Explicación de la demostración de La respiración bacteriana en el laboratorio

1. UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SANTO DOMINGO
Primada de América
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
Cátedra de Microbiología
Laboratorio de microbiología
MIP-133/111/114
1
La respiración bacteriana
y la prueba de catalasa

2. LAS EXIGENCIAS RESPIRATORIAS
(Respiración – Fermentación)
El termino respiración se refiere a todas las reacciones
que ocurren dentro de las células de liberación de
energía (oxidaciones)
Es posible hacer una distinción entre las oxidaciones que
utilizan oxigeno molecular y aquella que no lo hacen
como sigue:
Respiración es la oxidación que utiliza oxigeno molecular
como aceptor primario de hidrogeno AEROBIA y la
oxidación que tiene lugar en ausencia de oxigeno
molecular ANAEROBIA.
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Altagracia Jiménez Díaz MA
preguntas

3. Las exigencias respiratorias
 La respiración y la fermentación son los dos mecanismos
de que dispone la célula viva para proveerse de energía;
ambos llevan a cabo la oxidación del sustrato.
 La condición de aerobio o anaerobio puede ser estricta.
Es decir ser una necesidad especifica, en tal caso recibe
el nombre de anaerobio obligatorios o aerobios
obligatorios, posiblemente este ultimo grupo posee
enzimas esenciales, las cuales funcionan únicamente en
el estado reducido y son particularmente sensibles a la
inactivación del oxigeno.
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4. Tipos de respiración bacteriana
Aerobia: crece en la superficie del tubo caldo de
thioglicolato de sodio
Anaerobia: crece en la profundidad del tubo de
caldo de thioglicolato de sodio.
Microaerofilica: crece debajo de la zona oxigenada
del tubo de caldo de thioglicolato de sodio.
Facultativa: crece en todo el tubo de caldo de
thioglicolato de sodio.
Anaeróbica: crece en el fondo del tubo
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5. LAS EXIGENCIAS RESPIRATORIAS
 Facultativas y son bacterias capaces de vivir aeróbica
o anaeróbicamente.
 Microaerofilicos : han sido llamados aquellos
organismos que requieren oxigeno libre en menor
concentración que la existente en la atmósfera.
 Baja tensión de oxigeno y de 10 a 12 por ciento de
CO2
 Anaeróbicas: son bacterias que viven en ausencia de
oxigeno
 Medio de cultivo para el estudio de la respiración
bacteriana es el Caldo de Thioglicolato
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Las exigencias respiratorias
Altagracia Jiménez Díaz MA

6. CALDO DE THIOGLICOLATO
Medio de cultivo: Caldo de thioglicolato de sodio
Indicador de oxigeno: resazurina, azul metileno y
otros

7. Medio de cultivo: Caldo de thioglicolato de sodio
Indicador de oxigeno: resazurina, azul metileno y otros
La respiración bacteriana
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1. Medio de cultivo: Caldo de thioglicolato de sodio
2. Indicador de oxigeno: resazurina, azul metileno y
otros
La respiración Bacteriana

9. La respiración Bacteriana
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1. Medio de cultivo: Caldo de thioglicolato de sodio
2. Indicador de oxigeno: resazurina, azul metileno y
otros

10. La prueba de la Catalasa
Esta prueba permite diferenciar los microorganismos
aerobias y facultativas Catalasa POSITIVA de las
anaeróbicas y de las Microaerofilicas las cuales son
Catalasa negativa.
La catalasa es una enzima respiratoria, es una
porfirina de hierro cuya funcion es desdoblar los
peroxidos en H2O y O2.
Se utiliza en el laboratorio para diferenciar el
Estafilococos de Estreptococos.
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11. Material necesario para realizar la prueba
• Reactivo: peróxido de hidrogeno ( agua oxigenada –
H2O2 )
• Cepas de Staphylococcus aureus
• Lamina portaobjeto
• O en el cultivo en placa de Petri o en tubo
• Colocar una gota de H2O2 en el cultivo o en las
colonias que se colocan en el porta objeto
• Resultados
• Prueba positiva ; Si aparecen burbujas,
desprendimiento de O2 , presencia de la enzima
catalasa
• Prueba negativa: no se observan burbujas por la
ausencia de la enzima catalasa

12. La prueba de la Catalasa
 La catalasa es una enzima que desdobla en
peróxido de hidrogeno en O2 Y H2O.
 Esa es la razón por lo que se observan las
burbujas

13. La prueba de la Catalasa
Colocar unas gotas de H2O2 en el cultivo o en las colonias que se colocan en el
porta objeto
Resultados
Prueba positiva ; Si aparecen burbujas, desprendimiento de O2 , presencia de la
enzima catalasa
Prueba negativa: no se observan burbujas por la ausencia de la enzima catalasa

14. Prueba de la Catalasa+
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15. Preguntas
 Cual es el medio de cultivo que se utiliza para
estudiar la respiración bacteriana? Caldo de
Thioglicolato
 En que lugar del tubo de thioglicolato crecen;
 Las bacterias aerobia y esquematice en la
superficie
 En que lugar crecen las microaerofilica, y
esquematice Debajo de la zona oxigenada
 En que lugar del tubo crecen las bacterias
anaerobicas y esquematiceen el fondo del tubo
 En que lugar del tubo crecen las bacterias
facultativas y esquematice. En todo el tubo,

16. Preguntas
 Para que se utiliza el frasco de la vela?
Bacterias microaerofilicas
 Para que se utiliza la jarra de Gas pak?
bacterias anaeróbica
 La prueba de catalasa en las bacterias aeróbicas
es ? positiva
 La prueba de catalasa en las bacterias
anaeróbica es? negativa

17.  El reactivo para la prueba de catalasa? H2O2

18. Esquematice
 La respiración aeróbica, microaerofilica ,
facultativa y anaeróbica
……..,,
,….