La cromatografía de columna es una técnica de purificación que permite separar los componentes de una mezcla utilizando una columna rellena con un soporte sólido adsorbente. Cada componente se mueve a través de la columna a diferente velocidad debido a sus interacciones con la fase estacionaria y móvil, logrando su separación en fracciones al salir de la columna.

1. CROMATOGRAFÍA DE
COLUMNA

2. CROMATOGRAFÍA DE COLUMNA
Es una técnica de purificación, puesto que
permite aislar los compuestos deseados de una
mezcla.
se utiliza una columna de vidrio vertical que se
llena con un soporte sólido adsorbente que será
la fase estacionaria. La muestra que se quiere
separar se deposita en la parte superior de este
soporte. El resto de la columna se llena con un
disolvente que constituye la fase móvil que, por
efecto de la gravedad, hace mover la muestra a
través de la columna. Debido a que cada uno de
los componentes de una mezcla establecerá
interacciones diferentes con la fase estacionaria
y la móvil, serán transportados a diferentes
velocidades y se conseguirá su separación.
1. extracción y separación de pigmentos vegetales, Macilla, C.G.E. Castrejón, CR; Rosas, T.M; Blanco, E.Z, Pérez, S.L.J. Universidad Del Valle De México.
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3. RESULTADOS
Se hizo el respectivo montaje de la columna, se
coloco en la parte inferior un poco de algodón,
posteriormente se relleno con gel sílice con
etanol, se volvió a colocar algodón, luego se
agrego el pigmento a estudiar y luego se
agrego el hexano-etanol 2-1. Posteriormente,
se abrió la llave y se empezó a separar los
pigmentos en varios tubos de ensayo.
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4. RESULTADOS
Los pigmentos se
marcaron como A, B, C
y D.
A: Xantofilas
B: Clorofila a
C: Clorofila b
D: Carotenos
C
,
B
A
,
B
A
,
B
A
D
D DB C
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5. DISCUSIÓN
 La separación surge de las interacciones mutuas de los componentes
de una muestra (pigmentos), solvente y adsorbente (hexano-etanol y
silica gel). El adsorbente presenta sitios polares capaces de unir
reversiblemente pequeñas concentraciones de sustancias por un
proceso esencialmente electrostático. El solvente compite con los
componentes de la muestra por los sitios de unión. Estos componentes
son desplazados reversible y continuamente en la dirección del flujo del
solvente.
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6. Los compuestos que se encuentran disueltos en
la fase móvil, poco a poco saldrán de la columna
cromatografía, y se recogen en fracciones. Las
fracciones menos polares, que son por lo general
las que se retienen poco o nada en el absorbente,
serán las primeras en salir de la columna. En
cambio, las sustancias más polares, quedan
retenidas por más tiempo en el absorbente.
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7. Lo anterior se debe a que entre más
polar sea un compuesto, más
fuertemente se adsorbe en la fase
estacionaria, por lo que su migración
a lo largo de ella es menor, siendo
eluído (arrastrado) más lentamente
por la fase móvil, que los
compuestos menos polares. De este
modo, la separación selectiva de los
componentes de una muestra, por
cromatografía, se debe a las
diferencias en la migración de los
componentes individuales a lo largo
de la fase estacionaria.
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8.  Los carotenos fueron las que tuvieron mayor afinidad por el solvente
hexano-etanol 2-1 mientras que las xantofilas fueron los que
presentaron la menor afinidad por este solvente al ser los primeros y
últimos pigmentos en obtenerse.
 La cromatografía de columna es una técnica de mucho cuidado ya
que se hace una separación fraccionada de los pigmentos y si se
aplica mal la técnica se pueden pasar dos pigmentos en un mismo
tubo.
 El hexano-etanol 2-1 presentaba una polaridad media lo que permitía
la separación de los pigmentos, ya que la fase estacionaria era polar
(gel sílice) y por lo tanto atrapaba los compuesto mas polares y
dejaba correr a los menos polares.
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CONCLUSIONES

9. Al llevar a cabo un cronograma es importante mantener
siempre el nivel de solvente arriba de la columna del
adsorbente para prevenir la formación de cuarteaduras en
el adsorbente.
La columna se preparo y desarrollo usando el solvente
hexano-etanol, el cual disuelvio a la muestra y permitió el
movimiento de los compuestos a una velocidad práctica,
esto es debido a que tiene una polaridad proporcional
para los pigmentos que se separaron.
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10.  En la práctica, los pasos de desarrollo y elusión frecuentemente son
distinguibles, ya que la banda que se mueva más rápido puede empezar a
emerger de la columna antes de que se complete la separación de las
bandas que se mueven más lentamente.
 Los resultados de esta cromatografía dependerán de variables como la
fuente de los pigmentos, la eficiencia de la extracción, la actividad de la
silica gel utilizada como adsorbente, las dimensiones de la columna, los
volúmenes de cada solvente y las mezclas de cada solvente utilizadas en el
desarrollo. Cambios muy pequeños en algunos de estos factores pueden
afectar la separación e incluso causar cambios en las posiciones
individuales de los pigmentos en el cronograma.
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11.  Cual es el desarrollo múltiple y el bidimensional en la cromatografía de capa
delgada?
R/: la cromatografía de desarrollo múltiple se usa para aumentar el poder de
resolución de la cromatografía, dejando correr nuevamente el solvente sobre la
cromatografía ya desarrollada.
La cromatografía bidimensional permite la separación con dos solventes, se
desarrolla la cromatografía de forma normal con un primer solvente después se
extrae la fase estacionaria , se deja secar y se gira 90° con respecto a su posición
original , y se desarrolla con el segundo solvente.
2. Valcárcel, M. 1988, Técnicas analíticas de separación. Editorial Reverte. España. PP 335-336, 597-613.
Preguntas
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12.  En que consiste la cromatografía de capa delgada preparativa?
R/. Consiste en tomar la muestra y hacer una línea delgada sobre una placa grande y
desarrollarla en una dirección perpendicular a la línea , después de esto es posible
recoger de la fase estacionaria los con con ayuda de una espátula.
2. Valcárcel, M. 1988, Técnicas analíticas de separación. Editorial Reverte. España. PP 335-336, 597-613.
Preguntas
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13.  Que es una resina de intercambio anicónica y una catiónica?
R/. Las resinas anicónicas poseen cargas positivas, por que interactúan con cargas
negativas, las resinas anicónicas poseen cargas negativas e interactúan con cargas
positivas, estas resinas son sintéticas, solidas e insolubles en agua, de estructura porosa,
las reacciones entre estas resinas y el medio son completamente reversibles.
2. Valcárcel, M. 1988, Técnicas analíticas de separación. Editorial Reverte. España. PP 335-336, 597-613.
Preguntas
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14. BIBLIOGRAFÍA
 1. extracción y separación de pigmentos vegetales, Macilla, C.G.E.
Castrejón, CR; Rosas, T.M; Blanco, E.Z, Pérez, S.L.J. Universidad Del Valle
De México.
 2. Valcárcel, M. 1988, Técnicas analíticas de separación. Editorial
Reverte. España. PP 335-336, 597-613.
 3. Rubén Darío Cortez, Técnicas De Separación, Cromatografía, En
Línea: Sección de La Red Latinoamericana De Química, Barquisimeto
Lara Versión 21 De Enero De 1998.
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15. GRACIAS
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