Procedimiento para realizar la tincion diferencial de Gram

1. Tincion de Gram

2. La Tincion de Gram ES UN TIPO DE TINCION DIFERENCIAL EMPLEDO EN LA MICROBIOLOGIA PARA VISUALIZAR BACTERIAS, SOBRE TODO EN MUESTRAS CLINICAS. DEBE SU NOMBRE AL BACTERIOLOGO DANES CHRISTIAN GRAM. QUE DESARROLLO LA TECNICA EN 1884, SE UTILIZATANTO PARA PODER REFERIRSE A LA MORFOLOGIA CELULAR BACTERIANA, CONSIDERARSE BACTERIA GRAM + A LAS BACTERIAS QUE SE VISUALIZAN DE COLOR VIOLETA Y BACTERIA GRAM --- A LAS QUE SE VISUALIZAN DE COLOR ROSA.

3. MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS MECHERO . PORTA OBJETOS . PIPETAS GRADUADAS . ASA DE CULTIVO . AGUA DESTILADA . CRISTAL VIOLETA . LUGOL . ALCOHOL . SAFRANINA . CULTIVO BACTERIANO . MICROSCOPIO .

4. DESARROLLO 2.CON LA AYUDA DE UN MECHERO, FLAMEAR UN ASA BACTERIOLOGICA Y ESPERAR QUE ENFRIE UN POCO. 1. COLOCAR EN EL CENTRO DEL PORTA OBJETOS UNA GOTA DE AGUA DESTILADA. A.-FIJAR UN FROTIS

5. 3.TOMAR EL ASA Y RECOGER UN POCO DE MUESTRA DE UNA DE LAS COLONIAS BACTERIANAS QUE SE ENCUENTRAN MAS AISLADAS. 4.DESPUES COLOCAR LA MUESTRA EN EL PORTAOBJETOS Y MEZCLARLA CON EL AGUA Y HACER UNA EXTENCION DE APROXIMADAMENTE 2 CM .

6. 5.HACERCAR EL PORTAOBJETOS AL CALOR DEL MECHERO HASTA SECAR SUAVEMENTE.

7. B.- TINCION 1.-INUNDAR EL FROTIS CON VIOLETA DE GENCIANA: DURANTE 2 MINUTOS.

8. 2.-UNA VEZ TRANSCURIDO EL TIEMPO LAVAR CON AGUA CORRIENTE HASTA QUITAR EL EXCESO DE COLORANTE. C.-ENJUAGUE

9. 3.-CUBRIR CON LUGOL EL FROTIS DURANTE 2 MINUTOS. D.-MORDIENTE

10. 4.-LAVAR CON AGUA CORRIENTE. E.-ENJUAGUE

11. F.-DECOLORACION 5.-DESPUES DE HABER ACTUADO EL MORDIENTE EL FROTIS SE DECOLORA CON ALCOHOL DE 95’C HASTA QUE EL LIQUIDO SALGA CLARO.(30-60SEGUNDOS).

12. G.-TINCION DE CONTRASTE 6.-UNA VEZ DECOLORADO EL FROTIS TEÑIR CON SAFRANINA DURANTE 3 MINUTOS.

13. H.-ENJUAGUE 7.-YA QUE ACTUO LA SAFRANINA COMO ULTIMO PASO SE PROCEDE HA ENJUAGAR EL FROTIS CON AGUA CORRIENTE, SE ESPERA A QUE SE SEQUE AL AIRE LIBRE.

14. I.-OBSERVACION 8.-DESPUES QUE LA TINCION QUEDO TERMINADA SE TOMA EL PORTAOBJETOS Y SE COLOCA EN EL MICROSCOPIO PARA SER OBSERVADO. Y ASI PODREMOS DETERMINAR LOS SIGUIENTES RESULTADOS.

15. J.-RESULTADOS 9.-SI EL FROTIS SE TIÑE DE COLOR AZUL LAS BACTERIAS SON GRAM POSITIVAS.

16. 10.-SI EL FROTIS SE TIÑE DE COLOR ROSA LAS BECTERIAS SON GRAM NEGATIVAS.

17. K.-CONCLUSION HACIENDO UNA BUENA TINCION, CON CALIDAD Y EFICIENCIA PODREMOS OBTENER EXCELENTES RESULTADOS. GRACIAS.