ANTIBIOGRAMA<br />Dra. Natalia Izurieta Cergneux<br />PRÁCTICA NO. 4 - LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA Y MICOLOGÍA<br />
DEFINICIÓN<br />Prueba in vitro que determina la sensibilidad de un microorganismo frente a diferentes antibióticos.<br />...
OBJETIVOS<br />
MÉTODOS - ANTIBIOGRAMA<br />
CONCENTRACIÓN INHIBITORIA MÍNIMA<br />Es la mínima concentración de un antimicrobiano que inhibe la multiplicación y creci...
CONCENTRACIÓN BACTERICIDA MÍNIMA<br />Para determinar la CBM se seleccionan tubos donde no haya turbidez y se siembra el c...
CIM Y CBM<br />CONTROL <br />SIN AB<br />AB<br />AB<br />AB<br />AB<br />AB<br />S/C<br />S/C<br />S/C<br />S/C<br />C/C<b...
MÉTODO DE DILUCION<br />Consiste en determinar el crecimiento de una bacteria en presencia de concentraciones decrecientes...
MÉTODO DE DIFUSIÓN<br />Es el método más empleado en el laboratorio.<br />Se trabaja a partir de un microorganismo debidam...
MÉTODO DE DIFUSIÓNPRINCIPIO DEL MÉTODO<br />
SELECCIÓN DE LAS COLONIAS<br />Es el paso más importante. <br />Se selecciona de 3 a 5 colonias del microorganismo.<br />
PREPARACIÓN DEL INÓCULO Y ESTANDARIZACIÓN DE LA SUSPENSIÓN<br />En ambos métodos, la turbidez de la suspensión debe ser es...
SUSPENSIÓN DIRECTA DE LAS COLONIAS<br />Se trabaja con cultivos jóvenes. <br />En esta técnica se estandariza el inóculo a...
FASE LOGARÍTMICA DE CRECIMIENTO<br />Se usa para la mayoría de microorganismos de rápido crecimiento.<br />3 A 5 COLONIAS<...
PREPARACIÓN PARA LA INOCULACIÓN<br />Losdiscos deben permanecer a temperatura ambiente durante 1-2  horas.<br />El agar de...
INOCULACIÓN DE LA PLACA<br />2<br />1<br />3<br />
INOCULACIÓN DE LA PLACA<br />1ml de <br />inóculo<br />
APLICACIÓN DE LOS DISCOS DE ANTIBIÓTICOS<br />MÉTODO MANUAL<br />
MÉTODO AUTOMÁTICO<br />
APLICACIÓN DE LOS DISCOS DE ANTIBIÓTICOS<br />1<br />8<br />7<br />2<br />9<br />3<br />6<br />5<br />4<br />
MEDICIÓN DE LAS ZONAS DE INHIBICIÓN<br />
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Laboratorio no.4 antibiograma

  1. 1. ANTIBIOGRAMA<br />Dra. Natalia Izurieta Cergneux<br />PRÁCTICA NO. 4 - LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA Y MICOLOGÍA<br />
  2. 2. DEFINICIÓN<br />Prueba in vitro que determina la sensibilidad de un microorganismo frente a diferentes antibióticos.<br />SENSIBLE<br />RESISTENTE<br />
  3. 3. OBJETIVOS<br />
  4. 4. MÉTODOS - ANTIBIOGRAMA<br />
  5. 5.
  6. 6. CONCENTRACIÓN INHIBITORIA MÍNIMA<br />Es la mínima concentración de un antimicrobiano que inhibe la multiplicación y crecimiento visible de una cepa bacteriana en un medio de cultivo. <br />
  7. 7. CONCENTRACIÓN BACTERICIDA MÍNIMA<br />Para determinar la CBM se seleccionan tubos donde no haya turbidez y se siembra el contenido en un medio de cultivo sólido y se observa si hay o no crecimiento. <br />LA CBM corresponde a aquella dilución donde no hay crecimiento bacteriano.<br />
  8. 8. CIM Y CBM<br />CONTROL <br />SIN AB<br />AB<br />AB<br />AB<br />AB<br />AB<br />S/C<br />S/C<br />S/C<br />S/C<br />C/C<br />C/C<br />C/C<br />C/C<br />S/C<br />C/C<br />S/C<br />C/C<br />
  9. 9. MÉTODO DE DILUCION<br />Consiste en determinar el crecimiento de una bacteria en presencia de concentraciones decrecientes de un mismo antibiótico. <br />Se observa el crecimiento de los microorganismos mediante la aparición de turbidez<br />
  10. 10. MÉTODO DE DIFUSIÓN<br />Es el método más empleado en el laboratorio.<br />Se trabaja a partir de un microorganismo debidamente aislado e identificado (CULTIVO PURO)<br />
  11. 11. MÉTODO DE DIFUSIÓNPRINCIPIO DEL MÉTODO<br />
  12. 12.
  13. 13. SELECCIÓN DE LAS COLONIAS<br />Es el paso más importante. <br />Se selecciona de 3 a 5 colonias del microorganismo.<br />
  14. 14.
  15. 15. PREPARACIÓN DEL INÓCULO Y ESTANDARIZACIÓN DE LA SUSPENSIÓN<br />En ambos métodos, la turbidez de la suspensión debe ser estandarizada al estándar 0,5 de McFarland (que corresponde a aproximadamente 1,5 X 10 -8 CFU/ml). <br />
  16. 16. SUSPENSIÓN DIRECTA DE LAS COLONIAS<br />Se trabaja con cultivos jóvenes. <br />En esta técnica se estandariza el inóculo al mismo tiempo que se prepara la suspensión. <br />SS ó CALDO COMÚN<br />3 A 5 COLONIAS<br />AJUSTAR TURBIDEZ<br />0,5 ESCALA DE McFARLAND<br />ESTABILIZAR 15 MIN.<br />
  17. 17. FASE LOGARÍTMICA DE CRECIMIENTO<br />Se usa para la mayoría de microorganismos de rápido crecimiento.<br />3 A 5 COLONIAS<br />SS ó CALDO COMÚN<br />INCUBACIÓN A 35 0 C 2-6 HORAS<br />AJUSTAR TURBIDEZ<br />0,5 ESCALA DE McFARLAND<br />
  18. 18.
  19. 19. PREPARACIÓN PARA LA INOCULACIÓN<br />Losdiscos deben permanecer a temperatura ambiente durante 1-2 horas.<br />El agar de elección para esta prueba es el agar Mueller-Hinton (MHA).<br />
  20. 20. INOCULACIÓN DE LA PLACA<br />2<br />1<br />3<br />
  21. 21. INOCULACIÓN DE LA PLACA<br />1ml de <br />inóculo<br />
  22. 22. APLICACIÓN DE LOS DISCOS DE ANTIBIÓTICOS<br />MÉTODO MANUAL<br />
  23. 23. MÉTODO AUTOMÁTICO<br />
  24. 24. APLICACIÓN DE LOS DISCOS DE ANTIBIÓTICOS<br />1<br />8<br />7<br />2<br />9<br />3<br />6<br />5<br />4<br />
  25. 25. MEDICIÓN DE LAS ZONAS DE INHIBICIÓN<br />

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