Acción de las bacterias sobre los carbohidratos

1. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SANTO DOMINGO
Primada de América
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Cátedra de Microbiología
Laboratorio de microbiología
MIP-133/111/114
Acción de las bacterias sobre los carbohidratos
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Durante el proceso del metabolismo algunas
bacterias son capaces de reducir a los carbohidratos
a compuestos menos complejos que pueden
penetrar en el interior de las células.
Para que se den estas reacciones es preciso que los
microorganismos sean capaces de elaborar enzimas.

3. La mayoría de las bacterias heterótrofas
metabolizan la glucosa, pero la degradación sigue
distintas direcciones, según la constitución
enzimática de las diversas especies de bacterias.
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Acción de las bacterias sobre
los hidratos de carbono

4. Para realizar esta práctica se requiere de medios de cultivo que contengan
azucares
Eam, Mac conkey, Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante,TSI,Agar manitol salado.
Asas y Agujas bacteriológicas
Cepas de: E. coli, Staphylococcus aureus y epidermidis, Proteus mirabilis y
vulgaris, Pseudomonas aeruginosa.
PRCEDIMIENTO:
1- Rotular las placs y tubos
Sembrar las cepas en los medios seleccionados, empleando el metodo de siembra
recomendado para cada caso
Incubar 37 grados durante 24 horas
IMTERPRETAR LOS RESULTADOS.
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5. Contiene tres azúcares que son:
1. Glucosa
2. Lactosa
3. Sacarosa
Contiene también sulfato amínico ferroso, que
reacciona con el acido sulfhídrico, con el cual
se determina la formación de H2S (sulfuro de
hidrogeno)un precipitado de color negro.
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6. Amarillo (A): ácido
(fermentó el azúcar)
*Rojo (K): alcalino (no
fermentó el azúcar)
*Negro: presencia de H2S
(H2S+)
*Burbujas o vacíos, con
levantamiento del
medio:
presencia de H2 + CO2
H2 + CO2+
Precipitado negro = H2S
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7. Se verifican varias reacciones:
Ninguna reacción, alcalino superficie/alcalino fondo (K/K).
El medio se queda inerte, no cambia de color por tanto es un “No
Fermentador” y se descarta Enterobacteriaceae.
Alcalino superficie/Acido fondo (K/A), significa solo fermentación
de la glucosa, por tanto, es un “No fermentador de lactosa” (o
sacarosa ).
Acido superficie/Acido fondo (A/A), significa que se trata de un
fermentador de lactosa (o sacarosa en TSI).
Alcalino superficie/Acido fondo con precipitado negro, se reporta
como H2S positivo.
Además de las características anteriores se pueden observar burbujas
o rompimiento del medio debido a la producción de gas en el
medio.
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9. Es un medio de cultivo selectivo y diferencial
Es un medio de cultivo selectivo para bacterias
Gram. negativas
Este medio contiene el azúcar lactosa y un indicador
de PH( rojo neutro), entre otros componentes.
Si la bacteria utiliza el azúcar
Las colonias se tornan rosadas.
Si no la utiliza las colonias se observan
transparentes.
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10. Se observan
Colonias
Rosadas.
Resultado:la
bacteria utilizo
la Lactosa
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11. Colonias Claras o
Transparentes
Resultado:la
bacteria no
utilizo la
Lactosa
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12. Se verifican dos reacciones
1. Colonias rosadas la bacteria utilizo la lactosa
2. Colonias transparentes la bacteria no utilizo la
lactosa
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13. Es un medio de cultivo selectivo para Gram.
negativos.
Es diferencial contiene el azúcar lactosa
En tubos de Durham cuando hay gas en el tubito
invertido nos indica que hay presencia de gas por
tanto ha ocurrido la utilización de la lactosa
Esta reacción es producida por los coliformes .
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14. Interpretación:
1. Si se observa un desplazamiento en el tubito
invertido se reporta: gas +
2. Si el tubito invertido permanece lleno del liquido
se reporta: gas -
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Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante
(CLBVB)

15. .
GAS NEGATIVO
GAS POSITIVO
Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante
(CLBVB)
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16. Es un medio selectivo y
diferencial
Es selectivo para
bacterias Gram
negativas
Contiene el azúcar
lactosa y sacarosa
se observan colonias con
brillo verde metálico.
Si hay mucha acidez
La E. coli crece con brillo
verde metálico
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17.  Este medio se utiliza
con los Staphylococcus
 Resultados si se
observan cambio a
colonias de color
amarillo , la bacteria
utilizo el manitol
 Si se observan cambios
a color rosa cereza, la
bacteria no utilizo el
manitol

18. Cepa de Staphylococcus
1. La coagulasa actúa como una enzima termoestable que
permite diferenciar el Staphylococcus aureus del
resto de los Estafilococos coagulasa negativos.
2. Se producen dos tipos de coagulasa, la unida a la pared
celular y la liberada por la célula como coagulasa libre
y es la detectada por la técnica en tubo.
3. La coagulasa actúa sobre la protrombina para producir
trombina que actúa sobre el fibrinógeno para formar el
coagulo.
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19. 1. Si se forma un coagulo la prueba es:
positiva
2. Si no se forma el coagulo la prueba es:
negativa.
3. Staphylococcus aureus forma un coagulo,
es coagulasa +
4. Staphylococcus que no forman coagulo
son: coagulasa –
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20. Coagulasa + Coagulasa -
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Interpretación

21. Esta prueba permite diferenciar los microorganismos
aerobias y facultativas Catalasa POSITIVA de las
anaeróbicas y de las Microaerofilicas las cuales son
Catalasa negativa.
La catalasa es una enzima respiratoria, es una
porfirina de hierro cuya funcion es desdoblar los
peroxidos en H2O y O2.
Se utiliza en el laboratorio para diferenciar el
Estafilococos de Estreptococos.
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22. • Reactivo: peróxido de hidrogeno ( agua oxigenada –
H2O2 )
• Cepas de Staphylococcus aureus
• Lamina portaobjeto
• O en el cultivo en placa de Petri o en tubo
• Colocar una gota de H2O2 en el cultivo o en las
colonias que se colocan en el porta objeto
• Resultados
• Prueba positiva ; Si aparecen burbujas,
desprendimiento de O2 , presencia de la enzima
catalasa
• Prueba negativa: no se observan burbujas por la
ausencia de la enzima catalasa

23.  La catalasa es una enzima que desdobla en
peróxido de hidrogeno en O2 Y H2O.
 Esa es la razón por lo que se observan las
burbujas

25. Colocar unas gotas de H2O2 en el cultivo o en las colonias que se colocan en el
porta objeto
Resultados
Prueba positiva ; Si aparecen burbujas, desprendimiento de O2 , presencia de la
enzima catalasa
Prueba negativa: no se observan burbujas por la ausencia de la enzima catalasa

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27.  Que tipo de medios de cultivos son Mac
conkey, CLBVB, EAM? Selectivos y diferencial
 Son selectivos para bacterias Gram negativas
 Que azucares contienen los siguientes
medios:
 Mac conkey
 CLBVB
 EAM
 TSI

28.  Que tipo de medio es el TSI
 Que tipo de medio es el agar de manitol
salado?
 Para que bacterias se utiliza el manitol salado
y la prueba de cooagulasa?
 Para que se utiliza la prueba de coagulasa?
 Para que se utiliza la prueba de catalasa?
 Que reactivo se utiliza para realizar la prueba
de catalasa?