El documento describe la prueba de Coombs, la cual detecta anticuerpos e inmunoglobulinas unidas a glóbulos rojos. Explica que la prueba de Coombs directa detecta sensibilización de glóbulos rojos in vivo, mientras que la prueba de Coombs indirecta detecta sensibilización in vitro. También detalla los procedimientos para realizar ambas pruebas de Coombs, incluyendo los pasos de preparación, sensibilización, lavado y adición del suero anti-humano, así como la interpretación de los

1. TEST DE COOMBSTEST DE COOMBS

2. GENERALIDADES
De los sistemas serológicos para demostrar la presencia de antígenos
o anticuerpos de grupos sanguíneos, la Prueba de Coombs o
antiglobulina humana es considerada como la más eficiente y de
mayor valor en el Banco de Sangre.
Principio de la prueba:
Detectar inmunoglobulinas de la clase IgG y/o fracciones del
complemento ( C3d ) unidos a los G.R.
Obtención:
El reactivo de antiglobulina se prepara inyectando a conejos
gamma globulina humana purificada para obtener suero
antiglobulina, y otras son inyectadas con componentes purificados
del complemento ( C3 ) para producir anticuerpos específicos contra
ellos .

3. FUNDAMENTOS DE LA PRUEBA DE COOMBS
Los anticuerpos y complemento humano son globulinas y
además son diferentes a otras especies; por lo tanto, se
comportan como antígenos cuando se inyectan a otras
animales.
Si un animal es inyectado con globulinas humanas
purificadas o con suero total, este animal elaborará
anticuerpos contra ellas, estos anticuerpos tendrán
especificidad antiglobulina humana.
El suero antiglobulina humana ( Suero de Coombs )
reaccionará específicamente contra las globulinas humanas.
Si los G.R. están sensibilizados por las inmunoglobulinas, el
suero de Coombs se combinará con ellas.

4. MECANISMO DE ACCION DEL REACTIVO
ANTIGLOBULINA HUMANA

8. GENERALIDADES
La sensibilización de los G.R. se puede producir de dos formas:
a) In vivo, es decir, cuando la reacción del antígeno con su
correspondiente anticuerpo se efectúa en el organismo,
cuando ambos están circulando como sucede, por ejemplo, en
caso anemias hemolíticas autoinmunes, enfermedad
hemolítica del recién nacido, etc.
b) In vitro, la sensibilización de los G.R. por el anticuerpo se
realiza en un tubo de ensayo en el laboratorio. Si en el suero
existen anticuerpos contra los antígenos presentes , se
producirá la reacción antígeno-anticuerpo y los G.R.
quedaran sensibilizados.
Para demostrar la sensibilidad de los G.R. sea in vivo o in vitro
existen dos modalidades en la prueba de antiglobulina

9. PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA
Detecta la sensibilización de G.R. in vivo. Tiene valor dx. en:
* Enfermedad hemolítica del recién nacido
* Anemia hemolítica autoinmune
* Anemia hemolítica y sensibilización inducida por drogas
* Investigación de reacciones transfusionales.
Procedimientono
Interpretación:
a) Si la prueba de Coombs muestra aglutinación, se interpreta
positiva, significa que hubo sensibilización de los G.R. in
vivo, se señala en cruces, vg. 4 +
b) Si no hubo aglutinación, la prueba es negativa y significa
que no existe autosensibilización eritrocítica. La prueba
negativa será válida si la prueba control es positiva.

13. COOMBS DIRECTO
PROCEDIMIENTO

14. 1
PREPARACIÓN PARA LA PRUEBA
a. Lavar los eritrocitos del paciente cuando menos 3 veces en
solución salina con una concentración al 4 %

15. 2
Adición del Suero
Anti-Humano
a. Colocar en un tubo de ensayo una a dos gotas del suero de Coombs
b. Agregar una gota de eritrocitos lavados al tubo de ensayo
c. Mezclar bien con una suave agitación. Centrifugar 20 seg. a 3,400 RPM

16. 3 REACCIÓN
a. Resuspender los eritrocitos para ver aglutinación macroscópica
b. Una reacción negativa confirmarla por medio de examen
microscópico

17. 4 INTERPRETACIÓN
a. TUBO SUPERIOR: Aglutinación ‫ز‬ eritrocitos cubiertos con anticuerpo ‫س‬
b. TUBO INFERIOR : Sin aglutinación ‫ز‬ Anticuerpos no demostrados en los
G.R.

18. PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA
Permite detectar G.R. sensibilizados in vitro. El suero en estudio es
incubado con los G.R. por el tiempo adecuado, luego se lavan para
eliminar anticuerpos y otras inmunoglobulinas que no se han
fijado en el eritrocito.
Se investiga anticuerpos irregulares en el suero
La detección de anticuerpos presentes en el suero se realiza con:
a) G.R. especialmente seleccionados: células detectaras, en las cuales
se encuentran presentes los antígenos de grupos sanguíneos
correspondientes a los anticuerpos de mayor frecuencia e
importancia clínica.
b) G.R. de genética conocida ( panel ). Se usa después de haber
demostrado anticuerpos irregulares mediante las células
detectoras.
c) Con G.R. desconocidos como en la Prueba de compatibilidad.

20. COOMBS INDIRECTA
PROCEDIMIENTO PARA DETECTAR LA
PRESENCIA DE ANTICUERPOS EN EL SUERO
( PRUEBA CRUZADA MAYOR )

21. 1 PREPARACIÓN PARA LA PRUEBA
a. Lavar G.R. del donante en solución salina normal con una concentración al 4
%
b. Coloque dos gotas del suero del receptor en cada uno de los tubos. Agregar
tres gotas de albúmina bovina al 22 % a uno de los tubos

22. 2
SENSIBILIZACIÓN DE
LOS ERITROCITOS
a. Agregue una gota de eritrocitos lavados a cada uno de los tubos de
ensayo
b. Mezcle con suave agitación e incube durante 15 a 60 minutos a 37º C

23. 3
LAVADO DE LOS ERITROCITOS ANTES DE
LA PRUEBA DE COOMBS
a) Lave los eritrocitos tres veces con una solución salina normal,
decantando tanta solución como sea posible después del último
lavado

24. 4
ADICIÓN DEL SUERO
ANTI-HUMANO
a) Agregue una o dos gotas del suero de Coombs.
b) Mezclar bien y centrifugar y resuspender los eritrocitos. Observar
si hay aglutinación.
c) Una reacción negativa puede ser confirmada por examen
microscópico

25. 5 INTERPRETACIÓN
TUBO SUPERIOR: Aglutinación ‫ز‬ Prueba cruzada mayor
incompatible ‫س‬
TUBO INFERIOR : sin aglutinación ‫ز‬ Prueba cruzada mayor

26. PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA
Interpretación
a) Si hay aglutinación: prueba de Coombs indirecta positiva,
presencia de anticuerpos irregulares en el suero.
b) Si no hay aglutinación : Coombs indirecto negativa. Es válido el
resultado si la prueba control de Coombs es positiva, y si esta
última es negativa, la prueba es inválida. Debe repetirse el
procedimiento.
Indicaciones
* Como screening en: embarazo, donantes de sangre,
*Pacientes que está recibiendo transfusiones o ya las ha
recibido
* Identificar cualquier anticuerpo encontrado en el screening
* Pruebas de compatibilidad
* Determinación de ciertos grupos sanguíneos, como Du, Kell,
Kidd, Duffy

27. RESULTADO DE TECNICAS DE AGLUTINACION Y DE
ELISA EN PACIENTE CON PRUEBA DE COOMBS
NEGATIVA