Este documento describe los materiales y procedimientos necesarios para realizar un análisis toxicológico de una muestra de hígado de pollo. Incluye una desproteinización para separar las proteínas y extracciones con solventes orgánicos a diferentes pH para separar tóxicos ácidos, débiles, neutros y alcalinos. El procedimiento finalizará con la separación de las fases orgánicas que contendrán los diferentes tipos de tóxicos para su posterior análisis.

1. 1.3 Materiales y equipos.
Tubos de prueba de 13 x
100 mm, con tapón.
Matraces de 100 mL.
Peras de separación.
Tiras indicadoras de pH.
Morteros Pipestas de 1,2,5 y 10
ml
Papel de filtro Cocinilla eléctrica
Muestra: hígado de pollo
➢ Baño Maria.
➢ Centrífuga.
➢ Tungstato de sodio 10%.
➢ NaOH 10% y 2.5%.
➢ H2O destilada.
➢ NH4OH q.p.
➢ HCl q.p.
➢ Equipo de destilación al vacio.
➢ Eter dietílico o cloruro de metileno o cualquier solvente inmiscible con el
agua.

2. 1.4 Procedimiento.
Se procederá a hacer una desproteinización según el método de Curry,
obteniendose un filtrado limpio.
luego medimos el PH y filtramos en caliente hasta obtener un liquido
transparente (sepracion de proteínas)
Pesamos 20g de la muestra
(hígado de pollo)
Luego adicionamos 4ml NaOH
10%, 25 ml de Na2WO4 10%,
36 ml de H2O d, 20 ml H2SO4
2/3N.
Posteriormente llevamos
a baño María 15´

3. Luego se hará una extracción con solventes orgánicos a pH ácido 3,5 (HCl Q.P.)
Eter Etílico o con un solvente inmiscible, se guarda la fase orgánica.
Luego, el mismo filtrado, se llevará a pH alcalino con el NH4OH Q.P. (9.5) y se
extraerá con otra alícuota de Éter Etílico u otro solvente orgánico, se guarda la
fase orgánica.
Luego decantamos la fase acuosa
y la orgánica vertemos en un
frasco ámbar
Agregamos éter y agitamos
por 2 o 3´, dejamos reposar
hasta que se forme dos fases

4. Tóxicos
Tóxicos
Alcalinos
Ac. Fuertes
Ac. Débiles
NH4OH 9.5
Éter etílico
Agitar x 4´separar
Toxico ácido débil neutro
Tóxico acido débil neutro
HCl . PH3
Éter agitar y separar
NaOH
HCO3HN
Agitar x 3´separar

5. La fase orgánica de la primera extracción (Acida) servirá para separar los
tóxicos orgánicos ácidos fuertes, ácidos débiles y neutros.
Acido débil neutro
Acido débil
Las fases orgánicas servirán para futuras prácticas.

6. 1.5. Resultados.
Reacción de la práctica.
C4O6H6 + 2NaOH → Na2C4H4O6 + 2H2O
Ácido tartárico + NaOH → tartrato de sodio + 2H2O
NH4OH + HCL → NH4Cl + H2O
Desproteínización.
Se basa en la formación de ácido tungstico, el cual hace precipitar proteínas en
la muestra
Na2WO4 + H2SO4 → H2WO4 + Na2SO4.
EXTRACCIÓN.
Los tóxicos orgánicos se extraen con disolventes orgánicos (éter etílico,
cloroformo, diclorometano, etc.). El principio utilizado es el agotamiento por
disolventes orgánicos. Ya que la extracción no es demasiado selectiva, se utiliza
una marcha aprovechando ligeras diferencias en cuanto a la afinidad de algunos
de los tóxicos de interés según su pH, pues depende de ella su solubilidad en el
medio.
R1. Ácidos fuertes. (compuestos fenólicos y salicilatos)
R2. Ácidos débiles. (barbitúricos y algunas benzodiazepinas)
R3. Neutros. (pesticidas, organoclorados y fosforados).
R4. Alcalinos. (benzodiazepinas, cocaína, cafeína) la extracción se realiza
cuando el toxico se encuentra en forma no ionizada.