribosome synthesis Phase 2 Hemoglobin accumulation Phase 3 Ejection of nucleus Reticulo- cyte Erythro- cyte Committed cell Developmental pathway
  • 28. PROLIFERACION GR • 250 000 000 000 / 24 horas • 10 416 000 000 / 1 hora. • 173 000 000 eritrocitos / minuto. • 2 883 000 eritrocitos / segundo. danielsuarez2005@gmail.com
  • 29. 29 CÉLULAS DE LA SERIE ERITROPOYÉTICA CÉLULA TAMAÑO (µM) NÚCLEO* Y MITOSIS NUCLÉOLO OS CITOPLASMA* MICROFOTOGRAFIA ELECTRÓNICA. Proeritroblasto 14 - 19 Redondeado, color burdeos; fina red de cromatina; mitosis. 3 - 5 Gris-azul, agregados en periferia. RER poco desarrollado; numerosos polisomas, escasas mitocondrias; ferritina. Eritroblasto basófilo 12 - 17 Igual al anterior. 1 a 2? Coloración rosada poco intensa. Semejante al ant. Presencia de hemoglobina. Eritroblasto policromatófilo 12 - 15 Redondeado; tinción intensa; red de cromatina muy gruesa, mitosis. Ninguno Rosa amarillento sobre un trasfondo azulado. Similar al ant. > cantidad de hem Eritroblasto Ortocromatófilo 8 - 12 Pequeño, redondo, denso; excéntrico o en proceso de expulsión. Ausencia de mitosis. Ninguno Rosa en un trasfondo azulado poco intenso Escasas mitocondrias y polisomas, abundante hem Reticulocito 7 - 8 Ninguno Ninguno Semejante a eritrocitos maduros Grupos de ribosomas; cél rellena de hem Eritrocito 7.5 Ninguno Ninguno Citoplasma rosado Únicamente hem
  • 30. PROERITROBLASTO T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 30 TAMAÑO 14-22 NU CL EO FORMA Redonda / Lig. Ovalado R- N/C Muy alta 5:1 8:1 COLOR Rojo Purpura CROMATINA Fina y delicada Pequeños grupos Paracromatina Escasa NUCLEOLO 1-2 prominentes Color Azulado C I TO PL AS MA COLOR Azul Intenso Basofilo CONTENIDO Aparato Golgi Mitocondrias Halo perinuclear ligeramente azul 1
  • 31. ERITROBLASTO BASOFILO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 31 TAMAÑO 12 - 18 N U C L E O FORMA Redonda Central R- N/C Alta 4:1 6:1 COLOR Purpura intercaldo con areas claras CROMATINA Gruesa y algo Condensado NUCLEOLO 0 - 1 C I T O P L A S M A COLOR Azul Intenso Hiperbasofilo CONTENIDO Aparato Golgi produce área cerca núcleo ligeramente azul. Muchas Mitocondrias
  • 32. ERITROBLASTO POLICROMATICO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 32 TAMAÑO 10 - 14 N U C L E O FORMA Redonda Central/Excentrico R- N/C Baja (25%) 1:1 4:1 COLOR Purpura Rojo CROMATINA Gruesa y Condensado Paracromatina definida apariencia “Tablero damas” NUCLEOLO Ninguna C I T O P L A S M A COLOR Rosa azulado Gris azulado Acidofilo CONTENIDO Halo peri nuclear visible Incremento Hb Disminución RNA
  • 33. ERITROBLASTO ORTOCROMATICO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 33 TAMAÑO 8 - 11 N U C L E O FORMA Redonda Central/Excentrico Fragmentado - Extruido R- N/C Muy Baja 1:4 1:2 COLOR Purpura azul CROMATINA Condensado y Homogenea (Picnotico) NUCLEOLO Ninguna C I T O PL AS M A COLOR Rosado Rosado naranja con indicios de azul Muy Acidofilo CONTENIDO Produccion Hb incrementado
  • 34. RETICULOCITO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 34 TAMAÑO 8 - 9 NU CL EO FORMA Ninguna R- N/C COLOR CROMATINA NUCLEOLO C I TO PL AS MA COLOR Rosado con un tinte azulado +-Basofilo CONTENIDO Remanentes Ap. Golgi y mitocondrias Residual de RNA Produccion Hb incrementado
  • 35. ERITROCITO 35 TAMAÑO 7 – 7.5 NU CL EO FORMA Ninguna R- N/C COLOR CROMATINA NUCLEOLO C I TO PL AS MA COLOR Rosado Central Palido 1/3 de la Cell Acidofilo CONTENIDO NO mitocondrias
  • 37. PRUEBAS LABORATORIO • RECUENTO HEMATIES • HEMOGLOBINA • HEMATOCRITO • CONSTANTES CORPUSCULARES T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 37 LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
  • 39. FUNDAMENTO El recuento de HEMATIES consiste en CONTAR el número de ellos en 1 mm3 de SANGRE, realizando DILUCIÓN de la sangre con una SOLUCIÓN ISOTÓNICA (mantiene la morfología de los eritrocitos). La técnica se basa en diluir la sangre con líquido ISOTONICO ( HAYEM) en porciones exactas. El líquido de Hayem es una solución compuesta por sales, las cuales hacen que la solución obtenga el grado de isotónica permitiendo que los eritrocitos se mantengan completos.
  • 40. HAYEM NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V VOLUMEN TOTAL ML Tº CONSERVACI ÓN Hayem Cloruro mercúrico 0.25% 200 ml T°A Sulfato de sodio 2.5% Cloruro de sodio 0.5% Agua destilada 200 ml Preparación Mezclar y conservar
  • 41. CONTROLES CONTROL VALOR REFERENCIA VOLUMEN TEMPERATURA CONSERVACIÓN ESTABILIDAD BAJO 106/uL 2.44 ± 0.18 3 ml 4°C 1 mes NORMAL 106/uL 4.68 ± 0.24 3 ml 4°C 1 mes ALTO 106/uL 5.88 ± 0.30 3 ml 4°C 1 mes
  • 43. PROCEDIMIENTO 1 DILUCION 1/200 1. DILUYENTE Colocar en un tubo de ensayo de 12 x 75, 995 ul de la solución HAYEM. 2. MUESTRA Añadir al mismo tubo de ensayo 5 ul de SANGRE total y homogenizar. (Dilucion 1/200) 3. REPOSAR 1 minuto a temperatura ambiente. danielsuarez2005@gmail.com
  • 44. PROCEDIMIENTO 2 CARGADO CAMARA NEUBAUER 1. HOMOGENIZAR previamente antes de dispensar a la cámara de neubauer. 2. COLOCAR la lámina cubreobjetos sobre la CÁMARA DE NEUBAUER, 3. CARGAR aproximadamente con 10 ul del preparado y 4. REPOSAR por 2 minutos.
  • 45. PROCEDIMIENTO 3 LECTURA MICROSCOPIO 1. LECTURA Proceder a su respectiva lectura con el OBJETIVO de 40X. 2. ENFOCAR El campo de observación en las cuadriculas R1, R2, R3, R4, y R5 de la cámara de Neubauer. R1 R2 R3 R4 R5
  • 51. PROCEDIMIENTO 4 REGLAS CONTEO 40X 2. Si la superficie es mayor o igual al 50% de la célula esta dentro de la línea limítrofes del cuadrante se cuenta 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 1. Contar los eritrocitos en un área de 0,2 mm2 utilizando las cuadriculas R1, R2, R3, R4 y R5, aplicando las regla del SI y del NO. donde basta que toque la línea para considerarlo o no dependiendo la línea que toca
  • 52. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c1 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 40X
  • 53. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c2 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 40X danielsuarez2005@gmail.com
  • 54. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c3 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 40X
  • 55. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c4 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 40X
  • 56. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO 40X 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13
  • 57. CALCULOS - FORMULA RGR = N X 10 X 200 X 400 80 GR/mm3 16 X 5 16 X 25
  • 58. CALCULOS - FORMULA RGR = N X 10 X 200 X 400 80 GR/mm3
  • 59. CALCULOS - FORMULA RGR = N X 10 X 200 X 400 80 GR/mm3 MP/D PROPORCIÓN (1/N) VOLUMEN/ uL SANGRE TOTAL 1 1/200 5 HAYEM 199 995 danielsuarez2005@gmail.com
  • 62. FUNDAMENTO Los eritrocitos son lisados por acción de un AGENTE TENSIOACTIVO presente en el reactivo, liberando su contenido de hemoglobina en la solución. La HEMOGLOBINA liberada es OXIDADA a METAHEMOGLOBINA por el FERRICIANURO, siendo esta última convertida en CIANOMETAHEMOGLOBINA por la presencia de CIANURO. La absorbancia de la cianometahemoglobina es medida a 540 nm, siendo la intensidad de color obtenida, directamente proporcional a la concentración de hemoglobina en la muestra.
  • 63. FUNDAMENTO [Fe(ΙΙΙ)(CN)6]3- HbFe (ΙΙ) HbFe (ΙΙΙ) [Fe(ΙΙΙ)(CN)6]4- KCN KCN HEMOGLOBINA METAHEMOGLOBINA FERRICIANURO CIANURO CIANOMETAHEMOGLOBINA
  • 64. DRABKIN NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V VOLUME N TOTAL ML Tº CONSERVA CIÓN Reactivo Drabkin (CONCENTRADO) Bicarbonato de sodio 1.00 gr 1000 ml T°A Cianuro de potasio 0.05 gr Ferricianuro de potasio 0.20 gr Agua destilada 1000 ml Preparación Mezclar todo y guardar en frasco oscuro protegido de la luz. Estable un mes. NOMBRE PROPORC IÓN (1/N) VOLUMEN/ML TEMPERATU RA CONSERVACI ÓN ESTABILIDAD R1 DRABKIN 1 1/10 10 ml. 2 - 8 ºC. 1 HORA R2 AGUA DESTILADA 9 90 ml Preparación Agregar a una probeta o fiola de 100 ml , 10 ml del Reactivo de Drabkin y luego completar con agua destilada hasta la marca de 100 SOLUCION TRABAJO SOLUCION MADRE
  • 65. ESTANDAR HEMOGLOBINA 15 – 18 g/dL ESTANDAR PROCESO ESTANDAR LECTURA danielsuarez2005@gmail.com
  • 66. CONTROLES CONTROL VALOR REFERENCIA VOLUMEN TEMPERATURA CONSERVACIÓN ESTABILIDAD BAJO g/dL 6.1 ± 0.4 3 ml 4°C 1 mes NORMAL g/dL 13.8 ± 0.6 3 ml 4°C 1 mes ALTO g/dL 19.2 ± 0.8 3 ml 4°C 1 mes
  • 68. PROCEDIMIENTO 1 Drabkin+Muestra/Estandar 1. REACTIVO Agregar en cada tubo de ensayo de 12x75 , respectivo 1500 ul del reactivo DRABKIN diluido 1/10. 2. MUESTRA/ESTANDAR Luego añadir al mismo tubo, 6 ul de sangre total y homogenizar por inversión
  • 69. PROCEDIMIENTO 2 LECTURA 3.REPOSAR 5 Minutos a temperatura ambiente. 4.LECTURA Luego del reposo proceder a su respectiva lectura en el ESPECTROFOTÓMETRO MANUAL (Anotar las absorbancias y realizar el cálculo respectivo )o SEMIAUTOMATIZADO (Anotar el Resultado) a 540 nm.
  • 70. CALCULOS - FORMULA HB = Lectura D X S Lectura S g/dL
  • 71. CALCULOS - ejemplo g/dL FORMULA Factor = 18/Absorbancia Standar Hb (g/dL)=Factor x Absorbancia desconocida CALCULOS Factor = 18/0.564 = 31.91 Hb (g/dL) = 31.91 x 0.410 = 13.08
  • 74. FUNDAMENTO Es la RELACIÓN que existe entre el VOLUMEN que ocupa toda la MASA CELULAR HEMÁTICA y el VOLUMEN TOTAL DE SANGRE. Se expresa como un tanto por ciento del volumen total.
  • 76. CAPILARES Caracteristicas: •Longitud: 75 mm +/- 0.5 mm •Diámetro interno: 1.15 +/- 0.05 mm •Diametro externo: 1.55 +/- 0.05 mm •Espesor: 0.40 mm •Aforo o volumen 75 ul •Material del capilar: Borosilicato •Aditivo: no contiene
  • 77. CAPILARES Caracteristicas: •Código en la parte superior del capilar de color rojo. •Longitud: 75 mm +/- 0.05 mm •Diametro interno: 1.15 +/- 0.05 mm •Diámetro externo: 1.55 +/- 0.05 mm •Espesor: 0.40 mm •Aforo o volumen 75 ul •Material del capilar: Borosilicato •Aditivo: Heparina de sodio (Revestimiento interno con heparina sódica (Na-Heparin) 4 U.I. de Heparina
  • 78. SELLADOR Caracteristicas: •Cera especial Segillum. •Capa homogénea que garantiza un cierre totalmente uniforme del tubo capilar. •2 x 24 posiciones numeradas. •Fácilita el cierre y transporte de las muestras
  • 79. PROCEDIMIENTO 1 Llenado Capilar 1. Homogenizar la sangre total 8 veces por inversión suavemente. 2. Llenar el capilar azul del tubo con EDTA (Sangre venosa) danielsuarez2005@gmail.com
  • 80. PROCEDIMIENTO 2 Llenado Capilar 1. Limpiar con papel toalla los bordes sin tocar la punta. 2. Sellar con plastilina el extremo en contacto con la sangre, con la plastilina
  • 81. PROCEDIMIENTO 3 Sellado Capilar 1. Y para mayor seguridad taponar con parafina. 2. Colocar los tubos capilar en las ranuras del cabezal de la centrífuga, el extremo del tubo que se ha taponado con plastilina y parafina deberá apuntar hacia fuera, lejos del centro. Verificar que el número de la ranura corresponda al número de la muestra.
  • 82. PROCEDIMIENTO 3 Centrifugado Capilar 1. Asegurar con la Tapa evitando mover los capilares 2. Centrifugar a 10 000 rpm. por cinco minutos 3. Al finalizar la centrifugación cada uno de los tubos tendrá en su interior tres capas: – En la parte superior, una columna de plasma (P). – A la mitad, una capa delgada de glóbulos blancos (GB/Pq). – En la parte inferior y hasta el fondo, una columna de glóbulos rojos (GR).
  • 83. LECTURA TABLA/REGLA a) CON LA TABLA Luego de este procedimiento realizaremos la lectura en el CRITOCAPS, colocando la base de la columna de glóbulos rojos en la escala 0 y el plasma en la escala 100. El hematocrito es la base y el tope de la columna de glóbulos rojos como podemos observar en el siguiente esquema. b) CON LA REGLA Con una regla medir el volumen total, empezando desde la base de la columna de glóbulos rojos hasta el tope del plasma. (L1) como nos muestra el esquema. Luego medir la base y el tope de la columna de glóbulos rojos. (L2) como nos muestra el esquema.
  • 84. CALCULOS - FORMULA HTO = CH X 100 ST % CALCULOS REGLA CH 25 mm ST 54 mm VALOR OBTENIDO 46%
  • 86. CALCULOS - ejemplo g/dL FORMULA Factor = 18/Absorbancia Standar Hb (g/dL)=Factor x Absorbancia desconocida CALCULOS Factor = 18/0.564 = 31.91 Hb (g/dL) = 31.91 x 0.410 = 13.08
  • 89. VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO FORMULA V.C.M. = HTO X 10 GR/mm3 fL • Se mide en femtolitros. • Se utiliza principalmente para valorar anemias. • Microciticas o Macrociticas • La Muestra después de 4 horas / Tº Ambiente aumenta el VCM • La Muestra es estable por 48 horas / 4ºC danielsuarez2005@gmail.com
  • 91. HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIO FORMULA H.C.M. = HB X 10 GR/mm3 uL • Se expresa en picogramos • Hipocrómica o normocrómica • Se eleva falsamente por Hiperlipidemias, Paraproteinas, Crioaglutininas
  • 92. VALORES REFERENCIALES HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIO VALORES REFERENCIALES uL
  • 93. CONCENTRACION HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIO FORMULA C.H.C.M. = HB X 100 HTO % • Indica la cantidad de hemoglobina contenida en 100 ml de glóbulos rojos. • Necesario Clasificar Anemia según Wintrobe • El grado de disminución se relaciona con la cantidad de células Hipocromicas
  • 94. % CLASIFICACION MORFOLOGICA DE ACUERDO WINTROBE CONCENTRACION HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIO CLASIFICACION WINTROBE
  • 95. + RELACION DE LA HIPOCROMIA DEL EXTENDIDO SANGRE PERIFERICA Y LA CHCM CONCENTRACION HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIO HIPOCROMIA SP/CHCM danielsuarez2005@gmail.com
  • 97. ANCHO DISTRIBUCIÓN ERITROCITOS - RDW Expresa el grado de variación en el volumen eritrocitario. Complementa el VCM Clasifica en homogenea/heterogenea Valor normal: 11.5-14.5%
  • 98. RDW : 11.5-15.1 % CRITERIO CLASIFICACION MORFOLOGICAS ANEMIAS SEGÚN BESSMAN ANCHO DISTRIBUCIÓN ERITROCITOS RDW
  • 99. DESVIACION IZQUIERDA HISTOGRAMA ERITROCITOS DESVIACION DERECHA • VCM disminuido • Microcitosis • Esquistocitos • Macroplaquetas • VCM aumentado • Macrocitosis • Macrovalocitos • Crioaglutininas
  • 100. RECUENTO RETICULOCITOS RET • Fluorocromo que se une al ARN de los reticulocitos, • Evalúa actividad eritropoyetica de la M.O. • Constituyen entre 1% y 2% de todos eritrocitos circulantes • Aumento de reticulocitos se consideran que la anemia es regenerativas • Disminución de reticulocitos la anemia es arregenerativa • Las muestras hemolíticas disminuyen el recuento de reticulocitos danielsuarez2005@gmail.com
  • 101. FRACCION RETICULOCITOS INMADUROS VIR • VlR: 3% a 15,9% • Indicador del aumento de la eritropoyesis, • útil después de la quimioterapia, • Evalua la actIvidad M.O • Falsas elevaciones en leucemias
  • 102. HEMOGLOBINA RETICULOCITARIA CHr • Corresponde al grado de hemoglobinización de los reticulocitos circulantes. • VlR: 24,1 pg a 35,8 pg • Indica una inadecuada disponibilidad de Hierro para una optima Eritropoyesis • útil para evaluar depósitos de hierro en los pacientes con enfermedad renal que reciben eritropoyetina. • Detección de doping por eritropoyetina danielsuarez2005@gmail.com
  • 103. T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 103 HEMATIES LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
  • 104. GLOBULOS ROJOS También llamados eritrocitos, son "células" sanguíneas. FUNCIÓN: Transportan el oxigeno desde los pulmones hacia los diferentes tejidos del organismo. VALORES ALTOS: Problemas respiratorios. Personas fumadoras Deshidratación VALORES BAJOS: Anemia Hemorragia Enfermedad de la médula ósea. VALORES NORMALES: Glóbulos rojos hombre: 4,5-5 millones/mm3 Glóbulos rojos mujer: 4-4,5 millones/mm3 «HEMATÍES O ERITROCITOS»
  • 105. DEL TAMAÑO DE LA COLORACIÓN DE LA FORMA • Anisocitosis Diferentes tamaños. • Microcitosis Menor tamaño. • Macrocitosis Mayor tamaño. • Megalocitosis Grandes y ovalados. • Hipocromía C.H.C.M. disminuida  30% • Hipercromía Esferocito,Hb concentrada • Poiquilocitosis Distintas formas • Ovalocitosis Forma ovalada • Eliptocitosis Forma elíptica • Esferocitosis Forma esférica • Esquizocitosis Fragmentos de G.R.
  • 106. HEMATOCRITO El hematocrito es el porcentaje del volumen total de la sangre compuesta por glóbulos rojos. VALORES ALTOS DE HEMATOCRITO Policitemia Cardiopatía congénita. Deshidratación Hipoxia Fibrosis pulmonar VALORES BAJOS DE HEMATOCRITO Anemia Leucemia . Desnutrición. Sobre hidratación Destrucción de los glóbulos rojos. VALORES NORMALES: Hematocrito hombre:42-52% Hematocrito mujer: 37-48%
  • 107. HEMOGLOBINA Es una proteína encargada de llevar el oxígeno y que da el color rojo a la sangre. CUALITATIVAS: Defectos genéticos Alteraciones de la combinación CUANTITATIVAS: Anemia Poliglobulia. VALORES NORMALES: Hemoglobina hombre: 13-18 g/dL Hemoglobina mujer:12-16 g/dL
  • 108. CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA (C.H.C.M) Es el índice que valora la concentración de hemoglobina que lleva cada hematíe; es decir relaciona la cantidad de hemoglobina que lleva el hematíe con su volumen. POR EJEMPLO: Cuando la concentración de hemoglobina disminuye aparecen las anemias. VALORES NORMALES: 33-37 pq
  • 109. EL VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO (V.C.M) Es el valor que refleja el tamaño de los hematíes. ALTERACIONES VCM alto indica que los glóbulos rojos son grandes. Déficit de vitamina B12 o de ácido fólico, Patologías del hígado, Consumo elevado de alcohol VCM bajo indica que los glóbulos rojos son pequeños. Talasemia Déficit de hierro VALORES NORMALES 86-98 micromm3 danielsuarez2005@gmail.com
  • 110. HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA (H.C.M) Indica la cantidad de hemoglobina que hay en cada glóbulo rojo. En cierto modo nos está diciendo lo 'rojos' que son los hematíes. ALTERACIONES HCM Está aumentado . Déficit de vitamina B12, Déficit de ácido fólico HCM Está disminuido . Talasemia Déficit de hierro VALORES NORMALES: 27-32 pg
  • 111. LEUCOPOYESIS LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
  • 113. GRANULOPOYESIS CELL PROGENITORA CELL PRECURSORA CELL CIRCULANTE CELULA MEDULA OSEA SP NEUTROFILO MB PM M mM B S GRANULOS 1º 0 E A E M 0 0 0 GRANULOS 2º 0 0 AZ-RS RS-VI EOSINOFILO MB PM M mM B S GRANULOS 1º 0 E A E M 0 0 0 GRANULOS 2º 0 0 RJ-NJ NJ-RJ BASOFILO MB PM M mM B S GRANULOS 1º 0 E A E M 0 0 0 GRANULOS 2º 0 0 AP AN AZ-NG
  • 114. GRANULOPOYESIS MIELOBLASTO PROMIELOCITO MIELOCITO METAMIELOCITO BANDA SEGMENTADO MB PM M mM B S
  • 115. MIELOBLASTO 115 TAMAÑO 15 - 20 N U C L E O FORMA Redonda / Lig. Ovalado R- N/C Muy alta 4:1 COLOR Purpura Rojizo CROMATINA Delicada y dispersa NUCLEOLO 2-3 C I T O P L A S M A COLOR Azul Intenso o pàido Mas claro adyacente al nucleo Basofilo CONTENIDO No gránulos o vacuolas danielsuarez2005@gmail.com
  • 116. PROMIELOCITO 116 TAMAÑO 20 - 25 N U C L E O FORMA Redonda / Ovalado Central - Excentrico R- N/C alta 2:1 COLOR Purpura CROMATINA Relativamente Fina poniendose cada vez mas gruesa NUCLEOLO 2-3 variando de visibles a indistinguibles C I T O P L A S M A COLOR Azul Mas claro adyacente al nucleo Basofilo CONTENIDO Pocos o muchos granulos primarios color azul oscuro o azul rojiso
  • 117. MIELOCITO NEUTROFILO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 117 TAMAÑO 20 - 25 N U C L E O FORMA Redonda / Ovalado Aplanado o Endido en un lado R- N/C Baja 3:1 3:2 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Presenta mas tosca NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos:0.3 um Numero Variable de granulos inespecificos Aparecer Pequeños granulos especificos rosado o rojizo junto a el núcleo luego en todo el citoplasma
  • 118. MIELOCITO EOSINOFILO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 118 TAMAÑO 20 - 25 N U C L E O FORMA Redonda / Ovalado Aplanado o Endido en un lado R- N/C Baja 3:1 3:2 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Presenta mas tosca NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.2-1.0 um Numerosos grandes Marron Naranja Azul naranja
  • 119. MIELOCITO BASOFILO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 119 TAMAÑO 20 - 25 N U C L E O FORMA Redonda / Ovalado Aplanado o Endido en un lado R- N/C Baja 3:1 3:2 COLOR Morado CROMATINA Presenta mas tosca NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.5-1.5 um Pocos granulos grandes Purpura azulano Negro azulado
  • 120. METAMIELOCITO NEUTROFILO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 120 TAMAÑO 10 - 15 N U C L E O FORMA Ariñonado Tipico y Ligeramnete Endido R- N/C Baja 7:3 1:1 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Gruesa y azul negruzco NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.3 um Rosado o Azul rojizo
  • 121. METAMIELOCITO EOSINOFILO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 121 TAMAÑO 10 - 15 N U C L E O FORMA Ariñonado Tipico y Ligeramnete Endido R- N/C Baja 7:3 1:1 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Gruesa y azul negruzco NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.2-1.0 um Naranja brillantes Rojisos
  • 122. METAMIELOCITO BASOFILO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 122 TAMAÑO 10 - 15 N U C L E O FORMA Ariñonado Tipico y Ligeramnete Endido R- N/C Baja 7:3 1:1 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Gruesa y azul negruzco NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.5-1.5 um AZUL OSCURO danielsuarez2005@gmail.com
  • 123. BANDA NEUTROFILO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 123 TAMAÑO 9 - 12 N U C L E O FORMA Notablemente indentado R- N/C Baja 1:2 1:1 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Gruesa y azul negruzco NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.3 um Rosado o Azul rojizo
  • 124. BANDA EOSINOFILO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 124 TAMAÑO 9 - 12 N U C L E O FORMA Notablemente indentado R- N/C Baja 1:2 1:1 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Gruesa y azul negruzco NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.2-1.0 um Naranja brillantes Rojisos
  • 125. BANDA BASOFILO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 125 TAMAÑO 9 - 12 N U C L E O FORMA Notablemente indentado R- N/C Baja 1:2 1:1 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Gruesa y azul negruzco NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.5-1.5 um AZUL OSCURO
  • 126. NEUTROFILO SEGMENTADO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 126 TAMAÑO 9 - 12 N U C L E O FORMA 3 – 5 Lobulos unidos filamento cromatina R- N/C Baja 1:3 1:5 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Completamente condensada NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.3 um Uniformente distribuidos Rosado o Violeta rosado
  • 127. EOSINOFILO SEGMENTADO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 127 TAMAÑO 9 - 12 N U C L E O FORMA 2 –3 Lobulos unidos filamento cromatina R- N/C Baja 1:3 1:5 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Completamente condensada NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.2-1.0 um Naranja brillantes Rojisos
  • 128. BASOFILO SEGMENTADO Danielsuarez2005@hot mail.com T.M. SUAREZ AGUILAR DANIEL ANGEL 128 TAMAÑO 9 - 12 N U C L E O FORMA 2 Lobulos unidos filamento cromatina Cubierto granulos R- N/C Baja 1:3 1:5 COLOR Purpura oscuro CROMATINA Completamente condensada NUCLEOLO Ninguno C I T O P L A S M A COLOR Azul Rosado CONTENIDO Granulos: 0.5-1.5 um AZUL OSCURO
  • 131. PRUEBAS LABORATORIO LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM • RECUENTO LEUCOCITOS • FORMULA DIFERENCIAL
  • 133. FUNDAMENTO El recuento de LEUCOCITOS consiste en CONTAR el número de ellos en 1 mm3 de SANGRE, realizando DILUCIÓN de la sangre con una SOLUCIÓN HIPOTONICA (mantiene la morfología de los Leucocitos). La técnica se basa en diluir la sangre con líquido HIPOTONOCA ( TURK) en porciones exactas. El ÁCIDO ACÉTICO produce lisis de los eritrocitos sin alterar a los leucocitos. El VIOLETA DE GENCIANA tiñe el núcleo de los leucocitos para que estos puedan observarse mejor. El violeta de genciana puede ser sustituido por azul de metileno.
  • 134. TURCK NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V VOLUMEN TOTAL ML Tº CONSERVAC IÓN TURCK Acido glacial acético 2,0 ml 100 ml T°A Violeta de genciana 1,0 ml Agua destilada 100 ml Preparación Mezclar los reactivos y guardar en frasco ámbar.
  • 135. CONTROLES CONTROL VALOR REFERENCIA VOLUMEN TEMPERATURA CONSERVACIÓN ESTABILIDAD BAJO 103/uL 2.0 ± 0.5 3 ml 4°C 1 mes NORMAL 103/uL 7.7 ± 1.0 3 ml 4°C 1 mes ALTO 103/uL 20.4 ± 2.5 3 ml 4°C 1 mes
  • 137. PROCEDIMIENTO 1 DILUCION 1/20 1. DILUYENTE Colocar en un tubo de ensayo de 12 x 75, 190 ul de la solución TURCK. 2. MUESTRA Añadir al mismo tubo de ensayo 10 ul de SANGRE total y homogenizar. (Dilucion 1/20) 3. REPOSAR 1 minuto a temperatura ambiente. danielsuarez2005@gmail.com
  • 138. PROCEDIMIENTO 2 CARGADO CAMARA NEUBAUER 1. HOMOGENIZAR previamente antes de dispensar a la cámara de neubauer. 2. COLOCAR la lámina cubreobjetos sobre la CÁMARA DE NEUBAUER, 3. CARGAR aproximadamente con 10 ul del preparado y 4. REPOSAR por 3 - 5 minutos.
  • 139. PROCEDIMIENTO 3 LECTURA MICROSCOPIO 1. LECTURA Proceder a su respectiva lectura con el OBJETIVO de 10X. 2. ENFOCAR El campo de observación en las cuadriculas L1,L2.L3 Y L4 de la cámara de Neubauer. L1 L2 L3 L4
  • 144. PROCEDIMIENTO 4 REGLAS CONTEO 10X 2. Si la superficie es mayor o igual al 50% de la célula esta dentro de la línea limítrofes del cuadrante se cuenta 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 1. Contar los LEUCOCITOS en un área de 0,25 mm2 utilizando las cuadriculas L1,L2,L3,L4, aplicando las regla del SI y del NO. donde basta que toque la línea para considerarlo o no dependiendo la línea que toca danielsuarez2005@gmail.com
  • 145. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c1 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 10X
  • 146. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c2 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 10X
  • 147. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c3 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 10X
  • 148. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c4 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 10X
  • 149. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 10X
  • 150. CALCULOS - FORMULA RGB = N X 10 X 20 4 GB/mm3
  • 151. CALCULOS - FORMULA RGB = N X 10 X 20 4 GB/mm3 danielsuarez2005@gmail.com
  • 152. CALCULOS - FORMULA MP/D PROPORCIÓN (1/N) VOLUMEN/ uL SANGRE TOTAL 1 1/20 10 HAYEM 19 190 RGB = N X 10 X 20 4 GB/mm3
  • 155. FUNDAMENTO Formula Diferencial La fórmula leucocitaria nos da información sobre el PORCENTAJE de cada tipo de LEUCOCITOS, cuyos VALORES RELATIVOS en base a su MORFOLOGÍA y CARACTERÍSTICAS TINTORIALES. A partir de estos valores y de la cuenta total de glóbulos blancos podremos calcular los VALORES ABSOLUTOS de cada línea celular en sangre periférica, y así compararlos con los valores normales de cada una de ellas.
  • 156. FUNDAMENTO Coloracion Wright FIJACION COLORACION EOSINATO-AZUL DE METILENO EOSINATO-AZUL DE METILENO AGUA DESTILADA METANOL EOSINA B EOSINA Y AZUL METILENO CELULAS ESTRUCTURAS BASICAS ESTRUCTURAS ACIDAS Deshidrata las Celulas Agrupamientos básicos de las moléculas de hemoglobina y a las proteínas básicas Los agrupamientos de ácidos nucleicos, las proteínas de los núcleos celulares y el citoplasma inmaduro reactivo
  • 157. WRIGHT NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V VOLUMEN TOTAL ML Tº CONSERVACIÓN COLORANTE WRIGHT Eosinato azul de metileno 0.3 g 100ml T°A Metanol 97,0 ml Glycerol 3.0,0 ml Preparación Colorante de Wright: para 100 mL se requiere de colorante de Wright (0.3g), metanol (97.0 mL) y glicerol (3.0 mL). Disolver en un mortero el colorante con el glicerol. Una vez disuelto se adiciona el metanol trasvasándolo a un frasco oscuro. Agitar. Filtrar antes de usar. Solución amortiguadora tamponada: en un litro de agua destilada se agregan 3.76 g de hidrofosfato disódico (Na2HPO4* 2H20) y 2.10g de fosfato de potasio dihidrogenado (KH2PO4). Mezclar todos los reactivos y guardar en frasco de vidrio en lugar fresco. Ajustar el pH a 7.2.
  • 160. PROCEDIMIENTO 1 FROTIS 1. Colocar una gota de sangre total en un borde de la lámina. 2. Luego con una lámina extensora en posición de 45° dispensar la sangre hacia los bordes y extender.
  • 161. PROCEDIMIENTO 1 FROTIS 1. Una vez realizado el extendido correctamente, esperar que seque a temperatura ambiente. 2. Luego de haber secado el frotis sanguíneo, proceder a la fijación y coloración.
  • 162. PROCEDIMIENTO 1 FIJACION/COLORACION 1. Colocar un puente de soporte y el frotis sanguíneo a fijar, sobre el lavadero. 2. Agregar 5 gotas del colorante WRIGHT o la cantidad necesaria para cubrir el frotis por el tiempo de 30’’ - 1’ actuando como fijador.
  • 163. PROCEDIMIENTO 1 FIJACION/COLORACION 1. Pasado el tiempo determinado proceder a la coloración. Añadir 5 gotas o la cantidad necesaria de agua tamponada. 2. Luego soplar en forma circular hasta formar un brillo metálico sobre la superficie de la coloración y reposar por el tiempo de 5’ - 10’.
  • 164. PROCEDIMIENTO 1 LAVADO 1. Pasado determinado tiempo enjuagar la lámina coloreada con un chorro de agua débil desde la cabeza, el agua debe desplazarse hacia a la cola.
  • 165. PROCEDIMIENTO 1 SECADO LECTURA 1. Luego secar a temperatura ambiente 2. Una vez seca la lámina coloreada llevar al microscopio para proceder a su lectura entre el cuerpo y la cola con objetivo de 100X (inmersión)
  • 168. LEUCOCITOS LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
  • 169. «LEUCOCITOS» GLOBULOS BLANCOS Estas células son unidades móviles que forman parte del sistema inmunológico que el cuerpo usa para combatir infecciones. Los glóbulos blancos viajan por el torrente sanguíneo a las áreas de infección y destruyen las bacterias que la están causando. LEUCOCITOSIS Infecciones bacterianas piógenas Inflamaciones Neoplasias Quemaduras Infarto del miocardio LEUCOPENIA Aplasia medular TBC Fiebre tifoidea Sida y Hepatitis Enfermedades virales VALORES NORMALES: 4.000 o 5.000 a 10.000 mm3
  • 170. NEUTRÓFILOS Son un tipo granulocitos. Se encargan de atacar a las sustancias extrañas (básicamente bacterias, que entran en nuestro organismo. SU FUNCIÓN ES: Fagocitar y destruir a bacterias y participar en el inicio del proceso inflamatorio. NEUTROFILIA Infecciones bacterianas agudas. Comienzo de infecciones virales Quemaduras Drogas (Prednisona 40mg) NEUTROPENIA Anemia perniciosa o aplástica: Por deficiencia de la vitamina B12 Pueden darse por menor producción o maduración, ó por mayor destrucción o secuestro. VALORES NORMALES: *Neutrófilos segmentados 55-65% *Neutrófilos en cayado(inmaduros) 0-5%
  • 171. LINFOCITOS Son células de tipo granulocitos de alta jerarquía en el sistema inmunitario principalmente encargadas de la inmunidad especifica o adquirida. SU FUNCION ES: Fagocitar o "comerse" a diferentes microorganismos o restos celulares. LINFOCITOSIS Inflamaciones Varicela Parotiditis Hepatitis TBC LINFOPENIA Anemias aplásicas Terapias esteroidales Quimioterapias Sida Enfermedades virales VALORES NORMALES: 23-35%
  • 172. MONOCITOS Son células de tipo granulocitos de mayor tamaño en la sangre. Estos son activados tanto en procesos virales como bacterianos. SU FUNCION ES: La producción de anticuerpos y de la destrucción de células anormales. MONOCITOSIS TBC caseosa Leucemia Infecciones virales Infecciones protozoaricas VALORES NORMALES: 4-8%
  • 173. EOSINÓFILOS Un eosinófilo es un leucocito de tipo granulocito pequeño derivado de la médula ósea. Los eosinofilos son los leucocitos responsables por el combate de parásitos y por el mecanismo de la alergias. EOSINOFILIA: Infecciones parasitarias. Reacciones alergicas. Triquinosis (parasitosis tisular) EOSINOPENIA: Infecciones bacterianas Infecciones virales. Stress treumatico, fisico, emotivo. Tratamiento con adrenalina, ACHT,Insulina e histamina. VALORES NORMALES: 0,5 -4%
  • 174. BASOFILOS Son de tipo granulocitos, y menos común de los leucocitos en la sangre. FUNCIÓN: Intervienen en las reacciones de hipersensibilidad. BASOFILIA Leucemia Sinusitis crónica Coexiste con eosinofilia en alérgias VALORES NORMALES: 0-2%
  • 175. TROMBOPOYESIS LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
  • 178. •Zona PERIFÉRICA • Zona ESTRUCTURAL • Zona ORGANELOS •Sistema Membranas Adhesión y Agregación Estructura y Soporte Secreción y Almacenamiento ESTRUCTURA DE LA PLAQUETA
  • 179. Gránulos Cuerpos densos Gránulos alfa Gránulos lisosómicos •Mediadores de función de plaquetas •Hemostasia •ADP •ATP •Fosfatos •Calcio •Serotonina F. von willebrand Factor V Fibrinogeno Antiplasmina a Plasminógeno Enzimas hidroliticas Mitocondrias Glucógeno F. 4 plaquetario F. Crecimiento plaquetario Tromboglobulina b Albúmina Trombospondina Fibronectina Proteínas Hemostásicas No Hemostásicas Específicas No Específicas ZONA DE ORGANELOS
  • 180. Anucleadas 2 a 3 um 150.000 a 450.0000/ml Vida media 8 -10 días
  • 182. FUNDAMENTO El recuento de PLAQUETAS consiste en CONTAR el número de ellos en 1 mm3 de SANGRE, realizando DILUCIÓN de la sangre con una SOLUCIÓN HIPOTONICA (DESTRUYE la morfología de los eritrocitos). La técnica se basa en diluir la sangre con líquido HIPOTONICO ( OXALATO AMONIO 1%) lisa el resto de las células sanguíneas (leucocitos y hematíes) para permitir el recuento de plaquetas en el hemocitómetro.
  • 183. OXALATO AMONIO 1% NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V VOLUMEN TOTAL ML Tº CONSERVA CIÓN OXALATO DE AMONIO 1% Oxalato de amonio 1 g 100ml 15-30ºC Agua destilada 100 ml PREPARACIÓN Mesclar el oxalato de amonio con el agua destilada.
  • 184. CONTROLES CONTROL VALOR REFERENCIA VOLUMEN TEMPERATURA CONSERVACIÓN ESTABILIDAD BAJO 103/uL 68 ± 20 3 ml 4°C 1 mes NORMAL 103 /uL 268 ± 40 3 ml 4°C 1 mes ALTO 103 /uL 553 ± 60 3 ml 4°C 1 mes
  • 186. PROCEDIMIENTO 1 DILUCION 1/20 1. DILUYENTE Colocar en un tubo de ensayo de 12 x 75, 190 ul de la solución HAYEM. 2. MUESTRA Añadir al mismo tubo de ensayo 10ul de SANGRE total y homogenizar. (Dilucion 1/20) 3. REPOSAR 15 minuto a temperatura ambiente.
  • 187. PROCEDIMIENTO 2 CARGADO CAMARA NEUBAUER 1. HOMOGENIZAR previamente antes de dispensar a la cámara de neubauer. 2. COLOCAR la lámina cubreobjetos sobre la CÁMARA DE NEUBAUER, 3. CARGAR aproximadamente con 10 ul del preparado y 4. REPOSAR por 2 minutos.
  • 188. PROCEDIMIENTO 3 LECTURA MICROSCOPIO 1. LECTURA Proceder a su respectiva lectura con el OBJETIVO de 40X. 2. ENFOCAR El campo de observación en las cuadriculas R1, R2, R3, R4, y R5 de la cámara de Neubauer. R1 R2 R3 R4 R5
  • 194. PROCEDIMIENTO 4 REGLAS CONTEO 40X 2. Si la superficie es mayor o igual al 50% de la célula esta dentro de la línea limítrofes del cuadrante se cuenta 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 1. Contar los eritrocitos en un área de 0,2 mm2 utilizando las cuadriculas R1, R2, R3, R4 y R5, aplicando las regla del SI y del NO. donde basta que toque la línea para considerarlo o no dependiendo la línea que toca
  • 195. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c1 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 40X
  • 196. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c2 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 40X
  • 197. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c3 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 40X
  • 198. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO c4 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13 40X
  • 199. PROCEDIMIENTO 4 EJEMPLO 40X 1 2 3 4 8 7 6 5 9 10 11 12 16 15 14 13
  • 200. CALCULOS - FORMULA RPq = N X 10 X 20 X 400 80 Pq/mm3 16 X 5 16 X 25
  • 201. CALCULOS - FORMULA RGR = N X 10 X 20 X 400 80 GR/mm3
  • 202. CALCULOS - FORMULA RGR = N X 10 X 20 X 400 80 GR/mm3 MP/D PROPORCIÓN (1/N) VOLUMEN/ uL SANGRE TOTAL 1 1/20 10 OXALATO AMONIO 1% 19 190
  • 203. VALORES REFERENCIALES GRUPO ETAREO MUJER VARON UNIDAD REFERENCIA Recién nacido 192 000 – 213 000 mm3 193 000 – 215 000 mm3 Niño 280 000 – 323 000 mm3 290 000 – 320 000 mm3 Adulto 150 000 – 400 000 mm3 150 000 – 400 000 mm3 Anciano 150 000 – 400 000 mm3 150 000 – 400 000 mm3
  • 204. PLAQUETAS LIC. SUAREZ AGUILAR DANIEL DANIELSUAREZ2005@GMAIL.COM
  • 205. PLAQUETAS Son las células responsables por el inicio del proceso de coagulación. TROMBOCITOSIS Anemia por déficit de hierro Síndrome nefrótico TROMBOCITOPENIA Destrucción aumentada Metástasis de cáncer Drogas Autoinmunidad VALORES NORMALES: 150.000 a 450.000 microlitro “Trombocitos”
  • 206. HEMATOLOGIA T.M. DANIEL A. SUAREZ AGUILAR danielsuarez2005@gmail.com
  • 208. INTRODUCCIÓN El estudio e interpretación del frotis de sangre periférica, representa la extensión morfológica del estado de los elementos celulares de la sangre (hematíes, leucocitos plaquetas). Puede considerarse el paso más importante en la identificación del mecanismo responsable de una anemia, talasemias u otras patologías.
  • 209. A) OBJETIVO: Proveer información para el diagnóstico Proveer datos para la selección de exámenes pertinentes, para establecer un diagnóstico. Evaluar la serie blanca, roja y plaquetaria. B) ALCANCE: El estudio e interpretación del frotis de sangre periférica como parte del hemograma representa la extensión morfológica del estado de los elementos celulares de la sangre. C) MUESTRA: Sangre total MARCO TEÓRICO
  • 210. El frotis de sangre periférica obtenido por punción capilar y coloreada con Wrigth o Giemsa, suministra un medio para estudiar la sangre y determinar las variaciones y anormalidades de estructura forma y tamaño de los eritrocitos; su contenido de hemoglobina y sus propiedades de coloración. Permite además observar agrupaciones de plaquetas y los glóbulos blancos, cada uno con su morfología característica. 1. Definición
  • 212.
  • 213. 2.1. ALTERACION ERITROCITARIAS: A) FORMA 2. Alteraciones NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN ESQUISOCITOS- ESQUISTOCITOS También llamados esquistocitos, son células fragmentadas con una sobrevida corta de los eritrocitos sobre todo por una destrucción acelerada. -Púrpura trombocitopenia trombotica -Coagulación intravascular diseminada -Exposición o toxinas -Síndrome hemolítico urémico -Uremia -Carcinoma - Prótesis intravasculares -Quemaduras y otras condiciones. TEARDROP- DACRIOCITOS Se ignora el mecanismo de su formación. Su morfología es como lágrima o raqueta. -Anemia ferropénica o megaloblastica. -Milelofibrosis -Trasplante hematopoyético
  • 214. NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN ELIPTOCITOS U OVALOCITOS Se encuentran deformados teniendo forma elíptica (eliptocitos) u ovalada (ovalocitos) en vez de bicóncava. -Eliptocitos hereditaria. Existen tres tipos: -Común -Eliptocitosis esferocítica -Eliptocitosis estomatocítica -Anemia megaloblastica. -Talasemias -Anemias ferropénicas ESFEROCITOS Eritrocitos de forma esférica cuyo diámetro es menor que lo normal y que aparecen hipercrómicos por su forma. -Esférocitos hereditaria -EHRN(enfermedad hemolítica del recién nacido) -Adultos: anemias hemolíticas autoinmunes e isoinmunes. -Ictericia hemolítica -Fostesplectomia -Quemadura DREPANOCITOS Células en forma de hoz, ya sea en forma espontánea o inducida son muy característicos de la anemia por presencia de hemoglobina S o anemia de células falciformes. -Mayoría de anemias -Hemoglobinopatía (rara)
  • 215. NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN ESTOMATOCITOS Células que adoptan una configuración de boca de pez, se ven en personas con grupos Rh "nuil" que usualmente tienen un grado moderado de anemia. -Cirrosis hepática -Estomatosis hereditaria -Cirrosis alcohólica -Autoanticuerpos EQUINOCITOS- CELULAS BUR Células cuya superficie externa (membrana) ha sido socavada dándole a la misma un aspecto festoneado característico. Se ignora la etiopatogenia. -Déficit de piruvatoquinaza -Uremia -Enfermedades renales -Carcinoma gástrico -Anemia hemolítica ACANTOCITOS- CÉLULAS SPUR Células con proyecciones en su superficie (membrana) en forma de puntas irregulares. No deben confundirse con crenocitos, éstos últimos aparecen por defectos técnicos al preparar las láminas o recoger la muestra. - Se encuentran en la a-betalipo proteinemia. -Hepatopatías -post-esplectomia
  • 216. B) COLOR NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN NORMO-CROMIA Coloración normal de hematíes. -Personas sanas. HIPOCROMIA Indica disminución del contenido de hemoglobina de los eritrocitos. Cuando se asocia con macrocitosis y/o ovalocitosis a menudo se debe a deficiencia combinada de hierro y factores de maduración (usualmente ácido fólico). -Anemia ferropénica -Envenenamiento con plomo -talasemias. -Anemia sideroblástica -Por transfusión reciente de un paciente con anemia hipocrómica. HIPERCROMIA Coloración superior a lo normal -Esferositosis
  • 217. NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN ANISOCROMIA Coexistencia de eritrocitos normocromicos e hipercromicos. -Anemia sideropenicas (en tto) -Después de transfusión POLICROMATOFILA . Término que denota la presencia de eritrocitos incompletamente hemoglobinizados (jóvenes), el aumento de estas células en la sangre periférica indica actividad eritropoyética, hemorragia reciente. -Respuesta al tratamiento con hierro o ácido fólico o respuesta compensadora en la anemia por deficiencia de hierro o ácido fólico. - Anemias regenerativas.
  • 218. C) AGRUPACIÓN NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN FENÓMENO DE ROULEAUX Indica el agrupamiento de los eritrocitos en forma de monedas apiladas; a veces es un artefacto que se produce en la preparación de los frotis. -Hiperproteinemia e hiperviscosidad -Mieloma múltiple Macroglobulinemia -Estados inflamatorios crónicos. -Cuerpo del frotis AGLUTINACIÓN Nótense las acumulaciones irregulares de eritrocitos agregados. -Cuerpo del frotis
  • 219. D) INCLUSIONES NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN CUERPOS DE HOWELL-JOLLY Representan remanentes de DNA resultantes de cariorrexis en los precursores del eritrocito maduro. -Después de esplenectomía -Anemia de células Falciformes -En talasemias -Anemia perniciosa -Anemias hemolíticas severas. -Hipoesplenismo ANILLOS DE CABOT Línea muy fina en forma de anillo de color rosado o azulado. -Carecen de especificidad, aunque su presencia traduce trastorno profundo de eritropoyesis. PUNTEADO BASOFILICO Indica remanentes de RNA en los eritrocitos (reticulocitos), este hallazgo es importante en pacientes con intoxicación. -Intoxicación con plomo -talasemias -Anemias hemolíticas –Anemia perniciosa severa.
  • 220. CUERPOS DE PAPPENHEIMER. Son gránulos que contiene hierro (llamados también gránulos sideróticos). -Pacientes con hipoesplenismo -Anemia por exceso de hierro -Anemias hemolíticas de varias etiologías. CUERPOS DE HEINZ. Representan precipitados de hemoglobina en el interior de los eritrocitos. No se encuentran con la coloración usual y para demostrarlos es necesario usar coloraciones especiales. -En anemias hemolíticas causadas por deficiencia de Glucosa 6 fosfato deshidrogenasa -Talasemias -Drogas (fenacetina) SIDEROCITOS Hematíes en sangre con gránulos verdes Tinción con azul de Prusia de perls Hierro no hemoglobínico Normalmente es el 0.3 % de los hematíes. -Anemias sideroacresticas -Talasemias -Esplenectomía NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
  • 221. NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN NORMOCITOS. Hematíes de tamaño igual entre ellos. -Personas sanas. MICROCITOS. Consiste en la existencia de unos hematíes con un diámetro longitudinal inferior a 7 µm y un volumen inferior a 80 µm³, se encuentran en anemia por déficit de hierro (probablemente la causa más común en nuestro medio) -Talasemias -Anemias sideroblásticas -Intoxicación con plomo -Anemia de las enfermedades crónicas. E) TAMAÑO
  • 222. NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN MACROCITOS. Consiste en la existencia de unos hematíes con un diámetro longitudinal superior a 8 µm y un volumen superior a 100 µm³, a menudo indican deficiencia de ácido fólico o vitamina B12, condiciones en las cuales con frecuencia se acompaña de ovalocitosis. -Puede encontrarse macrocitosis sin ovalocitosis en pacientes con hipotiroidismo -Enfermedades hepáticas -La presencia de ligera macrocitosis en el recién nacido es un hallazgo normal. ANISOCITOSIS. Indica variación del tamaño de los eritrocitos. -También puede ser un cambio mínimo o una alteración muy evidente con presencia de células características de una determinada entidad.
  • 223. 2.2. ALTERACION LEUCOCITARIAS: A) CITOPLASMÁTICO NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN GRANULACIONES TOXICAS Las llamadas granulaciones tóxicas no son más que lisosomas agrandados y activos de los leucocitos polimorfonucleares que por su mayor afinidad por los colorantes básicos aparecen como gránulos negruzcos purpúricos en estas células. -Se observan en las personas con estados infecciosos agudos, sobre todo bacterianos. CUERPOS DE DOHLE Los cuerpos de Dohle, cuyo origen no es muy bien definido. -Aparecen en las células de pacientes con infecciones agudas -Quemaduras y con tratamiento con medicamentos tóxicos, incluyendo algunos antibióticos.
  • 224. NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN ANOMALÍA DE CHEDIAK- HIGASHI. Morfológicamente los leucocitos, en particular los neutrófilos, presentan granulaciones gigantes. Los pacientes son muy susceptibles a las infecciones por un defecto de los neutrófilos para destruir las bacterias y muchos mueren en la primera década. -Neuropatías -Neutropenia -Infecciones recurrentes -Trombocitopenia -Hepatoespíen o megalia. ANOMALÍA DE ALDER- REILLY Este es un defecto autosómico recesivo que se caracteriza por la presencia de gránulos grandes en los neutrófilos y otros leucocitos. Y es parte de un defecto metabólico de los polisacáridos. - Se asocia con defectos hereditarios como el gargolismo
  • 225. DESGRANULACION Neutrófilo sin granulación aparece azulado y agranular. -Indicativo de hemopatía grave. -Leucemias agudas mieloides. -Síndromes mielodisplasicos. VACUOLIZACION DE LOS LEUCOCITOS. Se ve en personas tratadas con distintos medicamentos. Que ejercen un efecto tóxico sobre los leucocitos. -Este hallazgo es indicativo de edema intracelular. ANOMALÍA DE MAY HEGGLIN Es un defecto autosómico dominante caracterizado por la presencia de plaquetas gigantes, cuerpos de Dohle en los neutrófilos, basófilos, eosinófilos y monocitos, con o sin trombocitopenia. -Leucopenia leve -Pacientes presentan buena salud en la mayoría de los casos. NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
  • 226. B) NUCLEAR NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN HIPERSEGMENTACION Polinucleares con 4 o más segmentos. -Anemias megaloblasticas. ANOMALÍA DE PELGER -HUET En este trastorno benigno, la mayoría de los granulocitos es bilobulada. Con frecuencia, el núcleo presenta una configuración de lentes o “pince-nez”. -Anomalía congénita -Seudopelger en: -Anm aplasica -Anm perniciosa -Síndromes mielodisplasicos y mieloproliferativos crónicos - Leucemias mieloblasticas LINFOCITOS ATÍPICOS Son linfocitos transformados por estimulación antigénica. La presencia de un número significativo de linfocitos atípicos en la circulación, por ejemplo, más de 20% es indicativa de una infección viral aguda. -Mononucleosis infecciosa -Hepatitis viral -Enfermedad de inclusión citomegálica
  • 227. SÍNDROME DE SÉZARY Linfocitos con frecuentes núcleos convolucionados (células de Sezary) -En un paciente con micosis fungoide avanzada. NUCLEOS EN ANILLO Hiposegmentacion nuclear con gran agujero central. -Síndrome mieloproliferativos crónicos -Leucemias agudas -Alcoholismo crónico -Momonucleosis PLEOCARIOCITO Hipersegmentacion nuclear con gigantismo celular. -Anemias megaloblasticas NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN
  • 228. 2.3. ALTERACION PLAQUETARIA : A) FORMA NOMBRE DESCRIPCION IMAGEN TROMBOCITOS IRREGULARES Son fragmentos citoplasmáticos pequeños, irregulares y carentes de núcleo, de 2-3 µm de diámetro, derivados de la fragmentación de sus células precursoras.
  • 229. B) ARTEFACTOS PLAQUETARIOS NOMBRE DESCRIPCION IMAGEN SUPERPOSICIÓN Se debe al depósito de una plaqueta sobre un eritrocito. Puede hacer pensar en la presencia de una inclusión intraeritrocitaria. Se diferencia de la inclusión en que, en la superposición, se observan las características morfológicas propias de una plaqueta y, además, se aprecia un halo alrededor de ella. AGREGACION PLAQUETARIA Presencia de plaquetas agregadas en el frotis de sangre periférica debido a trastornos en los procesos de agregación o adhesión plaquetaria o por dificultad en la toma de muestra (presencia de coágulos). SATELITISMO Consiste en la adhesión de plaquetas a los neutrófilos. Puede dar lugar a la observación de neutrófilos rodeados por un gran número de trombocitos. Las causas de este fenómeno son desconocidas.
  • 230. NOMBRE DESCRIPCION IMAGEN ANISOCITOSIS PLAQUETARIA Presencia de plaquetas de diferente tamaño pueden ser grande mayor de 5µ o gigantes semejante al tamaño de un linfocito. MICROTROMBOCITOS Consiste en la observación, en la sangre periférica, de plaquetas pequeñas- las microplaquetas con trombocitos viejos. C) TAMAÑO
  • 231. NOMBRE DESCRIPCION CASOS IMAGEN MEGATROMBOCITOS No es valorable si los megatrombocitos representan menos del 3% de toda la población plaquetaria. La megatrombocitosis suele indicar la presencia sanguínea de plaquetas inmaduras. -Síndrome de Bernard-Soulier HIPOGRANULACIÓN TROMBOCITARIA Consiste en la observación, en la sangre periférica, de plaquetas con un citoplasma grisáceo y pobre en gránulos. -Púrpura trombocitopénica idiopática -trombocitemia esencial.
  • 232. 1. FASE PREANALÍTICA: A) MUESTRA MARCO EXPERIMENTAL TIPO VOLUMEN/CANTIDAD ADITIVO TEMPERATURA CONSERVACIÓN ESTABILIDAD SANGRE TOTAL Sangre capilar EDTA 17° Normal
  • 233. B) MATERIALES TIPO MATERIAL CARACTERISTICA BIOSEGURIDAD Guantes -Látex -Family doctor Mandilón -Tela -Blanco Mascarilla -Algodón -Blanco Gorro -Algodón -Blanco TIPO MATERIAL CARACTERISTICA EXTRACCION Lancetas -Sterilance medic -Estériles Algodón -Sterilab laboratorio -25g Alcohol 70°
  • 234. 1.1. CONDICIONES PREANALÍTICAS: INDICACIONES CRITERIOS RECHAZO Lamina rotulada. No recibir si la lámina no está rotulada. La lámina debe tener las tres partes de un extendido sanguíneo. Si la lámina no tiene el extendido completo. La lámina debe estar bien coloreada. Verificar la coloración de la lámina.
  • 235. 2. FASE ANALÍTICA: A. FUNDAMENTO DEL METODO: A.1. METODO DE COLORACION WRIGTH:
  • 236. B. REACTIVOS: (COLORANTES Y SOLUCIONES) B.1. REACTIVO PROVISTO: B.1.1 LISTO PARA SU USO NOMBRE COMPOSICIÓN: P/V VOLUMEN TOTAL ML Tº CONSERVACIÓN TINCIÓN DE WRIGHT colorante de Wright 0.3g 100 ml 5-25ºC metanol 97.0 ml glicerol 3.0 ml PREPARACIÓN Disolver en un mortero el colorante con el glicerol. Una vez disuelto se adiciona el metanol trasvasándolo a un frasco oscuro. Agitar. Filtrar antes de usar.
  • 237. B.2. REACTIVO NO PROVISTO: B.2.1) SOLUCIONES Y DILUYENTES NOMBRE CONCENTRACIÓN P/V VOLUMEN TOTAL ML Tº CONSERVACIÓN Solución amortiguadora tamponada Agua destilada 1L 1000ml TºA (20-22ºc) hidrofosfato disódico (Na2HPO4* 2H20) 3.76 g fosfato de potasio dihidrogenado (KH2PO4) 2.10g Preparación Mezclar todos los reactivos y guardar en frasco de vidrio en lugar fresco. Ajustar el pH a 7.2.
  • 238. C. MATERIALES C.1. PIPETAS AUTOMATICAS Y/O VOLUMETRICAS C.2. MATERIAL DE VIDRIO C.3. MATERIALES DIVERSOS MARCA VOLUMEN MIN VOLUMEN MAX TIPO ACCUMAX 5 µl 50 µl Automática MATERIAL MARCA DIANMETRO Lamina porta objeto Neolab 25.4x76.2mm(1*x3*) 1mm-1.2mm THICK MATERIAL MARCA Lanceta Sterilance medical
  • 239. D. EQUIPOS D.1. MICROSCOPIO MARCA/MODELO TIPO OBJETIVOS CARACTERÍSTICAS Microscopio (binocular) Olympus Mod. CX31 Los objetivos Plan C Acromáticos campo visual (4x, 10x, 40x, 100x (aceite))  Los objetivos Plan C Acromáticos con campo visual; (4x, 10x, 40x, 100x aceite)  Oculares de F.N. 20  El revólver porta objetivo orientado hacia adentro cuádruple mejora el acceso y facilita el cambio rápido del portaobjeto  Condensador, centrable y enfocable para la iluminación Köhler  Un bombillo halógeno de 6V/30W provee iluminación amplia para cualquier observación  El estativo diseñado ergonómicamente tiene los tornillos micro y macrométricos ubicados en una posición baja y mangos en el frente y la parte posterior para el transporte; tope de campo integrado
  • 240. E. PROCEDIMIENTO E.1. ETAPA 1: TOMA DE MUESTRA. DESCRIPCION IMAGEN 1. Marcar una lámina porta objeto con el número correspondiente del usuario. 1. Limpiar el dedo del usuario con alcohol de 70º dejar secar. 1. Pinchar el dedo del usuario con una lanceta. Desechar la primera gota de sangre.
  • 241. DESCRIPCION IMAGEN 1. Colocar una gota de sangre en la lámina (portaobjetos), realizar el extendido con ayuda de otra lamina, colocando uno de los extremos de este portaobjetos en contacto con la gota de sangre. 1. Realizar el extendido a lo largo de la lámina, dejar extender con capilaridad la sangre a lo largo del borde del portaobjetos y con una inclinación de 30 a 40º. 1. El extendido debe tener cabeza, cuerpo y cola.
  • 242. E.2. ETAPA 2: COLORACION DE LA LAMINA DESCRIPCION IMAGEN 1. Colocar las láminas sobre el soporte de coloración hacia arriba 1. Cubrir la totalidad de la lámina con colorante de Wright durante 2 minutos. 1. Cubrir con agua destilada y soplar suavemente todo el extendido. Dejar 2 minutos.
  • 243. DESCRIPCION IMAGEN 1. Lavar la lámina con agua de la llave, escurrir. 1. Eliminar el exceso decolorante por el revés con una toalla desechable. 1. Colocar la lámina sobre la bandeja y dejar secar a temperatura ambiente.
  • 244. E.3. ETAPA 3: LECTURA DEL EXTENDIDO DESCRIPCION IMAGEN 1. Colocar el extendido en el microscopio. 1. Agregar una gota de aceite de inmersión 1. Observar en objetivo de 100X
  • 245. DESCRIPCION IMAGEN 1. Seleccionar la parte óptima para la lectura donde los eritrocitos apenas se toquen. 1. Evaluar la serie roja, serie blanca y serie plaquetaria. 1. Anotar lo observado en el respectivo registro. 1. Transcribir los resultados en el formato respectivo.
  • 246. F. LECTURA E INTERPRETACION (ERITROCITOS) F.1. EN FORMA Forma Anormal Normal Ligera (+) Moderada (++) Marcada (+++) Esferocito 0 1 - 5 6 - 15 Más de 15 Acantocitos 0 1 - 5 6 - 15 Más de 15 Drepanocitos 0 1 – 5 6 - 15 Más de 15 Rouleaux 0 1 - 5 6 - 15 Más de 15 Dacriocitos 0 2 - 5 6 - 15 Más de 15 Codocitos 0 - 1 2 - 5 6 - 15 Más de 15 Esquistocitos 0 - 1 2 - 5 6 - 15 Más de 15 Ovalocitos 0 - 1 2 - 5 6 - 15 Más de 15 Eliptocitos 0 - 1 2 - 5 6 - 15 Más de 15 Estomatocitos 0 – 1 2 - 5 6 - 15 Más de 15
  • 247. F.2. EN COLOR F.3. INCLUSIONES Color anormal Normal Ligera Moderado Severa Hipocromía 0-5 + 6 - 15 ++ 16 - 30 +++ Mayor de 30 Hipercromía 0-5 + 6 - 15 ++ 16 - 30 +++ Mayor de 30 Anisocromia 0-5 + 6 - 15 ++ 16 - 30 +++ Mayor de 30 Policromatofila 0 – 0.5 0 – 2% + 1.6 – 2.5 2 – 4% ++ 2.6 – 3.5 4 – 6% +++ Más de 3.6 Más de 6% Normal Ligera (+) Moderada (++) Severa (+++) Howell– Jolly Ninguno 1 – 2 3 – 5 Más de 6 Cuerpos paperheimer Anillos cabot Punteado basófilo
  • 249. G. LECTURA E INTERPRETACION (LEUCOCITARIO) Recuento de Leucocitos/mm3 X 100 = Recuento corregidos blancos 100 + número de células nucleadas no leucocitarias H. LECTURA E INTERPRETACION (PLAQUETARIO) Observar morfología y cantidad de las plaquetas en el extendido de sangre periférico. Acá se observa si las plaquetas están pequeñas o grandes o si hay cúmulos de plaquetas
  • 250. 2. FASE POST ANALÍTICA: A. REPORTE Reportar si hay: – Anisocitosis – Poquilocitosis – Policromatofilia – Inclusiones eritrocitarias – Hipocromía. - Chequear la presencia del fenómeno de Rouleaux (glóbulos rojos pegados en cadena). A.1 SERIE ROJA A.2 SERIE BLANCA Reportar si los leucocitos están aumentados o disminuidos y se encuentra inclusiones leucocitarias en los neutrófilo, o si se observan blastos.
  • 251. A.3. SERIE PLAQUETARIA Número de plaquetas está aumentado o disminuido, mirar forma y tamaño de las plaquetas. - Buscar cúmulos de plaquetas en el extendido, ya que dichos cúmulos sería resultado erróneo recuento disminuido. A.4. OTROS - Buscar parásitos sanguíneos como filarias. - Buscar células grandes como blastos.