Este documento describe varias pruebas serológicas utilizadas para diagnosticar infecciones febriles, incluyendo la reacción de Widal para fiebre tifoidea, la reacción de Huddleson para brucelosis, y la reacción de Weil-Felix para rickettsiosis. Explica los principios, interpretación y limitaciones de cada prueba, así como consideraciones importantes para su realización como el uso de sueros de control y la importancia de un contexto clínico.

1. Equipo no.11
●Campos Vega Romana
●Medina Salgado Jenyffer Daniela
●Mendez Perez Grissell Zulema
●Valdez Ortega Nicole

2.  Esta prueba representa un método de
laboratorio útil para seguir la secuencia de
ciertas infecciones con acceso febril,
causadas por bacterias.

3.  La reacción de Widal es un método serológico
usado comúnmente en el diagnóstico de las
fiebres tifoideas, entérica y ondulante, la
reacción mide el título del suero contra una
suspensión de microorganismo conocidos
 La reacción de Widal es un test basado en el
principio de aglutinación antígeno-anticuerpo,
donde se determina la presencia de anticuerpos
contra el antígeno O y H de la Salmonella
typhi para el serodiagnóstico de fiebre tifoidea,
sin embargo debido a su falta de especificidad,
debe ser interpretado en el contexto clínico del
paciente.

4.  Las aglutininas O y las H son las aparecidas en el
suero como respuesta a la estimulación creada
por los antígenos (Ag) somáticos O y flagelares H
de la salmonella. El Ag Vi de superficie no suele
emplearse en el diagnóstico serológico porque
los Ac que produce tienden a desaparecer de la
sangre inmediatamente después de la mejoría
clínica. Las aglutininas O aparecen con
precocidad, alcanzan títulos bajos y desaparecen
rápidamente; las H aparecen más
tarde, alcanzan títulos elevados y se conservan
más tiempo, pudiendo demostrarse títulos bajos
durante más de un año.
 Los títulos altos frente al Ag O significan
infección en la fase aguda; los títulos altos
frente al Ag H corresponden a la fase de
convalecencia.

5.  Los falsos positivos de la reacción de Widal
también han sido descritos en procesos no
infecciosos, como enfermedades autoinmunes
(artritis reumatoide- lupus eritematoso sistémico)
y hepatopatías crónicas.
 También hay que considerar los falsos
negativos como toda prueba de
laboratorio, entre sus causas tenemos
 1. Antibioticoterapia temprana, la cual, retrasa la
aparición de anticuerpos (descrito principalmente
con cloranfenicol)
 2. Utilización de corticosteroides
 3. Medición temprana de anticuerpos (primera
semana)
 4. Inmunodeficiencias adquiridas y congénitas.
 5. Portadores crónicos de Salmonella typhi.

6.  La reacción de Huddleson es un método
serológico que detecta anticuerpos contra B.
abortus, B. melitensis y B. Suis, agentes
causales de la brucelosis; también conocida
como fiebre de malta o fiebre ondulante por el
cuadro febril característico que se presenta.
 La prueba se basa en una reacción
inmunológica entre los anticuerpos séricos y el
antígeno correspondiente produciendo una
reacción de aglutinación macroscópica.

7.  Seutiliza una suspensión Antígenos de B.
abortus al 3-10% de gérmenes en fenol, con
verde brillante y cristal violeta para la
busqueda de anticuerpos.

8.  En las reacciones febriles se utiliza la reacción
de Weil-Felix, esta prueba en si no busca
Rickettsias, se basa en la capacidad del suero
del paciente infectado por Rickettsias para
aglutinar ciertas cepas de Proteus (Reacción
cruzada) por lo que es poco sensible y específica
y siempre deberá seguirse de pruebas
confirmatorias (fijación del
complemento, hemaglutinación
indirecta, inmunofluorescencia directa e
indirecta y otras).
 El periodo de incubaciòn es de aproximadamente
7 dias y varia de 2 a 14 días.

9.  Suero control negativo: Suero de conejo el
cual no ha sido inmunizado contra ningún
antígeno, por lo que no muestra ninguna
aglutinación con los antígenos en suspensión.
 Suero Control Positivo: Suero de conejo el
cual ha sido inmunizado contra todos los
antígenos febriles en una suspensión.

10.  Puede efectuarse por medio de dos maneras.
Método de aglutinación rápida en placa.
 1. Anotar el antígeno correspondiente en la placa de vidrio.
 2. Depositar en cada cuadro 0.04ml de suero del paciente
para cada uno de los antígenos que se vayan a utiliza.
 3. A cada gota de suero añadir una gota de cada antígeno.
 4. Mezclar con un aplicador limpio ( utilizar un aplicador
para cada antígeno.
 5. Agitar suavemente la placa por rotación (120 r.p.m)
durante 2 ó 3 minutos.
 6. Observar la aglutinación con ayuda de una lámpara.
 Cuando hay reacción positiva se repite la técnica con
diluciones las cuales se obtienen con el uso de las siguientes
cantidades del suero en la siguiente forma.

11. Método de aglutinación en tubo.
 1. Numerar siete tubos ( 13x75mm) del uno al
seis y un testigo (T) para cada antígeno.
 2. Adicionar 0.9 ml de solución salina al primero
y 0.5 ml a los restantates.
 3. Agregar 0.1ml del suero problema al tubo uno.
Mezclar y pasar 0.5 ml al tubo dos y así
sucesivamente hasta el seis eliminando 0.5 ml de
esta última dilución. Obteniéndose diluciones
1/10, 1/20, 1/40, 1/80, 1/160 y 1/320.
 4. Adicionar 0.3 ml de antígeno diluido
previamente 1:20 con solución salina en cada uno
de los tubos.

12.  5. Agitar enérgicamente e incubar en baño
maría en las siguientes condiciones.
 Antígeno/tiempo - Temperatura.
 Salmonella “B” 18 a 24 hrs. 48 a 50°C
 Salmonella “H” 2hrs. 37°C
 Paratificos “A” y “B” 2 hrs. 48 a 50°C
 Brucella 48 hrs. 37°C
 Proteux 0X-19 18 hrs. 37°C
 6.Tomar dos o tres tubos a la vez, agitarlos
ligeramente frente una fuente de luz que
ilumine las partículas claramente.

13.  1. Todos los sueros por probar deberán estar
totalmente claros y libres de contaminación
bacteriana.
 2. No caliente el suero antes de probarlo.
 3. Agite bien el antígeno antes de utilizarlo
para asegurar una suspensión uniforme.
 4. El antígeno se debe mantener en
refrigeración a 2 8ºC cuando no se utilice.
 5. No congelar.

14.  http://www.infectologiapediatrica.com/mai
n/page_new_folder_reacciones_febriles.html
 http://www.cecyt15.ipn.mx/polilibros/inmu
no/Cap3/PAGINAS/febriles.html