1. Autora: María Isabel Ramírez Orellana UNIVERSIDAD TECNICA PARTICULAR DE LOJA La Universidad Católica de Loja Escuela de Bioquímica y Farmacia Directora de Tesis: Dra. Natalia Bailón M.
7. Familia : Asteraceae Subfamilia: Asteroideae Genero: Parthenium Especies: Parthenium argentatum Desecho resinoso Argentatina A , B y C Parra, 2006
8.
9.
10. Daño oxidativo E ntrecruzamientos Rotura de simple y doble cadena
11.
12. Siembra Obtención – muestra Incubamos 48 h Tratamiento Ag B (5, 15, 25uM) EMS 0.1uM, DMSO 0.5% Preparación de Placas Electroforesis Neutralización Tinción (BrEt) Análisis Incubamos 24 h Materiales y Métodos Viabilidad
13.
14. Grafica No. 3.2 Porcentaje de viabilidad de linfocitos humanos tratados con Argentatina B (5, 15 y 25 uM) y EMS a 0.1 uM Cada barra representa la media de tres experimentos por duplicado de tres donadores diferentes. ( ♦ p < 0.0001; ● p < 0.002)
15. Grafico No. 3.3 . Efecto de la actividad genotóxica del Etilmetanosulfonato, usando como referencia el largo de cola en linfocitos humanos ( ● p < 0.0001)
16. Largo de Cola con Argentatina B Grafica No. 3.5 Efecto genotóxico de diferentes dosis de Argentatina B en Linfocitos humanos. Cada barra representa la media de tres experimentos por duplicado de tres donadores diferentes. ( ● p < 0.0001)
17.
18.
19.
Notas del editor
Graf. 1: Según la OMS el cáncer se ha convertido en la segunda causa de muerte a nivel mundial ocupando el 23 % del total de defunciones luego de las Enf. Cardiovasculares, es por ello que se hace importante el estudio de esta enfermedad que afecta indistintamente a todos los pueblos Graf 2: en esta grafica se puede observar la incidencia de los diferentes tipos de cancer como se distribuye de manera heterogenea a nivel mundial
En lo que respecta a nuestro país se ha demostrado que el tipo de cáncer mas común en las mujeres es el Cáncer de Mama con el 34.5% y en los hombres es el cáncer de Próstata con un 44.9%; adentrandonos mas cercanamente en nuestra provincia se han registrado 3566 casos de los cuales 1615 se han registrado en la ciudad de loja
Graf. 1: los principales factores externos que contribuyen al desarrollo del cáncer son: el cigarrillo, la mala alimentación, las bebidas alcohólicas, y la contaminación, entre otros . Graf. 2: En el proceso de carcinogenesis se definen varias etapas: Iniciación se da cuando un factor externo ya sea físico o químico produce un cambio genético a la cell, en la promoción esta cell se divide, luego en la etapa de transformación por acción de un agente genotóxico se produce una célula cancerosa y finalmente esta la etapa de progresión que es en si el desarrollo de un tumor maligno o cáncer.
Hoy en día contamos con algunos tipos de tratamientos contra el cáncer entre los que podemos nombrar están: los procesos quirurgicos, la radiación y la mas utilizada la quimioterapia la cual se puede definir como un procedimiento terapéutico farmacológico, que consiste en la utilización de fármacos denominados antineoplásicos, para el tratamiento paliativo del cáncer.
El Partenium argentatum es un arbusto nativo del desierto de Desierto de Chihuahua México y sudoeste de EE.UU, pertenece a la familia de las Asteraceas, dentro del proceso de industralización de esta especie se obtiene un residuo resinoso el cual es rico en compuestos triterpenicos denominados Argentatinas A, B y C.
Dentro de nuestro proyecto escogimos trabajar con la Argentatina B, ya que esta en estudios realizados previamente por Parra y colaboradores se obtuvo que esta es una molécula citotóxica en líneas celulares cancerosas humanas, es citostática en linfocitos humanos, es inhibidor no competitivo del receptor del estradiol y es no genotoxico en linfocitos humanos determinado en el ensayo de micronucleos con bloqueo de citocinesis
Esta técnica consiste en embeber las células individuales en agarosas, para posteriormente ser lisadas y sometidas a electroforesis y así observar la migración del ADN
Esta técnica nos permite observar diferentes tipos de daños como son: rotura de simple y doble cadena, entrecruzamientos, daño oxidativo, crosslinkins y reparación de daño
Aquí voy a decir brevemente el protocolo de cometa que yo use
en la grafica de viabilidad del EMS observamos que las dosis probadas son subtoxicas ya que la viabilidad es superior al 70%, así mismo se observo una diferencia significativa entre las consentraciones de 0.075 y 0.1 Um con respecto al control
En la grafica de la viabilidad de Argentatina B se observa que la viabilidad es superior al 70% observándose una diferencia significativa entre todas las concentraciones con respecto al control
En lo que respecta el análisis del cometa se observo la migración del ADN (tamaño de cola), en la grafica se observa una respuesta dosis – dependiente ya que a medida que se aumentan las concentraciones se aumenta el daño
Se observa una respuesta dosis dependiente ya que a medida que las concentraciones se incrementan el daño aumenta y a la vez se puede ver una diferencia significativa entre todas las dosis probadas con respecto al control
Los triterpenos naturales mas estudiados son: el ac. Ursólico y el ac. Aleanólico los cuales han demostrado tener propiedades como antiinflamatorio, antiviral, anti- tumoral, citostático, hipoglicémico, antihistaminico, hepatoprotector, diurético, anti-ulcera, inmunomodelador e inmunoestimulador y sedante
