El documento describe el procedimiento del antibiograma para determinar la sensibilidad de bacterias a antibióticos. Explica que el antibiograma mide los halos de inhibición alrededor de discos impregnados con antibióticos para clasificar las bacterias como sensibles, resistentes o intermedias. El método más usado es la difusión por disco de Kirby-Bauer donde se incuban las placas y se miden los halos para predecir la eficacia del tratamiento con cada antibiótico.

1. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SANTO DOMINGO
Primada de América
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Cátedra de Microbiología
Laboratorio de microbiología
MIP-133/111/114
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Antibiograma

2. ANTIBIOGRAMA
SU IMPORTANCIA
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3. Introducción
La determinación de la sensibilidad
antimicrobiana a los aislamientos bacterianos
que tienen significado clínico es una de las
principales funciones del laboratorio de
microbiología.
El objetivo principal de las pruebas de
sensibilidad es:
predecir el éxito del tratamiento con los
antimicrobianos ensayados.
3
PRUEBA DE SENSIBILIDAD A LOS ANTIBIÓTICOS
ANTIBIOGRAMA

4. INTRODUCCIÓN
Esto significa que un resultado “sensible” implica
una alta probabilidad de que el paciente va a
responder al tratamiento con ese determinado
antimicrobiano.
Y un resultado dado como “resistente” es casi
seguro que falle con ese tratamiento.
La prueba de sensibilidad mas usada es el método
Estandarizado de Disco-Difusión (Kirby-Bauer)
4

5. La determinación de la susceptibilidad
de las bacterias a los agentes
antimicrobiano es necesaria para el
uso racional de ellos
y para la evaluación de nuevos
agentes antimicrobianos en estudio
epidemiológico
5

6. ANTIBIOGRAMA
Que es un
antibiograma?
Es el estudio del
laboratorio que
determina la
sensibilidad o
resistencia de
una bacteria
frente a varios
antibióticos.
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7. ANTIBIOGRAMA
 Tecnica: Difusión –Kirby Bauer
 Método de la siembra: Embadurnamiento
 Medio de cultivo: Mueller Hinton
 Instrumento de siembra: Hisopo estéril
 Resultados: Sensible, resistente e intermedio
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8. ANTIBIOGRAMA
 Se prepara el inoculo tomando 4 o 5
colonias de iguales características
morfológicas y suspender en 4 o 5 mls de
solución salina fisiológica estéril.
 Incubar a 36 grados centígrados unos
minutos ajustando a la turbidez del estándar
de 0.5 de MacFarland.
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9. PROCEDIMIENTO
 Inocular en la superficie de Mueller Hinton
 Con un Hisopo estéril cubriendo la totalidad de la
superficie en un sentido y luego se repite dos veces
rotando la placa 60 grados cada vez
 Dejar secar la placa de 5 minutos no mas de 15
minutos y colocar los discos de sensibilidad
 A 2 Cm de los bordes y distancia tal que los halos
de inhibición no se superpongan.
 Se incuban a 36 grados C durante 16 a 18 horas.
9

10. 10

11. 11

12. 12

13.  se miden los Halos de inhibicion en el
antibiogramas con una regla tomando en cuenta
los
 corte establecidos (NCCLS) para cada combinación
de microorganismo/antimicrobiano
13

14. ANTIBIOGRAMA
1. Sensible: si al rededor del disco de sensibilidad
el microorganismo no crece y se forma un halo
claro de inhibición.
2. Resistente: si al rededor del disco de
sensibilidad el microorganismo crece y NO se
forma un halo claro de inhibición.
3. Intermedio: si alrededor del disco de
sensibilidad se forma un pequeño halo o si el
halo es grande pero aparecen colonias de
bacterias mutantes
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15.  Se valora el diámetro de la zona de inhibición que
se forma alrededor de cada disco y se compara
con las referencias oportunas publicadas por la
NCCLS.
 De esta manera se sabe si el microorganismo es
Sensible, Intermedio o Resistente a cada uno de
los antibióticos.
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16. ANTIBIOGRAMA
16
Resistente
Sensible

17. ANTIBIOGRAMA
 Sensible: si alrededor del disco se forma un halo
de inhibición que corresponda a los puntos de
corte establecidos (NCCLS) para cada combinación
de microorganismo/antimicrobiano.
 NCCLS(Performance Standards for Antimicrobial
Susceptibi testing)
17
Antibiograma

18. 18
Resistente: no se forma un halo claro
alrededor del disco de sensibilidad.
 La bacteria crece alrededor del disco.
Antibiograma

19. COMPUESTOS B-LACTAMICOS
19
1. Penicilinas.
2. Cefalosporinas.
3. Monobactámicos.
4. Carbapenems.

20. EN RESUMEN
 PRUEBAS DE SENSIBILIDAD BACTERIANA
 Las pruebas de sensibilidad bacteriana se
llevan a cabo mediante el antibiograma que
sirve para medir la sensibilidad de una cepa
bacteriana a uno o varios antibióticos.
 El estudio de la sensibilidad in vitro es uno de
los requisitos previos para la eficacia in vivo de
un tratamiento antibiótico.
 También es importante para realizar estudios
sobre la evolución de las resistencias
bacterianas que permite revisar los protocolos
de la antibioticoterapia empírica. 20

21.  La determinación de la Concentración Mínima
Inhibidora (CMI) es la medida de la sensibilidad
de una bacteria a un antibiótico.
 Es la mínima cantidad de antimicrobiano que es
capaz de impedir el crecimiento de un
microorganismo en unas condiciones
normalizadas.
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22.  Sensible, si existe una buena probabilidad de éxito
terapéutico en el caso de un tratamiento a la dosis
habitual.
 Resistente, si la probabilidad de éxito terapéutico
es nula o muy reducida. No es de esperar ningún
efecto terapéutico sea cual fuere el tipo de
tratamiento.
 Intermedia, cuando el éxito terapéutico es
imprevisible. Se puede conseguir efecto terapéutico
en ciertas condiciones (fuertes concentraciones
locales o aumento de la posología).
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23.  Durante muchos años, y a pesar de ser una técnica
puramente cualitativa, el método de difusión por
disco (o método Kirby-Bauer), en función sobre
todo de su comodidad, economía y fiabilidad, ha
sido uno de los más utilizados en los laboratorios.
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24. BIBLIOGRAFIA
 Cedano Yovanni V; et al. Manual de laboratorio de
Microbiología, Universidad Autónoma de Santo
Domingo; Facultad de Ciencias, Escuela de
Microbiología y Parasitología
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25. GRACIAS
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