La cromatografía es un método de separación de sustancias en mezclas complejas que utiliza dos fases, una estacionaria y otra móvil. El botánico ruso Mijaíl Tsweet utilizó por primera vez el término "cromatografía" en 1906 y desarrolló un método de separación de pigmentos vegetales usando una columna con carbonato de calcio como fase estacionaria. Existen dos tipos principales: cromatografía de gases y cromatografía de líquidos.

1. MÉTODOS
CROMATOGRÁFICOS

2. La cromatografía en si es un método de separación de
sustancias en mezclas complejas y se utiliza
generalmente para separación, pero a los instrumentos
se les acopla algún componente para la posterior
determinación por algún método analítico instrumental.
La mezcla a resolver se introduce en un sistema formado
por un fluido (fase móvil), que circula en contacto con la
fase estacionaria. Los componentes de la mezcla que
poseen una mayor afinidad por la fase estacionaria, su
velocidad de avance se hará más pequeña y se logrará la
separación.

3. Hay dos tipos importantes de cromatografía:
Cromatografía de gases: Es la fase móvil de un
gas inerte y la fase estacionaria puede ser sólida
o líquida.
• Cromatografía de líquidos: Es la fase móvil de
uno o varios líquidos y la fase estacionaria es
sólida.

4. El botánico ruso Mijaíl Tsweet, empleó por primera vez en
1906 el término "cromatografía" (que proviene del griego
χρομα y γραφω que significan respectivamente chroma "color"
y graphos "escribir").
A comienzos del año 1903, Mijail Tsweet usó columnas de
adsorción de líquidos para separar pigmentos vegetales (por
ejemplo, clorofilas). Las disoluciones se hacían pasar a través
de una columna de vidrio rellena de carbonato de calcio,
finamente dividido de un material poroso que interacciona de
forma diferente con los componentes de la mezcla, de forma
que éstos se separaban en distintas bandas coloreadas a lo
largo de la columna.
UN POCO DE HISTORIA…

5. CLASIFICACIÓN DE LOS
MÉTODOS DE SEPARACIÓN EN
CROMATOGRAFÍA

6. Cromatografía plana: La fase estacionaria se sitúa
sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales
técnicas son:
Cromatografía en papel
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en columna: La fase estacionaria se
sitúa dentro de una columna. Según el fluido empleado
como fase móvil se distinguen:
Cromatografía de líquidos
Cromatografía de gases
Cromatografía de fluidos supercríticos

7. La cromatografía de gases incluye a numerosos
compuestos orgánicos. En el caso de
compuestos no volátiles se recurre a procesos
denominados de "derivación", a fin de
convertirlos en otros compuestos que se
volatilicen en las condiciones de análisis.

10. SEPARACIÓN DE CLOROFILAS
MEDIANTE CROMATOGRAFÍA EN
PAPEL

11. Analito: es la substancia que se va a separar durante la
mensografía.
Cromatografía analítica: se emplea para determinar la existencia y
posiblemente también la concentración de un analito en una
muestra.
Fase enlazada es una fase estacionaria que se une de
forma covalente a las partículas de soporte o a las paredes internas
de la columna.
Cromatograma es el resultado gráfico de la cromatografía. En el
caso de separación óptima, los diferentes picos o manchas del
cromatograma se corresponden a los componentes de la mezcla
separada.
TÉRMINOS EMPLEADOS
EN CROMATOGRAFÍA

12. CROMATOGRAMA CON PICOS NO
RESUELTOS

13. CROMATOGRAMA CON DOS
PICOS RESUELTOS

14. Cromatógrafo es el equipo que permite una separación sofisticada.
Por ejemplo, un cromatógrafo de gases o un cromatógrafo de
líquidos.
Cromatografía es el método físico de separación en el cual los
componentes que se van a separar se distribuyen entre dos fases,
una de las cuales es estacionaria (fase estacionaria) mientras la otra
(la fase móvil) se mueve en una dirección definida.
Eluyente es la fase móvil que atraviesa la columna.
Serie eluotrópica : es una lista de disolventes clasificados según su
poder de dilución.
Fase inmovilizada es una fase estacionaria que está inmovilizada
sobre partículas de soporte, o en la pared interior del tubo
contenedor o columna.

15. Fase móvil: fase móvil consiste en la muestra que está siendo
separada/analizada y el disolvente, que se mueven por el interior de la
columna. En el caso de la cromatografía líquida de alta
resolución, HPLC, la fase móvil es un disolvente no-polar como
el hexano (fase normal) o bien algún disolvente polar (cromatografía de
fase reversa) y la muestra que va a ser separada.
Cromatografía preparativa se usa para purificar suficiente cantidad de
sustancia para un uso posterior, más que para análisis.
Tiempo de retención es el tiempo característico que tarda un analito
particular en pasar a través del sistema (desde la columna de entrada
hasta el detector) bajo las condiciones fijadas.
Muestra es la materia que va a ser analizada en la cromatografía.
Puede consistir en un simple

16. Soluto es cada uno de los componentes de la muestra
que va a ser separado.
Disolvente es toda sustancia capaz de solubilizar a otra,
y especialmente la fase líquida móvil en cromatografía de
líquidos.
Fase estacionaria es la sustancia que está fija en una
posición en el procedimiento de la cromatografía. Un
ejemplo es la capa de silica en la cromatografía en capa
fina.